加味桃红四物汤对黑素细胞酪氨酸酶和酪氨酸激酶受体基因蛋白表达的影响

目的研究加味桃红四物汤对体外培养的人表皮黑素细胞(MC)可溶性总蛋白以及酪氨酸酶(Tyr)基因和酪氨酸激酶受体基因(c—kit)表达的作用。方法采用免疫印迹法检测了加味桃红四物汤对酪氨酸酶和酪氨酸激酶受体蛋白含量的影响；595nm比色标准曲线测定黑素细胞总蛋白含量；采用细胞数统计和显微镜观察的方法测定加味桃红四物汤对细胞毒性和对细胞增殖的影响。结果加味桃红四物汤对黑素细胞可溶性总蛋白和酪氨酸酶的合成有促进作用，分别为4．76％和1．79％；对酪氨酸激酶受体蛋白的合成具有显著促进作用，高达79．41％。结论加味桃红四物汤治疗白癜风的作用机制之一是与酪氨酸激酶受体蛋白含量的提高相关，而与黑素细胞增殖和酪氨酸酶相关蛋白的含量无明显关系。     

加味桃红四物汤治疗白癜风的临床及实验室研究

目的 观察加味桃红四物汤治疗白癜风的效果并探讨其作用机制。方法 白癜风患者243例，用加味桃红四物汤口服液，每次10mL，3次／d，口服。体外培养的正常人黑素细胞以含药血清作用后测定细胞酪氨酸酶活性、黑素含量和细胞增殖。结果 临床观察显示243例白癜风患者服用加味桃红四物汤后，治愈26例(10．7％)，显效66例(27．2％)，有效76例(31．3％)，无效75例(30．8％)；实验结果显示加味桃红四物汤的含药血清能上调酪氨酸酶活性，提高黑素含量，促进黑素细胞增殖。结论加味桃红四物汤治疗白癜风有明显疗效，其作用可能与刺激黑素细胞黑素合成、上调酪氨酸酶活性、促进细胞增殖有关。     

酪氨酸酶基因家族与皮肤黑素生成

４个酪氨酸酶基因家族成员ａｌｂｉｎｏ、ｂｒｏｗｎ、ｓｌａｔｙ和Ｐｍｅｌ－１７都定位于黑素小体膜上同一多酶复合中，彼此相互作用共同调控黑素细胞生成黑素的和量。对它们的认识有助于阐明色素障碍性皮肤病的分子发病机理，探索临床基因治疗的新途径。     

酪氨酸酶基因家族与皮肤黑素生成

4个酪氨酸酶基因家族成员albino、brown、slaty和Pmel-17都定位于黑素小体膜上同一多酶复合体中,彼此相互作用共同调控黑素细胞生成黑素的质和量。对它们的认识有助于阐明色素障碍性皮肤病的分子发病机理,探索临床基因治疗的新途径。     

桃红四物汤皮肤科研究概述

桃红四物汤出自《医宗金鉴》一书,由熟地黄、川芎、白芍、当归、桃仁、红花组成,其功能特点是在活血、养血的基础上,加治了逐瘀的作用,常可治疗精血不足、或气滞血瘀等多种常见皮肤病,临症选用此方可解临床之难,具体应用如下。1临床研究1.1变态反应性皮肤病1.1.1荨麻疹刘建华[1]治疗本病,取以血行风自灭之理。投桃红四物汤加减,每日1剂,3周为1个疗程,总有效率76.2%。王晓红等[2]治疗本病以桃红四物汤加减,取其补血而不滞血,行血而不破血之效,脏腑气血充实调畅,则其风自     

中药含药血清对体外培养黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响

目的探讨中药补肾化瘀胶囊含药血清对黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响。方法体外培养人黑素细胞株,制备大鼠中药含药血清,分别采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)和蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法测定黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性。结果中药含药血清均能促进黑素细胞增殖,与空白对照组差异有显著性(P<0.05);三组含药血清间两两比较差异无显著性(P>0.05)。补肾化瘀胶囊组较六味地黄丸组、逍遥丸组、空白对照组有显著抑制酪氨酸酶活性的作用,差异有显著性(P<0.01);六味地黄丸组、逍遥丸组、空白对照组三组两两比较,差异均无显著性(P>0.05)。结论补肾化瘀胶囊含药血清对黑素细胞增殖具有促进作用,对酪氨酸酶活性具有明显抑制作用,在促进黑素细胞增殖上各组中药含药血清作用相当,在抑制酪氨酸酶活性上补肾化瘀胶囊组优于六味地黄丸组和逍遥丸组。     

橙皮苷对人黑素细胞黑素合成和酪氨酸酶活性的影响

目的:观察橙皮苷对人原代黑素细胞酪氨酸酶及黑素合成的影响,探讨其作用机制.方法:选择50、100、200、300、400、500 和600 mg/L 7 个浓度的橙皮苷作用于体外培养的人表皮黑素细胞72 h,分别测定细胞增殖活性、酪氨酸酶活性及黑素含量.结果:橙皮苷显著抑制黑素合成和酪氨酸酶活性,且呈浓度依赖性.结论:橙皮苷可抑制黑素合成和酪氨酸酶活性.     

桃红四物汤治疗色素性紫癜性皮肤病临床及实验室观察

目的 观察桃红四物汤治疗色素性紫癜性皮肤病的临床疗效及血液流变学变化。方法 将61例随机分为两组，治疗组31例用桃红四物汤加味，对照组30例用西药治疗。结果 疗效统计：治疗组有效率70.97％，对照组43．33％，差异有显著性（P〈0.05）。血液流变学检测：治疗组治疗前后各项指标差异有非常显著性（P〈0．01），对照组治疗前后各项指标差异无显著性（P〉0.05），两组治疗后差异有非常显著性（P〈0．01）。毛细血管扩张性环状紫癜疗效较好，差异有显著性（P〈0.05）。结论 桃红四物汤加味治疗色素性紫癜性皮肤病有较好的临床效果和改善微循环的作用。     

加味桃红四物汤治疗带状疱疹后遗神经痛84例临床观察

带状疱疹是感染水痘——带状疱疹病毒所致的急性疱疹性皮肤病。与中医文献中记载的“缠腰火丹”、“蛇串疮”、“蜘蛛疮”、“蛇丹”等眼1演相似。其后遗神经痛是治疗中最为棘手的难题。很多患者尽管皮损已经消退,但其遗留的神经痛经久不愈,疼痛难忍,特别是一些老年性患者,患病     

姜黄素对正常人表皮黑素细胞黑素生成的影响

目的研究姜黄素对体外培养的正常人表皮黑素细胞黑素生成及酪氨酸酶活性的影响。方法采用MTT法测定姜黄素对人表皮黑素细胞的活力的影响,体外氧化DOPA反应方法测定酪氨酸酶活性,NaOH法测定黑素生成量。结果姜黄素在浓度小于或等于10μmol/L时无明显细胞毒性。姜黄素在浓度大于或等于2.5μmol/L时呈剂量依赖性抑制酪氨酸酶活性,减少黑素生成,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论姜黄素抑制培养的人表皮黑素细胞的黑素生成,可能具有开发成为美白产品的前景。     

N-乙酰氨基葡萄糖对酪氨酸酶活性及小鼠B16黑素瘤细胞黑素合成的影响

目的 探讨N-乙酰氨基葡萄糖对体外酪氨酸酶活性、小鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶和黑素合成的影响。方法 取对数生长期小鼠B16黑素瘤细胞,分别加入不同浓度N-乙酰氨基葡萄糖（1.5、3、6.25、25、50和100 mmol/L）共孵育,MTT法测定培养的小鼠B16黑素瘤细胞的增殖活性,NaOH法测定黑素生成量,体外氧化多巴反应方法测定酪氨酸酶活性;免疫细胞化学测定小鼠B16黑素瘤细胞中酪氨酸酶的表达。结果 与阴性对照（0.8183 ± 0.0326）相比,1.5、3、6.25、25和50 mmol/L N-乙酰氨基葡萄糖显著抑制蘑菇酪氨酸酶活性（分别为0.7380 ± 0.0254、0.7293 ± 0.0382、0.7247 ± 0.0389、0.7233 ± 0.0186、0.7043 ± 0.0166）（P < 0.05或P < 0.01）;25、50和100 mmol/L N-乙酰氨基葡萄糖显著抑制小鼠B16黑素瘤细胞增殖（分别为0.5410 ± 0.0496、0.4480 ± 0.0246、0.1273 ± 0.0137）和黑素生成（0.0070 ± 0.0008、0.0049 ± 0.0012、0.0015 ± 0.0014）,50和100 mmol/L N-乙酰氨基葡萄糖显著抑制B16黑素瘤细胞酪氨酸酶活性（分别为0.1003 ± 0.0404、0.0130 ± 0.0053）及酪氨酸酶蛋白的表达（13.2700 ± 0.9741、8.5667 ± 2.0345,P < 0.05或P < 0.01）。结论 N-乙酰氨基葡萄糖抑制培养的小鼠B16黑素瘤细胞的酪氨酸酶活性和黑素合成。     

女贞子对培养的黑素细胞酪氨酸酶活性和黑素合成的影响

目的 研究女贞子单体酪醇和齐墩果酸对人黑素细胞的增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成的影响。方法 采用MTT法测定细胞增殖情况,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,氢氧化钠裂解法测定黑素含量,半定量RT-PCR检测药物对黑素细胞酪氨酸酶和酪氨酸酶相关蛋白-1 mRNA表达的影响。结果 加入酪醇72h后,各组黑素细胞的酪氨酸酶活性和合成黑素能力明显增强,且呈浓度依赖性;酪氨酸酶和酪氨酸酶相关蛋白-1 mRNA表达量分别比空白对照增加39.10%和99.26%;齐墩果酸也能明显激活酪氨酸酶(P<0.01),促进黑素合成(P<0.05),并使黑素细胞酪氨酸酶和酪氨酸酶相关蛋白-1mRNA表达量分别比加入无水乙醇的对照增加31.88%和17.73%。结论 酪醇和齐墩果酸可能通过上调酪氨酸酶和酪氨酸酶相关蛋白-1 mRNA的表达而增强正常人黑素细胞的黑素合成和酪氨酸酶活性:两者可能是女贞子中影响黑素细胞生物学活性的主要成分。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对人表皮黑素细胞黑素合成的影响及机制

目的：观察表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对体外培养的人表皮黑素细胞的黑素合成和酪氨酸酶（TYR）活性以及TYR、酪氨酸酶相关蛋白（TRP）-1、TRP-2mRNA表达的影响,探讨EGCG对黑素合成的影响及其作用机制。方法：选择5．0、10．0、12．5、15．0、20．0μg／mL5个浓度的EGCG作用于体外培养的人表皮黑素细胞72h,分别测定细胞增殖活性、TYR活性、黑素含量;采用逆转录（RT）-PCR半定量检测EGCG对黑素细胞中TYR、TRP-1、TRP-2 mRNA表达的影响。结果：EGCG显著抑制黑素合成和TYR活性,且呈浓度依赖性;EGCG可明显抑制黑素细胞中TYR mRNA和TRP-1 mRNA的表达,但对TRP-2mRNA的表达无明显影响。结论：EGCG可抑制黑素合成和TYR活性,这种作用可能与EGCG下调TYR和TRP-1的表达有关。     

芦荟素对Melan-a鼠黑素细胞株黑素生成及其相关基因表达的影响

目的:研究芦荟素对Melan-a鼠黑素细胞株的黑素生成及其相关基因表达的影响。方法:分别测定不同浓度芦荟素作用后的Melan-a鼠黑素细胞株的细胞增殖率、酪氨酸酶(TRY)含量及黑素量变化,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定酪氨酸酶相关蛋白(TRP)-1和TRP-2的表达,并与相应浓度的氢醌进行比较。结果:0.01～10.00mmol/L的芦荟素对黑素细胞的增殖率无影响,芦荟素可显著抑制Melan-a鼠黑素细胞株的TRY活性和黑素量生成,抑制作用随芦荟素的浓度升高而增加,0.10mmol/L芦荟素处理的Melan-a鼠黑素细胞株的TRY抑制率及黑素量与0.10μmol/L的氢醌相当(P>0.05);芦荟素还能显著下调TRP-1和TRP-2 mRNA的表达水平(P<0.01),但是TRP-1和TRP-2的变化与TRY及黑素量的变化不平行。结论:芦荟素显著抑制Melan-a鼠黑素细胞株的TRY活性、黑素量和TRP-1/TRP-2 mRNA的表达水平,直接测定黑素细胞TRY浓度和黑素量比检测TRP-1/TRP-2mRNA更能确切地反映芦荟素对黑素细胞的影响。     

苦参碱及肉桂酸对体外培养小鼠黑素细胞黑素生成的影响

目的:观察苦参碱和肉桂酸对melan-a小鼠黑素细胞黑素生成的影响。方法:用药物干预melan-a小鼠,观察黑素细胞的形态并测定各组黑素量及酪氨酸酶的活性。结果:肉桂酸干预melan-a小鼠黑素细胞2d后就表现出明显的促进树突生成的作用。肉桂酸和苦参碱在高、中、低浓度(1.00、0.10、0.01mmol/L)有抑制melan-a小鼠黑素细胞酪氨酸酶活性的作用(除外0.01mmol/L苦参碱),其抑制作用均弱于对照药氢醌(P<0.01)。苦参碱(0.001～1.000mmol/L)和肉桂酸(0.001～1.000mmol/L)均能使melan-a小鼠黑素细胞黑素量减少,但其抑制黑素合成的作用明显低于同浓度氢醌。Fontana-Masson染色表明,经苦参碱干预后的melan-a小鼠黑素细胞内黑素颗粒少于空白对照组。结论:苦参碱和肉桂酸均有抑制melan-a小鼠黑素细胞酪氨酸酶活性的作用及使黑素合成量减少的作用,且苦参碱作用强于肉桂酸,而肉桂酸有促进黑素细胞树突形成的作用。     

丹皮酚在体外对人黑素细胞酪氨酸酶活性及黑素生成的影响

目的探讨丹皮酚对人表皮黑素细胞与角质形成细胞共培养体系酪氨酸酶活性及黑素生成的影响。方法培养人表皮黑素细胞及人表皮黑素细胞与角质形成细胞共培养体系,利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)还原法测定细胞活力,采用酶学方法测定酪氨酸酶活性,475nm比色法测定黑素含量。结果50,100和200μmol/L丹皮酚对于黑素细胞及共培养细胞酪氨酸酶活性及黑素生成均有较强的剂量相关性抑制作用,100及200μmol/L丹皮酚与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论丹皮酚对于共培养体系酪氨酸酶活性及黑素生成有较强的剂量相关性抑制作用。     

六味地黄丸及其组方中药对酪氨酸酶活性影响的实验研究

目的：为了研究中药对酪氨酸酶活性影响,用中药治疗色素障碍性皮肤病提供实验依据。方法：采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法体外测定六味地黄丸及其组方中药对酪氨酸酶活性的影响。结果：六味地黄丸组酪氨酸酶活性降低（水提物P＜0．05,醇提物P＞0．05）,其组方中药水提物熟地、丹皮组酪氨酸酶活性增高,茯苓、山药、山茱萸降低;醇提物中丹皮、泽泻增高,茯苓、山药、山茱萸降低。结论：六味地黄丸使酪氨酸酶活性降低（水提物）;六味地黄丸组方中药熟地、丹皮使酪氨酸酶活性增高,茯苓、山药、山茱萸使酪氨酸酶活性降低,泽泻组水提物增高、醇提物降低。     

Arthrophytum scoparium inhibits melanogenesis through the down‐regulation of tyrosinase and melanogenic gene expressions in B16 melanoma cells

Melanin performs a crucial role in protecting the skin against harmful ultraviolet light. However, hyperpigmentation may lead to aesthetic problems and disorders such as solar lentigines (SL), melasma, postinflammatory hyperpigmentation and even melanoma. Arthrophytum scoparium grows in the desert in the North African region, and given this type of environment, A. scoparium exhibits adaptations for storing water and produces useful bioactive factors. In this study, the effect of A. scoparium ethanol extract (ASEE) on melanogenesis regulation in B16 murine melanoma cells was investigated. Cells treated with 0.017% (w/v) ASEE showed a significant inhibition of melanin biosynthesis in a time‐dependent manner without cytotoxicity. To clarify the mechanism behind the ASEE‐treated melanogenesis regulation, the expressions of tyrosinase enzyme and melanogenesis‐related genes were determined. Results showed that the expression of tyrosinase enzyme was significantly decreased and Tyr, Trp‐1, Mitf and Mc1R mRNA expressions were significantly down‐regulated. LC‐ESI‐TOF‐MS analysis of the extract identified the presence of six phenolic compounds: coumaric acid, cinnamic acid, chrysoeriol, cyanidin, catechol and caffeoylquinic acid. The melanogenesis inhibitory effect of ASEE may therefore be attributed to its catechol and tetrahydroisoquinoline derivative content. We report here that ASEE can inhibit melanogenesis in a time‐dependent manner by decreasing the tyrosinase protein and Tyr, Trp‐1, Mitf and Mc1R mRNA expressions. This is the first report on the antimelanogenesis effect of A. scoparium and on its potential as a whitening agent.