不同产地栀子药材中8种主要药效成分的含量测定及聚类分析

目的:比较不同产地栀子药材中京尼平苷酸、去乙酰车叶草酸甲酯、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸及西红花苷Ⅰ共8种药效成分的含量,为栀子药材最佳产地的确定提供理论依据。方法:采用HPLC测定各指标成分含量,流动相乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)梯度洗脱(0~10 min,5%~10%A;10~20 min,10%~18%A;20~30 min,18%~45%A,40~50 min,45%~5%A),检测波长分别238,324,440 nm。并以各成分作为指标进行聚类分析,采用SPSS 20.0中主成分分析法提取4个主因子。结果:累计方差贡献率95.98%,聚类分析结果显示江西泰和县和江西樟树县GAP基地的栀子药材质量较好。结论:不同产区栀子药材中主要药效成分的含量有较大差异,各成分含量与产地呈一定的相关性。     

杜仲药材有效成分与环境因子的灰色关联度分析

目的: 运用灰色关联度法分析影响杜仲皮和叶中4种有效成分含量产地差异性的主要环境因子. 方法: 利用HPLC同时测定10个产地10年生杜仲皮和叶中桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷的含量,流动相分别为乙腈(A)-0.1%磷酸水(B)梯度洗脱(0~25 min,5%~13%A;25~45 min,13%~15%A;45~80 min,15%~21%A),流动相乙腈(A)-0.1%磷酸水(B)梯度洗脱(0~20 min,5%~12%A;20~35 min,12%~13%A;35~45 min,13%~19%A;45~65 min,19%~25%A),检测波长均为210 nm.检测杜仲生长地土壤的全氮、全磷、全钾、碱解氮、速效磷、速效钾、有机质及pH,获得土壤因子数据,运用灰色关联度法对4种有效成分与气候及土壤因子的相关性进行分析. 结果: 10个产地同一生长年限杜仲皮、叶中4种有效成分的含量存在较大差异.碱解氮、速效钾、有机质、年平均相对湿度、年平均最高气温对4种成分在杜仲不同组织中的影响较大. 结论: 杜仲不同组织部位中4种有效成分含量与环境因子的灰色关联度分析明确了主导环境因子,为合理施肥及环境调控来提高杜仲次生代谢产物的含量提供参考,为杜仲的适宜种植区选择及其道地性产生原因分析提供实验依据.     

不同产地和商品等级延胡索中尿苷、鸟苷、腺苷的含量分析

目的:建立高效液相色谱法同时测定延胡索药材中尿苷、鸟苷和腺苷3种核苷成分含量的方法,并比较不同产地、不同商品等级中3种核苷类成分含量的差异和各成分间的结构比。方法:采用Venusil MP C18(2)色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),以甲醇(A)-水(B)为流动相梯度洗脱(0~10 min,1%~5%A;10~15 min,5%~15%A;15~22 min,15%~17%A;22~26 min,17%~20%A;26~32 min,20%~24%A),流速1.0 m L·min-1,柱温35℃,检测波长260 nm。运用上述方法对38批延胡索药材进行测定,并对测定结果进行聚类分析。结果:测定了延胡索药材中3种核苷类成分的含量,在线性范围内线性关系良好(r0.999 8),平均回收率为99.63%~104.24%,RSD为0.7%~2.3%。38批延胡索样品中尿苷、鸟苷和腺苷均可检测到,不同产地延胡索药材中尿苷、鸟苷、腺苷量及组成结构比差异显著;同一产地不同种植户的延胡索药材其3种成分量及组成结构比也存在明显差异。采用聚类分析能将不同产地的38批延胡索药材分为3类。结论:总体上来说,不同产地延胡索药材成分的组成存在显著性差异,不同商品等级延胡索中核苷类含量无明显差异,延胡索药材的质量受自然环境、栽培技术因素的影响。该方法适用于延胡索中尿苷、鸟苷和腺苷的含量测定,为其质量控制提供保证。     

HPLC法同时测定毛果婆婆纳中3种环烯醚萜苷

目的建立HPLC同时定量测定采自西藏、四川阿坝毛果婆婆纳中梓醇、桃叶珊瑚苷、胡黄连苷Ⅱ的方法。方法采用外标法,Gemini C18色谱柱(110,4.60 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0~13 min,3%A;13~20 min,3%~15%A;20~50 min,15%A;50~60 min,15%~21%A;60~70 min,21%A;70~110 min,21%~100%A),体积流量1.0 m L/min,柱温25℃,检测波长203 nm。结果梓醇、桃叶珊瑚苷、胡黄连苷Ⅱ的线性范围分别为0.101 5~5.076μg,0.093 2~4.66μg,0.043 6~2.18μg;平均加样回收率分别为98.9%(RSD 1.0%),103.8%(RSD 0.7%),98.8%(RSD 1.9%)。结论 10个产地婆婆纳中梓醇、桃叶珊瑚苷、胡黄连苷Ⅱ的量差异明显,高低差异近10倍之多。     

不同炮制方法对巴戟天中寡糖类成分和水晶兰苷含量的影响

目的:考察不同炮制工艺对巴戟天中寡糖类成分和水晶兰苷含量的影响。方法:采用不同方法制备巴戟天炮制品,比较不同炮制品中寡糖类成分和水晶兰苷的含量。利用HPLC-CAD测定寡糖类成分含量,Shodex Asahipak NH2色谱柱,流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0~15 min,86%~81%A;15~20 min,81%~75%A;20~35 min,75%~70%A;35~50 min,70%~58%A;50~60 min,58%~40%A;60~65 min,40%~20%A);运用HPLC-DAD测定水晶兰苷含量,Venusil MP C18色谱柱,检测波长235 nm,流动相甲醇-0.4%磷酸溶液梯度洗脱(5∶95~28.8∶71.2,15 min)。结果:巴戟天不同炮制品中寡糖类成分总质量分数顺序为盐巴戟天>巴戟肉>制巴戟天>生巴戟天;水晶兰苷含量排序为盐巴戟天>生巴戟天>制巴戟天>巴戟肉。结论:巴戟天不同炮制品中寡糖类成分和水晶兰苷的含量差异较大,为巴戟天的饮片质量控制及炮制机制解析提供参考。     

HPLC测定栀子不同炮制品中栀子苷、绿原酸和西红花苷-Ⅰ含量

目的:比较栀子不同炮制品水提取部位中栀子苷、绿原酸和西红花苷-Ⅰ含量的差异,探索其炮制原理。方法:按2010年版《中国药典》标准炮制工艺制备生栀子、炒栀子和焦栀子,加水回流提取制备供试品溶液,采用HPLC-DAD检测栀子苷、绿原酸和西红花苷-Ⅰ含量,检测波长分别为240,330,440 nm,流动相甲醇-乙腈(9∶1,A)-0.3%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~15 min,10%~30%A;15~20 min,30%A;20~60 min,30%~65%A;60~65 min,65%A;65~75 min,65%~10%A),流速0.8 mL·min-1。结果:生栀子、炒栀子和焦栀子中栀子苷、绿原酸和西红花苷-Ⅰ质量分数均依次降低,栀子苷分别为2.84%,2.33%,1.57%,绿原酸依次为0.13%,0.09%,0.04%,西红花苷-Ⅰ分别为0.18%,0.16%,0.11%。结论:栀子不同炮制品水提部分主要药效成分—栀子苷、绿原酸和西红花苷-Ⅰ的含量存在差异,推测这与其炮制后缓和苦寒之性、增强凉血止血功效相关。     

LC-MS/MS同时测定鸡矢藤提取物中4个主要有效成分的含量

目的:建立运用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)同时测定鸡矢藤提取物中4个主要有效成分(鸡矢藤苷酸、鸡矢藤苷、鸡矢藤苷酸甲酯、车叶草苷)含量的分析方法。方法:采用Venusil MP C18色谱柱(2.10 mm×50 mm,5μm),以甲醇(A)-水(B)为流动相进行梯度洗脱(0~0.3 min,10%A;0.3~0.8 min,10%~95%A;0.8~3.0 min,95%A;3.0~3.2 min,95%~10%A;3.2~4.5 min,10%A),流速0.35 m L·min-1,柱温为室温,进样量10μL。采用电喷雾离子源(ESI),正离子模式下多反应监测扫描(MRM),通过优化三重四级杆的质谱仪参数以及4个化合物相关的质谱参数,进行检测和定量分析。结果:通过仪器精密度,线性范围,重复性,稳定性,加样回收率等方法学验证,发现其结果均符合定量分析的相关标准。鸡矢藤苷酸、鸡矢藤苷、鸡矢藤苷酸甲酯、车叶草苷在测定浓度范围内均具有良好的线性关系(r≥0.994 7);平均加样回收率(n=6)在90.8%~112.1%,RSD均≤5.1%。结论:该方法简便、快速、准确、可靠,可用于鸡矢藤提取物中4种主要有效成分的含量测定。     

HPLC波长切换同时测定知柏地黄丸中莫诺苷、马钱苷和丹皮酚的含量

目的:建立HPLC同时测定知柏地黄丸中莫诺苷、马钱苷、丹皮酚的含量。方法:采用Phenomenex C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-0.3%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~5 min,5%~7%A;5~26 min,7%A;26~45 min,7%~20%A;45~55 min,20%~60%A;55~65 min,60%A),流速1 m L·min-1,柱温40℃,波长切换(0~45 min,在240 nm波长下检测莫诺苷和马钱苷;46~65 min,在274 nm波长下检测丹皮酚)。结果:莫诺苷、马钱苷和丹皮酚的线性范围分别为0.055 5~1.11μg(r=0.999 9),0.076 4~1.528μg(r=0.999 9),0.098 2~1.964μg(r=0.999 9);平均回收率分别为100.6%,101.6%,101.9%,RSD分别为2.5%,1.8%,1.5%。结论:该方法操作简便、准确,重复性好,可用于知柏地黄丸的质量控制。     

菝葜抗炎有效部位群在大鼠肠外翻试验中的吸收特性考察

目的:考察菝葜抗炎有效部位群中6种成分的体外肠吸收特征,为该部位的制剂开发及药代动力学研究提供参考。方法:采用大鼠肠外翻模型,通过HPLC测定不同取样时间肠内液中白藜芦醇苷、落新妇苷、氧化白藜芦醇、槲皮苷、黄杞苷、白藜芦醇的含量,流动相乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0~18 min,12%~18%A;18~33 min,18%A;33~45 min,18%~21%A;45~50 min,21%A),流速1 m L·min-1,检测波长290 nm,计算吸收动力学参数,考察6个成分在不同肠段(十二指肠、空肠和回肠)的吸收情况。结果:白藜芦醇苷在各肠段吸收无明显差异,而其他5种成分在各肠段的吸收差异较大;6种成分在同一肠段的吸收有较大差异,在十二指肠、空肠和回肠中的吸收率分别为0.85%~2.79%,0.70%~2.73%和0.90%~1.77%。槲皮苷在十二指肠和空肠的吸收率最高,白藜芦醇苷在回肠的吸收率最高;氧化白藜芦醇吸收速度明显比其他5种成分慢,在十二指肠中于90 min后才表现出较明显的吸收。结论:白藜芦醇苷、落新妇苷、槲皮苷、黄杞苷、白藜芦醇在大鼠离体小肠的吸收为一级动力学过程,选择外翻肠囊法可评价菝葜提取物中多成分的肠吸收特性。     

金银花提取物的质量分析方法评价

目的:探索金银花提取物质量控制的专属性方法,为相关制剂的质量控制提供参考。方法:采用HPLC,流动相乙腈(A)-0.4%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0~15 min,5%~20%A;15~30 min,20%~30%A;30~40 min,30%A),检测波长327 nm。比较金银花提取物与山银花、杜仲叶原药材及其提取物中绿原酸含量和特征图谱,分析银黄制剂中金银花提取物的质量。结果:原药材、提取物中均是山银花所含的绿原酸含量最高,质量分数分别为3.56%~5.09%,4.62%~6.12%;金银花提取物与杜仲叶提取物无明显差异,绿原酸质量分数约4%;金银花、山银花、杜仲叶提取物酸化后绿原酸含量均提高,分别为6.90%,7.35%,6.47%。山银花、杜仲叶提取物及其酸化提取物的特征谱图与金银花提取物标准图谱相同,部分银黄制剂中检测出了杜仲叶的主要成分京尼平苷酸和山银花的主要成分灰毡毛忍冬皂苷乙。结论:金银花提取物中可能存在添加山银花和杜仲叶的情况,需加强质量控制,为金银花提取物质量标准的提高及检测方法的选择提供了重要依据。     

杜仲叶中有效成分的闪式提取工艺优选

目的:优选杜仲叶中有效成分的闪式提取工艺。方法:采用HPLC测定绿原酸和京尼平苷酸含量,流动相甲醇-水-冰乙酸(15∶85∶1),流速1.0 mL·min-1,检测波长237 nm。以绿原酸和京尼平苷酸提取率为评价指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察乙醇体积分数、提取次数、提取时间、料液比对杜仲叶闪式提取工艺的影响。结果:最佳提取工艺条件为加25倍量70%乙醇提取3次,每次6 min;绿原酸、京尼平苷酸提取率分别为1.82%,0.47%。结论:优选的提取工艺稳定可行,为杜仲叶的资源开发提供参考。     

HS-SPME-GC-MS结合化学计量法对不同产地艾叶药材挥发性成分的比较分析

目的:建立艾叶挥发性成分的快速分析方法,研究不同产地艾叶挥发性成分的含量及分布特征。方法:采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱(HS-SPME-GC-MS)联用技术,结合安捷伦化学工作站对不同产地的艾叶中挥发性化学成分进行定性分析,以峰面积归一化法计算各组分的相对含量,并通过化学计量法主成分分析和聚类分析对艾叶中的挥发性成分含量进行分析。结果:初步鉴定出84种化合物,主要为酮类、烯类、醇类化合物。不同产地艾叶挥发性成分有一定差异,采用主成分分析及聚类分析法能有效区分不同产地的艾叶,其中湖北蕲春产的艾叶品质最好,其次为湖南广布、河南汤阴的艾叶质量较佳,聚类分析结果将不同产地艾叶分为5类。结论:此方法稳定可靠,适用于艾叶挥发性成分的快速分析,并为艾叶挥发性成分的质量评价提供一定的科学依据。     

基于实验室制绒工艺比较不同产地艾叶出绒率

目的:优选艾叶制绒工艺,进而比较不同产地艾叶的出绒率。方法:采用摇摆式高速万能粉碎机粉碎艾叶,然后借助电动振筛机除去粉末残渣,选择投料量、粉碎时间、药典筛大小、筛分时间为自变量,艾叶出绒率和残渣质量为因变量,通过单因素实验优选艾叶制绒工艺,进而采用确定的工艺方法测定不同产地艾叶的出绒率。结果:优选的制绒工艺如下:最佳投料量为80 g,制得等级为5∶1~10∶1艾绒的合适粉碎时间为4~7 min,采用1号药典筛,筛分时间为110 s。采用优选的制绒工艺,比较不同产地艾叶的出绒率,当粉碎时间为4 min时,不同产地艾叶出绒率由大到小的顺序为河南省安阳市汤阴县(24.10%)河南省南阳市桐柏县(20.99%)河北省安国市(18.54%)河南省南阳市方城县(17.91%)河南省南阳市宛城区(15.45%)湖北省黄冈市蕲春镇野生(14.56%)湖北省黄冈市蕲春镇人工种植(12.02%)河南省南阳市西峡县(8.34%);当粉碎时间为7 min时,不同产地艾叶出绒率由大到小的顺序为河南省南阳市桐柏县(9.05%)河北省安国市(7.60%)河南省南阳市方城县(6.58%)河南省南阳市宛城区(6.04%)湖北省黄冈市蕲春镇野生(5.12%)河南省安阳市汤阴县(4.51%)湖北省黄冈市蕲春镇人工种植(4.43%)河南省南阳市西峡县(1.50%)。结论:优选的艾叶制绒工艺合理可行,当粉碎时间为4 min时,产自安阳汤阴、南阳桐柏、河北安国的艾叶出绒率较高;当粉碎时间为7 min时,产自南阳桐柏、河北安国、南阳方城的艾叶出绒率较高。     

山西不同产地酸枣仁中脂肪酸类成分的GC-MS分析

目的:研究山西不同产地酸枣仁中脂肪酸类成分的特征。方法:利用气相色谱-质谱联用技术对山西28个不同产地酸枣仁中脂肪酸类成分进行分离与鉴定,采用聚类分析对实验数据进行分析。结果:山西不同产地酸枣仁脂肪酸得率变化范围在22. 09%~31. 10%;鉴定出共有脂肪酸类成分24种,其中不饱和脂肪酸相对质量分数处于68. 22%~89. 92%。聚类分析在欧式距离系数5. 0处,山西酸枣仁样品明显分为两类。结论:山西产酸枣仁含有丰富的不饱和脂肪酸。产地对酸枣仁中脂肪酸类成分的含量影响较小。深入开发山西产酸枣仁脂肪酸类成分具有较好的区位优势。     

基于成分特征的桑叶经霜质量标志物探索

目的:分析识别桑叶经霜质量标志物(Q-marker),对桑叶是否经霜进行鉴别。方法:建立桑叶经霜前后HPLCDAD-MSn指纹图谱,标记共有峰,采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)提取桑叶经霜后的特征成分,以含量变化较大的成分作为标志成分,较为稳定的成分作为内参成分,以标志成分与内参成分峰面积的相对比值为桑叶经霜成分特征,实现对桑叶经霜的鉴别,并通过MSn和对照品进行定性研究。结果:建立了桑叶经霜前后的指纹图谱,共标记了33个共有峰,通过OPLS-DA分析,峰1,23,14确定为标志成分,峰12确定为内参成分,通过MSn和对照品分别鉴定为枸橼酸衍生物,桑皮苷F,色氨酸和新绿原酸。桑叶经霜前后枸橼酸衍生物,桑皮苷F,色氨酸与新绿原酸峰面积的比值分别为0. 15±0. 054,1. 0±0. 48; 0. 14±0. 073,0. 98±0. 48; 0. 13±0. 088,0. 89±0. 49。结论:建立的桑叶指纹图谱中,枸橼酸衍生物,桑皮苷F,色氨酸与新绿原酸的峰面积比值作为桑叶经霜的成分特征具有专属性,可作为桑叶经霜Q-marker对桑叶是否经霜进行鉴别。该研究扩展了中药Q-marker专属性的内涵,可为桑叶的质量评价及成药性提供实验数据,并为类似研究提供参考。     

江西不同产区车前子药材的HPLC指纹图谱及其多成分化学模式识别分析

目的:建立车前子HPLC指纹图谱检测方法,结合化学模式识别方法对江西不同产区车前子样品进行分析,并测定其中5种有效成分的含量,为科学评价和有效控制该药材的质量提供参考。方法:利用HPLC检测34批车前子药材,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012版)进行相似度评价,以其色谱峰信息为数据来源,利用化学模式识别方法综合分析江西道地药材车前子的质量,对筛选并指认出的5个有效成分京尼平苷酸、大车前苷、毛蕊花糖苷、木犀草苷、异毛蕊花糖苷进行定量分析。结果:江西不同产区车前子样品的相似度均 0. 86,说明江西不同产区车前子相似度良好。利用正交偏最小二乘法-判别分析能较好地区分不同产区车前子药材,且可判断与车前子质量相关性较强的化学成分。5种有效成分的含量在不同产区车前子中仍存在一定差异,其中尤以大车前苷的含量差别较大。结论:建立的车前子HPLC指纹图谱特征性强,结合化学模式识别方法可有效的评价车前子质量并区分其不同产区,可为该药材的质量控制提供参考依据。     

西南不同产区3种天麻变型主要化学成分含量比较

目的对西南不同产区3种天麻变型的主要化学成分含量进行比较和主成分分析,为进一步开发利用天麻资源和评价药材质量提供理论依据。方法采用苯酚-浓硫酸法测定天麻多糖含量,茚三酮显色法测定游离氨基酸含量,Folin-Ciocaileu比色法测定总多酚含量,HPLC法测定天麻中天麻素、对羟基苯甲醇含量,并利用主成分分析法对天麻药材质量进行评价。结果不同产区天麻资源材料的主要化学成分含量差异较大。变异系数以天麻多糖含量最小,为18.025%,对羟基苯甲醇含量的变异系数最高,达48.978%。其中,四川北川的乌天麻游离氨基酸、总多酚和天麻素含量均最高,分别为2.873%、0.805%和0.862%,与其他产区样品间差异均达极显著水平;贵州大方的绿天麻多糖含量最高,为29.225%,显著高于北川的乌天麻,并极显著高于其余天麻;对羟基苯甲醇含量最高的为云南昭通的乌天麻,其次为四川广元的红天麻,两者间差异不显著。结论天麻中各成分在地区或变型间差异不显著,从主要化学成分角度分析,四川北川的乌天麻药材质量最好。