Bcl-2和Bax在皮肤血管瘤组织中的表达及意义

目的 探讨Bcl-2和Bax在皮肤血管瘤发生、发展及退化过程中的作用及意义.方法 采用免疫组织化学方法(S-P法)检测人皮肤血管瘤增生期、退化期及正常组织中Bcl-2和Bax的表达水平.结果 Bcl-2在增生期血管瘤内皮细胞的表达明显高于退化期血管瘤内皮细胞和正常皮肤组织血管内皮细胞(P＜0.01);Bcl-2在退化期血管瘤内皮细胞的表达与正常皮肤组织血管内皮细胞相比,差异无统计学意义(P＞0.05).Bax在退化期血管瘤内皮细胞的表达明显高于增生期血管瘤内皮细胞和正常皮肤组织血管内皮细胞(P＜0.01);Bax在增生期血管瘤内皮细胞的表达高于正常皮肤组织血管内皮细胞(P＜0.05).结论 Bcl-2和Bax参与了血管瘤的发生、发展和退化.Bcl-2通过抑制内皮细胞凋亡而促进血管瘤的增生.Bax通过诱导内皮细胞凋亡而促进血管瘤由增生向退化的转变.     

凋亡抑制因子Survivin在皮肤血管瘤组织中的表达及意义

目的检测凋亡抑制因子Survivin在各期皮肤真性血管瘤中的表达情况，探讨其在血管瘤发病机制中的作用以及在临床分子治疗中的意义。方法利用免疫组化SP染色法显示Survivin在增生期、退化期血管瘤组织和正常皮肤组织中的表达情况，并运用病理图文报告管理系统处理染色结果，比较各组表达差异有无统计学意义。结果Survivin在增生期血管瘤、退化期血管瘤和正常皮肤组织中的光密度值分别是（0．2449±0．0135）、（0．1648±0．0217）和（0．1789±0．0126），增生期组与其他两组间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论Survivin可能通过在增生期血管瘤中高表达来调控血管内皮细胞的凋亡，在皮肤血管瘤的病理演变过程中发挥一定的作用。     

p27在婴幼儿皮肤血管瘤不同时期的表达及意义

目的 探讨p27在血管瘤发生、发展及退化过程中的表达状况及其意义.方法 采用免疫组织化学方法 (SABC法)检测人皮肤血管瘤增生期、退化期及正常皮肤组织中p27的表达水平,利用计算机图像分析技术测量不同时期血管瘤组织和正常皮肤组织p27表达的积分光密度和面积.结果 增生期血管瘤内皮细胞p27表达水平低于退化期,其差异有统计学意义(P<0.05),退化期血管瘤内皮细胞p27表达水平与正常皮肤组织相比,其差异有统计学意义(P<0.05).结论 p27可能通过抑制血管形成和血管内皮细胞增殖来抑制血管瘤的发展.     

Caspase-3在人皮肤血管瘤不同时期的表达及意义

目的 探讨Caspase-3在血管瘤不同时期的表达状况及其意义。方法 采用免疫组织化学方法检测人皮肤血管瘤增生期、退化期及正常皮肤组织中Caspase-3的表达水平,并结合Ⅷ因子相关抗原的免疫组织化学染色证实表达Caspase-3的细胞是血管内皮细胞。利用计算机图像分析技术测量不同时期血管瘤组织和正常皮肤组织Caspase-3表达的平均吸光度和平均阳性面积。结果Caspase-3在上述3组中的表达差异有显著性(P<0.05)。退化期血管瘤内皮细胞Caspase-3表达水平高于增生期,差异有非常显著性(P<0.01)。结论Caspase-3通过执行细胞凋亡的功能参与血管瘤退化过程。     

血小板反应蛋白和内皮抑素在皮肤血管瘤不同时期的表达

目的探讨血小板反应蛋白(thrombospondin1)和内皮抑制素(endostatin)在血管瘤发生、发展及退化过程中的表达状况及其意义。方法采用S P免疫组织化学方法检测人皮肤血管瘤增生期、退化期及正常皮肤组织及内皮中血小板反应蛋白和内皮抑素的表达水平。利用计算机图像分析技术测量不同时期血管瘤组织和正常组织中血小板反应蛋白和内皮抑素表达的平均吸光度和平均阳性面积。结果退化期血管瘤中血小板反应蛋白和内皮抑素表达高于增生期,差异有统计学性意义(P<0.01),增生期血管瘤中血小板反应蛋白和内皮抑素表达高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.01)。结论血小板反应蛋白和内皮抑素可能通过抑制血管生成而促进血管瘤的消退。     

细胞周期素H及细胞周期素依赖性激酶-7在皮肤血管瘤组织中的表达及意义

目的 探讨细胞周期素H(cyclin H)、细胞周期素依赖性激酶-7(CDK-7)在人皮肤血管瘤组织中的表达及临床意义.方法 采用免疫组织化学方法分别检测皮肤血管瘤组织中增牛期、退化期及正常皮肤组织中cyclin H和CDK-7蛋白的表达.并结合第Ⅷ因子相关抗原的免疫组织化学染色证实表达cyclin H和CDK-7蛋白的细胞是血管内皮细胞.利用计算机图像分析技术测量不同时期血管瘤组织和正常皮肤组织cyclin H和CDK-7表达的平均吸光度A值和平均阳性面积.结果 增生期血管瘤内皮细胞cyclin H和CDK-7的表达水平明显高于退化期及正常皮肤组织,差异有统计学意义(P<0.01);退化期与正常皮肤组织血管内皮细胞cyclin H和CDK-7表达水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 CDK7和cyclin H在增生期血管瘤组织中促使内皮细胞大量增生,使血管瘤不断生长,提示CDK7和cyclin H在血管瘤的发生、发展中起了重要作用.     

Ang/Tie2体系与VEGF、bFGF在血管瘤增生退化过程中的协同作用

目的:探讨促血管生成素家族(Ang/Tie2)与血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在血管瘤增生退化过程中的协同作用。方法:采用免疫组化SP法,检测增生期血管瘤32例、退化期血管瘤10例及小儿正常皮肤10例标本中促血管生成素1(Ang1)、促血管生成素2(Ang2)及其受体Tie2、VEGF及bFGF的表达情况。结果:增生期血管瘤组织Ang2、Tie2、VEGF及bFGF表达明显高于消退期血管瘤(P<0.01);消退期血管瘤组织Ang2、Tie2、VEGF及bFGF表达明显高于小儿正常皮肤(P<0.01);Ang1在血管瘤和小儿正常皮肤表达均较弱,各组之间的比较无显著性差异(P﹥0.05);血管瘤中Ang2、Tie2分别与VEGF、bFGF标记指数间具有强的正相关性(P<0.01)。结论:Ang/Tie2体系与VEGF、bFGF在血管瘤增生退化过程中可能起协同的作用。     

survivin和caspase-3在病理性瘢痕成纤维细胞中的表达及其意义

目的 研究病理性瘢痕成纤维细胞中survivin和caspase-3的表达水平,以及两种凋亡相关因子与病理性瘢痕发生、发展机制的关系. 方法 以普通瘢痕为对照,采用RT-PCR和免疫组化方法,研究体外培养的病理性瘢痕成纤维细胞中survivin和caspase-3 mRNA和蛋白的表达变化,并进行比较分析. 结果 病理性瘢痕成纤维细胞中survivin的mRNA和蛋白(65.47%、72.43%)的表达水平高于普通瘢痕(P<0.01);caspase-3的mRNA和蛋白表达水平低于普通瘢痕(22.85%、6.34%,P<0.01);survivin、caspase-3在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中的表达差异有统计学意义(P<0.05). 结论 survivin和caspase-3在病理性瘢痕成纤维细胞中的表达异常,在病理性瘢痕的发生、发展中起重要的作用.     

存活素、caspase-3在不对称良性前列腺增生中的表达及意义

目的 观察存活素、caspase-3在不对称BPH中的表达情况,探讨凋亡在BPH发病机制中的作用. 方法 采用自身对照设计,应用PV二步法免疫组织化学方法检测25例不对称BPH增生明显叶与不明显叶中存活素、caspase-3的表达情况. 结果 增生明显叶组存活素蛋白阳性率为(22.08±16.33)%,不明显叶组为(7.64±5.45)%,2组间差异有统计学意义(t=4.817,P<0.01).增生明显叶组caspase-3蛋白阳性率为(33.12±21.01)%,不明显叶组为(51.52±27.27)%,2组间差异有统计学意义(t=5.770,P<0.01).两者在增生明显叶组表达呈负相关(r=0.474,P<0.05);而在增生不明显叶组表达无相关性(r=0.313,P>0.05). 结论 存活素、caspase-3引起腺体的不同凋亡状态与前列腺增生程度密切相关,提示凋亡机制在BPH的发生与发展中发挥重要作用.     

Caspase-3在血管瘤组织中的表达及其意义

目的　探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3(Caspase 3)的表达及其与血管瘤消退的关系。 方法　采用免疫组化SP法检测Caspase 3在 79例血管瘤和 5例正常皮肤组织中的表达。 结果　 79例血管瘤患者血管组织的Caspase 3阳性表达率在增殖期、消退期、退化期分别为 5 2 .4 %、91.2 %和 83.3% ,退化期、消退期的阳性表达高于增殖期 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1) ,也明显高于正常对照组 (P<0 .0 1) ,而增殖期与正常对照组阳性表达的差异无统计学意义 (P>0 .0 5 )。结论　Caspase 3参与了血管瘤由增殖期转变为消退期的病理发生过程 ,Caspase 3的活化诱导了细胞凋亡的发生 ,这可能是血管瘤自发消退的主要因素之一     

SURVIVIN、VEGF、CASPASE-3在血管瘤不同时期的表达及其相关性研究

目的研究不同时期的血管瘤组织中,Survivin、VEGF、活化Caspase-3的变化,并对其表达进行相关性分析,探讨其变化对血管瘤病程演化的影响。方法采用免疫组织化学检测Survivin、VEGF、活化Caspase-3在45例血管瘤(增生期30例,消退期15例)和15例正常皮肤组织中的表达。结果①Survivin主要表达在血管瘤内皮细胞胞核中,在增生期、消退期的阳性表达率分别为80%(24/30)和60%(9/15),正常组织中不表达;其表达在血管瘤的增生期、消退期及正常组织的两两比较均有统计学意义。②VEGF主要在血管瘤内皮细胞的胞浆和胞膜中表达,增生期、消退期的阳性表达率分别为90%(27/30)和46.7%(7/15),正常组织不表达;其表达在血管瘤的增生期、消退期及正常组织的两两比较均有统计学意义。③活化Caspase-3主要在血管瘤内皮细胞胞核中表达,在血管瘤增生期、消退期阳性表达率分别为60.0%(18/30)和86.7%(13/15),正常组织中不表达;其表达在血管瘤的增生期、消退期及正常组织的两两比较均有统计学意义。④血管瘤中VEGF的表达与Survivin的表达呈显著正相关(r=0.54,P<0.01);血管瘤中Survivin与活化Caspase-3的表达呈显著负相关(r=-0.51,P<0.01)。结论 VEGF、Survivin抑制Caspase-3的途径可能在血管瘤增生、消退过程中起关键作用,靶向处理该途径有望为血管瘤和各种血管形成性疾病提供新的治疗靶点。     

COX-2在肝细胞肝癌中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的 探讨肝细胞癌(HCC)中环氧化酶-2(COX-2)的表达与细胞凋亡的关系及其可能的机制.方法 选用44例HCC组织制作组织芯片,应用免疫组织化学S-P法检测癌组织COX-2、caspase-3和survivin的表达情况.应用末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡指数(AJ).结果 HCC中COX-2蛋白阳性率为52.3%,其表达与AJ呈显著负相关r=-0.354,P＜0.05),与caspase-3蛋白表达也呈显著负相关(r=-0.447,P＜0.01),但与survivin蛋白的表达呈显著正相关(r=0.394,P＜0.01).AI与caspase-3呈显著正相关(r=0.381,P＜0.05),但与survivin呈显著负相关(r=-0.458,P＜0.01).结论 本研究证实了HCC中COX-2的抗肿瘤细胞凋亡作用;其机制可能是通过上调肿瘤细胞survivin表达,同时下调caspase-3表达途径实现的.     

P73和c-fos蛋白在血管瘤组织中的表达及意义

目的　探讨p73和c fos蛋白在血管瘤组织中的发生、发展及临床意义。方法　采用免疫组织化学检测增生期血管瘤、退化期血管瘤及正常皮肤组织中p73和c fos蛋白的表达。结果　在血管瘤增生期中p73和c fos蛋白有较高表达 ;退化期血管瘤和正常皮肤组 ,p73和c fos表达极弱。增生期血管瘤与退化期血管瘤、正常皮肤组分别相比 ,p73和c fos蛋白阳性表达均有统计学意义 (P <0 0 1) ,退化期血管瘤与正常皮肤组 ,p73和c fos蛋白阳性表达的差异均无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论　p73和c fos蛋白在血管瘤的发生、发展及其演变过程中起着重要的作用。     

凋亡诱导因子和caspase-3在结直肠腺瘤-癌序列中的表达及相关性

目的探讨非caspase依赖凋亡途径的凋亡诱导因子（AIF）与caspase依赖凋亡途径的caspase-3在结直肠腺瘤．癌序列中的表达变化及两种蛋白之间的相关性。方法采用免疫组织化学染色检测18例正常黏膜、84例结直肠腺瘤和72例结直肠癌中AIF及caspase-3的表达情况。结果结直肠腺瘤组织中AIF及caspase-3的阳性表达率均明显高于正常黏膜组织（P〈0．05）;腺瘤组织中AIF阳性表达率与腺癌之间的差异无统计学意义（P〉0．05）,而caspase-3阳性表达率则明显高于腺癌组织（P〈0．05）;腺瘤组内绒毛状腺瘤AIF阳性表达率明显低于管状腺瘤（P〈0．05）,而caspase-3阳性表达率在两种腺瘤之间的差异无统计学意义（P〉0．05）。相关分析显示,AIF表达与caspase-3表达无显著相关性（P〉0．05）。结论AIF代表的非caspase依赖凋亡途径异常发生在腺瘤向癌突变早期．而caspase依赖途径的凋亡失控可能是更重要的促进结直肠癌发生的因素之一。非caspase依赖的凋亡途径与caspase依赖的凋亡途径是肿瘤发生中两条相对独立的细胞凋亡途径。     

凋亡相关基因survivin、caspase-3及cyclin-B1在胃癌发生、发展中的作用

目的 检测凋亡相关基因survivin、caspase-3和cyclin—B1在胃癌组织中的表达，探讨其表达在胃癌发生、发展中的作用。方法 采用RT—PCR方法检测survivin mRNA、caspase-3 mRNA和cyclin-B1 mRNA在30例胃癌组织、10例癌旁正常胃组织标本中的表达。结果 30例胃癌组织中有20例survivin mRNA阳性表达，10例正常胃组织中无survivin mRNA表达；30例胃癌组织和10例正常胃组织中均有caspase-3 mRNA和cyclin—B1 mRNA阳性表达；20例survivin mRNA阳性表达的胃癌组织中caspase-3 mRNA和cyclin-B1 mRNA表达水平明显低于lo例survivin mRNA阴性表达的胃癌组织（P〈0．01）和正常胃组织（P〈0．01）；10例survivin mRNA阴性表达的胃癌组织caspase-3 mRNA和cyclin—B1 mRNA表达水平亦明显低于10例正常胃组织（P〈0．01）。相关性分析表明，survivin的表达与caspase-3（r=-0．923，P〈0．01）和cyclin-B1（r=0．886，P〈0．01）表达呈负相关，caspase-3的表达与cyclin-B1表达呈正相关（r=0．892，p〈-0．01）。结论survivin促进胃癌发生、发展，caspase-3和cyclin-B1抑制胃癌发生、发展。     

病理性瘢痕组织中微血管密度的测定及与survivin mRNA的表达关系

目的测定病理性瘢痕组织中CD105标记的微血管密度（microvesiel density,MVD）和survivin mRNA的表达,探讨病理性瘢痕组织中癌基因在血管形成中的作用。方法采用多相寡核苷酸探针原位杂交技术和免疫组织化学染色技术（SP法）,分别检测survivin mRNA、CD105蛋白在40例病理性瘢痕、20例非病理性瘢痕和20例正常皮肤组织中的表达,并计数CD105标记的MVD。结果CD105-MVD、survivinmRNA在病理性瘢痕较非病理性瘢痕和正常皮肤的表达差异皆具有统计学意义（P〈0.05）。病理性瘢痕组中survivin mRNA表达与CD105-MVD表达有相关性（P〈0.05）。结论病理性瘢痕组织中,凋亡抑制基因survivin表达上调可能参与了其血管形成过程。     

Ang1、Ang2及其受体Tie2在血管瘤组织中的表达及意义

目的探讨血管瘤的血管生成与促血管生成素家族（Ang/Tie2）之间的关系。方法通过免疫组化SP法、RT-PCR检测增生期血管瘤17例、消退期血管瘤13例和小儿正常皮肤10例的组织中促血管生成素1（Ang1）、促血管生成素2（Ang2）及其受体Tie2的表达情况。结果增生期血管瘤组织Ang2、Tie2表达高于消退期血管瘤（P〈0.01）;Ang2、Tie2在小儿正常皮肤表达较弱或阴性;Ang1在血管瘤和小儿正常皮肤表达均较弱或阴性,二者比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论Ang/Tie2体系在血管瘤的增生和消退过程中可能起重要的作用。     

热疗诱导人肝癌细胞HepG2凋亡及机制的研究

目的探讨不同温度热疗对人肝癌细胞Hep G2的凋亡作用。方法人肝癌Hep G2细胞常规方法培养,采用水浴加热法对实验组(41℃,42℃,43℃)和对照组(37℃)细胞进行加温(0.5 h)处理,处理后继续培养24 h。采用流式细胞术检测细胞的凋亡情况,免疫组织化学技术检测细胞凋亡相关蛋白P53的水平,实时荧光定量PCR法检测热疗作用后生存素(Survivin),caspase-9基因mRNA的表达变化。应用SPSS16.0软件进行统计学分析。凋亡率、P53蛋白值、caspase-9 mRNA表达水平等计量资料采用均数±标准差表示,组间比较采用t检验或方差分析。P0.05差异有统计学意义。结果在37℃,41℃,42℃,43℃,细胞凋亡率分别为(9.58±1.22)%、(16.47±3.41)%、(20.07±1.85)%和(23.42±1.93)%;P53蛋白表达OD值分别为(0.083±0.015)、(0.145±0.024)、(0.267±0.031)、(0.389±0.019)。与对照组比较,survivin基因mRNA的表达量下降(P0.05),caspase-9基因mRNA的表达显著增加(P0.05)。不同温度热疗后,随着加热温度的增高,细胞凋亡率增加,促进了基因p53及caspase-9的表达,凋亡抑制基因survivin的表达量下降。结论通过热疗可以增加p53及caspase-9基因的表达,抑制survivin基因的表达,从而诱导肝癌Hep G2细胞凋亡。