CAPE对神经胶质瘤生长抑制作用研究

目的:探讨咖啡酸苯乙酯(Caffeic acid phenethyl ester,CAPE)在人神经胶质瘤巾的治疗作用.方法:建立裸鼠胶质瘤模型,观察CAPE在体内对肿瘤的影响.运用实时荧光定量PCR、Western blotting检测CAPE对胶质瘤细胞株U251异常Wnt/β-catenin通路及靶基因c-myc的影响.结果:通过对荷瘤鼠模型的观察,发现口服GAPE可以抑制神经胶质瘤的生长.CAPE可以抑制β-catenin基因mRNA及蛋白的表达,下游靶基因c-myc的mRNA及蛋白表达也相应降低.结论:CAPE可以抑制神经胶质瘤异常Wnt/β-catenin通路中β-catenin基因及c-myc基因的表达,对神经胶质瘤的生长有抑制作用.     

CAPE体内对Tcf-4蛋白作用研究

目的探讨咖啡酸苯乙酯（caffeic acid phenethyl ester,CAPE）在人神经胶质瘤移植瘤中对Tcf-4蛋白的作用。方法建立人神经胶质瘤细胞株裸鼠模型,运用Western blot技术检测CAPE对胶质瘤细胞株U251移植瘤Tcf-4蛋白的作用。结果通过对移植瘤模型的观察,发现CAPE可以抑制神经胶质瘤细胞株Tcf-4蛋白的表达。结论 CAPE可以抑制U251移植瘤Tcf-4蛋白的表达,可能对神经胶质瘤的生长有抑制作用。     

CAPE对人结肠癌HT-29细胞生长抑制和凋亡的作用

目的 探讨咖啡酸苯乙酯(caffeic acid phenethyl ester,CAPE)对结肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的作用.方法 用不同浓度CAPE处理HT-29,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测CAPE对HT一29细胞的增殖抑制效应;采用AO/EB染色和流式细胞仪检测细胞凋亡的发生.结果 CAPE对HT-29细胞的生长具有明显抑制作用,呈剂量和时间依赖性.AO/EB染色发现CAPE作用后凋亡细胞数量增加.流式细胞仪检测细胞凋亡率显示,2.5、5.0、7.5、10 μg,/mL处理HT-29细胞24 h后,细胞凋亡率上升,呈剂量依赖性.结论 CAPE对人结肠癌HT-29细胞具有明显的生长抑制和诱导凋亡作用.     

钩吻素子对神经胶质瘤细胞U251生长抑制及诱导凋亡作用

目的：探讨钩吻素子体外对神经胶质瘤细胞U251的生长抑制作用及诱导凋亡的作用.方法：利用MTT法和台盼蓝拒染法观察钩吻素子对神经胶质瘤细胞U251生长抑制作用.应用激光共聚焦、流式细胞仪、电子显微镜检测钩吻素子诱导U251细胞的凋亡作用.结果：MTT结果显示钩吻素子在（5-50mg/L）的浓度范围内对人神经胶质瘤U251细胞具有显著的抑制作用.生长曲线结果显示药物的各个浓度对U251的抑制作用呈时间依赖性.流式细胞仪可以观察到明显的＂亚G1期＂峰（凋亡峰）,且凋亡率达到22.4%.激光共聚焦显微镜可以观察到典型的凋亡核形,如核固缩和核碎裂等.透射电子显微镜下见到典型的早期凋亡形态学表现.结论：在一定的浓度范围内,钩吻素子可以抑制U251细胞的生长,并呈剂量和时间依赖效应.其抗肿瘤的特性与引起肿瘤细胞的凋亡有关.     

Genistein对胶质瘤细胞株U251MG作用的研究

目的探讨Genistein对胶质瘤细胞株U251MG的作用。方法采用光镜和倒置显微镜观察Genistein对胶质瘤细胞株U251MG生长的影响,并用流式细胞仪检测Genistein对U251MG细胞凋亡的影响。结果 Genistein在25μg/mL和50μg/mL作用48 h后,对U251MG细胞生长均有抑制作用,凋亡率均较对照组显著增加（P〈0.01）,并呈剂量依赖性。结论 Genistein既可以抑制U251MG细胞增殖,又可以诱导其凋亡。     

华蟾素诱导人胶质瘤细胞U251凋亡的作用机制研究

目的研究观察华蟾素(Cinobufacini)对体外培养人胶质瘤细胞U251增殖抑制作用,并初步探讨其诱导U251细胞凋亡的分子机制。方法平皿克隆形成法测定不同浓度华蟾素对U251细胞锚定依赖性生长能力的影响;使用Wester Blot法观察不同浓度华蟾素处理人胶质瘤细胞48小时后,Bcl-2、Bax蛋白表达变化情况。结果平皿克隆法显示:华蟾素抑制人胶质瘤细胞U251生长,呈剂量依赖性;Wester Blot显示随着药物浓度升高,华蟾素可以逐渐抑制Bcl-2的蛋白表达,活Bax蛋白表达。结论华蟾素有诱导人胶质瘤细胞U251细胞凋亡的作用,其机制可能Bcl-2/Bax比值的下调,促进细胞凋亡有关。     

shRNA靶向干扰PRDXⅢ对人胶质瘤细胞株U251的影响

目的探讨PeroxiredoxinsⅢ(PRDXⅢ)基因对人胶质瘤细胞株U251体外增殖和凋亡的影响。方法将U251细胞分为空白对照组、空载体转染组、无关序列转染组和干扰组。利用脂质体将PRDXⅢ干扰片段转染胶质瘤细胞株U251,RT-PCR及Western blot检测转染后PRDXⅢmRNA及蛋白的表达水平,流式细胞仪(FCM)、DNA ladder、PI染色检测转染后细胞的凋亡状况,四甲基偶氮唑盐(MTT)检测转染后U251细胞的生长抑制率。结果转染后干扰组PRDXⅢmRNA及蛋白的表达水平明显降低,抑制率分别为76.0%和63.9%。DNA ladder显示干扰组出现明显梯形电泳条带。PI染色结果显示干扰组细胞核的染色质高度浓染色,部分细胞核裂解为碎块。空白对照组、空载体转染组、无关序列转染组和干扰组细胞凋亡率分别为(2.26±0.64)%、(2.68±0.74)%、(3.54±0.62)%和(35.90±4.85)%,干扰组细胞凋亡率明显高于其他各组(P=0.00)。干扰组U251细胞生长抑制率为44.40%。结论 PRDXⅢ靶向干扰能够显著抑制U251细胞株增殖,增加其凋亡。     

TRAIL联合放射线诱导人脑胶质瘤细胞株U251凋亡的协同作用研究

目的：研究肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）对人脑胶质瘤细胞株U251的凋亡诱导作用及与放射线联合应用的协同作用，并探讨不同剂量TRAIL对人脑胶质瘤细胞株U251凋亡率的影响。方法：利用显微镜、流式细胞仪，观察和检测不同剂量TRAIL、放射线、TRAIL加放射线对传代培养的人脑胶质瘤细胞株U251的凋亡诱导作用，比较各组间肿瘤细胞凋亡率的差异。结果：TRAIL作用后镜下可见到人脑胶质瘤细胞株U251凋亡的典型表现，不同剂量TRAIL均有诱导入脑胶质瘤细胞株U251凋亡的作用，联合应用放射线后U251细胞凋亡率显著提高。结论：TRAIL可有效的诱导入脑胶质瘤细胞株U251凋亡，并和放射线有显著协同作用。     

TRAIL联合放射线诱导人脑胶质瘤细胞株U251凋亡的协同作用研究

目的:研究肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)对人脑胶质瘤细胞株U251的凋亡诱导作用及与放射线联合应用的协同作用,并探讨不同剂量TRAIL对人脑胶质瘤细胞株U251凋亡率的影响。方法:利用显微镜、流式细胞仪,观察和检测不同剂量TRAIL、放射线、TRAIL加放射线对传代培养的人脑胶质瘤细胞株U251的凋亡诱导作用,比较各组间肿瘤细胞凋亡率的差异。结果:TRAIL作用后镜下可见到人脑胶质瘤细胞株U251凋亡的典型表现,不同剂量TRAIL均有诱导人脑胶质瘤细胞株U251凋亡的作用,联合应用放射线后U251细胞凋亡率显著提高。结论:TRAIL可有效的诱导人脑胶质瘤细胞株U251凋亡,并和放射线有显著协同作用。     

低剂量辐射对裸鼠移植人胶质瘤(U251)细胞凋亡的影响

目的：探讨低剂量辐射对裸鼠移植人胶质瘤U251细胞凋亡的影响。方法：35只荷人胶质瘤U251裸鼠,随机分为7个实验组(每组5只),即假照组(0 mGy),D₁组(75 mGy),D₂组(4Gy),D₁-12 h+D₂组(D₁照射后12 h给予D₂),D₁-24 h+D₂组(D₁照射后24 h给予D₂),D₁-48 h+D₂组(D₁照射后48 h给予D₂)和D₁-72 h+D₂组(D₁照射后72 h给予D₂)。各实验组以不同方式照射后4 d,荷瘤裸鼠全部处死,采用TUNEL法检测裸小鼠移植人胶质瘤组织的细胞凋亡。结果：D₁（75 mGy）照射后,细胞凋亡指数（AI）增至(0.19±0.07),但与假照组（0.17±0.07）比较差异无显著性（P＞ 0.05）。D₂（4 Gy）组、D₁+D₂各组细胞凋亡指数均明显增加,分别为0.54±0.05、0.64±0.04、0.63±0.04、0.65±0.11及0.67±0.07,与假照组比较差异均具有显著性（P＜0.01）。与D₂组比较,D₁+D₂各组细胞凋亡指数增加更为明显,两者比较差异均具显著性（P＜0.05）。结论：75 mGy照射对胶质瘤细胞凋亡可能有一定程度的影响,低剂量辐射与大剂量辐射有协同促胶质瘤细胞凋亡的作用。     

咖啡酸苯乙酯对大肠癌细胞HCT116细胞周期和cyclin D1表达的影响

目的探讨咖啡酸苯乙酯(caffeic acid phenethyl ester, CAPE)对体外培养的大肠癌细胞HCT116细胞周期和cyclin D1表达的影响.方法以人大肠癌细胞株HCT116为研究对象,PI染色、流式细胞仪检测CAPE处理24 h后细胞周期分布,Western blotting、RT-PCR检测CAPE处理24、48 h 后cyclin D1表达的变化.结果 2.5、5.0、10 mg/L CAPE处理HCT116细胞24 h后,G0/G1期细胞百分率上升,S期细胞百分率下降,呈剂量依赖性.2.5、5.0、10 mg/L CAPE处理HCT116细胞24、48 h后cyclin D1蛋白和mRNA表达均降低,呈剂量和时间依赖性.结论 CAPE诱导HCT116细胞周期阻滞,其机制可能与其下调cyclin D1表达有关.     

咖啡酸苯乙酯药理活性以及机制研究进展

咖啡酸苯乙酯是一种来源于蜂胶和其他植物如红景天等的天然活性化合物,因其具有广泛的药理活性,如抗炎、抗氧化、抗肿瘤以及心血管和神经保护作用等,成为近年来研究的热点。本文就咖啡酸苯乙酯的药理活性以及机制研究最新进展进行综述,以促进咖啡酸苯乙酯的进一步开发与应用。     

咖啡酸苯乙酯对糖尿病大鼠肾保护作用

目的 探讨咖啡酸苯乙酯(CAPE)对糖尿病大鼠肾功能的保护作用及机制.方法 将50只大鼠分为6组,对照组、模型组及CAPE低、中、高(12、24、48 mg/kg)剂量组,一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ) 65 mg/kg制备糖尿病大鼠模型,第8周.末测尿清蛋白(Alb)、视黄醇结合蛋白(RBP)和肌酐,腹主动脉取血,测定空腹血糖(GLU)和糖化血红蛋白(HbA1c).取出肾脏,一部分肾组织用4℃生理盐水冲洗后,称质量研唐制成匀浆,再离心,取上清波测定丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽氧化物酶(GSH)的活性、一氧化氮(NO)水平、一氧化氮合酶(NOS)和Na-K-ATP酶活性.另一部分肾组织光镜下检测组织形态学变化.结果 与模型组比较,CAPE高剂量组Alb和RBP明显降低(P＜0.05);肾组织中NO、NOS、GSH和SOD活性明显上升,MDA水平明显下降,Na-K-ATP酶活性升高(P＜0.05),肾组织病理损伤减轻.结论 CAPE能降低糖尿病大鼠肾脏损伤具有保护作用,起保护作用可能与提高肾脏抗氧化应激损伤有关.     

Effects of caffeic acid phenethyl ester on proliferation of vascular smooth muscle cells in rats

INTRODUCTION The over-hyperplasia and migration of vascularsmooth muscle cells (VSMC) play an impor-tant role in both acute and chronic vascular pathologies including atherosclerosis(AS) and restenosis(RS)after percutaneous coronary intervention (PCI) [1]. Soit is important to inhibit excessive proliferation ofVSMC. Caffeic acid phenethyl ester (CAPE) is anactive component of honeybee propolis extracts andalso existed in some plants producing resin. It hasbeen used as traditional m…     

番茄红素抑制人脑胶质瘤U251细胞生长的实验研究

目的探讨番茄红素对体外培养的人脑胶质瘤U251细胞增殖及诱导凋亡的作用。方法用CCK-8法检测不同浓度番茄红素作用于U251细胞24h、48h及72h后细胞的存活率;应用流式细胞术（FCM）检测细胞周期。结果番茄红素能抑制人脑胶质瘤U251细胞的生长,呈量-效及时-效关系（P〈0．01）;FCM检测表明,细胞主要被阻滞在G0／G1期;番茄红素诱导细胞凋亡率较对照组明显增加（P〈0．01）,具有浓度依赖性。结论番茄红素能抑制U251细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

小分子干扰RNA靶向抑制suvivin基因诱导U251细胞凋亡的实验研究

目的 构建靶向survivin基因的小分子干扰RNA（siRNA）表达载体,导入人胶质瘤细胞U251中,研究siRNA靶向抑制survivin基因对U251细胞的凋亡诱导作用。方法根据siRNA设计原则,在survivin全长序列中选取设计含19个核苷酸（19nt）靶序列两条反向重复序列,间以9个核苷酸的茎环序列,两端分别加上对应的酶切位点．形成siRNA的DNA模板并克隆到siRNA表达载体pGenesil-1中,获得靶向抑制survivin基因的siRNA表达载体pGenesil-1／survivin;采用Metafectene转染试剂将干扰质粒导入到胶质瘤细胞U251;分别采用实时荧光定量PCR以及Western bloting从mRNA和蛋白水平检测干扰效果;采用Annexin—V／PI双色标记的流式细胞仪法检测siRNA诱导的细胞凋亡。结果实时荧光定量PCR以及Western blotting显示：survivin基因的mRNA转录水平以及蛋白水平的表达均得到显著抑制：流式细胞仪检测结果显示：survivin基因表达被抑制后,U251细胞凋亡率明显增高。结论靶向survivin基因的重组siRNA干扰载体pGenesi—l／survivin介导的RNAi显著靶向抑制了survivin基因在人胶质瘤细胞U251中的表达,并明显诱导了U251细胞发生凋亡。