两首活血化瘀方干预急性心肌缺血心肌细胞凋亡与Bcl—2、Bax表达的实验研究

目的 观察两首活血化瘀方对心肌细胞凋亡与相关蛋白表达干预的作用.方法 采用结扎冠状动脉左前降支的方法 复制急性心肌缺血模型,20条犬随机分成对照组、心肌缺血组、桃红四物汤以及丹参饮组,每组5条.分别采用HE染色、DNA 末端标记法( TUNEL) 以及免疫组化法观察心肌组织病理变化、心肌细胞凋亡与相关蛋白表达的变化.结果 对照组无细胞变性与坏死,仅见极少量凋亡阳性细胞;心肌缺血组有明显心肌组织坏死,心肌细胞凋亡增多,Bcl-2的表达明显减少,Bax的表达明显增多,与对照组比较有统计学意义;桃红四物汤以及丹参饮组心肌细胞坏死及凋亡均显著减轻,Bcl-2的表达明显增多,Bax的表达明显减少,与心肌缺血组比较有统计学意义.结论 桃红四物汤以及丹参饮可影响Bcl-2和Bax的表达,有效地抑制心肌细胞坏死及凋亡,减轻心肌细胞损伤,对缺血心肌有保护作用.     

活血化瘀类方抗急性心肌缺血的实验研究

目的：观察活血化瘀类方对犬急性块血心肌的保护作用。方法：采用结扎冠状动脉左前降支的方法复制急性心肌块血模型，实验结束后检测肌酸磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)，观察心肌组织病理学变化。结果：心肌块血组CK、LDH含量及MDA水平均明显升高，SOD水平下调，与对照组比较均有统计学意义(P＜0．05)，形态学观察示心肌细胞坏死增多。血府逐瘀汤组、活络效灵丹组、桃红四物汤组、丹参饮组CK、LDH含量及MDA水平均低于心肌块血组，SOD水平上调，与心肌块血组比较有统计学意义(P＜0．05)，与对照组比较无统计学意义，形态学观察示心肌坏死程度较低。失笑散组CK、LDH含量及MDA水平均明显升高，SOD水平下调，与心肌缺血组比较无统计学意义(P＞0．05)。结论：血府逐瘀汤、活络效灵丹、桃红四物汤、丹参饮可有效降低CK、LDH含量及MDA水平，提高SOD水平，减少心肌细胞坏死，对块血心肌有保护作用，各组间比较无统计学意义(P＞0．05)，而失笑散对急性块血心肌无明显保护作用。     

血府逐瘀汤干预急性心肌缺血心肌细胞凋亡与Bcl-2、Bax表达的实验研究

目的观察血府逐瘀汤对心肌细胞凋亡与相关蛋白表达干预的作用。方法采用结扎冠状动脉左前降支的方法复制急性心肌缺血模型,15条犬随机分成对照组、心肌缺血组以及血府逐瘀汤组,每组5条。分别采用HE染色、DNA末端标记法(TUNEL)以及免疫组化法观察心肌组织病理变化、心肌细胞凋亡与相关蛋白表达的变化。结果对照组无细胞变性与坏死,仅见极少量凋亡阳性细胞;心肌缺血组有明显心肌组织坏死,心肌细胞凋亡增多,Bcl-2的表达明显减少,Bax的表达明显增多,与对照组比较有统计学意义(P<0.05);血府逐瘀汤组心肌细胞坏死及凋亡均显著减轻,Bcl-2的表达明显增多,Bax的表达明显减少,与心肌缺血组比较有统计学意义(P<0.05)。结论血府逐瘀汤可影响Bcl-2和Bax的表达,有效地抑制心肌细胞坏死及凋亡,减轻心肌细胞损伤,对缺血心肌有保护作用。     

重症急性胰腺炎早期合并心肌损害与心肌细胞凋亡关系的实验研究

目的研究重症急性胰腺炎(SAP)早期心肌损害与心肌细胞凋亡的关系和意义。方法应用5％牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射诱发大鼠SAP模型。实验设定对照组(n=18)和SAP组(n=18),并分为6、12、24h三个时点,分别检测血清LDH、CK、CK-MB,用TUNEL法检测心肌细胞凋亡。结果SAP组在各时点较对照组血清LDH、CK和CK-MB显著升高(P<0.01);对照组在各时点未见心肌细胞凋亡或仅出现极少数心肌细胞凋亡,SAP组出现较多的心肌细胞凋亡,其凋亡指数(AI)较对照组显著升高(P<0.01)。结论SAP早期可诱发心肌损害,与心肌细胞凋亡有关。     

同种心肌细胞移植到大鼠瘢痕心肌组织的实验研究

心肌梗死所致的心肌细胞缺失和瘢痕形成是心力衰竭乃至死亡的病理基础。药物治疗、介入治疗和外科搭桥手术虽能改善症状,甚至使闭塞的血管再通,却不能替代坏死心肌,彻底改善心功能。故本研究将胎鼠心肌细胞移植到心肌梗死后瘢痕心肌组织中,本研究旨在观察同种心肌细胞移植到受损心肌组织中能否生存增殖,形成含有血管的心肌样组织,改善心肌梗死后心脏功能。材料与方法取体重(30 0±5 0 ) gWister成鼠90只随机分成对照组(2 0只)、心肌梗死组(35只)和移植组(35只) ,利用冠状动脉结扎法[1] 建立大鼠心肌梗死4周后的心肌瘢痕模型;利用细胞培养和…     

益气温阳、活血化瘀方对慢性病毒性心肌炎模型小鼠心肌细胞凋亡的影响

目的观察益气温阳、活血化瘀方对慢性病毒性心肌炎模型小鼠心肌细胞凋亡的影响。方法采用多次腹腔注射柯萨奇B3m病毒稀释液方法,复制小鼠慢性病毒性心肌炎的模型。将BALB/c小鼠120只,随机分为:模型组、空白组、中药治疗组,每组40只。中药组予益气温阳、活血化瘀方治疗,空白组和模型组灌胃同体积生理盐水。于给药4周后采用原位末端标记法(TUNEL),观察益气温阳、活血化瘀方对实验性慢性病毒性心肌炎模型小鼠心肌细胞凋亡的影响。结果中药组与模型组比较,可改善小鼠心肌组织病理形态学及超微结构的变化,抑制心肌细胞凋亡。结论益气温阳活血化瘀方能够减轻慢性病毒性心肌炎模型小鼠病理损伤,抑制心肌细胞肥大,抑制心肌细胞凋亡,从而对慢性病毒性心肌炎起到一定的防治作用。     

银杏叶提取物对大鼠急性心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的 探讨银杏叶提取物(EGB)对大鼠心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响.方法 采用结扎左冠状动脉前降支(LAD)30 min,再灌注2 h复制大鼠心肌缺血再灌注模型,分别以缺口末端标记法(TUNEL)及免疫组织化学法检测心肌凋亡细胞、心肌细胞Bcl-2、Bax基因的蛋白表达的变化.结果 缺血再灌注(IR)组心肌细胞凋亡数量显著高于假手术组(P<0.01),EGB组心肌细胞凋亡明显受到抑制(P<0.01).IR组和EGB组Bax、Bcl-2、P53基因蛋白表达均明显增加(P<0.01);EGB明显促进Bcl-2基因表达,同时抑制Bax、P53基因表达(P<0.01),Bcl-2和Bax的比值也随之升高.结论 EGB可明显下调Bax和P53基因的蛋白表达,上调Bcl-2基因的蛋白表达,从而显著抑制心肌缺血再灌注损伤(MIRI)后心肌细胞凋亡.     

益心胶囊对家兔急性心肌缺血模型血浆及心肌组织内皮素含量的影响

目的 :通过观察益心胶囊对家兔急性心肌缺血模型血浆及心肌组织内皮素含量的影响 ,探讨其防治心肌缺血的确切作用机制。方法 :将 2 0只雄性家兔随机分为 4组 ,每组 5只 ,即模型组、假手术组、益心胶囊组、通心络组 ,以结扎家兔左冠状动脉前降支复制成急性心肌缺血模型。结果 :与模型组相比 ,益心胶囊可明显降低急性心肌缺血家兔血浆及心肌组织内皮素的含量 (P <0 .0 5 ) ,其作用与通心络胶囊大致相当 (P >0 .0 5 )。结论 :益心胶囊对心肌缺血具有一定的防治作用 ,可通过保护缺血心肌血管内皮细胞 ,降低内皮素的生成和释放 ,从而改善内皮细胞功能障碍 ,这可能是益心胶囊防治心肌缺血损伤作用机制之一。     

运动预适应对急性心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡及凋亡蛋白表达的影响

目的探讨运动预适应(EP)对非动脉硬化大鼠及动脉硬化大鼠急性心肌缺血心肌细胞B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达及半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3蛋白的影响。方法选取7周龄SD大鼠90只,随机分为5组:对照组(A组)、急性心肌缺血组(B组)、动脉硬化+急性心肌缺血组(C组)、EP+急性心肌缺血组(D组)、动脉硬化+EP+急性心肌缺血组(E组),其中A组10只,其余各组20只。C、E组予维生素D3连续灌胃4 d,喂高脂饲料(猪油、胆固醇、胆酸、丙基硫氧嘧啶)6 w制备动脉硬化模型。B、C、D、E组腹腔注射3 mg/kg异丙肾上腺素(ISO),复制大鼠急性心肌缺血损伤模型。D、E组建立EP大鼠模型进行间歇性游泳运动,以尾部负重体重的3%重物。建模后24 h内采用脊髓脱臼法处死大鼠,取左心室心肌组织,采用免疫组化检测Bcl-2及Bax蛋白的表达,Western印迹检测Caspase-3蛋白。结果与A组比较,B、C、D、E组心肌细胞Bcl-2的表达均显著降低(P<0.05),而Bax表达均显著升高(P<0.05);B组与C组心肌细胞Bcl-2的表达差异无统计学意义(P>0.05),但C组Bax的表达显著升高(P<0.05);D组、E组心肌细胞Bcl-2的表达较B组、C组显著升高(P<0.05),而Bax的表达显著降低(P<0.05);与D组比较,E组Bcl-2的表达显著降低,而Bax的表达显著升高(P<0.05)。与A组相比,B、C、D、E组心脏Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与B组、C组相比,D组、E组心脏Caspase-3蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。与D组比较,E组心脏Caspase-3蛋白表达水平无明显差异(P>0.05);与A组比较,B、C、D、E组细胞凋亡指数(AI)显著增高(P<0.05),其中C组AI最高;与B组、C组比较,D组、E组AI显著降低(P<0.05),而D组比E组AI稍低(P<0.05)。结论EP可能改善急性心肌缺血或是在合并动脉硬化基础上急性心肌缺血大鼠的心肌细胞凋亡,可能基于凋亡相关基因Bcl-2表达升高、Bax表达降低调控及下调Caspase-3蛋白所致。     

吡格列酮对缺血再灌注心肌细胞凋亡影响的实验研究

目的观察吡格列酮对大鼠在体心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡的影响。方法实验动物随机分为2组,一为缺血30 min再灌注30 min组,进一步分为假手术组（n = 5）、模型组（即溶剂对照组,n = 6）和吡格列酮组（3mg／kg,n = 7）,测定心肌梗死面积;另一为缺血30 min再灌注2h组,然后进一步分为假手术组（n = 5）、模型组（n = 6）及吡格列酮0．3mg／kg组（n = 6）、1mg／kg组（n = 7）和3mg／kg组（n = 6）,各用药组于缺血前30 min静脉注射给药。然后,取心脏标本,石蜡包埋后切片,免疫组化检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3、PPARy蛋白质表达,原位杂交方法检测PPARymRNA表达。TUNEL法和DNA凝胶电泳观察心肌细胞凋亡。结果（1）与模型组比较,吡格列酮组梗死面积与缺血区面积之比减少28％（P 〈 0．01）,梗死面积与左室面积之比减少32％（P 〈 0．01）;（2）免疫组化和原位杂交结果示：吡格列酮0．3、1、3mg／kg可呈剂量依赖性减少Bax、Caspase-3,增加Bcl-2、PPARy蛋白质以及PPARymRNA表达;（3）TUNEL法检测吡格列酮可减少心肌细胞凋亡指数,3组作用均显著（P 〈 0．05）,但DNA凝胶电泳模型组、吡格列酮0．3、1mg／kg可见到DNA梯带,假手术组和吡格列酮3mg／kg则无DNA梯带。结论吡格列酮预处理可通过减少心肌细胞凋亡和梗死面积起到抗缺血再灌注损伤的作用。     

益心胶囊对家兔急性心肌缺血模型血清及心肌组织NO和NOS的影响

目的 :探讨益心胶囊对心肌缺血家兔一氧化氮 (NO )及一氧化氮合酶 (NOS)的影响。方法 :雄性家兔 2 0只 ,随机分为 4组 ,每组 5只 ,预防给药 5d。灌胃结束后 ,开胸结扎家兔左冠状动脉前降支 ,建立心肌缺血动物模型 ,观察血清及心肌组织NO和NOS的变化。结果 :模型组、益心胶囊组、通心络组与假手术组比较 ,心肌组织NO及NOS含量均有明显降低(P <0 .0 5 ) ;而与模型组相比 ,益心胶囊组、通心络组的NO及NOS含量均有明显的恢复 (P <0 .0 5 ) ,提示益心胶囊能够提高心肌缺血家兔心肌组织NO及NOS含量。结论 :心肌缺血损伤时 ,血清及心肌组织NO及NOS含量明显降低 ,而益心胶囊能够显著提高心肌缺血家兔血清及心肌组织NO及NOS含量 ,对血管内皮细胞功能具有保护作用。     

缝隙连接失耦联剂Heptanol对缺血心肌的影响

研究缝隙连接失耦联剂Heptanol对缺血心肌是否具有类似缺血预处理 (IP)的心肌保护作用 ,进一步探讨IP的心肌保护作用机制。在离体心脏水平 ,观察IP和Heptanol对缺血心肌的影响 ,观测指标 :心率、冠状动脉血流量(简称冠脉流量 )、心律失常情况及心肌梗死范围。结果 :①IP使缺血心肌的心律失常评分下降 ,心肌梗死范围缩小(P <0 .0 1) ,但对冠脉流量和心率没有明显影响 ;②Heptanol使缺血心肌的心律失常评分和心率下降 ,并缩小心肌梗死范围 (P <0 .0 1) ,呈剂量依从性 ,对冠脉流量无明显影响。结论 :①Heptanol可模拟IP的心肌保护作用 ,呈剂量依从性关系 ,但有一定的浓度范围限制 ;②IP的心肌保护作用可能与预处理后细胞间电耦联和代谢耦联下降有关     

钠氢交换抑制剂对心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨钠氢交换抑制剂HOE642对心肌细胞凋亡的影响。方法 以离体大鼠心脏缺血再灌注为模型,随机分成空白、对照和HOE642组,测定左室发展压、左室舒张末压、心律失常、心率和冠脉流量,TUNEL法检测细胞凋亡。结果 缺血前15min给予HOE642能明显改善心肌缺血再灌注后的心功能的恢复,减少缺血再灌注心律失常,增加复灌10分钟的冠脉流量,但对心率和复灌20、30分钟的冠脉流量无明显作用,HOE642能明显减少缺血再灌注后的细胞凋亡数量。结论HOE642对缺血再灌注损伤心肌有保护作用,能抑制缺血再灌注后的心肌细胞凋亡。     

不同缺血预处理对心肌细胞的影响

目的：明确缺血预处理的刺激量与其心肌细胞保护效果的关系。方法：以Ｗｉｓｔａｒ大鼠为模型，开胸安置缺血再灌注装置。将４８只大鼠分为４组，每组各１２只：Ａ组持续阻断冠状动脉１小时，再灌注２小时；Ｂ组缺血５分钟，再灌注５分钟，阻断冠状动脉１小时，再灌注２小时；Ｃ组缺血５分钟，再灌注５分钟，重复３次，阻断冠状动脉１小时，再灌注２小时；Ｄ组缺血１０分钟，再灌注５分钟，阻断冠状动脉１小时，再灌注２小时。检测血浆肌酸激酶浓度与心脏切片氯化硝基四氮唑蓝染色，判断心肌梗死范围；磁带记录心电，分析心律失常。结果：缺血预处理对缺血心肌有明显的保护作用；增加刺激量（缺血预处理的时间与次数），没有增加保护效果。结论：心肌细胞的缺血预处理保护可能依靠阈值触发，无论刺激强弱，一旦启动则是充分完全地发挥保护作用。而超过阈值的强刺激可能有害无益     

水蛭地龙提取液对抗大心肌缺血作用的实验研究

目的观察水蛭地龙提取液的抗心肌缺血作用，为该药治疗心绞痛、心肌梗死等缺血性心脏病提供实验依据。方法采用结扎冠状动脉制作心肌梗死模型，将60只大鼠分为模型对照组（模型组）、假手术组、水蛭地龙提取液治疗组（治疗组），观察各组大鼠治疗后凝血酶时间（TT）、凝血酶原时间（PT）、部分凝血酶原时间（APTT）、D-二聚体（DD）及组织纤溶酶原激活物（t—PA）含量的变化。测定各组大鼠血清中磷酸肌酸激酶（CPK）、乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）的活性，并测定心肌梗死范围。结果与假手术组与模型对照组比较，治疗组TT、PT、APTT、明显延长（P〈0．05或P〈0．01），血清CPK、LDH、MDA含量降低（P〈0．05或P〈0．01），且可提高SOD活性，显著减少心肌梗死范围。结论水蛭地龙提取液有抗心肌缺血作用，这一作用与其抗凝促纤溶、心肌保护、改善心肌血液循环有关。     

HIF-1对大鼠急性缺血心肌的保护作用

目的研究HIF-1对大鼠急性缺血心肌的保护作用及其作用机制。方法应用HIF-1活性诱导剂氯化钴预处理大鼠,观察预处理对大鼠急性心肌梗死面积和心肌VEGF、iNOS蛋白表达的影响。结果氯化钴预处理组大鼠较对照组和假手术组急性心肌梗死面积显著减少(P<0.01),VEGF、iNOS蛋白表达显著增高(P<0.01)。结论HIF-1可以减少大鼠急性心肌梗死面积,对大鼠急性缺血心肌具有保护作用,其机制可能与HIF-1促进VEGF、iNOS蛋白表达增加有关。     

芎芍胶囊及丹参对大鼠缺血心肌血管新生的作用

目的探讨中成药芎芍胶囊及丹参对心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生的影响。方法采用开胸结扎冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,清洁级(或SPF级)SD大鼠24只(雌雄各半)分为3组,即模型组、芎芍胶囊组、丹参组,每组8只,分别用生理盐水、芎芍胶囊、丹参按中剂量进行灌胃给药,连续给药。6周后采集血,分离样本,并按规定保存,用免疫组化评分法、血管新生相关因子检测法;检测各组缺血心肌内皮细胞生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、表皮细胞生长因子(EGF)、转化生长因子(TGF)、血小板源生长因子(PDGF)等促血管生成因子的表达。结果芎芍胶囊组对VEGF、EGF的促进作用较丹参组、对照组有统计学意义(P<0.05),其中芎芍胶囊组、丹参组对FGF的促进作用与对照组比较均有统计学意义(P<0.05),对照组对TGF、PDGF促进作用较芎芍胶囊组、丹参组有统计学意义(P<0.05)。结论中药具有促进心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生、提高心肌梗死大鼠心肌细胞VEGF、FGF、EGF蛋白的表达、具有保护心肌缺血性损伤的作用。     

心肌缺血预适应对急性心肌梗死病人的影响

目的 对首次急性心肌梗死（AMI）发生前24h、24h～48h、〉48h有无发作过心绞痛的病人的临床状况及近期预后进行评价。方法 158例AMI病人分为两组，缺血预适应组（观察组）46例，其中24h内发生心绞痛ll例，24h～48h内发生心绞痛6例，〉48h发生心绞痛29例；非心肌缺血预适应组（对照组）112侧。结果 观察组除〉48h外，均比对照组心肌梗死范围小（P〈0，01），血浆肌酸磷酸激酶（CPK）、乳酸脱氢酶（LDH）、谷草转氨酶（AST）峰值低（P〈0．01），住院期间发生心功能不全、心源性休克、死亡等心脏事件发生率明显降低（P〈0．05）。结论 首次急性心肌梗死前48h以内发作的心绞痛对AMI心肌具有明显的保护作用，其机制可能与心肌缺血预适应有关。