血小板无效输注风险度与HPA-1—16基因鉴定价值

血小板无效输注一直为输血界所关注,尤其是近10来年有关国内各地区人类血小板抗原(HPA)基因鉴定报道的日渐增多,这已成为输血领域的热点问题.笔者以血小板无效输注产生的免疫性原因为切入点,综合国内相关报道,分析中国大部分地区汉族人群随机输注血液制品后产生血小板无效输注的风险度与HPA基因多态性分布的相关性,重点阐述中国大部分地区汉族人群供受血者行HPA-1-16基因鉴定,以及进行血小板匹配性输注与建立供血者HPA基因数据库的临床实用价值.     

HLA与HPA配型不合导致血小板输注无效1例

正血小板输注无效(platelet transfusion refractoriness,PTR)是指患者在至少连续两次输注ABO血型相合且其中至少一次保存时间在48 h以内的血小板后,血小板计数未见有效提升,临床出血症状未得到明显改善~([1])。大约30%～70%患者多次输注血小板制品后会产生血小板抗体,导致同种免疫反应而发生PTR~([2])。引起同种免疫反应的血小板抗原分为两类:一类是血小板相关性抗原,包括HLA-Ⅰ类抗原、ABH、Lewis     

人类血小板抗原(HPA)研究概况

自1959年第一个人类血小板抗原(HPA)被鉴定以来．使用血清学方法至今已检出24个血小板抗原。2003年由国际输血协会(ISBT)和国际血栓和止血协会(ISTH)联合成立的血小板命名委员会(PNC)，对HPA进行了系统命名．建立了命名原则和认可新抗原的标准。目前已有22个血小板抗原被正式命名，相应基因遗传多态性的分子基础也被阐     

血小板输注无效

血小板输注适用于预防和治疗血小板减少或血小板功能缺陷患者的出血,并已成为各种血液病及肿瘤患者放?化疗的有效支持疗法,但患者在多次输血(全血?红细胞?白细胞?血小板),妊娠及器官移植后,易产生血小板相关抗体,导致血小板输注无效(PTR)。我们结合近几年国内外研究进展,对血小     

血小板抗原基因分型与配型在血小板输注中的应用简

本研究建立已知HPA基因型血小板供者库,开展相同HPA基因型血小板交叉配型后输注,防止血小板抗体的产生,解决血小板无效输注.应用PCR-SSP技术对血小板献血者和患者进行HPA基因分型,采集与患者ABO血型及HPA基因型相同血小板制剂,再加以固相凝集法配型相合后输注.结果表明,牡丹江地区HPA血型分布的遗传特征具有本地区人群特点,具有最高杂合度的是HPA-15,其次是HPA-3.采用ABO血型及HPA基因型均相同加固相凝集配型相合血小板输注有效率94.4％.采用ABO血型相同随机血小板固相凝集配型相合输注有效率77.8％.结论：牡丹江地区HPA血型分布的遗传特征具有多态性,采用血小板HPA同基因型供者采集加配型输注可防止血小板免疫性抗体及输注无效的发生,采用ABO同型随机血小板加配型输注是提高血小板输注的效果、防止输注无效发生的既经济又简便的方法.     

血小板输注无效患者血小板同种抗体及血小板特异性糖蛋白抗体表达的研究

目的 探讨血小板输注无效与血小板同种抗原或血小板特异性抗原的相关性.方法 选择65例临床确诊血小板输注无效患者作为研究对象,应用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法检测血清、血小板洗脱液中血小板特异性抗体;应用HLA抗体特异性检测试剂盒,对组合反应性抗体(PRA)阳性的患者进行HLA抗体特异性分析;用HPA分型试剂盒检测8个血小板同种抗原系统HPA-1、2、3、4、5、6、9、15;用HLA分型试剂盒对HLA-A/B抗原进行基因分型.结果 65例患者HLA-A/B抗原,HPA-1、2、4、5、6、9、15抗原的基因频率分布与健康献血员比较差异无统计学意义.HPA-3a、3b抗原频率分别为0.65、0.35,与健康献血员比较差异有统计学意义(P＜0.05).65例患者中HLA抗体单独阳性24例(36.9%),HLA抗体和血小板特异性糖蛋白抗体共同阳性14例(21.5%);HLA抗体和血小板洗脱液特异性糖蛋白抗体共同阳性6例(9.2%),血小板洗脱液特异性糖蛋白抗体阳性13例(20%),HLA抗体、血小板特异性糖蛋白抗体及血小板洗脱液特异性糖蛋白抗体共同阳性4例(6.2%);HLA-A/B特异性抗体中,HLA-A*9抗体占全部抗体的46.2%,HLA-B*40抗体占33.6%.血清血小板特异性抗体以GPⅡb/Ⅲa为主(26.2%),其次为GP Ⅰa/Ⅱa(21.5%),血小板洗脱液中,血小板特异性抗体以GPⅡb/Ⅲa和GP Ⅰb/Ⅸ为主(41.5%).对2例患者进行了遗传学调查,发现产生的血小板特异性糖蛋白抗体和HLA抗体与父母血小板抗原及HLA抗原不相合呈密切相关.结论 血小板输注无效患者中,HLA抗体占主要地位,其次为血小板特异性糖蛋白抗体.     

血小板输注无效与对策

血小板输注无效（PTR）困扰临床。引起PTR的原因有免疫因素和非免疫因素,免疫因素主要是HLA抗体和血小板特异性抗体,非免疫因素包括发热、感染、弥漫性血管内凝血（DIC）、骨髓移植（BMT）、脾肿大、药物影响等。针对PTR的原因可采取相应对策,避免免疫因素的影响可以输注去除白细胞的血小板,ABO和血小板交叉配型相合的血小板,解离HLA抗原的血小板．对血小板表面HLA抗原进行化学修饰,紫外线照射血小板,给受者大剂量静脉注射免疫球蛋白;避免非免疫因素,要积极治疗原发病,如发热、感染、DIC、去除药物影响等,脾大患者必要时切脾。     

血小板输注无效患者体内血小板反应性抗体特异性调查研究

目的探讨血小板输注无效患者体内血小板反应性抗体的发生频率及其特异性。方法对48名血小板输注无效患者,利用MACE法筛查其血清中的血小板反应性抗体,进一步用PAK12诊断试剂MAIPA法鉴定血小板HPA抗体特异性。结果血小板输注无效患者中血小板反应性抗体的总检出率为50%(24/48),其中同种HLA抗体发生率为39.6%(19/48),占所有抗体检出的79.2%,同种HPA抗体的检出率为29.2%(14/48),而其中有64.3%(9/14)是与HLA抗体同时存在。检出的HPA抗体特异性有抗-HPA-3a(n=2),-5a(n=1),-5b(n=1),-2b(n=1),-4b(n=1);同时HPA抗体中有78.6%(11/14)是针对GPⅡb/Ⅲa,Ⅰa/Ⅱa和/或Ⅰb/Ⅸ的多反应性抗体。女性患者中检出抗体的比例55.2%(16/29)高于男性患者42.1%(8/19),但差异没有显著性统计学意义。结论血小板输注无效患者中血小板同种抗体以HLA抗体多见,但HPA抗体并不像之前报道的罕见。与高加索人群PTR患者血小板同种反应性抗体以抗-HPA-5b,-1b为主不同,研究发现中国人群PTR患者HPA同种抗体以HPA-3,-5系统抗体多见,同时检出了HPA-4b,-2b抗体。     

血小板输注无效患者的血小板抗体筛查与配合性输注

目的分析血小板输注无效（PTR）的主要原因,为患者选择适用的血小板,用以提高输注疗效。方法对多次输血患者于输血前后监测血小板计数值,并计算1h和24h血小板增高指数（CCI值）,对判断为血小板输注无效者,采用简易致敏血小板血清学技术（SEPSA）进行血小板抗体筛查,并进行血小板交叉配型,对配合性输注效果进行分析。结果278例多次输血患者发生PTR共88例（31．7％）;88例PTR患者中血小板抗体阳性67例（76．1％）;67例抗体阳性患者,血小板交叉配型成功37例,血小板输注有效32例,有效率达86．5％。结论血小板抗体的产生是导致血小板输注无效的主要免疫性因素,血小板配合性输注能显著提高血小板输注效果。     

海南黎族人血小板1—17抗原基因与随机输血不配合率研究

目的调查海南岛黎族人群血小板抗原(HPA)-1—17等位基因多态性及其特点,评估其在随机输血中血小板输注无效的风险。方法采用PCR-SSP方法对海南岛180名黎族人群做HPA-1—17基因分型检测>计算各系统对偶抗原不配合率。结果在海南黎族人群的HPA-1—17系统中,呈多态性分布的等位基因及其频率为HPA-2a(0.9972)、2b(0.0028),HPA-3a(0.4889)、3b(0.5111),HPA-5a(0.9667)、5b(0.0333),HPA-6a(0.9972)、6b(0.0028),HPA-15a(0.4250)、15b(0.5750);其余HPA-1、4、7—14、16、17等位基因均呈单线性分布。在HPA-3、15等位基因中出现bb纯合子基因型,频率分别为0.2834和0.3667;其余系统均未见bb纯合子基因型。随机输血中,海南岛黎族人群HPA不配合的发生率依次为:HPA-3(37.49%)、-15(36.93%)和-5(6.23%)。结论揭示了海南岛黎族人HPA-1—17基因型和等位基因频率的分布及特点;立足人群的随机血小板输注,只需检测供、受者HPA-2,-3、-5和-15基因相合,就可基本达到血小板匹配性输注。     

佛山地区血小板输注无效患者的血小板输注策略及应用

目的 建立一种适用于佛山地区临床客观情况的免疫抗体致血小板输注无效输血策略与技术路线.方法 采用PCR-SSP法对佛山地区无偿机采血小板捐献者600人进行HLA-1 （A,B位点）基因分型,其中100人进行HPA-1～15基因分型,建立HLA、HPA供者库.使用3种不同输血策略（HLA/HPA供者库配合输注、血小板交叉配血试验配合输注、随机输注血小板）为血小板输注无效患者提供血小板,并比较其输血效果.结果 HLA/HPA供者库配合输注策略和血小板交叉配血试验配合输注策略获得相合供者率分别为100.0％、80.0％,两者差异无统计学意义（P＞0.05）;HLA/HPA供者库配合输注策略、血小板交叉配血试验配合输注策略和随机输注血小板策略的输注有效率分别为100.0％、62.5％、10.0％,前两者间及前两者分别与后者比,差异均有统计学意义（P＜0.05）;HLA/HPA供者库配合输注策略和血小板交叉配血试验配合输注策略的平均实验时间分别为（7.5＆#177;1.6）h、（13.3＆#177;6.1）h,两者差异均有统计学意义（P＜0.05）;平均费用分别为（365＆#177;47）元、（696＆#177;343）元,两者差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 HLA/HPA供者库配合输注策略比血小板交叉配血试验配合输注策略更易寻找到相合的供者,平均实验时间更短,平均费用更少,输注有效率更高,输血效果良好,是为佛山地区血小板输注无效患者寻找相合血小板较为理想的输注策略,建议在临床输血中应用.     

云南汉族血小板献血者HLA-A、B和HPA基因多态性的分析

目的研究云南地区汉族血小板献血者HLA-A、B基因和HPA1-17基因多态性,建立已知型血小板献血者基因数据库。方法分别采用PCR-SSOP和PCR-SSP方法对1 000名云南地区无血缘关系的汉族血小板献血者做HLA-A、B和HPA1-17系统基因分型,计算基因型频率、基因频率,并与其他人群进行比较。结果在云南地区人群中共检出HLA-A位点14个,HLA-B位点35个。A*02(35.81%)、A*11(35.42%)和A*24(17.72%)3个等位基因为云南汉族人群HLA-A座位的主要等位基因;B*46(12.87%)、B*40(60)(10.83%)和B*15(62)(9.78%)3个等位基因为云南汉族人群HLA-B座位的主要等位基因。每个样本均检测到HPA-1a、2a、4a-14a、16a、17a基因;HPA-4a、7a-14a、16a、17a呈现单态性,未检测出相应的等位基因HPA-b;对于HPA-1、2、5、6主要以a/a纯合子居多,a/a基因型频率分别是0.989、0.960、0.990、0.980,没有b/b纯合子出现。在HPA1-17中,具有最高杂合度的是HPA-15,基因型HPA15a/15a、HPA15a/15b、HPA15b/15b频率分别是0.392、0.360、0.248;HPA-3在其次,基因型HPA3a/3a、HPA3a/3b、HPA3b/3b频率分别是0.339、0.467、0.194。经χ2检验,结果符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。结论云南地区汉族血小板献血者HLA-A、B和HPA1-17基因频率与南方汉族接近,也呈现其自身特点。应建立本地区的血小板供者分型数据库。     

HPA配型在免疫性血小板输注无效中的应用研究

目的探讨以HPA配型解决免疫性血小板输注无效的方案。方法 1)建立PCR-SSP方法检测HPA-1～5基因型检测方法,建立机采血小板供者库;2)采用微柱凝胶法和Capture-P法对32名血小板输血无效患者作血小板同种抗体筛查,并对2种方法比较;3)对血小板同种抗体筛查阳性患者采用已知HPA基因型的标准谱血小板作抗体鉴定并采取HPA基因型同型输注的原则寻找供者。结果 1)采用PCR-SSP方法成功检测出HPA-1～5基因型,并对1 000名血小板供者的HPA-1～5基因型定型;2)32例血小板输注无效病例中,微柱凝胶法检测血小板同种抗体阳性率为50%,Capture-P法血小板抗体阳性检出率为40%;3)32例血小板输血无效病例中2种方法同时血小板抗体阳性13例,其中2例鉴定为抗-HPA,分别为抗-HPA-5b(P=1/84)、抗-HPA-1a(P=1/55)。结论对抗-HPA引起的血小板输注无效患者采用HPA基因型相合的方法寻找供者是有效的。     

Platelet transfusion refractoriness and anti-HLA immunization

Platelet transfusion refractoriness (PTR), defined as an unsatisfactory post-transfusion platelet count increment, is a common complication of patients receiving multiple transfusions. Different strategies are described in the management of PTR. In this work, we demonstrate the efficacy of the detection and identification of anti-HLA antibodies in the recipient using a threshold of 3000 mean fluorescence intensity (MFI), and the seek of donors not expressing HLA antigens against which the patient is immunized.     

Efficacy of anti-thymocyte globulin for platelet transfusion refractoriness in serious aplastic anemia patients

Platelet transfusion refractoriness (PTR) is a life threatening, intractable clinical issue suffered by some serious aplastic anemia (SAA) patients. Unlike immune thrombocytopenia, effective treatments for PTR remain largely unknown. In our clinical work, we noted that PTR in some SAA patients could be rapidly relieved with the application of anti-thymocyte globulin (ATG), therefore, we retrospectively analyzed its management and outcomes for PTR in SAA patients. A cohort including 29 SAA with PTR patients who received ATG administration was enrolled in this study. All patients suffered from PTR before ATG administration. Among the 29 PTR patients treated with ATG, 21 (72.4.0 %) patients had response, importantly, 13 (44.8 %) patients had an immediately response following the first dose of ATG administration. Bleeding events of grade 3 or above occurred in 23 patients (79.3 %). With the recovery of effective platelet transfusion, the bleeding events in responders could be quickly relieved. The non-responders suffered from aggravated bleeding, including intracranial bleeding in two non-responders, which appeared on eighth and 29th days after ATG administration. Our study indicated that ATG was an effective and safe intervention in the management of PTR in SAA patients.     

Immune-mediated platelet transfusion refractoriness in a severely thrombocytopenic patient with myelodysplastic syndrome successfully treated with romiplostim

Immune-mediated platelet transfusion refractoriness due to anti-human leukocyte antigen (HLA) antibodies can occur in approximately 9% of patients with myelodysplastic syndromes (MDS) and can lead to an increased risk of clinically relevant bleeds and treatment delays. These patients are typically managed with frequent platelet transfusions; however, HLA-matched platelet transfusions are usually available only in large blood centers. For this reason, alloimunized thrombocytopenic MDS patients are notoriously difficult to manage. Here, we present a case of a MDS patient with an immune-mediated platelet transfusion refractoriness, severe thrombocytopenia and spontaneous subarachnoid hemorhage who we successfully treated with romiplostim, a thrombopoietin receptor agonist.