利用Pirkle型手性固定相柱拆分对映体药物:用异氰酸-α萘酯作衍生化试剂拆分胺类、醇类药物

本文首次介绍了利用异氰酸-α萘酯(NI)作衍生化试剂,在Pirkle型DNBPG柱上对五种含胺基、醇基的药物对映体进行了拆分。其中拆分美西律(mexiletine)、氯胺酮(ketamine)、本芴醇(benflumelol)和苯丙醇(phenylpropanol)药物尚未见报道。结果表明,用异氰酸-α萘酯作衍生化试剂的方法,具体简便易行、分离度好、几乎没有衍生化带来的杂质、不需分离出未反应的异氰酸-α萘酯便可直接进行拆分实验等优点。可以预计,NI将可能成为一种很有发展前途的新衍生化试剂,而且为Pirkle型DNBPG柱开发了新的领域。     

利用Pirkle型手性固定相柱拆分对映体药物:用异氰酸-α萘酯衍生化拆分烯丙洛尔等β-阻断剂药物及衍生物的结构鉴定

利用异氰酸-α萘酯(NI)作衍生化试剂,在Pirkle型DNBPG柱上拆分了β-阻断(?)丙洛尔等药物。方法简便,分离度好。对其衍生物结构的研究表明:在温和的条件下,异氰酸酯与分析物的仲氨基反应,生成脲;若反应在较强烈的条件下进行,则将发生异构化,最终是异氰酸酯与羟基结合,生成氨基甲酸酯。实验还表明,NI试剂与分析物之间的反应是按1:1进行的。     

利用Pirkle型手性固定相柱拆分对映体药物:用异氰酸-α萘酯衍生化拆分烯丙洛尔等β-阻断剂药物及衍生物的结构鉴定

利用异氰酸-α萘酯(NI)作衍生化试剂,在Pirkle型DNBPG柱上拆分了β-阻断(?)丙洛尔等药物。方法简便,分离度好。对其衍生物结构的研究表明:在温和的条件下,异氰酸酯与分析物的仲氨基反应,生成脲;若反应在较强烈的条件下进行,则将发生异构化,最终是异氰酸酯与羟基结合,生成氨基甲酸酯。实验还表明,NI试剂与分析物之间的反应是按1:1进行的。     

手性药物拆分试剂的研究进展

摘要：手性药物是指分子结构中存在手性中心（不对称中心）的药物,彼此之间互为实物与镜像的对映异构体。手性不同,药物对映体之间的理化性质和生物活性可能存在显著差异,进一步影响药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄,因此需要对手性药物进行拆分以保证药效,减少不良反应,提高安全性。手性拆分试剂是指含有手性识别位点且能够拆分手性分子的化合物,它们对于手性药物的拆分具有重要意义,常见的手性拆分试剂有环糊精、淀粉衍生物、纤维素衍生物、蛋白类、脂肪酶、金属有机骨架、大环抗生素、冠醚类等。本文将结合近5年手性拆分试剂的研究与应用,探讨手性拆分机制,分析拆分能力影响因素,为手性拆分试剂的选择和开发提供参考。     

手性药物拆分的研究进展

目前，利用酶法、超临界流体色谱法、化学法、高效液相色谱法、气相色谱法、毛细管电泳法和分子烙印法拆分药物的对映体，已成为新药研究和分析化学领域的重要课题。在药物对映体拆分分析研究中，常用的方法是气相色谱法和高效液相色谱法，这两种方法效率较高，但手性柱费用高、易污染，且手性衍生化常带进副产物；超临界流体色谱法处于发展阶段，各种参数对分离度的影响虽尚未完全清楚，但随着其理论和技术的日臻完善，这种方法在手性药物拆分中的应用将得到进一步发展；酶法和化学法在生产方面有较明显的优势，酶法操作简便且不易导致污染；而分子烙印技术有着良好的应用前景。     

柱前手性衍生化-反相高效液相色谱法拆分布洛芬对映异构体

目的：建立一种柱前手性衍生化-反相高效液相色谱紫外法检测布洛芬的异构体。方法：以N′N-羰基二咪唑（CDI）作为活化剂活化布洛芬的羧基基团,再以（R）-（+）-1-（1-萘基）乙胺（R-NEA）作为手性衍生化试剂进行反应。选用Kromasil C18色谱柱,流速1.0 mL·min-1,柱温30 ℃,以乙腈-0.05%磷酸（68∶32）为流动相,检测波长225 nm。结果：布洛芬的非对映异构体色谱峰的保留时间分别为25.6 min和27.9 min。结论：本方法操作简单,条件温和,衍生化产物稳定,且衍生化试剂价格便宜,更准确地实现了对布洛芬对映异构体的分离检测。     

柱前衍生化RP-HPLC荧光色谱法分离肌肽的光学异构体

目的 采用柱前衍生化反相高效液相荧光色谱法拆分肌肽的对映体.方法 采用邻苯二甲醛和N-乙酰-L-半胱氨酸为柱前手性衍生化试剂,反相液相色谱法分离肌肽的光学异构体.考察衍生化反应条件对肌肽衍生化反应、不同色谱条件下对肌肽光学异构体分离的影响.通过光学异构体分离过程中的热力学参数的计算,探讨光学异构体分离过程的驱动力.结果 邻苯二甲醛和N-乙酰-L-半胱氨酸的摩尔比为1∶2时,以无水乙醇与硼酸缓冲液(pH9.8)为溶剂溶解,作为衍生化试剂,于室温下避光反应5 min,肌肽转化成异吲哚产物;在柱温35℃时,肌肽光学异构体的衍生化产物分离因子(α)和分离度(R)分别为1.533、3.947.其光学异构体-衍生产物的拆分过程主要是一个焓驱动的过程.结论 所用方法简单快速、灵敏度高、重复性好,适用于肌肽的手性拆分.     

柱前手性衍生化反相高效液相色谱法拆分地佐西平对映异构体的研究

用乙酰葡萄糖异硫氰酸酯(GITC)作柱前手性衍生化试剂,以反相高效液相色谱法成功地拆分了地佐西平对映异构体。在此基础上建立了地佐西平对映异构体纯度和血药浓度测定方法。已用于测定右旋地佐西平的光学纯度和小鼠血药浓度。     

阿替洛尔的手性衍生化RP—HPLC法拆分及在鼠肝微粒体中的测定

目的：建立阿替洛尔两对映体在鼠肝微粒体中的ＲＰ－ＨＰＬＣ测定方法。方法：从鼠肝微粒体中提取阿替洛尔消旋体,采用手性衍生化试剂２,３,４,６－四－Ｏ－乙酰基－β－Ｄ－吡喃葡萄糖异硫氰酸酯（ＧＩＴＣ）对阿替洛尔消旋体进行柱前手性衍生化再以ＲＰ－ＨＰＬＣ拆分,测定鼠肝微粒体中阿替洛尔对映体含量。结果：建立了在碱性条件下从水相中用乙酸乙酯提取阿替洛尔,用ＧＩＴＣ进行柱前手性衍生化,以及用流动相ＮａＨ２ＰＯ     

用均匀设计法优化β-环糊精手性固定相的衍生化反应工艺条件

采用均匀设计法对衍生化β-环糊精(β-CD)键合固定相的合成条件进行优化,考察的主要因素包括衍生化试剂异氰酸苯酯的用量、反应时间及反应温度.衍生化后β-CD键合相的碳含量优化结果预测值和实测值分别为17.95%和18.10%.采用红外光谱、热重分析曲线对衍生化前后β-CD键合固定相进行表征,探讨了衍生化前后β-CD键合相的手性拆分能力.     

水／非水介质毛细管电泳法拆分抗胆碱能药物的研究

目的:研究抗胆碱能药物盐酸苯环壬酯、盐酸去甲苯环壬酯和盐酸戊乙奎醚对映体的手性分离方法。方法:采用均匀设计方法建立了拆分3种抗胆碱能药物对映体的水介质毛细管电泳方法。也通过选择环糊精种类和浓度、背景电解质浓度和酸度等最佳试验条件,确定了非水介质毛细管电泳拆分这3种抗胆碱能药物对映体的方法。结果:40 mmol·L~(-1)的磷酸盐缓冲液,pH=2.0,含有5 mmol·L~(-1)HP-β-CD 的甲醇(20%,v/v)水溶液实现了盐酸苯环壬酯和盐酸去甲苯环壬酯的手性分离;20 mmol·L~(-1)磷酸和10 mmol·L~(-1)氢氧化钠的甲醇溶液,添加9 mmol·L~(-1)HDMS-β-CD 作为分离介质,可以同时拆分盐酸苯环壬酯和盐酸去甲苯环壬酯的混合物,并可以较好地分离盐酸戊乙奎醚对映体。结论:比较2种拆分体系表明,非水介质毛细管电泳快速、高效,分离度高。     

柱前衍生化-反相高效液相色谱法拆分酮洛芬对映异构体

目的 :建立一种用柱前衍生化反相高效液相色谱法分析酮洛芬对映异构体的方法。方法 :采用二氯亚砜和S - (- )- 1- (1-萘基 )乙胺作为衍生化试剂 ,S - ( ) -酮洛芬和R - (- )酮洛芬衍生化后生成一对非对映异构体。选用HypersilC18柱 ,以乙腈 -水 -乙酸 -三乙胺 (5 8∶42∶0 1∶0 0 2 )为流动相 ,在 2 5 4nm下检测。色谱流份经电喷雾离子阱多级质谱分析验证。结果 :非对映异构体色谱峰的保留时间分别为 7 3min和 8 5min ,分离度为 1 9。结论 :衍生化产物稳定 ,方法灵敏度高 ,重现性好 ,操作简单 ,可用于药品质量控制和对映体选择性药物动力学研究。     

手性拆分剂及其手性药物色谱拆分技术的应用进展

近三十年上市的新药中,手性药物占有很大比例,手性药物拆分技术应用广泛,发展也日趋完善.手性拆分(Chiral Resolution)也称作光学拆分(Optical Resolution),亦或称作外消旋体拆分,为立体化学上,用以分离外消旋化合物成为两个不同的镜像异构物的方法[1].例如反应停事件中:药物沙利度胺(反应停)是以对映体的混合物用作缓解妊娠反应药物,造成许多服用过此药的孕妇产下畸婴,经研究发现(R)-沙利度胺具有镇静和缓解妊娠反应作用,而(S)-沙利度胺可酶促水解成邻苯二甲酰谷氨酸并渗透到胎盘,干扰叶酸的合成,产生强致畸作用.     

多巴对映异构体的柱前衍生化HPLC法手性拆分

目的：建立多巴对映异构体的柱前衍生化拆分分析方法。方法：采用柱前衍生化反相高效液相色谱法,以氯甲酸乙酯为酰化剂,L-丙氨酸-β-萘胺（L-Ala-β-NA）为柱前衍生化试剂,在室温反应20 min 后,依利特 Hypersil ODS2（4.6 mm ×250 mm,5μm）为色谱柱;乙腈-0.05%三氟乙酸为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL·min-1;柱温为25℃;检测波长为280 nm。结果：多巴对映体衍生物获得了基线分离,并确认了R（-）-和S（+）-两个衍生物的色谱峰。结论：该方法经济可行,操作较简便,为多巴的药理学研究和光学异构体纯度测定提供了参考。     

在卵类粘蛋白手性柱上拆分药物对映体西替利嗪的研究

目的:建立利用卵类粘蛋白手性固定相拆分西替利嗪对映异构体的反相高效液相色谱分析方法,研究色谱条件对拆分结果的影响和该蛋白柱的部分拆分机理。方法:西替利嗪溶解在流动相中配成浓度为22μg·mL-1的溶液,用Ultron Es-OVM柱(5μm,150 mm×4.6 mm),流动相为磷酸二氢钾缓冲溶液与有机改进剂(甲醇或乙醇或乙腈)的混合溶液,紫外器波长230 nm,柱温25℃。结果:首次利用卵类粘蛋白手性柱成功拆分了西替利嗪药物对映体,最佳分离条件:乙腈-20 mmol·L-1磷酸二氢钾(pH 6.20,用磷酸和氢氧化钾溶液调节)(18:82),流速0.5 mL·min-1,出峰时间在20 min内,分离度达到1.68。结论:本方法简单、快速,无需柱前衍生,可方便用来拆分和检测西替利嗪对映体。     

手性拆分技术-化学拆分法的研究进展

目的探讨手性拆分法中化学拆分法的影响因素。方法通过对手性药物的经典拆分方法-化学拆分法相关的文献进行分析整理,探讨利用化学拆分法进行拆分过程中的影响因素。结果手性拆分试剂的种类直接决定了拆分结果,可以根据底物的结构特征选择合适的手性拆分试剂。拆分溶剂的种类也对拆分具有直接的影响,不同的拆分溶剂可能得到构型相反的异构体。拆分试剂与样品的摩尔比可以影响中间体盐的形成及拆分样品的纯度。结论总结归纳的化学拆分法的影响因素,为今后利用化学拆分法开发具有光学活性的药物,设计高效合理的拆分路线提供了有利的参考和依据。     

HPLC法拆分氟比洛芬对映体

建立氟比洛芬手性药物的高效液相色谱拆分方法。方法:手性流动相添加剂HPLC法:利用C18柱,以羟丙基-β-环糊精作为手性流动相添加剂,调节有机修饰剂甲醇的比例和添加不同量的三乙胺对氟比洛芬进行拆分;手性固定相HPLC法:利用Chiral-pakAD手性柱,以正己烷-乙腈为流动相基本成分,调整两者不同比例和添加不同量的三乙胺,对氟比洛芬进行拆分。结果:手性流动相添加剂法:使用C18柱对氟比洛芬对映异构体进行拆分,调节流动相中有机修饰剂甲醇浓度、手性流动相添加剂羟丙基环糊精浓度、峰型修饰剂三乙胺的浓度等都不能使氟比洛芬对映体达到基线分离,只能部分分离。手性固定相法:氟比洛芬对映体在Chiral-pakAD手性柱上能达到较好的分离。在正己烷-乙腈流动相系统中,正己烷体积含量为90%,三乙胺体积含量为0.05%的条件下,氟比洛芬对映体得到了较好的分离,分离度为10.0。结论:建立的手性固定相法能有效拆分氟比洛芬对映体而手性流动相添加剂法不能拆分氟比洛芬对映体。     

手性流动相HPLC法拆分氟比洛芬对映体研究

目的:建立氟比洛芬手性药物的高效液相色谱拆分方法.方法:利用C18柱,以β-环糊精及其衍生物作为手性流动相添加剂,调节有机修饰剂比例和添加不同量的峰型修饰剂对氟比洛芬对映体进行拆分.结果:采用单6-L-脯氨酸-β-环糊精作为手性流动相添加剂,利用C18柱可直接拆分S,R-氟比洛芬对映体.最佳色谱分离条件为:流动相为1.4％的6 -L - proline -β - CD甲醇溶液(w/v):pH为4.0,体积分数1.0％的三乙胺水溶液(V/V) =25:75(V/V);柱温t=25℃;流速1.0ml/min;进样量10ul,检测波长254nm.S,R-氟比洛芬对映体获得了良好分离,分离度为1.65.结论:建立的手性流动相添加剂法能有效拆分氟比洛芬对映体.     

GITC柱前手性衍生化HPLC测定吡喹胺光学异构体纯度

以乙酰葡萄糖异硫氰酸酯(GITC)作柱前手性衍生化试剂,用反相高效液相色谱法成功地拆分了吡喹胺(1,3,4,6,7,11b-六氢-2H吡嗪[2,1-a]并异喹啉-4-酮)光学异构体。在此基础上建立了测定吡喹胺光学异构体纯度的方法,并已用于d-和l-吡喹胺纯度的测定。     

萘普生拆分法概述

非甾体抗炎药萘普生(Naproxen、简称NPX)系一手性分子,化学名S-( )-2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酸,可由不对称合成或消旋体(±)-NPX经光学拆分获得,后者是目前萘普生生产的主要方法。关于(±)-NPX的光学拆分,国内外已作了大量研究,报道了众多行之有效的方法。概括起来,这些方法都经历一个共同的拆分过程:将(±)-NPX与某些非光学活性或光学活性化合物作用,制成对映体或非对映体衍生物——酯、酰胺或盐,利用其性质差异,采用相应的分离手