聚合酶链反应和杂交试验检测上海地区庚型肝炎病毒感染的初步报告

为探讨上海地区庚型肝炎病毒感染的现状，采用逆转录套式聚合酶链反应（ＲＴＮｅｓｔｅｄＰＣＲ）检测庚型肝炎病毒（ＨＧＶ／ＧＢＶＣ）核酸（ＨＧＶＲＮＡ）。结果在各类患者和助血员中ＨＧＶＲＮＡ的检出率分别是：血液透析和肾移植为１５７％（８／５１）、丙型肝炎为３３％（１／３０）、乙型肝炎为０（０／１９）、散发性非Ａ～Ｅ型肝炎为０（０／２８）、义务助血员为７５％（５／６７）。提示ＨＧＶ感染多为无症状或亚临床型，常与ＨＣＶ重叠感染，并与输血密切相关。作者肯定了上海地区存在庚型肝炎，指出筛选助血员对控制输血后庚型肝炎至关重要。     

佛山市庚型肝炎病毒检测和部分基因序列分析

目的了解佛山庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染状况，分析ＨＧＶ非结构基因（ＮＳ）３区部分核苷酸序列。方法采用逆转录聚合酶链反应检测血清ＨＧＶＲＮＡ，对一例肝炎患者的ＨＧＶ（ＨＧＶＣ－ＦＳ）ＮＳ３区８１８ｂｐ片段作克隆及序列分析。结果８０例非甲－戊型肝炎患者和１０５例静脉吸毒者ＨＧＶＲＮＡ检出率分别为６．３％（５／８０）和２３．８％（２５／１０５），ＨＧＶＣ－ＦＳＮＳ３区片段核苷酸序列与ＨＧＶ－Ｕ４４４０２、Ｕ４５９６６、Ｕ３６３８０及ＨＧＶＣ９６４相同区段同源性为８５．５％、８５．６％、８８．０％、８９．２％。结论佛山存在ＨＧＶ感染，静脉吸毒者感染率较高，ＨＧＶ可能不是非甲－戊型肝炎主要致病因素。ＨＧＶＣ－ＦＳ与ＨＧＶＣ９６４同源性最高。     

24例非甲—戊型肝炎患者血清庚肝病毒RNA检测结果分析

采用逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）技术对２４例非甲－戊（Ａ－Ｅ）型肝炎患者进行庚肝病毒ＲＮＡ（ＨＧＶ－ＲＮＡ）检测。结果：ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性６例（２５．０％），其中急性肝炎１例（１／９）、慢性肝炎２例（２／９）、肝为肝硬变３例（３／４）；１例有输血史，余５例均无输血或血浆史。提示庚肝病毒可能为非Ａ－Ｅ型肝炎的病原体之一，且存在输血外传播途径。     

山东地区输血后丙肝患者HGV感染状况及HGV部分核酸序列测定

应用ＲＴ－ＰＣＲ法检测庚肝病毒（ＨＧＶ）ＲＮＡ,并对阳性扩增的产物采用ＰＣＲ片段直接克隆法测定。结果从８６例输血后丙型肝炎（ＰＴＨ－Ｃ）患者血清中检出ＨＧＶＲＮＡ阳性者３１例（３６．０％）,其中１例ＨＧＶＮＳ５区部分核苷酸序列与美国原始株和另１例日本株核苷酸同源性比较分别为８６．０％和８４．０％。证实山东地区ＰＴＨ－Ｃ２存在着ＨＧＶ感染和ＨＧＶ／ＨＣＶ混合感染,但是否存在不同亚型或ＨＧＶＲＮＡ阳性     

原发性肝癌患者血清和肝组织中庚型肝炎病毒基因的PCR检测

用逆转录－聚合酶链反应法（ＲＴ－ＰＣＲ）检测了原发性肝癌（ＰＬＣ）患者血清及肝癌和癌旁肝组织中的庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）ＲＮＡ，以ＰＣＲ－双脱氧末端终止法测定了ＰＣＲ产物的核苷酸序列。结果显示，血清和肝组织中ＨＧＶＲＮＡ的检出率分别为１９．４％（１３／６７）和２５．７％（９／３５），且ＨＧＶＲＮＡ在肝癌组织呼吕旁肝组织中同时存在，血清和肝组织中ＨＧＶ ＲＮＡ检测结果的符合率为８５％；５′非编码区（５     

66例慢性非甲非乙型肝炎患者的丙型肝炎病毒感染研究

以ＨＣＶ－Ｔ３序列为引物，结合ＲＴ－ＰＣＲ和寡聚核甘酸探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，检测６６例慢性非甲非乙型肝炎（ＮＡＮＢＨ）患者的血浆ＨＣＶ－ＲＮＡ，阳性４２例（６３．６％）。同样病例以相当于ＨＣＶＣ区基因编码和ＮＳ３区编码的人工合成肽抗原检测抗ＨＣＶ，阳性４９例（７４．２％）。这６６例慢性ＮＡＮＢＨ病例，抗ＨＣＶ和ＨＣＶ－ＲＮＡ双阳性者３８例（５７．６％）；抗ＨＣＶ阴性而ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性者４例（６．１％）；抗ＨＣＶ阳性而ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性者１１例（１６．７％）。其中诊断为散发型ＮＡＮＢＨ者３５例，检出ＨＣＶ－ＲＮＡ者１７例（４８．６％），为输血后ＮＡＮＢＨ者３１例，检出ＨＣＶ－ＲＮＡ者２５例（８０．７％）。     

丙型肝炎病毒母婴传播的研究

目的研究丙型肝炎病毒母婴传播的可能性与机率。方法采用前瞻性研究方法，使用ＰＣＲ技术检测ＨＣＶＲＮＡ，用二代ＥＩＡ试剂检测抗－ＨＣＶ。结果１３例输血后丙型肝炎母亲和她们所生的１５例婴儿，婴儿ＨＣＶ感染率为８６．７％，其中临床型１例（７．７％），亚临床型ＨＣ３例（２３．１％），ＨＣＶ隐性感染９例（６９．２％）。抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ阳性率均随年龄增长而降低，至３岁时分别为７．７％和１５．４％。结论感染ＨＣＶ母亲所生婴儿，ＨＣＶ感染率高，但转归较好。观察引产胎儿肝脏和血液发现，孕妇抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ阳性所引产的胎儿血清和／或肝脏中抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ阳性，ＨＣＶ的母婴传播，主要发生于子宫内。     

血清抗－HCV与HCV RNA检测结果比较

采用逆转录一套式－聚合酶链反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅ－ＰＣＲ）及ＥＬＩＳＡ（Ａｂｂｏｔｔ）对一组经第二代抗－ＨＣＶＥＬＩＳＡ（上海科华生物技术有限公司，科华）试剂筛选的抗－ＨＣＶ阳性血清及抗－ＨＣＶ阴性的非甲非乙型肝炎患者血清，进行了ＨＣＶＲＮＡ与抗－ＨＣＶ检测。对两者检测结果及相互关系进行了分析与比较。结果显示：Ａｂｂｏｔｔ与科华ＥＬＩＳＡ试剂两者抗－ＨＣＶ检测的阳性符合率及总符合率为７７．７％及７９．８％。两者与ＨＣＶＲＮＡ检测阳性结果的符合率分别为４９，７％及５６．３％。２０８份血清中ＨＣＶＲＮＡ阳性１０９份，其中抗－ＨＣＶ阳性组ＨＣＶＲＮＡ阳性率为６０．２％，较之抗－ＨＣＶ阴性之非甲非乙型肝炎ＨＣＶＲＮＡ阳性率（５０．０％）为高，其在ＰＣＲ试验中呈阳性与强阳性反应者的比率，前者亦显著高于后者（８５．２％与２５．ｏ％，Ｐ＜０．０１）。     

肝炎患者中庚型肝炎病毒感染的PCR检测

应用逆转录套式ＰＣＲ法检测了４８例丙型肝炎，２６例乙型肝炎及１２例甲乙丙丁戊型肝炎病毒感染标志均阴性的肝炎患者血清中的庚型肝炎病毒ＲＮＡ。结果表明，我国肝炎患者存在ＨＧＶ感染；ＨＧＶ可单独感染或与其他肝炎病毒混合感染。丙型肝炎患者中，ＨＧＶ ＲＮＡ的检出率为１０．４％，乙型肝炎患者中的检出率为３．８％，而在甲乙丙丁戊型肝炎标志均阴性的肝炎患者中的检出率为３３．３％，ＨＧＶ与其他肝炎病毒的混合感染可     

庚型肝炎临床和病理特征

目的探讨庚型肝炎（ＨＧ）临床和病理特征。方法采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测血清ＨＧＶＲＮＡ；用庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）ＮＳ５区抗原制备单克隆抗体（ＭｃＡｂ），对２２例临床和／或病理确诊的急、慢性庚型肝炎进行肝脏免疫组化。结果ＨＧＶ感染的血清学模式以重叠ＨＢＶ，ＨＣＶ，ＨＡＶ或ＨＥＶ二重感染为主，占６３．６％（１４／２２），单独ＨＧＶ感染者占３６．４％（８／２２）；ＨＧＶ在肝脏内分布呈散在胞浆型。结论ＨＧＶ单独感染者临床多呈隐匿性发病，症状轻，慢性化程度高     

联检C100—3抗体,第2代抗体与HCV RNA诊断丙型肝炎的比较

对江苏省南通市不同人群７７０例份血清联合检测Ｃ１００－３抗体和第２代抗体，并对其中抗－ＨＣＶ阳性和非甲非乙型肝炎患者用多聚酶链反应（ＲＣＲ）法检测了ＨＣＶ ＲＮＡ。在８９例急性肝炎中。检出的１４例急性丙型肝炎（丙肝）ＨＣＶ ＲＮＡ全数阳性，第２代抗体２例阳性，Ｃ１００－３抗体均阴性。慢性肝炎及肝炎后肝硬化２３０例共检出ＨＣＶ感染２４例（１０．４％），４５１例献血员检出丙肝３例（０．７％），以上两组     

丙型肝炎患者中各型肝炎病毒混合感染状况研究

１资料与方法：用ＲＴ－ＰＣＲ和ＥＩＡ（ＥＬＩＳＡ）方法对昆明地区８２例丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染的肝炎患者血清中ＨＣＶＲＮＡ和抗一ＨＣＶ,并对甲型肝炎病毒（ＨＡＶ）,乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）,丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）,戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）和庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的感染标志物进行了检测分析研究。２．结果：其它５型肝炎病毒均可同ＨＣＶ混合感染,并且同一患者可混合感染３种或４种其它型肝炎病毒。在这８２例患者中,２６．８％为单一ＨＣＶ感染,３２．９％为ＨＣＶ同ＨＡＶ混合感染,４５．ｌ０为ＨＣＶ同ＨＢＶ混合…     

肝癌和肝硬化患者庚型肝炎病毒RNA及NS3区cDNA酶切分析

目的 探讨肝癌及肝硬化患者中ＨＧＶ的感染状态及ＮＳ３区部分基因的酶切分析。采用ＲＴＰＣＲ技术检测ＨＧＶＲＮＡ，酶切分析比较中国株与美国ＧＢＶ－Ｃ株两种基因型的酶切位点，结果８１例肝癌样品中９例ＨＧＶＲＮＡ阳性（１１．１１％），２８例肝硬化中，３例ＨＧＶＲＮＡ阳性（１０．７％）。酶切点分析结果表明，中国ＨＧＶ感染患者在ＧＢＶ－Ｃ４３５１位存在ＴＳＰ５０９１（ＡＡ‘ＴＴ）切点，美国和日本发表的１１株（     

重庆地区HGV RNA检测及部分序列分析

目的 阐明重庆地区庚型肝炎病毒感染状况和序列特征。方法 以公布的ＨＧＶ非编码部分序列为引物，采用ＲＴ一套式ＰＣＲ技术检测ＨＧＶＲＮＡ，扩增产物序列采用ＰＣＲ片段直接循环测序法测定。结果 从７３例名种类型肝炎患者血清中检出２３例ＨＧＶ ＲＮＡ阳性，阳性率高达３７％，其中２６例非Ａ－Ｅ型肝炎中检出６例阳性（２３％），３９例乙型肝炎患者中检出１５例阳性（３８％），测序结果表明，重庆株ＨＧＶ非编码区邓列与     

血液透析患者和透析中心工作人员丙型肝炎病毒感染的研究

目的：研究血液透析患者和透析中心工作人员丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的感染率、影响因素及临床特点。方法：应用第二代酶链免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）法、反转录－套式ＰＣＲ法检测了１５４例血透患者和４６名透析中心工作人员的血清抗－ＨＣＶ抗体及ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果：血透患者抗－ＨＣＶ阳性率为７０．８％，ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性率为７１．７％，ＨＣＶ感染率达８２．１。透析中心工作人员ＨＣＶ感染率为０％。血透患者－ＨＣＶ与ＨＣＶ－ＲＮＡ的相关性较差。ＨＣＶ感染率与输血次数、透析年限显著相关，且输血次数的相对危险度（ＲＲ＝６．６７５）大于透析年限（ＲＲ＝３．８９７）。血源抗－ＨＣＶ筛查前、后两组ＨＣＶ感染率分别为９５．３％和５８．０％，差异十分显著（Ｐ＜０．００１）。ＨＣＶ阳性与ＨＣＶ阴性患者肝功能异常率无显著差异。结论：①血透患者ＨＣＶ感染率明显高于普通人群；而透析中心工作人员ＨＣＶ感染率极低（０％）。②透析年限和输血次数是透析患者ＨＣＶ感染传播的主要危险因素，且输血对ＨＣＶ感染的相对危险度较透析年限相对更大。血源抗－ＨＣＶ筛查能有效降低血透患者ＨＣＶ感染率。③血清转氨酶水平不能作为血透患者ＨＣＶ感染的敏感指标。     

不同临床型HCV感染的基因分型与血清学分型研究

采用酶免疫（ＥＩＡ）和反转录聚合酶链反应９ＲＴ－ＰＣＲ）技术对不同临床型ＨＣＶ感染的血清标本进行ＨＣＶ分型，结果显示，各临床型ＨＣＶ感染的的型别构成无明显差异。主要为基因Ⅱ型（９３．７％）、少量基因Ⅲ型（２．７％）和Ⅱ＋Ⅲ混合型（３．６％）未见基因Ⅰ、Ⅳ、菲分型一血清学分型总符合率为９７．９６％，血清学分型率与ＨＣＶ抗－ＣＳ／Ｃ 正相关；ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性者９３．７５％可基因分型，但仅有５２．０８     

不同人群血清单项丙型肝炎病毒核心抗体存在状态

为调查不同人群血清单项丙型肝炎病毒核心抗体（抗－ＨＣＶｃ）存在状态，应用合成肽酶免疫分析筛选抗－ＨＣＶｃ，经重组免疫印迹和中和抑制试验鉴定。发现孕妇、供血员、慢性乙型肝炎、非甲非乙型肝炎、透析患者、原因不明肝硬化和输血后肝炎单项抗－ＨＣＶｃ阳性率分别为０．８％（１１／１４３６）、２．８％（１５／５４１）、３．１％（１５／４８４）、１３．６％（９／６６）、１１．５％（１０／８７）、２８．６％（４／１４）和３０％（３／１０）。单项抗－ＨＣＶ阳性的孕妇和供血员血清仅２６．７％～２７．３％检出ＨＣＶＲＮＡ，透析和各种肝病患者检出率高达５５．６％～１００％。８例单项抗－ＨＣＶｃ阳性肝炎患者病理检查显示不同程度的肝损害。结果提示：不同人群单项抗－ＨＣＶｃ阳性的意义有差别，检测ＨＣＶＲＮＡ对区别抗－ＨＣＶｃ存在属既往或现症感染十分重要。     

联检C100－3抗体、第2代抗体与HCV RNA诊断丙型肝炎的比较

对江苏省南通市不同人群７７０例份血清联合检测Ｃ１００－３抗体和第２代抗体，并对其中抗－ＨＣＶ阳性和非甲非乙型肝炎患者用多聚酶链反应（ＲＣＲ）法检测了ＨＣＶＲＮＡ。在８９例急性肝炎中。检出的１４例急性丙型肝炎（丙肝）ＨＣＶＲＮＡ全数阳性，第２代抗体２例阳性，Ｃ１００－３抗体均阴性。慢性肝炎及肝炎后肝硬化２３０例共检出ＨＣＶ感染２４例（１０．４％），４５１例献血员检出丙肝３例（０．７％），以上两组患者３项标记阳性率相近。在检出的４２例ＨＣＶ感染中，仅１４例有输血史。比较３项标记，ＰＣＲ法检测ＨＣＶＲＮＡ最灵敏，对急性丙肝尤有诊断价值，并能直接反映ＨＣＶ复制；抗－ＨＣＶ可用于慢性ＨＣＶ感染的检测，第２代抗体优于Ｃ１００－３抗体。     

肝炎患者肝组织中庚型肝炎病毒相关抗原的表达

目的 研究庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）相关抗原在肝组织中定位。方法 采用免疫组织化学方法,用抗－ＨＧＶ非结构蛋白５（ＮＳ５）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）对１９６例肝炎患者肝组织中的ＨＧＶ相关抗原进行了检测。结果 １９６例肝炎患者肝组织中的ＨＧＶ相关抗原表达阳必国２５．０％;在血清中ＨＧＶＲＮＡ呈阳性患者肝组织中抗原检出率为３８．３％;单一感染者肝组织中抗原表达阳性率为６６．７％;阳性信号位于胞浆中,阳性信号表     

检测慢性丙型肝炎患者抗－HCVIgM的临床意义

对８２例输血后慢性丙型肝炎病人丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）ＩｇＭ动态变化进行观察，８２例患者均检测到抗－ＨＣＶ抗体，其中５１例抗－ＨＣＶＩｇＭ阳性。抗－ＨＣＶＩｇＭ出现规律表现为４种类型：（１）持续检出型２４例（２９．２７％）；（２）间断检出型８例（９．７６％）；（３）短暂检出型１９例（２３．１７％）；（４）阴性型３１例（３７．８０％）。将８２例输血后慢性丙型肝炎抗－ＨＣＶＩｇＭ出现类型与丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）、ＨＣＶＲＮＡ消长情况比较，发现阴性型具有较低的ＡＬＴ峰值，而其它３型ＡＬＴ峰值较高（Ｐ＜０．０１）。８例经干扰素治疗的慢性活动性丙型肝炎患者，治疗前均有ＡＬＴ明显异常及ＨＣＶＲＮＡ、抗－ＨＣＶＩｇＭ阳性，治疗后１～３个月ＡＬＴ均转为正常，ＨＣＶＲＮＡ转为阴性，但其中只有３例伴抗－ＨＣＶＩｇＭ的阴转，随访１年发现，只有抗，ＨＣＶＩｇＭ阴转的３例病人得以痊愈，其余５例均在治疗后半年内病情复发。提示治疗中伴有抗－ＨＣＶＩｇＭ阴转的患者预后良好。