维拉帕米,肝素,地塞米松抑制后囊混浊的细胞学基础：对晶体上皮细胞…

通过观察维拉帕米，肝素，地塞米松在体外对牛晶体上皮细胞（ＢＬＥＣ）增殖和细胞内Ｃａ＾＋的影响评价一它们抑制后囊混浊的价值。结果维拉帕米呈浓度依赖性抑制ＢＬＥＣ增殖（Ｐ〈０．０５（１０ｍｇ／Ｌ）或Ｐ〈０．０１（≥２０ｍｇ／Ｌ）和降低细胞内Ｃａ＾＋并能增强肝素的增殖抑制作用肝素５００ｍｇ／Ｌ时可明显抑制增殖（Ｐ〈０．０１）和降低细胞内Ｃａ＾＋＋５００ｍｇ／Ｌ以上抑制作用不随浓度增加而增强，地塞米松对Ｂ     

MTT比色法测定药物对晶体上皮细胞增殖的影响

目的筛选防治后囊混浊的药物。方法进行人胚胎晶体上皮细胞（ｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｓ，ＬＥＣ）的培养并用ＭＴＴ比色法检测了肝素、氟脲嘧啶、双氯灭痛、顺铂对人胚胎晶体上皮细胞增殖的影响。结果肝素１００～２５００Ｕ／ｍｌ，氟脲嘧啶０．１～１００μｇ／ｍｌ，顺铂１０～５００μｇ／ｍｌ作用２４ｈ和７２ｈ对胚胎晶体上皮细胞增殖有明显抑制作用（Ｐ＜０．０５）。作用７２ｈ抑制率高于２４ｈ（Ｐ＜０．０５）。双氯灭痛和对照组相比无明显差异（Ｐ＞０．０５）。结论肝素、氟脲嘧啶、顺铂均为剂量依赖型和时间依赖型药物，均能有效抑制晶体上皮细胞的生长；双氯灭痛对晶体上皮细胞增殖无明显抑制作用。     

碱性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子-I及其协同作用对牛晶体上皮细胞增殖的影响

目的　研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）、胰岛素样生长因子Ｉ（ｉｎｓｕｌｉｎｌｉｋｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒＩ，ＩＧＦⅠ） 及二者的共同作用对体外牛晶体上皮细胞（ｂｏｖｉｎｅ ｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌ，ＢＬＥＣ）增殖的影响。方法　ＢＬＥＣ原代培养，取第４ 代细胞种入２４ 孔板，加入不同浓度的ｂＦＧＦ、ＩＧＦⅠ、ｂＦＧＦ＋ ２０ μｇ／ＬＩＧＦⅠ，２０ ｈ 后加入３ＨＴＤＲ，１６ ｈ 后作液闪计数。结果　一定浓度的ｂＦＧＦ（１～１００ μｇ／Ｌ） 、ＩＧＦⅠ（２０～１００ μｇ／Ｌ） 在体外有促进ＢＬＥＣ 增殖的作用（ Ｐ＜ ０－０１ ） ，２０ μｇ／Ｌ的ＩＧＦⅠ可增加ｂＦＧＦ的促ＢＬＥＣ增殖作用。结论　生长因子及它们之间的协同作用在促进晶体上皮细胞异常增殖的过程中起重要作用。     

连续环形撕囊术在囊外摘除术中的应用

目的比较白内障囊外摘除术与人工晶体（ｉｎｔｒａｏｃｕｌａｒｌｅｎｓ，ＩＯＬ）植入术中采用连续环形撕囊（ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｃｕｒｖｉｌｉｎｅａｒｃａｐｓｕｌｏｔｏｍｙ，ＣＣＣ）与常规开罐式截囊（ｃａｎ－ｏｐｅｎｅｒｃａｐｓｕｌｏｔｏｍｙ，ＣＯＣ）方法的优缺点。方法１１７例采用ＣＣＣ，４４例采用ＣＯＣ。结果ＣＣＣ组中无玻璃体脱出，视力恢复明显好于ＣＯＣ组（Ｐ＜０．０１），术后并发症如葡萄膜炎、虹膜粘连等明显少于ＣＯＣ组（Ｐ＜０．０１）。ＣＣＣ组的主要并发症是术中娩核时可能发生韧带断离而使囊袋脱位。结论囊外摘除术采用ＣＣＣ方法可确保ＩＯＬ植入于囊袋中，减少ＩＯＬ植入睫状沟后并发症。术前正确估计核的大小，以确定撕囊口大小，并采用常规水分离充分将核脱出囊袋，可避免囊袋脱位的发生。     

后囊混浊的发生机制及防治现状

后囊混浊是白内障囊外摘出术的首要并发症，晶体上皮细胞的增殖，移行和纤维化在后囊混浊的发生中起了重要作用。目前，后囊混浊的预防以手术中彻底清除晶体上皮细胞及皮质，植入双凸或后凸的后房型人工晶体为主，其治疗主要靠激光后囊膜切开，研究发现，Ｄｉｓｐａｓｅ（一种中性蛋白酶），依地酶（ＥＤＴＡ）肝素及抗代谢药５－氟尿嘧啶，柔红霉纱，秋水仙碱，丝裂霉素等对晶体上皮细胞的移行和／或增殖的抑制作用，多种细胞因子对     

碱性成纤维细胞生长因子对牛晶状体上皮细胞增殖的影响及其在牛晶状体上皮细胞中的蛋白表达

目的　研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ） 在体外对牛晶状体上皮细胞（ＢＬＥＣ） 增殖的影响及确定ＢＬＥＣ 是否表达ｂＦＧＦ 蛋白。 方法　ＢＬＥＣ 原代培养。用不同浓度的ｂＦＧＦ 及３Ｈ胸腺嘧啶（３ＨＴＤＲ） 处理ＢＬＥＣ３６ ｈ 后，液闪测定ｂＦＧＦ 对ＢＬＥＣ３ＨＴＤＲ 掺入率的影响。Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹（ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ） 法确定ＢＬＥＣ 是否表达ｂＦＧＦ 蛋白。 结果　ｂＦＧＦ 在体外有促进ＢＬＥＣ 增殖作用，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 法表明ＢＬＥＣ 可表达低分子量（１８ ０００）ｂＦＧＦ 蛋白。 结论　ｂＦＧＦ 可能通过晶状体上皮细胞的自分泌，促进白内障术后残留晶状体上皮细胞的增殖，导致后发性白内障     

地塞米松和柔红霉素抑制后囊混浊的体外模拟研究

为评价地塞米松和柔红霉素防治后囊混浊的价值，在体外模拟其在体内的可行性用药方式观察其对牛晶体上皮细胞增殖的抑制作用，结果地塞米松模拟在术后用药７２小时，在房水有效浓度内对晶体上皮细胞无明显抑制作用；提示其防治后囊混浊的作用主要是通过加速血－房水屏障的恢复，减少和控制术后炎症反应而间接实现。柔红霉素模拟加入皮质冲洗液中作用１０分钟，在眼部允许剂量内可呈浓度依赖性抑制晶体上皮细胞增殖，认为按这种方式用药可达到抑制后囊混浊作用。     

氟中毒状态下大鼠晶体的形态学改变

目的了解氟中毒状态下实验动物的晶体形态学改变。方法以７５～１００ｍｇ／Ｌ的氟化钠溶液造成Ｗｉｓｔａｒ鼠的氟中毒，并以正常饮水大鼠作为对照组，在供毒后的１、２、４、６个月进行晶体的形态学观察。结果８２．１％（２３／２８）的氟中毒大鼠晶体出现了程度不同的前囊下、皮质及核的混浊，而对照组仅为１０．５％（２／１９）的大鼠晶体出现了皮质及核的混浊，但无前囊下混浊，且程度较轻，两组比较具有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。结论实验状态下出现的晶体形态学改变说明氟中毒与白内障具有较强的相关性。     

MsrB1对ONOO－诱导的人晶状体上皮细胞周期的影响

目的　探讨蛋氨酸亚砜还原酶Ｂ１（ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅｓｕｌｆｏｘｉｄｅｒｅｄｕｃｔａｓｅＢ１,ＭｓｒＢ１）基因沉默对过氧亚硝酸根（ＯＮＯＯ－）诱导的人晶状体上皮细胞（ｈｕｍａｎｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ,ＨＬＥＣ）细胞周期的影响和ＥＲＫ信号通路在其中的调节作用。方法　将培养的ＨＬＥＣ分为两组:正常组和ＭｓｒＢ１基因沉默组,分别用０μｍｏｌ·Ｌ－１、１００μｍｏｌ·Ｌ－１、２００μｍｏｌ·Ｌ－１和３００μｍｏｌ·Ｌ－１ＯＮＯＯ－处理２０ｍｉｎ后,继续培养１２ｈ。用ＲＴ-ＰＣＲ法检测ＭｓｒＢ１基因表达水平变化,流式细胞仪检测细胞周期水平变化,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测ＭｓｒＢ１基因沉默和ＯＮＯＯ－对ｐＥＲＫ表达水平的影响。结果　３００μｍｏｌ·Ｌ－１ＯＮＯＯ－处理ＨＬＥＣ会导致ＭｓｒＢ１表达水平显著下降（Ｐ＜０．０１）,当ＭｓｒＢ１基因沉默细胞经３００μｍｏｌ·Ｌ－１ＯＮＯＯ－处理后,ＭｓｒＢ１表达水平进一步显著下调（Ｐ＜０．０５）。经２００μｍｏｌ·Ｌ－１或３００μｍｏｌ·Ｌ－１ ＯＮＯＯ－处理,ＨＬＥＣ细胞周期分别阻滞在Ｇ２／Ｍ期和Ｓ期,当ＭｓｒＢ１基因沉默细胞经２００μｍｏｌ·Ｌ－１或３００μｍｏｌ·Ｌ－１ＯＮＯＯ－处理后,更多的细胞阻滞在Ｇ２／Ｍ期或Ｓ期（Ｐ＜０．０５）。ｐＥＲＫ检测结果表明,ＭｓｒＢ１基因沉默前后经ＯＮＯＯ－处理导致的细胞周期阻滞和ｐＥＲＫ表达水平显著下降有关（Ｐ＜０．０１）。结论　ＯＮＯＯ－可以下调ＨＬＥＣＭｓｒＢ１表达水平,ＭｓｒＢ１基因沉默细胞经ＯＮＯＯ－处理,ｐＥＲＫ表达水平显著下降,导致更多细胞阻滞在Ｇ２／Ｍ期和Ｓ期。     

老年性白内障血,房水,晶体中抗氧化物的研究

目的探讨老年性白内障患者血、房水、晶体中的抗氧化物对晶体的保护作用。方法随机取符合条件的老年性白内障４０例（４０眼）。ＶｉｔＣ和ＶｉｔＥ分别用微量荧光法和比色法测定。结果实验组血中ＶｉｔＣ和ＶｉｔＥ含量明显高于实验组房水和晶状体中二者的含量,并且二者在血－房水和血－晶状体中含量有显著性差异（Ｆ检验,Ｐ＜０．０１）;对照组房水和晶状体ＶｉｔＣ明显高于血中,并在对照组的血、房水、晶状体其含量有显著性差异（Ｆ检验,Ｐ＜０．０１）,对照组中ＶｉｔＥ含量基本接近。结论在房水和晶状体中ＶｉｔＣ、ＶｉｔＥ含量的下降是形成老年性白内障的原因之一。     

碱性成纤维细胞生长因子在牛晶状体上皮细胞中的表达和调控

目的　探讨牛晶状体上皮细胞 (BLEC)中碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的表达和胎牛血清对表达的调控作用 ,推测白内障摘除术后血 房水屏障破坏对bFGF的影响。方法　采用免疫组化法和Westernblot法检测体外培养的BLEC中bFGF的表达 ,以及不同浓度胎牛血清 (0 1%、1 0 %及 10 0 % )作用 2 4h、10 0 %胎牛血清作用不同时间 (4、8、12及 2 4h)对bFGF相对表达量的影响。结果　免疫组化法检测显示绝大部分BLEC胞浆中可见bFGF表达。Westernblot法检测显示BLEC中表达的bFGF相对分子质量为 180 0 0 ;bFGF的表达随胎牛血清浓度的增加而增强 ,差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ;随胎牛血清作用时间的延长而增强 ,差异有显著意义 (P <0 0 5 )。结论　BLEC中可见低相对分子质量bFGF的表达 ;胎牛血清可诱导BLEC中bFGF表达 ;白内障摘除术后血 房水屏障的破坏可导致房水中血清浓度改变 ,引起晶状体上皮细胞中bFGF表达增强。     

IL-1和TNF-α对晶体上皮细胞增殖及胞浆内游离Ca^2＋浓度的影响

目的研究白细胞介素１（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ１,ＩＬ－１）、肿瘤坏死因子α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒα,ＴＮＦ－α）对体外培养的小牛晶体上皮细胞（ｂｏｖｉｎｅｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌ,ＢＬＥＣ）增殖和胞浆内游离Ｃａ２＋浓度的影响,探讨它们在后囊混浊形成中的作用及其影响细胞增殖的机理。方法采用ＭＴＴ比色法测定ＩＬ－１及ＴＮＦ－α对细胞增殖的影响,用荧光指示剂Ｆｕｒａ－２测定它们对胞浆内游离Ｃａ２＋的影响。结果ＩＬ－１１０２～１０５ｎｇ／ｍｌ、ＴＮＦ－α１０２～１０４Ｕ／ｍｌ可显著促进细胞增殖,并增加胞浆内游离Ｃａ２＋浓度。结论推测ＩＬ－１、ＴＮＦ－α参与了白内障术后的后囊混浊形成;它们影响细胞增殖的作用机理之一是通过胞浆内游离Ｃａ２＋。     

体外模拟牛眼晶状体后囊膜混浊及普拉洛芬眼液对其细胞融合影响的实验研究

目的探讨晶状体后囊膜上晶状体上皮细胞的增生分化规律和普拉洛芬滴眼液对晶状体后囊膜混浊（PCO）的抑制作用.方法将牛后囊膜晶状体上皮细胞面朝上平铺于25 ml培养瓶底部,分别加入含0%、10%、20%胎牛血清的DMEM培养液培养1～5周,计数后囊膜晶状体上皮细胞覆盖率,并用Giemsa染色和扫描电镜观察其形态.同时用相当于普拉洛芬滴眼液滴眼后4 h在房水中的浓度（0.23 mg/L）作用于组织培养模型,与对照组比较,观察其对后囊膜晶状体上皮细胞融合时间的影响.结果赤道部的晶状体上皮细胞向晶状体后囊膜增生、迁徙,晶状体后囊膜形成明显的混浊和皱缩;后囊膜晶状体上皮细胞融合天数随血清浓度的升高而缩短;浓度为0.23 mg/L的普拉洛芬对后囊膜晶状体上皮细胞的融合有明显抑制作用.讨论体外模拟PCO的组织培养是研究后发性白内障的有效方法.普拉洛芬是一种安全、有效降低PCO发生率的药物,可作为白内障术后的常规用药.     

Ascorbic acid. Cytotoxic effect on cultivated bovine lens epithelium cells]

Ascorbic acid is one of the main components (1.16 mM/l) of the aqueous humor. The molarity of this molecule is 25 times higher than in the plasma of the cow, man or horse. Now the question arises as to which function ascorbic acid has in this extremely high concentration referring to the proliferation of the lens epithelial cells. Thus, the effect of ascorbic acid was investigated upon bovine lens epithelial cells (BLEC) in the range of 0-3 mM/l. These cells were cultivated under various culture conditions (serum-free, serum-containing, aqueous-humor-containing medium) and also incubated with such mitogens as retinal extract (RE), crude endothelial cell growth factor (cECGF), basic fibroblast growth factor (bFGF) or with calcium. In each culture condition 1 mM/l ascorbic acid caused remarkable inhibition of the proliferation of BLEC. Higher concentrations (> 1.5 mM/l) revealed cytotoxic effects. These effects were independent of small variations in the pH value caused by ascorbic acid. In addition, the effect of 2 mM/l ascorbic acid in combination with catalase in a concentration of 500 Um/ml and 1000 Um/ml, respectively, was investigated. It could be shown that catalase is capable of preventing the cytotoxic effect of ascorbic acid. These results show the inhibitory effect of ascorbic acid in its physiological concentration in the proliferation of BLEC.     

双氯芬酸钠水分离对晶状体上皮细胞融合的影响

目的研究双氯芬酸钠水分离及联合转核技术对残留后囊膜上的晶状体上皮细胞（LECs）融合的影响。方法将猪眼后囊膜LECs进行体外原代培养,分为对照组、加药组（双氯芬酸钠水分离）、加药转核组（双氯芬酸钠水分离联合核旋转）,观察LECs不同时期的增生、分化、融合情况及各组细胞的融合时间。结果加药组和加药转核组的细胞融合时间较对照组延长,差异有统计学意义（P〈0.01）,加药组的细胞出现核固缩现象,加药转核组残留细胞团明显减少。结论双氯芬酸钠水分离能延缓后发性白内障（PCO）的发生,双氯芬酸钠水分离联合转核能有效降低PCO的发生率。     

Effect of heparin on proliferation of cultivated bovine lens epithelial cells]

The treatments proposed to date for the prevention of secondary cataract have shown limited efficacy or have not been satisfactory due to ocular toxicity. Since it has been demonstrated that heparin can inhibit the proliferative activity of smooth muscle cells and fibroblasts in vitro and in vivo, we examined the effect of heparin at concentrations ranging from 20 to 200 micrograms/ml on the proliferation of cultured bovine lens epithelial cells (BLEC) under various culture conditions: (1) serum-free medium (SFM); (2) SFM + aqueous humor 1:1; (3) SFM +1 and 10% fetal calf serum; (4) SFM +1% retinal extract; (5) SFM +50 micrograms/ml endothelial cell growth factor; (6) SFM +10 ng/ml epidermal growth factor; (7) SFM +10 ng/ml basic fibroblast growth factor. Heparin caused no cytotoxic effects in any of the experiments. With medium 2 and 3, heparin caused dose-dependent inhibition of cell proliferation at concentrations ranging from 10 to 50 micrograms/ml. Cells cultivated in medium 4-7 with the addition of 50 micrograms/ml heparin revealed increased proliferative activity when compared with the corresponding controls. The antiproliferative activity on BLEC in medium containing aqueous humor suggests that heparin is a valuable tool for the prevention of secondary cataract in vivo.     

维拉帕米对人晶状体上皮细胞整合素表达的抑制作用

目的研究钙通道阻滞剂维拉帕米对人晶状体上皮细胞（LECs）株SRA01/04整合素表达的影响。方法对人LECs株SRA01/04进行培养并传代,分别以0.02、0.04、0.08mmol/L的维拉帕米作用于SRA01/0424h,经流式细胞仪检测SRA01/04各整合素的阳性表达率。结果整合素α2、α3、α5、β1、β2在人LECs株SRA01/04中呈阳性表达,维拉帕米对其表达具有抑制作用,并随药物浓度的增加而逐渐增强（P〈0.05）。结论钙通道阻滞剂维拉帕米对LECs整合素的表达具有抑制作用,可能阻碍整合素介导的LECs黏附、移行和增生,有望成为防治后发性白内障的有效药物。     

Localization of thrombomodulin in the anterior segment of the human eye

PURPOSE: To localize thrombomodulin (TM) in the anterior segment of the human eye. TM is a vascular endothelial cell surface glycoprotein that acts as a cofactor for the thrombin-catalyzed activation of the anticoagulant protease zymogen, protein C. METHODS: Immunohistochemical methods were used to detect TM expression in corneal epithelial cells, the lens epithelial cells, and other cells in the anterior segment of the eye. The expression of TM was also examined in cultured human corneal epithelial cells. RESULTS: TM was expressed in corneal epithelial cells, corneal endothelial cells, and nonpigmented ciliary epithelial cells, which are in direct contact with the aqueous humor. TM was also expressed in cultured corneal epithelial cells and showed cofactor activity. The amount of the antigen in the cultured corneal cells was approximately one tenth of that in human umbilical vein endothelial cells, but its specific cofactor activity (75%) was comparable to that of TM in human umbilical vein endothelial cells. The trabecular meshwork and endothelial cells lining Schlemm's canal also showed positive staining for TM. CONCLUSIONS: The TM in the cells that are in contact with the aqueous humor appears to be involved in maintaining the fluidity of the aqueous humor. In contrast, TM in cells that are not in contact with the aqueous humor may function in regulating cell proliferation and/or differentiation.