柱前衍生RP-HPLC法分析淡豆豉和大豆中氨基酸

目的 分析淡豆豉Sojae Semen Preparatum和大豆Glycine max中游离及水解氨基酸.方法 用0.1 mol/L HC1作溶剂超声提取得到淡豆豉和大豆中的游离氨基酸;用6 mol/L HC1水解提取得到水解氨基酸,以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生化试剂,采用柱前衍生RP-HPLC法进行分析.结果 淡豆豉和大豆中均含有16种氨基酸,这16种氨基酸浓度在0.031～1.750 mmol/L内呈良好的线性关系,r均大于0.997 9,平均回收率91.02％～102.04％,RSD1.01％～4.81％.结论 本方法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,16种氨基酸能在样品杂质量较多的情况下得到分离,且采用普通C18色谱柱成本低,可广泛应用于富含氨基酸样品的分析.     

PITC柱前衍生HPLC测定复方氨基酸注射液中18种氨基酸的含量

目的：建立柱前衍生高效液相色谱法同时测定复方氨基酸注射液（18AA）中18 种氨基酸含量的方法。方法：样品采用异硫氰酸苯酯（PITC）柱前衍生,以Unitary-C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）为色谱柱,检测波长为254 nm,醋酸钠缓冲盐及乙腈、甲醇和水的混合体系为流动相,梯度洗脱。结果：优化了衍生试剂用量、衍生时间、缓冲盐浓度以及pH 值和柱温等影响因素,最终在40 min内实现了18种氨基酸的分离,在9~1 021 μg·mL-1浓度范围内线性关系良好,且相关系数大于0.997 7,平均回收率为92.6%~110.7%,相对标准偏差（RSD）为0.01%~5.68%。其定量限（LOQ,S/N=10）为0.02~13.41 μg·mL-1。结论：该方法操作简便、灵敏度高、准确度和精密度好,可用于复方氨基酸注射液中氨基酸的含量测定。     

柱前衍生化RP-HPLC法分析龟板中氨基酸

目的采用柱前衍生RP-HPLC法对龟板中13种氨基酸进行分析。方法用6mol/L HCl水解提取龟板中总氨基酸,以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生化试剂,采用外标法,梯度洗脱的方式分析。结果13种氨基酸在40min内均可得到很好的分离,回收率(除甘氨酸外)为91.68%~106.26%,RSD为0.718%~4.386%。结论所建立的方法分离效果好、灵敏、准确、简便,且采用普通的C18色谱柱,可广泛用于含有多种氨基酸样品的分析。     

柱前衍生RP-HPLC法测定泽泻中氨基酸的含量

目的 分析不同产地泽泻中氨基酸含量及其特征性。方法 采用邻苯二甲醛(OPA)、氯甲酸芴甲酯(FMOC)联合柱前衍生RP-HPLC测定泽泻中的17种氨基酸。结果 氨基酸质量浓度与峰面积呈良好的线性关系，r均在0．99以上。不同产地泽泻中氨基酸含量有一定差别。结论 该方法适宜泽泻药材中氨基酸含量的测定。     

柱前衍生RP-HPLC法测定黄芩中氨基酸含量

目的采用柱前衍生RP-HPLC法对黄芩中游离及总氨基酸进行测定。方法以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂;色谱柱为Ultimate Amino Acid氨基酸分析专用柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:A为乙腈-水(80∶20,V/V),B为三水合醋酸钠缓冲溶液(pH 6.5)-乙腈(93∶7,V/V),梯度洗脱;检测波长为254 nm。结果 21种氨基酸在0.002 5~2.500 0 mmol/L内呈良好的线性关系(R20.999 0)。21种游离氨基酸平均回收率在93.72%~105.03%之间,RSD在0.81%~3.15%之间(n=6);总氨基酸平均回收率在95.22%~102.04%之间,RSD在0.47%~2.44%之间(n=6)。结论柱前衍生RP-HPLC法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,适合黄芩中氨基酸含量测定。     

柱前衍生化RP-HPLC测定鸡内金中16种氨基酸的含量

采用酸水解法制备水解氨基酸样品溶液,以异硫氰酸苯酯（PITC）柱前衍生化后进行HPLC分析。采用Ultimate Prime C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）;流动相A 0.1 mol·L^-1醋酸钠溶液（调pH至6.5）-乙腈（93∶7）,流动相B乙腈-水（8∶2）;流速1.0 mL·min^-1;柱温40 ℃;检测波长254 nm;梯度洗脱。氨基酸衍生溶液在36 h内保持稳定,16种氨基酸线性相关系数均大于0.999 5,加样回收率在98.01%~101.8%。该方法操作简便,精密度和重复性良好,可用于鸡内金中16种水解氨基酸含量的测定。     

柱前衍生HPLC同时测定驴胶补血颗粒中6种水解氨基酸

目的:建立柱前衍生反相高效液相色谱法同时测定驴胶补血颗粒中6种水解氨基酸含量的方法.方法:采用Hypersil BDS C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),异硫氰酸苯酯为柱前衍生剂,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长254nm,柱温30℃.结果:L-谷氨酸的线性范围0.169 ～1.014 μg(r =0.9995),平均回收率101.43％,RSD 3.20％;L-羟脯氨酸的线性范围0.178～ 1.068 μg(r =0.999 9),平均回收率101.23％,RSD 3.25％;甘氨酸的线性范围0.381～2.286 μg(r=0.9995),平均回收率102.87％,RSD 2.32％;L-丙氨酸的线性范围为0.162 ～0.972 μg(r=0.999 5),平均回收率102.37％,RSD 3.36％;L-精氨酸的线性范围0.118 ～0.708 μg(r =0.999 6),平均回收率102.73％,RSD 2.41％;L-脯氨酸的线性范围0.253 ～ 1.518 μg(r =0.9999),平均回收率98.69％,RSD 2.34％.结论:建立的方法可靠,可用于驴胶补血颗粒中氨基酸的含量检测.     

柱前衍生RP-HPLC测定女贞子中21种氨基酸含量

目的:建立一种采用柱前衍生RP-HPLC检测女贞子中游离氨基酸和水解氨基酸含量的方法。方法:采用HPLC,用异硫氰酸苯酯进行柱前衍生,采用梯度洗脱的方法,检测女贞子中游离氨基酸和水解氨基酸含量。结果:21种氨基酸线性范围在0.002~0.270 mmol·L~(-1),r均≥0.999 5;21种游离氨基酸的平均加样回收率在88.33%~99.88%,RSD为0.6%~2.5%,水解氨基酸的平均加样回收率在90.32%~99.91%,RSD为0.5%~2.5%。结论:该方法适合测定女贞子中游离及水解氨基酸的含量。     

柱前衍生法测定海巴戟中18种氨基酸

目的:建立柱前衍生高效液相色谱法测定海巴戟中18种氨基酸的方法。方法:以2,4-二硝基氟苯为柱前衍生剂,梯度洗脱,流速1.0m L/min,检测波长为360nm,柱温为30℃。结果:18种氨基酸的线性范围分别为32-609μg/m L,r值均0.9990-0.9998,平均回收率分别为91.87%-108.56%。结论:本方法可用于海巴戟中氨基酸的测定。     

柱前衍生RP-HPLC法测定阿胶中13种氨基酸

目的 采用RP-HPLC法同时测定阿胶中13种氨基酸的量.方法 阿胶以6mol/L盐酸于120℃水解3h,以异硫氰酸苯酯柱前衍生,用反相高效液相色谱法测定氨基酸的量.采用Agilent Eclipse AAA色谱柱(75 mm×4.6 mm,3.5 μm),以乙腈-110 mmol/L醋酸胺溶液(1∶99)为流动相A、醋酸-乙腈-水(0.05∶80∶20)为流动相B进行梯度洗脱,体积流量0.6 mL/min,柱温42℃,检测波长为254 nm.结果在36 min内可完成对阿胶中13种氨基酸的分离测定,各氨基酸的峰面积与浓度的线性关系良好(r＞0.997 7),加样回收率为95.2％～104.4％,RSD＜ 5.0％.结论方法简便、准确,重复性好,可用于阿胶的质量控制,亦可为其他药物中氨基酸的分析提供参考.     

PITC柱前衍生HPLC测定柴胡炮制前后17种氨基酸含量

目的:建立一种同时测定鳖血柴胡中17种氨基酸含量的方法,为该药材的质量控制提供参考。方法:以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生试剂,采用Prevail C18色谱柱,流动相[乙腈-水(4∶1)]-[乙酸钠缓冲溶液(p H 6.5)-乙腈(97∶3)]梯度洗脱,检测波长254 nm,测定柴胡炮制前后氨基酸的含量。结果:17种氨基酸在32 min内可良好分离;样品平均加样回收率93.4%~107.1%,RSD 1.8%~3.9%。结论:与其他柱前衍生测定氨基酸含量的方法相比,该方法具有可操作性强、成本低、易推广等优势,可作为柴胡及其炮制品中氨基酸的含量测定方法。     

柱前衍生化RP-HPLC测定铁皮石斛中的氨基酸的含量

目的:测定不同产地的铁皮石斛样品中氨基酸的含量。方法:样品以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,与铁皮石斛中氨基酸柱前衍生,采用高效液相色谱法测定其含量,采用CAPCELL PAK C18SG300色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相[0.05 mol·L-1乙酸钠缓冲液(以乙酸调p H 6.5)-乙腈(1∶1)](A)-[0.05 mol·L-1乙酸钠缓冲液(以乙酸调p H6.5)](B)梯度洗脱,柱温25℃,流速0.6 m L·min-1,检测波长254 nm。结果:游离氨基酸和总的氨基酸的回收率范围分别为92.48%~97.30%和90.95%~95.63%,RSD都小于3.0%,9个不同产地的样品游离氨基酸的含量范围在0.210 5%~0.571 2%,总的氨基酸含量范围在3.670 8%~6.890 4%,必需氨基酸占总的游离氨基酸的比例为0.094 4%~0.186 0%;必需氨基酸占总的氨基酸的比例范围为0.338 5%~0.374 1%。结论:该方法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,可用于铁皮石斛中氨基酸的检测,不同产地的铁皮石斛样品其氨基酸的含量存在差异,必需氨基酸的比例也存在差异     

柱前衍生化HPLC法测定注射用芪红脉通中氨基酸＊

目的：建立中药注射剂注射用芪红脉通中氨基酸含量测定方法。方法：采用OPA-FMOC柱前衍生化法,用HPLC方法同时检测注射用芪红脉通中17种氨基酸。结果：所测17种氨基酸线性关系良好。结论：本试验建立的HPLC检测氨基酸的分析方法,选择性强、重复性好,可用于注射用芪红脉通中氨基酸的检测及质量控制。     

柱前衍生化HPLC法测定注射用芪红脉通中氨基酸

目的：建立中药注射剂注射用芪红脉通中氨基酸含量测定方法。方法：采用OPA-FMOC柱前衍生化法,用HPLC方法同时检测注射用芪红脉通中17种氨基酸。结果：所测17种氨基酸线性关系良好。结论：本试验建立的HPLC检测氨基酸的分析方法,选择性强、重复性好,可用于注射用芪红脉通中氨基酸的检测及质量控制。     

仙灵骨葆胶囊对骨折愈合相关血生化指标影响的临床研究

目的:评价仙灵骨葆胶囊治疗骨折病人的临床疗效。方法:选取2003至2005年本院60例应用仙灵骨葆胶囊及对照药物的患者进行了系统的临床观察,并比较了患者血钙、磷的变化。结果:结论:与对照组相比,治疗组骨折愈合时间明显缩短而骨痂评分显著增加(P<0.05);骨折后血清钙明显增高,而后逐渐下降;与此相反,血磷在伤后明显降低,而后逐渐增加;相比对照组,治疗组血钙下降和血磷上升均更明显(P<0.05)。结论:仙灵骨葆能明显缩短骨折患者的愈合时间,此功能与其增加钙磷沉积具有一定的相关性。     

反相高效液相色谱法同时测定仙灵骨葆滴丸中淫羊藿苷和补骨脂素及异补骨脂素的含量

目的:建立以反相高效液相色谱法测定仙灵骨葆滴丸(淫羊藿,补骨脂,川续断等)中有效成分含量的方法.方法:色谱柱为Kromasil-C18柱,流动相为甲醇-1.5%冰醋酸水溶液(55:45);检测波长为246 nm;流速为0.8 mL/min;柱温为30℃.结果:淫羊藿苷、补骨脂素及异补骨脂素3种成分均能达到良好分离,在淫羊藿苷进样量范围0.523～4.184 μg,补骨脂素进样60.8～486.4 ng范围,异补骨脂进样量47.2～377.6 ng范围内线性关系良好;平均回收率在97%～99%之间,RSD均小于2.6%.结论:本方法简便、准确、灵敏度高、重现性好,可用于仙灵骨葆滴丸的质量控制.     

HPLC法测定仙灵骨葆胶囊中川续断皂苷VI、补骨脂素及异补骨脂素

目的 采用多波长HPLC法建立仙灵骨葆胶囊中川续断皂苷VI、补骨脂素及异补骨脂素的定量测定方法。方法 采用月旭Ultimate^® XB-C₁₈柱,流动相采用乙腈-水系统,梯度洗脱;柱温30 ℃;检测波长：川续断皂苷VI为212 nm,补骨脂素、异补骨脂素为246 nm。结果 3种成分均能达到基线分离,川续断皂苷VI的进样量在144.1～5 764.0 ng（r=0.999 6）、补骨脂素在5.4～215.2 ng（r=0.998 0）、异补骨脂素在6.6～265.6 ng（r=0.998 5）与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为98.11%、97.86%、98.22%,RSD均小于2.0%。结论 建立的方法操作简便、分离良好、数据准确、灵敏度高、工作效率好,可用于仙灵骨葆胶囊的多指标成分定量测定。     

柱前衍生RP-HPLC测定菊米中17种氨基酸的含量

目的:探讨菊米中基本氨基酸组成和不同加工方式、不同采收期对氨基酸含量的影响,为菊米的质量和加工利用提供科学依据。方法:采用柱前衍生处理样品,建立HPLC方法,分析菊米中氨基酸组成及含量,评价不同加工处理和不同采收期的菊米质量差异。结果:菊米中含有17种必需和非必需氨基酸,机械加工样品氨基酸含量高于手工加工。通过t检验,除脯氨酸和胱氨酸外,其余15种氨基酸在两种加工方法处理菊米样品中均存在显著差异。通过氨基酸含量的偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA),加工方法对天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、缬氨酸和赖氨酸的影响最大(VIP1),两种加工方法区分明显,可以判断加工方法的优劣。不同采收时期的菊米样品氨基酸含量差异不明显(P0.05),说明采收时期对氨基酸成分影响较小。结论:利用柱前衍生-HPLC法分析菊米营养成分氨基酸可作为评价菊米质量评价的方法之一,采用机械加工可保证菊米的质量。     

仙灵骨葆胶囊上市后用药安全性系统评价

系统评价仙灵骨葆胶囊上市后用药安全性,计算机检索Medline,EMbase,the Web of Science,Clinical Trials.gov,the Cochrane Library,CNKI,VIP,Wan Fang Data,CBM。按纳入、排出标准筛选文献,依据国际公认的质量评价标准进行各类研究质量的评价,提取资料并进行分析。该研究最终纳入156篇文献,随机对照试验117篇,半随机对照试验11篇,非随机对照试验10篇,病例系列11篇,个案报告7篇,共分析167项研究。7 496例患者使用仙灵骨葆胶囊,累计发生不良反应共377例,严重不良反应4例,其中包含1例死亡病例,1例脑血管意外,1例皮肤过敏反应和1例胃肠道不适;轻度ADR中最常见为胃肠损害。该研究分析发现仙灵骨葆胶囊总体安全性可接受,虽系统分析了关于该药安全性病例报告的直接证据,但缺少针对该药上市后安全性的机制研究或前瞻性长期的临床观察性研究,因此关于其安全性研究还需进一步深入;同时仙灵骨葆胶囊在适应症方面,临床中存在超说明书使用范围,因此需要相关部门尽快制定用药规范,给临床用药提供更好的指导。