银屑病患者角质形成细胞对T淋巴细胞CD25、CD69表达的影响

目的 探讨银屑病患者角质形成细胞（KC）对T淋巴细胞CD25、CD69表达的影响。方法 分离10例银屑病患者KC，密度梯度离心法分离单一核细胞（PBMC）；流式细胞仪检测混合培养后T细胞活化标志CD25、CD69的表达。结果 银屑病患者皮损KC作用的自体外周血T细胞CD25、CD69表达水平分别与非皮损KC作用组及自体T细胞自然增殖组相比显著增高，银屑病非皮损KC+自体T细胞共培养组与自体T细胞自然增殖组相比，差异无统计学意义。银屑病皮损、非皮损KC作用的正常人T细胞CD25、CD69表达均显著高于正常人外周血T细胞自然增殖组，银屑病皮损KC+正常人T细胞共培养组与非皮损组相比，差异无统计学意义。结论 银屑病患者局部存在慢性炎症反应，可能是由于皮损KC免疫表型发生改变从而作为自身抗原，启动自身免疫反应。     

流式细胞术双色免疫荧光标记观察寻常性银屑病患者外周血淋巴细胞亚群

目的了解寻常性银屑病患者外周血淋巴细胞亚群的变化。方法应用流式细胞仪双色免疫荧光标记,检测98例寻常性银屑病患者外周血淋巴细胞亚群并与102名正常人进行比较。结果银屑病患者外周血CD4+细胞百分数显著高于正常人对照组(P<0.05);NK细胞百分数显著低于正常人对照组(P<0.01),寻常性进行期银屑病患者T细胞和CD4+细胞显著高于静止期银屑病患者(P<0.05),进行期银屑病患者T细胞、B细胞、CD4+细胞百分数均显著高于正常人对照组(P<0.001),NK细胞显著低于正常人对照组(P<0.001)。静止期银屑病患者与正常人对照组相比淋巴细胞亚群各项指标无明显差异。结论寻常性银屑病患者外周血淋巴细胞亚群的变化主要表现在T、B淋巴细胞特别是CD4+细胞的升高和NK细胞的降低。     

芍药苷对人外周血T淋巴细胞CD25、CD69及NF—KB表达的影响

目的研究芍药苷对人外周血T淋巴细胞CD25、CD69及NF—KB表达的影响。方法分离健康人外周血T淋巴细胞．抗人CD3单克隆抗体及抗人CD28单克隆抗体共刺激T淋巴细胞活化,加入不同浓度的芍药苷,流式细胞术检测T淋巴细胞CD25、CD69及NF—KB的表达。结果50Ixmol／L芍药苷对活化的T淋巴细胞CD25的表达有抑制作用（P〈O．05）,100,200I,zmol／L芍药苷对活化的T淋巴细胞CD25的表达有明显抑制作用（P〈O．01）;100,200μmovL芍药苷对活化的T淋巴细胞CD69的表达有明显抑制作用（P〈0．01）;25,50,100,200μmol/L芍药苷对活化的T淋巴细胞NF—KB的表达有明显抑制作用（P〈0．01）。结论芍药苷可呈浓度依赖性抑制T淋巴细胞CD25、CD69及NF—KB的表达。     

寻常性银屑病患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的功能研究

目的 测定银屑病患者外周血中的CD4+CD25+调节性T细胞功能的改变,探讨调节性T细胞在其发病中的作用。方法 寻常性银屑病患者12例,银屑病面积和严重度指数（PASI）评分15 ～ 34.5分,均为慢性斑块状。健康对照组6例,为健康献血者。通过免疫磁珠体外分离外周血中的CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25- T细胞,纯度达90％以上。采用［3H］-脱氧胸腺嘧啶苷方法检测CD4+CD25+ T细胞的增殖和抑制功能,ELISA法测定细胞因子和RT-PCR检测Foxp3 mRNA的表达。结果 多克隆刺激后CD4+CD25+ T细胞无明显增殖,IL-2可逆转此无反应状态。健康对照组CD4+CD25+ T细胞对CD4＋CD25－ T细胞增殖的抑制率可达60％,而银屑病组抑制率仅为19.5％（P < 0.01）。银屑病患者CD4＋CD25－ T细胞单独培养及与CD4＋CD25+ T细胞共培养后,分泌IFN-γ水平分别为（179.66 ± 48.97） ng/L和（109.55 ± 48.04） ng/L,健康对照组分别为（87.36 ± 33.36） ng/L和（32.55 ± 15.69） ng/L,两组比较,P值均 < 0.05;对IFN-γ分泌的抑制率银屑病患者组为40％,健康对照组为63％（P < 0.05）;健康对照组CD4＋CD25+ T细胞和CD4＋CD25－ T细胞单独培养,TGF-β分泌分别为（3025 ± 769） ng/L和（2450 ± 431） ng/L（P < 0.05）。两组之间,无论单独培养或两种细胞共培养,IL-10、TGF-β的分泌差异均无统计学意义（P > 0.05）。CD4+CD25+ T细胞表达高水平的Foxp3, 银屑病患者和健康人对照调节性T细胞和效应T细胞的Foxp3表达相似。结论 银屑病患者外周血中调节性T细胞抑制功能的减弱导致效应T细胞增殖失控,可能参与了银屑病的发病。     

银屑病和白癜风患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测

目的: 检测CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在白癜风和银屑病患者外周血中的表达.方法: 用流式细胞术检测19例白癜风患者、18例银屑病患者及19名正常人外周血中CD4+CD25+Treg的表达水平.结果: 白癜风患者的CD4+CD25+Treg表达率为(1.056±0.662)%,低于正常对照组(2.022±0.98)%,差异有统计学意义(P＜0.05);银屑病患者的CD4+CD25+Treg为(1.761±1.396)%,与正常人无显著性差异(P＝0.177).结论: CD4+CD25+Treg细胞在白癜风患者外周血中数量明显减少.     

CD40-CD40L在寻常性银屑病患者外周血的表达及意义

目的:探讨单核细胞上CD40和其配体CD40L及血清中游离型配体sCD40L在寻常性银屑病患者外周血中的水平及其临床意义.方法:采用流式细胞术检测30例寻常性银屑病患者外周血单核细胞CD40、CD40L表达水平,并采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清sCD40L的浓度.另取20例正常人外周血作为对照组.结果:寻常性银屑病患者外周血单核细胞上CD40的表达水平及血清中sCD40L浓度明显高于对照组(P<0.01),外周血单核细胞CIM0与CD40L表达水平呈正相关(r=0.412,P<0.05),外周血单核细胞CD40表达水平与血清中sCD40L浓度呈正相关(r=0.487,P<0.05).结论:CD40-CD40L通路在银屑病患者免疫功能紊乱中起了重要作用.     

银屑病患者外周血T淋巴细胞CD80的表达

目的:研究银屑病患者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子CD80的表达及其与银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)的相关性。方法:采用流式细胞仪检测31例银屑病患者外周血T淋巴细胞表面CD80的表达,以20例正常人作对照。结果:银屑病患者外周血T淋巴细胞表面CD80的表达为1.5403%±1.3447%,高于正常对照者的0.0990%±0.1207%(P<0.01);进行期银屑病患者外周血T淋巴细胞CD80的表达高于退行期;且银屑病患者外周血T淋巴细胞CD80的表达与PASI呈正相关(r=0.513)。结论:银屑病患者外周血T淋巴细胞CD80的表达上调,与银屑病的发病机制有关。     

CD69+T细胞在银屑病皮损中的表达及其临床意义

目的 探讨银屑病患者皮肤CD69+T细胞的表达及其与疾病活动性的关系.方法 免疫组化检测31例银屑病患者皮损和非皮损中CD69+T细胞在皮肤中的表达,与6例健康人进行对照.结果 CD69+T细胞主要分布于皮肤真皮.31例银屑病患者皮损和非皮损的真皮中,CD69+T细胞分别为(35.16±12.67)％和(8.70±3.29)％,皮损明显高于非皮损(t=12.5,P＜0.01).6例健康人对照皮肤中CD69+T细胞(8.71±2.55)％,明显低于银屑病皮损(t=5.03,P＜ 0.01),与非皮损相比,差异无统计学意义(t=0.05,P＞ 0.05).20例急性期与1 1例稳定期银屑病患者皮损中CD69+T细胞分别为(40.89±10.31)％和(24.46±9.49)％,急性期明显高于稳定期(t=0.36,P＜ 0.01).结论 银屑病患者皮损中CD69+T细胞表达增高,与疾病的活动性有关.     

寻常性银屑病患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测

调节性T细胞(CD4⁺CD25⁺Treg)是调节性T细胞亚群之一,具有多种独特的特征,包括可识别自身抗原肽、分泌抑制性细胞因子和维持免疫稳态等,在维持机体内环境的稳定、诱导移植耐受以及自身免疫性疾病的发生中发挥作用.     

斑秃患者外周血T淋巴细胞亚群及CD4~+CD25~+调节T细胞的检测

目的检测斑秃(AA)患者外周血T淋巴细胞亚群及CD4+CD25+调节性T(Tr)细胞数量变化,分析AA的可能病因。方法利用流式细胞仪和单克隆荧光抗体技术,测定重度和局限性AA各40例患者外周血中T淋巴细胞亚群占T淋巴细胞的比率及CD4+CD25+Tr细胞在CD3+CD4+T淋巴细胞中的比率。结果重度AA患者外周血中CD4+CD25+Tr细胞占CD3+CD4+T细胞的比率为(1.43±0.74)%,显著低于正常对照组(2.25±0.97)%(P<0.01),重度AA患者的CD4+T占T淋巴细胞的比率为(31.42±6.66)%,略高于正常对照组(30.69±7.47)%(P>0.05),差异无显著性,而CD8+T占T淋巴细胞的比率为(25.86±4.35)%,明显高于正常对照组(22.42±6.10)%(P<0.01);局限性AA患者的三项指标分别为(2.14±0.87)%,(32.60±10.27)%和(21.59±5.24)%,与对照组差异无显著性(P>0.05)。结论AA患者外周血中CD4+CD25+Tr明显低于正常对照组,CD8+T比率明显高于正常对照组,可能是导致重度AA发病的主要免疫机制。     

银屑病患者血清中可溶性血小板T细胞活化抗原1的检测

目的检测银屑病患者血清中可溶性血小板T细胞活化抗原1(sCD226/PTA1)的水平,初步探讨该抗原与银屑病的关系。方法银屑病患者包括疗前30例,其中活动期17例、静止期13例,疗后10例,正常人对照15例。应用双抗体夹心ELISA法测定血清中sCD226/PTA1的浓度。结果银屑病组血清中sCD226/PTA1水平(823.88±569.93pg/mL)显著高于正常人(120.45±58.41pg/mL),t= 4.41,P<0.001。活动期(1036.07±598.97pg/mL)更高,依次高于静止期(546.39±399.28pg/mL)和正常人。疗后组(263.16±207.3pg/mL)显著低于相应的疗前组(751.51±648.07pg/mL),t= 3.42,P<0.005。与正常人比较,疗后组值仍偏高,但差异无显著性,t=2.02,P>0.05。结论银屑病患者血清中存在高水平的sCD226/PTA1,并在活动期、静止期及疗后呈现出不同的变化。提示CD226/PTA1可能参与银屑病的病理过程。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞及其细胞因子在寻常型银屑病患者的改变

目的探讨寻常型银屑病患者CD4~+CD25~+调节性T细胞及其细胞因子的改变。方法用流氏细胞仪直接免疫荧光法检测寻常型银屑病患者外周血CD4~+CD25~+T细胞的百分率、FoxP3+分子表达、细胞因子白细胞介素(IL)-10、转化生长因子(TGF)-β的表达。结果寻常型银屑病患者CD4~+CD25~+T细胞在进行期组、静止期组、健康对照组结果分别是4.55±1.11、5.26±1.38、6.03±1.96,CD4~+CD25~+FoxP3+T细胞在进行期组、静止期组、健康对照组结果分别是3.85±0.89、4.31±1.26、4.95±1.37。进行期患者明显低于静止期患者和健康对照组(P0.05);而静止期患者与健康对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。CD4~+CD25~+IL-10+细胞、CD4~+CD25~+TGF-β+T细胞在进行期组、静止期组、健康对照组结果分别是11.57±5.64、14.49±8.26、16.35±9.98;2.65±0.97、4.23±1.55、4.83±1.84;进行期患者明显低于静止期患者和健康对照组(P0.05);而静止期患者与健康对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。CD4~+CD25~+FoxP3+T细胞与PASI呈负相关(r=-0.659,P0.05);CD4~+CD25~+IL-10+T与PASI呈负相关(r=-0.537,P0.05);而CD4~+CD25~+TGF-β+T细胞与PASI直线相关(r=-0.184,P0.05)。结论 CD4~+CD25~+调节性T细胞的比例以及Foxp3的表达、IL-10、TGF-β的表达明显下降,导致调节性T细胞的抑制功能缺陷,进而影响银屑病病情的发展。可以推测,调节性T细胞的数量或功能异常,均将影响银屑病的发病。     

银屑病患者体外系统血液固有免疫反应中CD4~+ CD25~+ T细胞及CD4~+ CD25~(high) T细胞的变化与意义

目的用体外系统血液固有免疫反应体系研究银屑病患者外周血CD4+ CD25+T细胞及CD4+ CD25highT细胞的变化,并探讨其在银屑病发病机制中的作用。方法将灭活大肠杆菌悬液(3×108/mL)0.2mL作为免疫原激活剂加入枸橼酸抗凝的全血细胞悬液0.2mL和血浆0.3mL中,37℃水浴1h,用流式细胞仪测定CD4+ CD25+T细胞及CD4+ CD25highT细胞的比例。结果在加入大肠杆菌的银屑病全血细胞组(银屑病实验组)CD4+ CD25highT细胞比例(1.88%)明显高于银屑病对照组(1.41%)(P﹤0.01),CD4+ CD25+T细胞及CD4+ CD25highT细胞的比例(16.86%,1.88%)明显低于加入大肠杆菌的健康实验组(24.26%,2.81%)(P﹤0.01);银屑病对照组CD4+ CD25+T细胞及CD4+ CD25highT细胞的比例(15.97%,1.41%)较健康对照组明显降低(21.75%,2.17%)(P﹤0.01);健康实验组CD4+ CD25+T细胞及CD4+ CD25highT细胞的比例群(24.26%,2.81%)均明显高于健康对照组(21.75%,2.17%),(P﹤0.05)。结论银屑病患者CD4+ CD25+T细胞及CD4+ CD25highT细胞比例降低,外来抗原刺激后比例升高,但与健康正常人存在差异。这可能与其复杂的系统免疫学发病机制相关。     

CD28/B7在银屑病皮损及外周血淋巴细胞中的表达

目的 探讨CD28/B7共同刺激分子在银屑病发病中的作用。方法 采用免疫组化ABC法检测22例银屑病皮损、流式细胞仪检测17例银屑病外周血淋巴细胞CD28、CD80、CD86的表达水平。15例整形外科手术患者的皮肤和外周血作为正常人对照。结果 免疫组化结果显示银屑病组皮损中CD28、CD80、CD86的表达明显增多,与正常人对照组相比差异均有显著性(P<0.01);进行期皮损中的表达显著高于静止期,差异均有显著性(P<0.05)。流式细胞仪检测显示CD28、CD80、CD86在银屑病组外周血淋巴细胞中的表达明显高于对照组,差异有显著性(P<0.01);进行期组与静止期组相比,CD28差异无显著性(P>0.05),CD80与CD86差异有显著性(P₁<0.01,P₂<0.05)。结论 CD28、CD80、CD86在银屑病发展过程中起一定作用。     

复发性生殖器疱疹患者外周血单一核细胞CD40和CD40L的表达

目的 探讨复发性生殖器疱疹患者外周血单一核细胞CD40、CD40L的表达。方法 利用流式细胞仪对30例复发性生殖器疱疹患者和20例正常人对照者外周血单一核细胞(PBMC)CD40、CD40L的表达及T淋巴细胞亚群进行检测。结果 病例组PBMC中CD40阳性细胞百分数较对照组显著降低(P=0.0061);CD40L阳性细胞百分数较对照组明显降低(P=0.041);CD3⁺T细胞和CD4⁺T细胞百分数亦显著低于对照组(其P值分别为0.025和0.032)。结论 CD40-CD40L共刺激作用低下是生殖器疱疹复发的重要原因之一。     

寻常性银屑病患者皮肤和血清中肿瘤坏死因子α受体p75测定

目的探讨肿瘤坏死因子(TNF)α受体75 000(p75)在寻常性银屑病中的作用机制。方法采用免疫组化和ELISA 方法对寻常性银屑病患者皮损、皮损周围“正常”皮肤p75表达及其在血清中的含量进行检测。结果正常人皮肤表皮基底细胞散在表达p75;银屑病患者皮损周围“正常”表皮、皮损表皮、真皮内浸润单一核细胞(MNCs)均表达p75;银屑病皮损表皮角质形成细胞p75表达强度与真皮内MNCs数呈显著正相关(r's = 0.73,P<0.05);银屑病患者血清中p75的含量与对照组比较差异有显著性(t=3.98,P<0.05);银屑病皮损表皮角质形成细胞p75表达强度与其血清中p75含量呈显著正相关(r's = 0.62,P<0.05)。结论银屑病患者皮肤和血清中TNFα受体p75的异常上调可能是造成银屑病发生和发展的原因之一。     

银屑病患者外周血淋巴细胞天然免疫与特异性免疫相关性的初步研究

目的探讨银屑病患者外周血淋巴细胞天然免疫与细胞及体液免疫功能的相互关系。方法分离新鲜血淋巴细胞,测定其对肿瘤细胞的快速天然免疫反应,并同时采用速率散射比浊法对血清中IgG、IgA、IgM含量进行测定,采用双抗体夹心法测定血清可溶性白介素-2受体(sIL-2R)水平。结果银屑病患者淋巴细胞天然免疫花环率和血清IgA含量均较正常人明显增高(P<0.01,P<0.01),淋巴细胞天然免疫花环率与IgA呈显著正相关(r=0.71,P<0.0001),与sIL-2R呈明显正相关(r=0.39,P<0.05)。结论银屑病发病与免疫异常有关,淋巴细胞天然免疫与特异性免疫相互联系,并可能在发病机制中起到重要的作用。