通心络联合干细胞移植对糖尿病足大鼠促血管新生的影响

目的观察通心络联合外周血干细胞移植治疗对糖尿病足溃疡大鼠促血管新生的影响。方法 2012年10月—2013年8月于河北以岭医药研究院药理实验室进行实验。高脂喂养联合低剂量链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型,通过冰块降温和液氮冷冻,诱导大鼠糖尿病足溃疡模型。将造模成功的50只大鼠分为正常对照组、模型组、通心络组、干细胞组、通心络+干细胞组5组,每组10只,正常对照组和模型组大鼠以等体积的生理盐水灌胃;通心络组给予通心络0.8 g/kg灌胃,1次/d;干细胞组给予干细胞移植治疗;通心络+干细胞组给予干细胞移植同时给予通心络0.8 g/kg灌胃,1次/d,于给药7 d后处死动物取材进行指标检测。ELISA法测定血清血管内皮生长因子(VEGF)、晚期糖基化终末产物(AGE)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE),RT-PCR法测定组织局部VEGF mRNA、RAGE mRNA表达水平。结果各组间比较血清VEGF、AGE、RAGE有显著差异(F=28.675、18.018、35.946,P均=0.000),与模型组比较,通心络组、干细胞组及通心络+干细胞组血清VEGF显著增加(P<0.05),AGE、RAGE显著降低(P<0.05);与干细胞组比较,通心络组血清VEGF显著增加(P<0.01),AGE、RAGE降低(P<0.05),通心络+干细胞组血清VEGF显著增加(P<0.01),AGE、RAGE显著降低(P<0.01);与通心络组比较,通心络+干细胞组血清VEGF增加(P<0.05),AGE、RAGE降低(P<0.05);各组间溃疡局部组织VEGF mRNA、RAGE mRNA表达有显著差异(F=8.152、7.650,P=0.000),与模型组比较,通心络组增加溃疡局部VEGF mRNA表达,降低RAGE mRNA表达(P<0.05),通心络+干细胞组显著增加溃疡局部VEGF mRNA表达,降低RAGE mRNA表达(P<0.01),干细胞组溃疡局部组织VEGF mRNA、RAGE mRNA表达无统计学差异(P>0.05);与干细胞组比较,通心络组显著增加溃疡局部VEGF mRNA表达(P<0.01),降低RAGE mRNA表达(P<0.05),通心络+干细胞组显著增加溃疡局部VEGF mRNA表达(P=0.002),显著降低RAGE mRNA表达(P<0.01);与通心络组比较,通心络+干细胞组增加溃疡局部VEGF mRNA表达(P<0.05),降低RAGE mRNA表达(P<0.05)。结论通心络联合外周血干细胞移植能够提高糖尿病足溃疡大鼠血清和溃疡局部组织中VEGF水平,降低AGE、RAGE水平,促进血管新生。     

天麻、法半夏水提物对ox-LDL诱导HUVECs损伤的影响

目的观察天麻、法半夏水提物对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响。方法体外培养HUVECs,随机数字表法分为对照组、模型组(80μg/mL ox-LDL)、天麻组(5mg/mL)、法半夏组(10mg/mL),均培养48h。流式细胞仪检测HUVECs细胞凋亡率、细胞增殖指数,Western blot法检测血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)表达,实时荧光定量PCR法检测半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)RNA表达。结果与对照组比较,模型组HUVECs细胞凋亡率升高([4.32±0.11)%比(0.34±0.01)%,P0.05],HUVECs细胞增殖指数下降([43.40±4.04)%比(63.76±2.71)%,P0.05],VEGF表达下调([0.09±0.03)比(0.85±0.06),P 0.05],VEGFR-2表达下调([0.13±0.03)比(0.81±0.05),P0.05],Caspase-3 RNA表达上调([1.67±0.02)比(0.79±0.01),P0.05],Caspase-9 RNA表达上调([2.29±0.02)比(0.71±0.01),P0.05];与模型组比较,天麻组、法半夏组HUVECs细胞凋亡率下降([2.51±0.45)%、(2.12±0.13)%比(4.32±0.11)%,P均0.05],HUVECs细胞增殖指数升高([50.83±2.46)%、(51.41±2.86)%比(43.40±4.04)%,P均0.05],VEGF表达上调([0.60±0.04)、(0.30±0.03)比(0.09±0.03),P均0.05],VEGFR-2表达上调([0.55±0.05)、(0.56±0.03)比(0.13±0.03),P均0.05],Caspase-3 RNA表达下调([1.33±0.03)、(1.16±0.02)比(1.67±0.02),P均0.05],Caspase-9RNA表达下调([1.86±0.09)、(1.82±0.02)比(2.29±0.02),P均0.05];与天麻组比较,法半夏组HUVECs细胞凋亡率下降([2.12±0.13)%比(2.51±0.45)%,P0.05],HUVECs细胞增殖指数差异无统计学意义([51.41±2.86)%比(50.83±2.46)%,P0.05)],VEGF表达下调([0.30±0.03)比(0.60±0.04),P0.05],VEGFR-2表达差异无统计学意义([0.56±0.03)比(0.55±0.05),P0.05],Caspase-3 RNA表达下调([1.16±0.02)比(1.33±0.03),P0.05],Caspase-9 RNA表达差异无统计学意义([1.82±0.02)比(1.86±0.09),P0.05]。结论天麻和法半夏水提物均能抑制ox-LDL诱导的HUVECs损伤,其机制可能与上调VEGF和VEGFR-2表达、下调Caspase-3 RNA和Caspase-9 RNA表达有关。     

通心络对大鼠急性缺血性卒中脑微小循环障碍的影响

目的:观察通心络对大鼠急性缺血性卒中微小循环障碍的影响。方法:采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,缺血2h拔线再灌注。大鼠随机分为假手术组、模型组、通心络组,每组20只。观察各组脑梗死灶体积、神经功能缺损评分、脑血流量、脑组织EB含量、金属基质蛋白酶基因表达、血脑屏障超微结构等。结果:模型组神经功能缺损评分为2.32±0.63,通心络组为3.09±0.61,P<0.05;模型组梗死灶体积为(146.1±34.5)mm3,通心络组为(97.2±25.8)mm3,P<0.05;通心络组各时间点EB含量与模型组比较明显下降,P<0.05;通心络组再灌后MMP-9mRNA含量下降,与模型组比较,P<0.05;通心络组各时相血流量与模型组比较有明显提高,P<0.01￣P<0.05;通心络组血管内皮细胞结构较模型组明显完整。结论:通心络可明显改善MCAO大鼠脑微小循环障碍。     

核转录因子YY1对缺血缺氧诱导的心肌细胞凋亡的影响及其机制

目的 探讨核转录因子阴阳1 (yin yang 1,YY1)对体外缺血缺氧诱导的心肌细胞凋亡的抑制作用及其机制.方法 体外分离培养新生大鼠心肌细胞,利用无糖培养基及含95％ N2+5％ CO2混合气体的缺氧装置(Billups-rothenberg)诱导建立缺血缺氧心肌细胞凋亡模型,通过建立过表达YY1重组质粒并将其转染入心肌细胞内,观察YY1对缺血缺氧诱导的心肌细胞凋亡的影响.实验分为对照组、YY1组、缺血缺氧组、缺血缺氧+YY1组、缺血缺氧+LY294002组、缺血缺氧+YY1+LY294002等6组(n=4).CCK-8法检测各组心肌细胞活力,TUNEL法检测各组心肌细胞凋亡情况,fQT-PCR检测YY1 mRNA表达水平,Westem blot法检测YY1、磷酸化丝氨酸苏氨酸激酶(p-Aktser473)及生存素(Survivin)蛋白表达水平.结果 与对照组相比,缺血缺氧组在缺血缺氧刺激6h后心肌细胞活力下降、凋亡率明显增高[(0.55 ±0.02) vs (1.14±0.02)、(38.25 ±1.65)％ vs (1.38±0.15)％,P＜0.01].缺血缺氧前预转染YY1重组质粒后,与缺血缺氧组相比,缺血缺氧+YY1组心肌细胞活力上升、凋亡率降低、p-Aktser473和Survivin蛋白表达增加[(0.78 ±0.03) vs (0.55 ±0.02)、(14.50±1.56)％ vs (38.25±1.65)％、p-Aktser473相对灰度值:(0.82±0.03) vs (0.28 ±0.03)、Survivin相对灰度值:(0.93 ±0.02) vs (0.36±0.02),P＜0.01].经PI3K/Akt信号通路特异性抑制剂LY294002干预后,缺血缺氧+ YY1+LY294002组与缺血缺氧+YY1组相比,心肌细胞活力下降、凋亡率增加、p-Aktser473和Survivin蛋白表达显著降低[(0.62 ±0.02) vs (0.78 ±0.03)、(27.75±1.12)％vs (14.50±1.56)％,p-Aktser473相对灰度值:(0.43 ±0.02)vs(0.82±0.03),Survivin相对灰度值:(0.27 ±0.02) vs (0.93 ±0.02),P＜0.01].结论 核转录因子YY1可抑制缺血缺氧诱导的心肌细胞凋亡,且该作用与PI3K/Akt信号通路的激活相关.     

HIF-1对大鼠心肌iNOS、VEGF蛋白表达的影响

目的观察缺氧诱导因子-1(HIF-1)对大鼠心肌诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响。方法应用HIF-1活性诱导剂氯化钴预处理大鼠,观察大鼠心肌iNOS、VEGF蛋白表达的变化。结果HIF-1α、iNOS、VEGF蛋白表达在预处理前分别为0.57±0.04、1.39±0.07、5.87±0.58。HIF-1α在预处理后3h(3.88±0.62)显著增加(t=3.04,P<0.01),6h(12.82±0.58)达高峰(F=3.87,P<0.01);iNOS蛋白表达在预处理后3h(8.10±0.40)显著增加(t=2.95,P<0.01),24h(13.74±0.58)达高峰(F=3.92,P<0.01);VEGF蛋白表达在处理后1h(9.18±0.75)即显著增加(t=3.08,P<0.01),之后在预处理后3h(21.72±0.53)和12h(23.97±0.73)分别形成两个表达高峰(均F=3.58,P<0.01)。结论氯化钴预处理大鼠后,HIF-1可促进心肌内iNOS、VEGF蛋白的表达,同时VEGF表达增高可能还存在其他的作用机制。     

绞股蓝总皂苷对糖尿病肾病大鼠nephrin、VEGF表达及肾功能的影响

目的观察绞股蓝总皂苷对糖尿病肾病(DN)大鼠nephrin、VEGF表达的影响,探讨其降低尿蛋白、保护肾脏的作用机制。方法采用单侧肾切除加链脲佐菌素注射法改良复制大鼠DN模型,实验分为正常组、模型组、绞股蓝总皂苷高、中、低剂量组和缬沙坦组,每组8只。药物干预4周后测定24h尿蛋白、内生肌酐清除率、足细胞相关分子nephrin及足细胞分泌的VEGF蛋白在肾脏组织的表达。结果绞股蓝总皂苷高剂量组24h尿蛋白明显低于模型组[(77.04±16.63)mg比(110.56±46.88)mg,P0.05],内生肌酐清除率高于模型组[(1.47±0.24)m L·min-1比(1.25±0.23)m L·min-1,P0.05]。高剂量组nephrin蛋白表达水平较模型组明显上调(0.4250±0.02比0.3388±0.02,P0.01),VEGF表达明显抑制(0.2588±0.03比0.3521±0.01,P0.01),且效果类似缬沙坦组。结论绞股蓝总皂苷能降低DN大鼠尿蛋白,改善肾功能和足细胞相关蛋白的异常表达。     

基于PKA依赖cAMP信号介导肺胃SP表达探讨中医肺胃相关理论的机制研究

目的观察胃食管反流模型大鼠肺、胃、食管组织中蛋白激酶A(PKA)、环磷酸腺苷(cAMP)、P物质(SP)的表达量,探讨中医肺胃相关理论的分子机制。方法将12只SD大鼠随机数字表法分为正常对照组(n=6)和模型组(n=6),模型组大鼠麻醉后经口插胃管至食管的中下段,以8滴/min的速率缓慢灌注0.1 mmol/L盐酸(含0.5%胃蛋白酶)溶液,每次20 min,1次/d,连续14 d。正常对照组采用PBS液代替,方法同模型组。提取食管、胃和肺组织标本进行病理学观察,用免疫组化法测定PKA、cAMP、SP表达,并将结果进行线性回归分析。结果与正常对照组比较,模型组大鼠肺、胃及食管组织HE半定量评分显著升高[(3.67±0.52)分比(0.00±0.00)分、(3.83±0.41)分比(0.00±0.00)分、(3.83±0.41)分比(0.00±0.00)分,P均<0.01]。与正常对照组比较,模型组大鼠肺、食管、胃组织的PKA蛋白表达量[(0.23±0.02)比(0.15±0.01)、(0.22±0.02)比(0.17±0.02)、(0.24±0.02)比(0.16±0.01),P均<0.01]、cAMP蛋白表达量[(0.20±0.02)比(0.15±0.02)、(0.24±0.03)比(0.15±0.02)、(0.25±0.03)比(0.17±0.02),P均<0.01]、SP蛋白表达量[(0.21±0.02)比(0.15±0.01)、(0.25±0.03)比(0.14±0.02)、(0.33±0.04)比(0.18±0.02),P均<0.01]均显著升高。线性回归结果表明,模型组大鼠胃与肺组织的PKA和SP平均光密度呈线性相关。结论激活后的PKA/cAMP是促进肺胃组织释放SP的重要通路,可能介导了胃食管反流咳嗽的病理生理过程,是肺胃相关理论可能的分子机制之一。     

通心络对家兔动脉粥样硬化模型MMP-3,9及PPARγ表达的影响

目的 研究通心络对金属蛋白酶-3(MMP-3)、金属蛋白酶-9(MMP-9)和过氧化物酶体增殖激活受体γ(PPARγ)在家兔动脉粥样硬化组织中表达的影响,探讨通心络的抗AS机制.方法 将实验动物家兔分为对照组(n=8)、高脂模型组(n=8)和通心络干预组(n=8);高脂模型组用高脂饲料饲养14周,通心络干预组除高脂饲养外加用通心络;应用免疫组化方法观察MMP-3、MMP-9和PPARγ在主动脉粥样硬化组织中的表达以及通心络对其表达的影响.结果 高脂模型组和通心络组兔主动脉壁所含MMP-3和MMP-9的阳性标记物百分比均明显高于对照组(P<0.01),所含PPARγ的阳性标记物百分比也明显高于对照组(P<0.01),但是通心络干预组兔所含MMP-3和MMP-9的阳性标记物百分比低于高脂模型组(P<0.01),而所含PPARγ的阳性标记物百分比显著高于高脂模型组(P<0.01).结论 通心络抑制动脉粥样硬化病变部位MMP-3和MMP-9的表达,增加PPARγ的表达.其抗AS作用可能与抑制MMP-3和MMP-9及增加PPARγ的表达有关.     

醛固酮对动脉损伤和高脂喂养大鼠颈动脉粥样硬化的影响及通心络对该影响的阻断作用

目的观察醛固酮对动脉损伤和高脂喂养大鼠颈动脉粥样硬化的影响及通心络对该影响的阻断作用。方法40只雄性SD大鼠予高脂饮食、左颈总动脉内膜损伤、维生素D_3注射,随机分成模型组、醛固酮组、伊普利酮组、通心络组和醛固酮 通心络组。术前取血,4个月后取血及左颈总动脉标本。观察斑块面积、巨噬细胞阳性计数、血清C-反应蛋白(CRP)和白细胞介素(IL)-6的浓度。结果醛固酮组的颈动脉斑块面积为(1.83±0.49)mm~2,较模型组的(0.89±0.22)mm~2增加近1倍(P<0.05),亦明显大于醛固酮 通心络组的(1.32±0.54)mm~2(P<0.05)。醛固酮组斑块内巨噬细胞数量为(14.9±2.7)个,明显多于模型组的(11.9±0.7)个(P<0.05);醛固酮 通心络组的巨噬细胞数量为(6.9±0.73)个,明显少于模型组和醛固酮组(P值均0.05);与醛固酮组比较,醛固酮 通心络组血清IL-6浓度明显降低(P<0.05)。结论醛固酮可以增加动脉粥样硬化程度,其作用机制可能与促进炎症反应有关。通心络具有醛固酮拮抗作用,可能为其抗动脉粥样硬化作用的一个新机制。     

通心络对小鼠病毒性心肌炎抗心肌纤维化作用

目的:观察通心络胶囊抗小鼠病毒性心肌炎慢性期心肌纤维化作用,并探讨其抗心肌纤维化的作用机制。方法:小鼠腹腔注射柯萨奇B3病毒,建立病毒性心肌炎慢性期心肌纤维化小鼠模型。随机分模型对照组、通心络胶囊低、中、高剂量组和正常对照组。用药4周后处死动物,通过免疫组化染色观察致纤维化细胞因子—转化生长因子(TGF)和血小板衍生生长因子(PDGF)的定量表达。结果:免疫组化染色示,正常组TGF、PDGF呈低水平表达,模型组较正常组表达水平显著升高(P<0.01),通心络各剂量组的TGF、PDGF表达水平均有不同程度降低。其中高剂量组和模型对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:通心络胶囊各剂量组均有抗心肌纤维化作用,其中以高剂量组效果最为明显。其作用机制可能与抑制TGF-β1、PDGF-BB的表达有关。     

急性重复缺氧增加小鼠海马组织血管内皮生长因子的表达

目的:观察重复性低氧对小鼠海马组织内血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白质表达的影响.方法:小鼠低氧0次(H0)、1次(H1)、4次(H4)后取海马组织,应用Western blot技术,检测小鼠海马组织内VEGF的蛋白表达变化.结果:实验发现H0、H1和H4组海马组织内VEGF均有表达,H1组与H0组之间没有差异,H4组显著升高(P＜0.05).结论:VEGF在急性低氧预适应小鼠海马组织表达增加可能参与预适应的形成及脑保护.     

低氧预适应对小鼠海马组织细胞红蛋白表达的影响

目的探讨细胞红蛋白在低氧预适应小鼠海马中的作用。方法复制急性重复低氧模型,利用Real-time PCR法检测小鼠海马组织细胞红蛋白的变化。结果低实验组小鼠海马组织细胞红蛋白mRNA的表达虽然高于未经低氧的对照组但未达到统计学意义,低氧预适应组小鼠海马组织细胞红蛋白mRNA的表达显著高于对照组。结论小鼠急性重复缺氧后脑海马神经元细胞红蛋白mRNA表达增强,推测细胞红蛋白可能参与低氧预适应形成和脑保护。     

ISCOM 型白血病瘤苗联合1-甲基色氨酸免疫治疗荷瘤小鼠疗效观察

目的：探讨免疫刺激复合物（ISCOM ）型白血病肿瘤疫苗（简称瘤苗）联合1-甲基色氨酸对荷瘤小鼠的治疗作用。方法皂苷溶液中加入脂肪酶蛋白（1 mg／mL ）7℃反应12 h ,加入80μL 脂类混合物溶液和5 mL 皂苷溶液（1 mg／mL ）制备ISCOM 型白血病瘤苗。 C57BL／6小鼠分为模型组、ISCOM 型白血病瘤苗组、1-甲基色氨酸组和联用组（ISCOM 型白血病瘤苗＋1-甲基色氨酸）,小鼠注射 FBL-3细胞建立白血病荷瘤小鼠模型,模型组给予等量生理盐水,其余各组接受对应药物治疗4周后,记录体质量,NK 细胞、Mφ细胞和细胞毒 T 淋巴细胞（CTL）细胞杀伤活性、血清 IL-10和 IL-12表达水平。结果联用组瘤质量低于1-甲基色氨酸组和 ISCOM 型白血病瘤苗组[（0．64±0．26）g vs ．（2．49±0．91）g ,P＜0．01;（0．64±0．26）g vs ．（1．28±0．73） g ,P＜0．05）];联用组 M φ细胞杀伤活性显著高于1-甲基色氨酸组[（55．69±13．69）％ vs ．（69．47±14．79）％,P＜0．01）];联用组NK 细胞杀伤活性显著高于1-甲基色氨酸组[（38．41±8．27）％ vs ．（67．22±12．74）％,P＜0．01];联用组 CTL 细胞杀伤活性高于1-甲基色氨酸组和 ISCOM 型白血病瘤苗组[（43．77±8．89）％ vs ．（69．68±11．44）％,P ＜0．01;（58．87±9．45）％ vs ．（69．68±11．44）％,P＜0．05）];联用组 IL-10均显著低于1-甲基色氨酸组、ISCOM 型白血病瘤苗组[（76．2±6．82）pg／L vs ．（98．3±13．4） pg／L ,P＜0．01;（76．2±6．82）pg／L vs ．（202．3±44．5）pg／L ,P＜0．01）];联用组 IL-12高于1-甲基色氨酸组、ISCOM 型白血病瘤苗组[（381．2±47．3）pg／L vs ．（332．1±30．2）pg／L ,P ＜0．05;（381．2±47．3）pg／L vs ．（291．2±17．3）pg ／L ,P＜0．01）。结论ISCOM 白血病瘤苗联合1-甲基色氨酸具有较佳的抗瘤活性,其机制可能是通过介导 IL-10和 IL-12的表达。     

槐白皮黄酮抗鼠脑缺血作用研究

目的 探讨槐白皮黄酮对小鼠、大鼠脑缺血的影响.方法 通过大鼠动静脉旁路血栓形成实验、小鼠常压密闭耐缺氧实验、结扎小鼠双侧颈总动脉(CCA)实验和建立脑缺血小鼠模型并测定脑缺血小鼠的脑含水量实验,研究槐白皮黄酮对脑缺血的影响.结果 与生理盐水组比较,槐白皮黄酮能抑制大鼠动静脉旁路血栓形成[(0.0131±0.13011)g,(0.0203±0.0009),P<0.01];能延长常压耐缺氧小鼠存活时间[(25.81±1.37)min,(18.11±0.48)min,P<0.01)];能延长结扎双侧CCA小鼠存活时间[(380.20±16.02)min,(273.10±12.16)min,P<0.01)];可降低小鼠脑湿重和含水量[湿重:(0.3350±0.0281)g,(0.3617±0.0215)g;含水量:(0.2441±0.0220)g,(0.2716±0.0157)g,P<0.05].结论 槐白皮黄酮对鼠脑缺血有保护作用.     

缺氧耐受对小鼠学习和记忆的影响

目的：观察小鼠缺氧耐受对学习、记忆的影响。方法：40只昆明种小鼠，按体重随机分为正常对照组（12只），1次缺氧组和4次缺氧组（各14只）。分别采用Morris水迷宫法、跳台法和避暗法观察缺氧耐受对小鼠学习、记忆的影响。结果：水迷宫测试中，与正常对照组比较，1次缺氧组小鼠第1、2、4及5天的搜索平台的总时间均明显延长(P<0.05)，第2、3及5天的总游程均明显增加(P<0.05)；与1次缺氧组比较，4次缺氧组小鼠前5天搜索平台的总时间均明显缩短(P<0.01或P<0.05)，第1、4及5天的总游程均明显缩短(P<0.01或P<0.05)，第1天的朝向角明显缩小(P<0.05)；与正常对照组比较，4次缺氧组小鼠第1天的总游程明显缩短(P<0.05)。跳台测试中，与正常对照组比较，1次缺氧组小鼠第2天错误次数明显增多(P<0.05)；与1次缺氧组比较，4次缺氧组第2天的潜伏期和错误次数均明显减少(P<0.05)。避暗实验中，各组第2天的潜伏期和错误次数比较，差异均无显著性(P>0.05)。结论：1次缺氧可减弱小鼠的学习、记忆功能，缺氧耐受（4次缺氧）可减轻缺氧对学习、记忆的损害，甚至增强小鼠的学习、记忆能力。     

低氧预适应对小鼠海马组织Fas-L表达的影响

目的:观察重复性低氧对小鼠海马组织内Fas-L蛋白质表达的影响.方法:小鼠低氧0 次(H0)、1 次(H1)、4 次(H4)后取海马组织,应用 Western Blot 技术,检测小鼠海马组织内Fas-L的蛋白表达变化.结果:实验发现H0、H1和H4组海马组织内Fas-L有表达,H4组与H0组之间没有差异,H1组显著升高(P<0.05,与H0和H1比较).结论:急性低氧预适应使小鼠海马组织Fas-L表达改变.     

二十二碳六烯酸对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响

目的:观察二十二碳六烯酸(DHA)在动物整体水平的抗大鼠肺动脉高压作用及其对肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为常氧组、低氧组、低氧DHA处理组,每组7只。大鼠缺氧肺动脉高压模型采用慢性间歇性低氧方法建立,通过右心导管法测定大鼠平均肺动脉压,精确称左右心室质量计算右心室指数,测定肺动脉平滑肌细胞凋亡率和Caspase3、Caspase9活性。结果:与常氧组比较,低氧组大鼠平均肺动脉压和右心室指数均明显升高(PPPP结论:DHA具有抗大鼠肺动脉高压作用,其机制与促进肺动脉平滑肌细胞凋亡有关。     

MG-132对雨蛙肽诱导的急性胰腺炎小鼠细胞间黏附分子1表达的影响

目的 研究蛋白酶体抑制剂MG-132对雨蛙肽诱导的急性胰腺炎(AP)小鼠核因子κB(NF-κB)与细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达的影响.方法 45只BalB/c小鼠按随机数字表法分为9组,即对照3、6、12 h组,AP3、6、12 h组和MG-132 3、6、12 h组,每组5只.AP组小鼠雨蛙肽100μg/kg腹腔内注射诱导,1次/h,共6次.对照组则腹腔内注射相同剂最的生理盐水.MG-132组在AP诱导前30 min腹腔注射MG-132 10 mg/ks.检测血清淀粉酶和可溶性ICAM-1(sICAM-1)的浓度变化,观察胰腺的病理学变化,经免疫组化法检测胰腺组织中NF-κB的表达,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胰腺组织中ICAM-1 mRNA的表达.结果 MG-132各组血清淀粉酶(U/L)、血清sICAM-1(pg/ml)的浓度均低于相应时间点AP各组(1629±59、1794±123、2910±152比1282±61、1525±103、1809±117,133±10、157±10、217±43比106±6、135±4、163±19,P<0.05或P<0.01),MG-132各组胰腺组织的病理评分均分别低于相应时间点AP各组(5.7±1.0、7.1±1.2、9.6±2.1比3.2±1.0、5.3±1.0、6.9±0.8,P<0.05或P<0.01),MG-132组胰腺组织中NF-κB蛋白表达及ICAM-1 mRNA的表达均明显低于相应时间点AP各组(3.8±1.1、4.6±1.2、6.7±0.4比1.9±0.6、3.1±1.0、4.7±1.0,0.3±0.1、1.0±0.2、1.2±1.0比0.3±0.2、1.8±0.2、2.1±0.2,P<0.05或P<0.01)的表达.结论 蛋白酶体抑制剂MG-132对雨蛙肽诱导的AP具有保护作用,其机制可能与抑制NF-κB的活化、下调包括黏附分子在内的细胞因子的表达有关.     

Inhibition of Expression of Hypoxia-inducible Factor-1αmrna by Nitric Oxide in Hypoxic Pulmonary Hypertension Rats

Summary: In order to study the effect of nitric oxide (NO) on the expression of hypoxia-inducible factor-1 alpha (HIF-la) mRNA in hypoxic pulmonary hypertension (HPH) rats, 30 healthy male Wistar rats were randomly divided into normoxic control group, chronic hypoxic group and hypoxia plus L-argine (L-Arg) group. The animal model of HPH was developed. The mean pulmonary arterial pressure (mPAP) was measured by inserting a microcatheter into the pulmonary artery. The HIF-1α mRNA expression levels were detected by in situ hybridization (ISH) and semiquantitative RT-PCR. It was found that after 14 days hypoxia, the mPAP in normoxic control group (17.6±2. 7 mmHg,1 mmHg=0. 133 kPa) was significantly lower than that in chronic hypoxic group(35.8±6.1 mmHg, t=0. 2918, P＜0.05) and mPAP in chronic hypoxic group was higher than that in hypoxia plus L-argine group(24.4±3.8 mmHg, t==0. 2563, P＜0. 05). ISH showed that the expression of HIF-lα mRNA in the intraacinar pulmonary arteriolae (IAPA) in normoxic control group (0. 1076±0. 0205) was markedly weaker than that in chronic hypoxic group (0. 3317 ± 0.0683, t=3. 125, P＜0. 05) and that in chronic hypoxic group was stronger than that in hypoxia plus L-argine group (0. 1928±0. 0381, t=2.844, P＜0.05). RT-PCR showed that the content of HIF-lα mRNA in chronic hypoxic group (2. 5395±0. 6449) was 2.16 times and 1.75 times higher than that in normoxic control group (1. 1781±0. 3628) and hypoxia plus L-argine group (1. 4511±0. 3981), respectively. It is concluded that NO can reduce the mPAP by the inhibition of the expression of HIF-1α mRNA, which may be one of the mechanisms through which NO affects the pathogenesis of HPH.     

Characteristics of fat metabolism in skeletal muscle of rats after hypobaric hypoxic acclimation

Objective：To investigate the characteristics of fat metabolism in rat skeletal muscle after hypobaric hypoxia acclimation. Methods： Sprague-Dawley rats were divided into 3 groups randomly： control group （H0）, hypoxic 5-day group （HS）, and hypoxic 15-day group （H15）. Animals of H5 and 15 groups were exposed to hypobaric hypoxia chamber simulating 5 000 m high altitude for 5 d or 15 d respectively, 23 h per day. H0 group stayed outside of chamber The level of fatty acid oxidation and uptake, and glucose oxidation were examined, and the level of non-esterified fatty acids （NEFA）, ATP and phosphocreatine （PCr） were also assayed in rat skeletal muscles. Results： The contents of ATP and PCr in H5 group were lower than those in H0 and H15 groups （P〈0.05）, while there was no significant difference between H0 and H15. Compared with H0, the blood NEFA level in all hypoxia groups was increased significantly （P〈0.05）. The muscle NEFA level in H15 group was greatly higher than that in H0 and H5 groups. The rates of fatty acid oxidation and uptake in H15 group were significantly higher than those in H0 and H5 groups （P〈0.05）, and the rate of glucose oxidation in all hypoxia groups was significantly decreased than that in H0 group （P〈0.05）. Conclusion： It is concluded that the enhanced fat oxidation may be one of the mechanisms in the maintenance of energy homeostasis after hypobaric hypoxic acclimation.