香烟烟雾抽提物对肺动脉内皮细胞环氧合酶,血栓素合成酶mRN…

本实验应用放免测定及分子杂交技术观察了香烟烟雾抽提物对培养的猪肺动脉内皮细胞环氧合酶，血栓素合成酶基因表达和ＰＧＩ２，ＴＸＡ２生成的影响，进一步从分子水平探讨由内皮细胞产生的前列腺素在ＣＳＥ影响肺血管张力和ＨＰＶ中的作用。     

蒲黄对急性高脂血症家兔TXA_2/PGI_2及血脂的影响

本文用一次静脉注射高脂血清同时短期口服胆固醇的方法,造成家免急慢性高脂血症模型,观察血浆PGI_2、TXA_2和血清各种脂蛋白的动态变化过程及其相互关系,以及蒲黄对它们的影响,并以Vit E作为对照,结果发现:1.急性高脂血症家兔血浆PGI_2含量明显减少,TXA_2/PGI_2比值升高,TXA_2/PGI_2与血清TC/HDL-C,LDL-C/HDL-C之间有显著的正相关关系。2.蒲黄不但可以防止高脂引起的上述变化,而且能直接升高体内PGI_2水平,其作用优于Vit E。3.急性脂质负荷后,血浆PGI_2有轻度升高,继之持续降低。     

内皮细胞条件培养液对平滑肌细胞环氧合酶血栓素A_2合成酶表达的影响

内皮细胞条件培养液对平滑肌细胞环氧合酶血栓素Ａ２合成酶表达的影响同济医科大学病理生理教研室（武汉４３００３０）于江洲王迪浔本研究旨在初步探讨内皮细胞对平滑肌细胞的旁分泌调节作用。我们应用内皮细胞常氧及缺氧条件培养液分别在常氧下培养平滑肌细胞，经分子杂...     

过氧化氢对肺动脉内皮细胞环氧合酶-2表达的影响及CaMKⅡ的作用

目的： 探讨过氧化氢（H₂O₂）对肺动脉内皮细胞环氧合酶-2（COX-2）表达的影响及钙-钙调蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）在其中的作用。方法: 采用活细胞计数法(CCK-8法)检测H₂O₂处理肺动脉内皮细胞后的细胞活性，采用RT-PCR检测 COX-2 mRNA的表达水平，采用Western blotting检测COX-2蛋白质的表达水平。结果: H₂O₂增强COX-2表达，呈浓度和时间依赖性。100 μmol/L H₂O₂处理肺动脉内皮细胞4 h，COX-2 mRNA和蛋白质表达水平明显高于正常对照组，COX-2 mRNA水平为正常对照组的256.01%±22.36%（P<0.05），蛋白质水平为正常对照组的216.65%±21.52%（P<0.05）。 CaMKⅡ特异性抑制剂KN-93能抑制H₂O₂的这一效应。结论: H₂O₂可增强肺动脉内皮细胞COX-2基因的表达，CaMKⅡ是H₂O₂增强肺动脉内皮细胞COX-2基因表达的途径之一。     

慢性缺氧对肺动脉内皮细胞Ⅲ型一氧化氮合酶mRNA表达的影响

目的和方法:采用原位杂交技术结合图象分析检测常氧(PO₂21.3kPa)及慢性缺氧(PO₂5.3±0.7kPa)培养的猪肺动脉内皮细胞Ⅲ型一氧化氮合酶mRNA的表达及其对急性缺氧刺激反应的变化。结果:常氧条件培养的肺动脉内皮细胞急性缺氧12h,NOSⅢmRNA表达明显增加(2、4、6代分别比缺氧前增加48%、125%、119%,P＜0.05);慢性缺氧条件下培养的肺动脉内皮细胞急性缺氧12h,NOSⅢmRNA表达亦明显增加(分别比急性缺氧前增加92%、245%、565%,P＜0.01)。其增加的幅度在慢性缺氧培养组均高于同代常氧组,且随着缺氧时间的延长,这种差别更显著。结论:慢性缺氧增强了肺动脉内皮细胞Ⅲ型一氧化氮合酶基因对急性缺氧的反应,这可能在慢性缺氧时肺血管对缺氧的反应性降低中,具有重要作用。     

香烟烟雾提取物对大鼠肺组织的损伤作用及对一氧化氮生成的影响

将大鼠肺组织切片与香烟烟雾提取物（ＣＳＥ）共同孵育,测定其乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性、亚硝酸盐（ＮＯ_２） 含量、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性及左旋精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）转运,以探讨吸烟对肺组织的氧化损伤作用及对一氧化氮 生成的影响。结果显示： １０％ ＣＳＥ时间依赖地增加大鼠肺组织 ＬＤＨ漏出及 ＮＯ_２释放,二者高度正相关（ｒ=０．６５, Ｐ＜０．０１）,刺激诱导型ＮＯＳ（ｉＮＯＳ）活性增加,并通过增加最大转运速度（Ｖｍａｘ）使Ｌ－Ａｒｇ转运增加。提示：吸烟可 能通过增加 Ｌ－Ａｒｇ的跨膜转运使细胞内 Ｌ－Ａｒｇ浓度增高,并增加 ｉＮＯＳ活性使 ＮＯ过量产生。 ＮＯ可能参与了吸烟对肺 组织的损伤过程。     

胃泌素对大鼠胃粘膜环氧合酶及生长因子表达的影响

目的：探讨胃泌素对大鼠胃粘膜环氧合酶（COX）及生长因子表达的影响。方法：雄性SD大鼠皮下注射胃泌素1 μg/kg、10 μg/kg或100 μg/kg，Western blot和免疫组化检查胃粘膜COX-1、COX-2、肝细胞生长因子（HGF）和肝素结合表皮生长因子样生长因子（HB-EGF）表达。评价胃泌素受体拮抗剂YM022对COX-1、COX-2、HGF和HB-EGF表达的影响。结果：胃泌素剂量依赖性地增加大鼠胃粘膜COX-2和HB-EGF表达，而对COX-1和HGF表达无明显影响；YM022阻断胃泌素诱导的COX-2和HB-EGF表达。 结论： 胃泌素调节大鼠胃粘膜COX-2和HB-EGF蛋白表达，提示COX-2和HB-EGF参与与胃泌素相关联的胃粘膜增生和胃癌等的发病过程。     

2型糖尿病患者应用厄贝沙治疗后血浆TXA_2/PGI_2及尿微量白蛋白水平的变化

目的探讨2型糖尿病患者应用厄贝沙坦治疗前后其血浆TXA2/PGI2的变化,并分析其与患者尿微量白蛋白水平之间的关系。方法研究中共收入112例2型糖尿病患者,随机分入对照组及治疗组,以ELISA法检测其血浆中TXA2与PGI2的水平,同时对研究对象的尿微量白蛋白水平进行检测,分析治疗前后患者尿微量白蛋白水平的变化。结果治疗组患者在接受4周厄贝沙坦治疗后其血浆TXA2水平（319.65±38.76）pg/mL显著低于治疗前（342.12±48.22）pg/mL（P〈0.01）,而PGI2水平（40.04±4.95）pg/mL则显著高于治疗前（32.13±4.47）pg/mL（P〈0.01）,治疗组患者尿微量白蛋白水平较治疗前有显著下降[治疗后（36.42±4.95）mg/Lv.s.治疗前（43.99±11.27）mg/L,P〈0.01];对照组中患者的TXA2/PGI2及尿微量白蛋白水平在接受治疗前后差异无统计学意义。结论2型糖尿病患者接受厄贝沙坦治疗后血浆TXA2/PGI2水平产生变化,同时尿微量白蛋白水平下降,提示TXA2/PGI2可能参与糖尿病肾病发展过程,而厄贝沙坦则可能阻断此过程并产生肾保护作用。     

瓜蒌和心得安对家兔急性心肌梗塞后血小板聚集性及PGI_2-TXA_2平衡的影响

本文观察家兔AMI后冠状窦与动脉血中血小板聚集性和PGI_2与TXA_2的稳定代谢产物6-keto-PGF_(1α)与TXB_2血浆浓度的变化,以及瓜蒌注射液和心得安单独或联合治疗对其变化及梗塞范围的影响。结果表明结扎冠状动脉左室支6h,血小板最大聚集率,最大聚集速度及TXB_2均明显升高,且冠状窦与动脉血变化一致;6-keto-PGF_(1α)及6-keto-PGF_(1α)/TXB_2比值变化不明显。瓜蒌和心得安单独或联合用药,明显抑制血小板聚集和TXB_2的变化,并能显著缩小梗塞范围,但两药无协同作用。     

肺动脉与冠状动脉内皮环氧合酶及TXA2合酶基因表达的差异

应用分子杂交和放免法观察了缺氧下培养的猪肺动脉内皮细胞和冠状动脉内皮细胞的环氧合酶－１,环氧合酶－２和血栓素Ａ２合酶基因表达及前列腺素生成的变化。结论：ＰＡＥＣ和ＣＡＥＣ在常氧下和缺氧时ＣＯＸ基因表达和ＰＧＩ２生成的差异可能与肺动脉和冠脉的基础张力和缺氧反应的差异有关。     

当归对正常犬血浆TXA2／PGI2水平的影响

我们研究了当归对正常犬下腔静脉、肝静脉和门静脉内ＴＸＢ２、６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ及其比值的影响。结果表明，用药后，３种血管内均表现为ＴＸＢ２水平增加，６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ水平下降及ＴＸＢ２／６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ水平上升，动态观察表明，当归对ＴＸＢ２／６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ的影响以门静脉和肝静脉最为显著。     

脑动脉内皮细胞缺氧时内皮型一氧化氮合酶基因表达的变化及蛋白激酶C的作用

目的：研究缺氧时脑动脉内皮细胞(CAECs)内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因表达的变化，并探讨可能的分子机制。方法： 分别采用RT-PCR和蛋白质免疫印迹技术检测原代培养的猪脑动脉内皮细胞缺氧2、6、12、24、48 h后eNOS mRNA和蛋白质表达的变化，并观察蛋白激酶C(PKC)抑制剂对缺氧24 h引起的eNOS mRNA和蛋白质变化的影响。加入转录抑制剂放线菌素D后观察缺氧24 h对eNOS mRNA稳定性的影响。结果：缺氧2 h后脑动脉内皮细胞eNOS mRNA和蛋白质表达均增加，12 h达到高峰，约分别为常氧组的2.5倍和2.0倍，缺氧48 h仍高于常氧组。缺氧对eNOS mRNA稳定性无明显影响。选择性PKC抑制剂BIM I(1 μmol/L)、G6983(1 μmol/L)均能降低缺氧24 h所引起的eNOS基因表达的上调。结论： 脑动脉内皮细胞缺氧时可通过PKC信号途径上调eNOS基因的表达，并可能由此介导缺氧时脑血管的扩张反应，发挥其神经保护作用。     

Phospholipase A2 (PLA2) activity in bovine pulmonary artery endothelial cells

We have investigated the role of recombinant human interleukin-1 (rIL-1) and recombinant human tumor necrosis factor (rTNF-) on PLA₂ activity, protein synthesis and eicosanoid production in bovine pulmonary artery endothelial cells. Cellular PLA₂ activity increased 4-fold and production of PGE₂ increased 3-fold at 1–2 hrs in the presence of 10 units/ml rIL-1. PLA₂ activity increased 3-fold at 30 min and PGE₂ production increased 2-fold with 5×10^–9 M rTNF-. The data show that endothelial cells respond more rapidly to rIL-1 (2–6 hr) and rTNF- (30 min) than do chondrocytes and synovial cells (6–16 hrs), suggesting endothelial cells may play a primary role in initiating the inflammatory response.     

辛伐他汀对香烟烟雾提取物诱导的人脐静脉内皮细胞表达sEPCR和mEPCR的影响

目的: 研究辛伐他汀对香烟烟雾提取物(CSE)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs) 表达可溶性内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)和膜联内皮细胞蛋白C受体(mEPCR)的干预作用。方法: 体外培养的4~6代HUVECs 随机分为对照组、5%CSE组、不同浓度辛伐他汀组及辛伐他汀干预组,辛伐他汀组分别加入50、100、200 μmol/L辛伐他汀液孵育24 h,辛伐他汀干预组先以50、100、200 μmol/L辛伐他汀预处理细胞2 h,再与5%CSE孵育24 h。收集各组细胞及上清液,ELISA法检测上清液中sEPCR蛋白含量,实时定量PCR法检测各组细胞中mEPCR mRNA的表达。结果: (1)5%CSE组sEPCR蛋白含量高于对照组,mEPCR mRNA表达低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);(2)100 μmol/L与200 μmol/L辛伐他汀组sEPCR蛋白含量均高于对照组,低于5%CSE组,其mEPCR mRNA表达均低于对照组,高于5%CSE组,差异均有统计学意义(均P<0.05);(3)各辛伐他汀干预组sEPCR蛋白含量均低于5%CSE组,但高于对照组及相应浓度的辛伐他汀组;相反,各辛伐他汀干预组mEPCR mRNA表达均高于5%CSE组,低于对照组及相应浓度的辛伐他汀组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论: 在体外,辛伐他汀通过上调HUVECs mEPCR mRNA的表达,降低sEPCR的分泌,对CSE介导的内皮细胞凝血功能障碍可能具有一定的改善作用。     

休克淋巴液对大鼠肺微血管内皮细胞凋亡相关基因表达的影响

目的：观察休克淋巴液对大鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）凋亡相关基因表达的影响，探讨休克淋巴液诱导PMVECs细胞凋亡的分子机制。方法：无菌条件下复制大鼠重症失血性休克模型，引流休克时肠系膜淋巴液或收集门静脉血，同时引流正常的淋巴液或正常门静脉血作为对照。以不同处理因素与第3代原代培养的PMVECs共同孵育，应用流式细胞仪检测细胞凋亡率，RT-PCR检测凋亡相关基因bcl-2、bax及fas、fas L的表达。结果：4%终浓度的休克淋巴液作用4 h后，PMVECs凋亡率为9.86%±3.24%，显著高于其它组（P<0.01）；4%终浓度的休克淋巴液作用6 h后，PMVEC的fas、fas L、bax mRNA表达高于其它组、bcl-2 mRNA表达低于其它组（P<0.01）。结论：休克淋巴液可诱导大鼠PMVECs凋亡，其机制与凋亡促进基因fas、fas L、bax表达增强、凋亡抑制基因〖STBX〗bcl-2〖STBZ〗表达降低有关。     

当归对胆管结扎肝硬化犬血浆TXA2／PGI2水平的影响

肝硬化病人及动物伴有显著ＴＸＡ２／ＰＧＩ２代谢异常，当归可有效地降低肝硬化大鼠和犬的门脉压，亦可影响多种种属动物和人花生四烯酸的代谢。因而有可能通过影响肝硬化动物ＴＸＡ２／ＰＧＩ２的代谢而改善和调节门脉血液动力学。为此，我们观察了当归对胆管结扎肝硬化犬腹腔内脏血浆ＴＸＢ２、６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α及其比值的影响。结果表明，静滴当归注射液后，动物下腔静脉、肝静脉和门静脉内ＴＸＢ２水平分别增加８０．１