γ射线诱发培养淋巴细胞TCR基因突变的剂量-效应关系

目的　探讨γ射线诱发培养淋巴细胞T细胞受体 (TCR)基因突变的剂量 效应关系。方法　以不同剂量 (0～ 4 0Gy)的γ射线照射新鲜分离的健康成人外周血淋巴细胞 ,植物血凝素脉冲式刺激 2h后 ,用白细胞介素- 2培养 7d ,用单克隆抗体直接免疫荧光标记流式细胞术检测TCR基因突变频率 (TCRMF)。应用SAS统计软件包编写的程序进行辐射剂量 效应曲线的拟合和筛选。结果　培养 7d后 ,TCRMF (10 -4)随照射剂量D (Gy)的增加而增高 ,最佳拟合曲线为二次多项式模型 ,其方程式可描述为 :TCRMF =2 . 74+ 6. 0 5D + 7 60D2 (F =3 62. 3 7 16,P <0 . 0 1,经校正的R2 =0 . 9999)。结论　TCR基因突变作为一种有潜力的生物剂量计可能用于近期辐射照射生物剂量的估算。     

离体诱导淋巴细胞TCR基因突变检测实验条件的探讨

目的完善外周血淋巴细胞TCR基因突变的离体培养方法,为其作为生物剂量计提供试验模型。方法以不同剂量(0～8 Gy)的X射线照射新鲜分离的健康成人周围血淋巴细胞,用不同浓度的植物血凝素(PHA-P)、重组人白细胞介素2(rhIL2)协同刺激,37℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养7 d,流式细胞术检测。结果PHA-P及rhIL2协同刺激,细胞的活化增殖要优于PHA-P单一刺激后再加入rhIL2。TCR基因位点突变频率(TCRMF)在0～8 Gy剂量范围内,剂量效应拟和曲线以二次多项式模式相关性最好。结论采用本实验改进的方法,可缩短TCR基因突变表型表达的时间,可为尽快估算受照人员的辐射生物剂量提供理论依据。     

小剂量钴—60—γ线照射诱发人淋巴细胞微核的剂量效应

目前国内外对于大剂量(0.25～5.0Gy)照射诱发微核的剂量效应已有不少报道,但(?)Gy 以下的小剂量照射,诱发微核的剂量效应还未见有报道。由于大多数事故受照是属于(?)Gy 以下的低剂量照射,如果用高剂量范围的刻度曲线去估算低剂量受照人员的吸收剂量,这显然是不可靠的。本实验是     

X射线诱发大鼠淋巴细胞TCR基因突变的剂量-效应关系

目的 探讨X射线诱发大鼠外周血淋巴细胞TCR基因突变的剂量-效应关系。方法 以不同剂量(0~3Gy)的X射线照射新鲜分离的大鼠外周血淋巴细胞,PHA、ConA、IL-2协同刺激培养7d,流式细胞仪检测TCR突变频率。结果 大鼠淋巴细胞体外培养7d后,TCR突变频率随照射剂量的增加而增加,二者存在良好的剂量-效应关系,最佳拟合曲线为二次多项式模式,回归方程为:TCRMF=1.615+9.979D+1.712D²(F=146.781,P<0.01,R_adj²=0.864)。结论 本研究结果显示:X射线诱发大鼠外周血淋巴细胞TCR基因突变频率与照射剂量间存在良好的剂量-效应关系。     

60 Co γ射线照射离体人血建立染色体畸变的剂量-效应曲线

目的建立^60Coγ射线照射离体人血诱发染色体畸变的剂量一效应曲线。方法采集健康成人外周静脉血，^60Coγ射线照射，照射吸收剂量为0～5．0Gy，剂量率为0．38Gy／min。采用开始加入秋水仙碱法进行细胞培养48h。制片后观察淋巴细胞中染色体型非稳定性畸变，包括双着丝粒体、着丝粒环、无着丝粒断片等。用双着丝粒体加着丝粒环对剂量进行曲线拟合。结果离体外周血经^60Coγ射线照射后，在0～5.0Gy范围内“双 环”率与剂量在不同剂量范围建立的回归方程为：0～0．5Gy，y=0.00217 0.08283D^2；0～1．0Gy，y=0.00146 0．09310D^2；0～5，0Gy，y=0．04851D^2.18601；0.5-5．0Gy，y=0.04848D^2.18645。结论成功建立了^60Coγ射线照射离体人外周血诱发染色体畸变剂量效应曲线。     

快中子与60Co-γ射线诱发人淋巴细胞生物效应研究

目的 18MeV中子和60Coγ射线照射离体人血淋巴细胞,建立染色体畸变和淋巴细胞微核的剂量-效应曲线;计算中子染色体畸变和微核的相对生物效应.方法 中子和60Coγ射线照射离体人血,吸收剂量率都为O.2Gy/min,吸收剂量为0.5～3.O Gy.记录染色体型畸变和双核淋巴细胞的微核,分别对双着丝粒体+着丝粒环和微核做曲线拟合,并计算中子的RBE.结果 中子和60Coγ射线照射离体人血诱发的染色体畸变(双+环)和淋巴细胞微核,呈良好的剂量-效应关系.中子诱发染色体畸变和微核的RBE值都随吸收剂量的增加而减少,在0.5～3.O Gy 范围内,诱发染色体(双+环)的RBE值是3.59～1.77;诱发微核的RBE值是2.91-1.24.结论 快中子照射离体人血淋巴细胞产生的染色体畸变(双+环)和微核的剂量一效应关系都符合线性平方模型.中子与60Coγ射线相比较,在照射剂量较低时,有较高的生物效应.     

γ-H2AX的辐射剂量效应关系研究

目的用共聚焦显微镜分别检测在整体和离体条件下电离辐射强度与γ-H2AX的剂量效应关系以及整体与离体之间的一致性关系。方法用137Cs源分7个剂量点(0、0.5、1、2、4、6、8Gy)照射Wister雌性大鼠外周全血,提取淋巴细胞,利用共聚焦显微镜检测电离辐射与γ-H2AX的剂量效应关系。结果在离体和整体条件下均发现电离辐射与γ-H2AX存在剂量反应关系,拟合的剂量反应曲线分别为:Y整=0.096+0.13X;Y离=0.040+0.21X。并且在离体和整体两种条件下的剂量反应关系具有一致性(R=0.98)。结论γ-H2AX与照射剂量之间存在正相关,相关系数R大于0.98。表明γ-H2AX检测有作为快速辐射生物剂量指标的可能性,可以用离体照射实验替代整体照射。     

Calyculin A诱导早熟染色体与低剂量电离辐射剂量-效应关系

目的 探讨CalyculinA诱导早熟染色体凝集技术作为低剂量电离辐射生物剂量计的可行性。方法 取健康成年人的抗凝外周静脉血,用X射线分别以0、0.1、0.25、0.5、0.75和1.0Gy照射。照射后将血样接种于RPMI1640培养基中,于37℃、5% CO₂恒温培养箱内培养48h,当培养24h时加入秋水仙素,终止培养前2h加入CalyculinA诱导早熟凝集染色体,收获制片并用Giemsa染液染色,观察G1、G2/M-PCC细胞中总畸变率、断片率、双着丝粒体加着丝粒环率与辐射剂量的效应关系。结果 用CalyculinA可成功诱导人外周血淋巴细胞产生PCC,且总畸变率、断片率、双着丝粒体加着丝粒环率随照射剂量的增加而增加,最佳拟合曲线为二次多项式模式。结论 CalyculinA诱导PCC技术可以作为一种方法来估算低剂量受照者的辐射剂量,但是需要更多的资料来完善。     

鹤壁60Co源放射事故受照者的生物剂量估算

目的估算一例河南鹤壁60Co源放射事故受照者的生物剂量。方法利用临床应急生物剂量指标进行初步估算。受照后33d取血培养，进行淋巴细胞染色体畸变分析，以第一次有丝分裂细胞双着丝粒体加着丝粒环(“双 环”)畸变频率作为进一步生物剂量估算依据。用“双 环”畸变在细胞间的泊松分布情况，检验照射的均匀性。结果根据临床表现粗略估算全身等效剂量为1～2Gy，右手局部皮肤剂量≥20Gy。依据“双 环”畸变频率估算全身等效剂量为1．54Gy，95％可信限下限值为1．32Gy，上限值为1．75Gy。检验证实“双 环”畸变在细胞间的分布大体符合泊松分布。结论综合判断患者受到比较均匀的照射，确诊为轻度骨髓型急性放射病伴急性放射性右手皮肤损伤Ⅳ。。     

高剂量率60Coγ射线照射离体人血建立染色体畸变的剂量-效应曲线

目的　高剂量率 6 0Coγ射线照射离体人血建立染色体畸变的剂量 -效应曲线。方法　6 0 Coγ射线照射离体人血 ,吸收剂量为 1 0～ 8 0Gy ,剂量率为 3 0Gy/min ,染色体采用微量法 ,培养开始加秋水仙碱 ,主要记录染色体型畸变的非稳定性畸变 ,包括无着丝粒断片、微小体、无着丝粒环、双着丝粒体和着丝粒环 (双 +环 ) ,对实验数据做曲线拟合 ,并检验回归系数的显著性和曲线的拟合度。结果　6 0 Coγ射线照射离体血诱发的“双 +环” ,在 0～8 0Gy范围内 ,呈良好的剂量 -效应关系 ,拟合的最佳回归方程为Y =0 2 69792D + 7 73 0 83× 10 - 2 D2 (R =0 99198)。结论　高剂量率 6 0 Coγ射线照射离体人血 ,采用微量法培养染色体 ,在 0～ 8 0Gy范围内 ,“双 +环”最佳数学模式为Y =bD +cD2 。     

Comparison of cellular and whole-animal bioassays for estimation of radiation effects in the polychaete wormNeanthes arenaceodentata (Polychaeta)

The polychaete wormNeanthes arenaceodentata was used in experiments to determine possible relationships between short-term genotoxicity tests and reproductive and lethal consequences of exposure to ionizing radiation. Groups of juvenileN. arenaceodentata received one of four different radiation doses (2, 4, 8, and 16 Gy) to determine dose-effect estimates for chromosomal aberration induction, and groups of both adult and juveniles received one of seven different radiation doses (1, 4, 8.4, 46, 102, 500, and 1000 Gy) to determine dose-effect estimates for reproduction, mortality, and life span. Effects on reproduction and genetic material were observed at the lowest doses and in the same range; detrimental reproductive effects were observed at 1 to 4 Gy, and the frequency of chromosomal aberrations were significantly increased at 2 Gy. Only high doses resulted in acute mortality (>500 Gy) and decreased life span (>100 Gy).Dose-effect estimates for chromosomal aberration induction were dependent on radiation dose and on the stage of the cell cycle at the time of irradiation. Dose-effect estimates for reproduction were dependent on dose and the potential for repopulation of gonadal tissue. It is concluded that short-term genotoxicity test can be predictive of detrimental reproductive effects in those model systems for which basic cell kinetics and reproductive parameters are well known.     

早熟染色体与辐射剂量-效应的关系

目的 探讨花萼海绵体诱癌素A（CalyculinA）诱导的早熟染色体凝集（PCC）与辐射剂量之间的剂量-效应关系。方法 取健康人的抗凝外周静脉血，用^137铯γ射线分别照射0、0．5、1．0、2．0、3．0、4．0、5．0Gy，观察CalyculinA诱导的PCC，并用C显带方法染色。结果 CabrculinA诱导的PCC总畸变率、断片率、双着丝粒体加环状染色体率与外照射剂量之间有良好的二次方程关系。结论 CalyculinA诱导PCC可以作为生物剂量计使用。     

不同射线诱发人外周血淋巴细胞微核的剂量-效应关系

[目的]比较60Coγ射线、X射线和17Csγ射线对人外周血淋巴细胞徼核率的影响,并探讨其在低剂量受照者剂量估算中的应用意义.[方法]在0~1.00Gγ的剂量范围内,用60Coγ射线、X射线和137Csγ射线(剂量率分别为0.440、0.073、0.810Gy/min)照射离体人血,采用胞质分裂阻断微核法(cytoki...     

放射治疗对乳腺癌患者外周血免疫系统相关指标的影响

目的:研究分析放射治疗对乳腺癌患者免疫系统相关指标的影响。方法:选取在医院就诊的6例病理诊断为乳腺癌Ⅱ~Ⅲ期患者,将所有患者放射治疗前(0 Gy)静脉血样本定义为对照组、放射治疗20 Gy和50 Gy照射后静脉血样本分别定义为20 Gy组和50 Gy组,于放射治疗10次后、25次后采集不同放射治疗累积剂量24 h后静脉血8 ml;采用流式细胞术检测所有受检者不同剂量放射治疗后外周血淋巴细胞亚群百分数、外周血淋巴细胞凋亡及细胞周期的改变;实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)法检测外周血淋巴细胞微小核糖核酸(miRNA)的改变。结果:乳腺癌患者20 Gy组和50 Gy组照射后与对照组比较,淋巴细胞亚群CD3⁺、CD4⁺/CD8-和CD4⁺/CD8⁺表达水平均呈下调趋势,CD4^-/CD8⁺呈上升趋势,但差异均无统计学意义;20 Gy组T细胞抗原受体(TCR)/CD3明显下调,与对照组比较差异有统计学意义(Z=-2.008,P<0.05),50 Gy组TCR/CD3有所回升,但差异无统计学意义。不同剂量的两组照射后乳腺癌患者mi RNA-150、mi RNA-210表达水平随剂量增加呈降低趋势,50 Gy组表达水平明显降低,与对照组相比差异有统计学意义(Z=-2.242,Z=-2.402;P<0.05)。结论:放射治疗未引起乳腺癌患者明显的免疫功能抑制,可能是通过改变mi RNA-150、mi RNA-210的通路而抑制肿瘤的生长。     

枸杞多糖对慢性辐射小鼠细胞凋亡及bc1-2基因表达的影响

目的:探讨枸杞多糖(LBP)对辐射小鼠细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2表达的影响。方法:以水提取-乙醇沉淀法制备枸杞多糖,并制成0.8%的饲料,给予受试小鼠(枸杞多糖组)。正常对照组、辐射对照组给予普通饲料。除正常对照组外,另两组均用60Coγ射线对动物进行全身性照射,每天照射1次,每天照射剂量为0.084Gy,每周照射5d,连续照射6w,照射总剂量为2.52Gy。检测骨髓微核率、睾丸精母细胞染色体畸变、精子畸形率、肝细胞caspase-3mRNA表达水平、细胞凋亡及凋亡相关基因bc1-2表达等指标。结果:LBP可使辐射引起的微核率、染色体畸变、及精子畸形率显著降低,骨髓细胞增殖活性提高,凋亡率降低,使辐射小鼠bc1-2基因表达提高、caspase-3mRNA表达水平降低。结论:枸杞多糖的抗辐射作用与其调控细胞bc1-2基因表达,影响细胞凋亡有关。     

不同早熟凝集染色体方法对60Co γ射线照射的剂量-曲线影响的研究

目的 研究早熟凝集染色体(PCC)方法学的常规法和改进后的方法对⁶⁰Co γ射线剂量-效应曲线影响,为事故应急选择快速和准确的生物剂量估算方法。方法 取3名23~28岁的男性肘静脉血,在⁶⁰Co γ射线照射(0、1.0、5.0、10.0、15.0、20.0 Gy,吸收剂量率0.635 Gy/min)的条件下,以常规PCC培养方法为对比;比较2种方法(常规法和改进法)的50 h和60 h的2个培养时间所产生剂量-效应曲线的关系;以另一实验室照射10.0 Gy(吸收剂量率0.670 Gy/min)所产生的PCC环结果,用上述制作的剂量-曲线估算剂量作验证。结果 ①常规50 h培养方法15.0、20.0 Gy点所获PCC细胞数不能满足统计学要求,常规方法60 h、改进法50和60 h的3个培养方法收获的细胞数均可满足统计学要求,故后3个方法均取作剂量曲线;②后3个培养方法的PCC环与受照剂量的相关系数其系数间相当接近(均0.996以上、均P < 0.01),直线回归方程成立,相关指数亦相当接近,剂量-效应拟合均为线性模式,回归系数间差异无统计学意义(P < 0.05),回归直线的形态基本重叠;③验证:本研究的3条剂量-曲线估算受照10.0 Gy的结果误差均 ≤ 8%,均符合生物学实验一般允许的15%。结论 本研究的3个方法制作的3条曲线均可用于大剂量电离辐射损伤的生物剂量估算,但以改进法的50 h培养速度快,可作为事故应急首选的方法。     

低剂量氚水对人体外周血淋巴细胞的影响

目的 研究低剂量水平下氚水β射线的生物效应。方法 人体外周血与氚水混合,分别培养24 h和48 h,72 h后收获细胞。通过染色体非稳定性畸变的变化,得到与氚水作用后染色体畸变的频率,以⁶⁰Co γ射线照射后的细胞效应作为参照,得到相同剂量下氚水的相对生物效应值。结果 拟合实验结果得到氚水β射线的最佳回归方程是Y=0.001+0.062D+0.053D²;比较氚水与γ射线的最佳回归方程可知,方程系数的主要区别在a值,氚水β射线的RBE最大值为2.21出现在0.06 Gy,随着剂量的增大RBE值先减小而后稳定。低剂量情况下淋巴细胞微核剂量-效应关系符合线性拟合方程Y=C+αD,得到⁶⁰Co γ射线对HTO β射线诱发微核的RBE值在1.46~2.17之间,与染色体畸变所得RBE值及变化趋势一致。结论 在低剂量情况下,β射线诱发畸变的能力更强,HTO β射线在一个电离辐射径迹上使两个染色单体各产生一个损伤的效率更高。     

不同剂量电离辐射对大肠癌HCT-8细胞P-gp表达的影响

目的 通过检测不同剂量电离辐射对大肠癌细胞多药耐药基因MDR1的蛋白表达产物P-糖蛋白(P-gp)的影响,探讨逆转肿瘤多药耐药的方法。方法 采用流式细胞术检测P-gp蛋白表达的变化。结果 与假照组相比,2Gy大剂量照射后P-gp阳性细胞百分率明显增加(P<0.01),先给予低剂量照射(0.05Gy,0.1Gy)后,再给予大剂量照射,P-gp阳性细胞百分率亦有明显增加(P<0.05),0.2Gy+2Gy组P-gp阳性细胞百分率明显增加(P<0.01)。与单纯2Gy大剂量照射组比较,0.1Gy+2Gy组P-gp阳性细胞百分率明显降低(P<0.05)。结论 低剂量辐射可以逆转大剂量辐射所致的多药耐药性。