RNA干扰技术在肿瘤基因治疗方面的研究进展

RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)在哺乳动物细胞中是利用小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)诱导特异性基因表达抑制。其具有基因抑制效果确切、抑制具有严格的序列特异性、作用迅速等特点,故与基因替代、反义寡核苷酸治疗、细胞因子基因治疗等传统的肿瘤基因治疗方法相比,RNAi技术有着无可比拟的优势。本文对RNAi技术的作用机制及在肿瘤基因治疗方面的实验研究进展作一综述。     

RNA干扰在肝病治疗中的研究进展

RNA干扰（RNAi）是双链RNA（dsRNA）分子在mRNA水平关闭相应序列及基因的表达使其沉默的过程^[1]。RNAi最主要的功能特色在于它可调节和关闭基因的表达，促使mRNA降解或阻止蛋白产物合成，进而调控细胞的各种高级生命活动。其抑制基因表达作用具有高效性和特异性嘲。RNAi作为一种快捷方便的工具广泛用于高通量的研究基因功能、基因敲除、基因治疗和基因表达调控领域的研究。现对RNAi在肝病治疗中的最新进展作一综述。     

纳米载体介导小干扰RNA在胃癌治疗中的应用

胃癌具有发病率高、易转移和病死率高等特点,根据临床统计,根治术后肿瘤的复发和转移率高达33％[1].近年来,基因治疗成为了研究热点,RNA干扰作为目前最为有效的基因沉默技术,是胃癌治疗的重大突破,其能特异而有效地阻断靶基因表达,下调相应蛋白水平及功能,抑制肿瘤细胞的增殖.现今,研究又将纳米技术与RNA干扰相结合,开辟了胃癌治疗的崭新途径.本文就当今纳米载体介导小干扰RNA在胃癌治疗领域中的作用机理、临床意义、研究现状及展望作一综述.     

小干扰RNA在肝癌治疗中的应用

小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)是21～23 nt的短双链RNA,将哺乳动物细胞内特异基因的mRNA特异性降解而使基因失活,引起转录后沉默该基因的作用.siRNA技术在人类恶性肿瘤的基因治疗有特异而强烈的作用,具有非常广阔的情景,但其稳定性是有待解决的新问题.本文针对siRNA在肝癌治疗中的研究现状进行综述.     

RNA激活研究进展

近年的研究发现非编码RNA(ncRNA)分子能在多个水平参与基因表达的调控机制,其中小分子双链RNA(dsRNA)对相关蛋白表达的特异性抑制作用已经进行了广泛而深入的研究,如小干扰RNA(siRNA)能够诱导与其分子核糖核苷酸排列序列相一致的mRNA降解,或可使相应基因启动子区域DNA的同源序列段CpG岛发生甲基化[1,2],并导致相应的基因失去转录活性,造成特定基因沉默.细胞内源性的microRNA(miRNA)也可在基因转录和翻译水平抑制基因的表达[3-5],体现出ncRNA分子在基因表达调控中的多样性.     

载脂蛋白M基因敲除小鼠模型的构建和鉴定

人载脂蛋白M(ApoM)由Xu等[1]于1999年发现,主要存在于具有抗动脉粥样硬化作用的高密度脂蛋白(HDL)中[2].研究显示,瘦素、胰岛素、高血糖以及多种细胞因子可调节ApoM的表达[3-4],也可能与肥胖、糖尿病、肝癌、结肠癌的发生发展相关[5-6],但其作用机制尚不明确,其功能有待进一步研究.本研究旨在构建ApoM基因敲除小鼠模型并建立分型ApoM基因敲除小鼠的方法.     

RNA干扰技术在大肠癌治疗中的研究进展

RNA干扰（RNAi）是近几年发展起来的一种阻抑内源基因表达的新方法,是由双链RNA诱发的发生在转录后水平的基因沉默。RNAi技术在逆基因分析及基因治疗中已有广泛的应用。大肠癌的发生是一种多基因、多因素相互作用的结果,目前对于大肠癌基因治疗的实验研究已经有了很大的突破。RNAi与传统的基因治疗手段相比,具有沉默效果好、作用稳定等优点。     

腺病毒介导RNA干扰对人结肠癌裸鼠移植瘤淋巴管生成的抑制作用

RNA干扰已成为当前肿瘤基因治疗的新策略[1].我们构建通过血管内皮生长因子(VEGF)-C靶向的小干扰RNA(siRNA),插入腺病毒载体,干预人结肠癌裸鼠移植瘤模型,探讨其对肿瘤生长及淋巴管生成的影响.     

小干扰RNA在临床治疗中的应用

RNA沉默现象是真核细胞生物一种重要的基因调节机制。利用小干扰RNA影响基因表达的RNA干扰技术在基因功能研究及基因治疗中得到了很大发展。目前已有数种针对不同疾病的siRNA药物进入了临床试验阶段。本文重点介绍了针对呼吸道合胞病毒的小干扰RNA——ALN—RSV01的临床试验进展情况。将小干扰RNA作为分子药物治疗疾病具有广阔的发展空间。但在临床试验及应用中需要以生物医学中的无害、有利、尊重．公正原则进行合理的风险一收益评估．以期其能更好地发挥作用。     

RNA干扰技术及其在前列腺癌基因治疗研究中的应用

RNA干扰(RNA i)是指生物体内由双链RNA(dsRNA)介导同源序列mRNA的特异性降解,从而导致基因沉默的现象。近年来,随着对RNA i研究的不断深入,其作用机制正逐步阐明;同时作为阻断基因表达的新手段,RNA i技术也日趋完善和成熟。它具有高效性和特异性,为RNA i在肿瘤的基因治疗方面的应用提供了有力的工具。本文综述RNA i技术的有关研究进展及其在前列腺癌基因治疗研究中的应用。     

长链非编码RNA及其与肿瘤相关研究进展

哺乳动物基因组中存在着大量非编码RNA是现代生物学研究的重大发现之一[1].应用基因芯片及全基因组和转录组测序技术研究证实编码蛋白质的RNA只占全部基因转录本的2％,剩余98％为非编码RNA[2]. 非编码RNA是指不编码蛋白质但在生物体生命活动中具有功能的RNA分子,按长度可将其分为短链非编码RNA和长链非编码RNA( long non-coding RNA,lncRNA)两大类.许多短链非编码RNA已被证实在肿瘤形成过程中发挥着重要作用[3],包括已被广泛研究并引起重视的microRNA和siRNA等.而后者指长度大于200个核苷酸的RNA,不参与或很少参与蛋白编码.目前研究已发现数十种lncRNA具有基因印记、计量补偿效应、RNA剪切等分子生物学作用,与肿瘤在内的多种疾病密切相关.本文将就lncRNA在肿瘤发生、发展中的作用做一综述.     

RNA基因沉默关键蛋白Argonaute在人类肿瘤中的表达及其作用

真核生物中,小分子非编码核糖核酸(RNA)的作用主要为序列特异性的基因表达负调控,包括RNA干扰(RNAi)、翻译抑制和异染色质形成等,即RNA基因沉默[1].随着研究的深入,发现许多非编码小分子RNA的胞内蛋白质合作者,参与了小RNA的加工成熟和在细胞内行使功能,其中发挥重要核心作用的Argonaute(Ago)蛋白引起了众多科学家的高度重视.     

siRNA介导的血管内皮生长因子基因沉默对膀胱癌T24细胞增殖的影响

我们应用RNA干扰技术,以血管内皮生长因子(VEGF)为靶点,对人膀胱癌T24细胞进行研究,初步探讨VEGF特异性小干扰RNA(siRNA)作为膀胱癌基因治疗手段的可能.现报告如下.     

靶向人端粒酶逆转录酶基因的shRNA真核表达载体的构建及鉴定

人端粒酶逆转录酶(hTERT)是端粒酶活性的主要调控因子,对细胞的恶性转化、肿瘤的发生发展意义重大,目前已成为肿瘤基因治疗的理想靶标[1].我们应用RNA干扰技术设计和构建有效靶向hTERT基因的真核表达质粒,并加以鉴定.     

RNAi 在大肠癌基因治疗中的应用策略和展望

目的 探讨RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术在大肠癌基因治疗研究中的应用。方法复习近几年的相关文献并进行综述。结果RNAi能够高效特异地沉默同源基因表达，可在大肠癌发生、发展多个环节发挥重要作用。结论RNAi技术为大肠癌基因治疗研究开辟了新的途径。     

RNA干扰技术与肝细胞癌基因治疗

肝细胞癌已被证实为一种基因病,相关基因的异常表达引起细胞生物学特性改变,导致细胞永生化和癌变,因此,深入探讨肝细胞癌发病的分子机制以寻求新的诊治方法是提高疗效的关键.RNA干扰作为一种高效特异性抑制基因表达的新技术,广泛应用于研究基因功能和基因治疗,本文就近年来RNA干扰技术应用于肝细胞癌基因治疗领域的研究进展予以综述...     

RNA干扰技术的进展及应用

RNA干扰是近年来出现的一种利用小双链RNA(dsRNA)高效、特异的促使mRNA降解 ,从而阻断体内特定基因表达 ,诱使细胞表现出特定基因缺失表型的一种技术。本文主要对RNA干扰的发现、机制、优越性以及在基因敲除和病毒防治等方面的应用的最新进展作以综述 ,并对其未来发展作以预计     

RNA干扰技术及其在肾癌基因治疗中的进展

RNA干扰（RNAi）是指生物体内由双链RNA（dsRNA）介导同源序列mRNA的特异性降解，从而导致基因沉默的现象。近年来，随着对RNAi研究的不断深入，其作用机制逐步阐明；同时作为阻断基因表达的新手段，RNAi技术也日趋成熟。它具有高效性和特异性，为RNAi在肿瘤基因治疗方面的应用提供了有力的工具。本文对RNAi技术及其在肾癌基因治疗研究中的进展作一综述。     

RNA干扰在间充质干细胞及骨系细胞分化中的应用

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指在细胞中引入外源双链RNA使相应序列的mRNA特异性降解,从而导致某一功能基因沉默的方法.Fire等[1]首次在秀丽阴杆线虫中发现了转录后水平的基因沉默机制,从而刷新了对基因调控机制的认识.后来有学者[2]发现在哺乳动物体内也广泛存在RNAi现象.RNAi的作用是在转录水平、转录后水平及翻译水平等多个不同水平上实现的.由于其高效性、特异性而被广泛应用于基因功能分析及基因治疗研究等很多领域.本文着重探讨近年来RNAi在间充质干细胞及骨系细胞生长、分化调控相关因子[包括PPARγ、Runx2、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、细胞凋亡、TonEBP等]作用机制方面的研究现状及其所取得的成果.     

RNA干扰Survivin基因表达对瘢痕疙瘩中成纤维细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨RNA干扰Survivin基因表达对癜痕疙瘩成纤维细胞增殖与凋亡的影响,为瘢痕疙瘩的基因治疗提供实验依据.方法 构建靶向Survivin的siRNA表达质粒,利用Lipofectamine TM 2000转染体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞;采用RT-PCR、Western blot技术检测成纤维细胞中Survivin基因的被干扰情况及Caspase-3基因的表达情况;利用MTT法、流式细胞仪检测成纤维细胞的增殖与凋亡情况.结果 靶向Survivin的序列特异件的siRNA对成纤维细胞中Survivin基因表达的抑制率:在mRNA水平为59.86%和82.57%,在蛋白质水平分别为48.76%和72.53%.Caspase-3基因的表达和活性显著增加(P＜0.01).转染靶向Survivin的RNAi表达质粒对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的抑制较显著(P＜0.05).Annexin V-FITC/P1双染法显示,干扰Survivin基因表达后成纤维细胞的调亡率高于对照组(56.36%,P＜0.05).结论 所构建的靶向Survivin的RNAi质粒可有效地抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞中Survivin基因的表达,通过Survivin基因表达的下调激活Caspas-3基因活性,可显著抑制成纤维细胞的增殖并诱导其凋亡,为瘢痕疙瘩的基因治疗开辟一新途径.