脂联素对自发性2 型糖尿病大鼠肝脏IRS-1 磷酸化的影响及其可能机制

摘要：目的探讨脂联素对自发性2型糖尿病（OLETF）大鼠肝脏胰岛素信号通路的影响及其分子信号机制。方法自发性
2型糖尿病大鼠OLETF鼠20只,同系健康对照LETO鼠10只。于8周和32周龄分别宰杀。检测空腹血糖、血浆胰岛素、
脂联素、血脂水平,并以ELISA、免疫印迹和免疫组化法检测肝脏脂联素、胰岛素受体底物-1酪氨酸磷酸化水平(py-IRS-1)
以及IKKβ和NFkB表达水平。结果OLETF鼠血浆脂联素水平在8周龄和32周龄均显著低于LETO鼠(P<0.05)。32周龄
时OLETF鼠血清胰岛素、TG、FFA、ISI均显著升高(P<0.05)。脂联素水平与FBG、血清胰岛素、TG、FFA、ISI数显著相关（P
均<0.01）。OLETF鼠肝脏脂联素和py-IRS-1水平在8周龄和32周龄均显著低于LETO鼠,IKKβ和NFkB水平也显著升高
(P<0.01)。py-IRS-1与肝组织脂联素、IKKβ和NFkB变化显著相关(P<0.01)。32周龄时脂联素水平与NF-κB和py-IRS-1
显著负相关（P<0.05）。结论OLETF鼠脂联素可能通过NFkB通路影响肝脏IRS-1酪氨酸磷酸化水平,导致肝脏的胰岛
素信号传导障碍及糖、脂代谢紊乱,参与2型糖尿病的发生发展。     

脂联素受体2在糖尿病大鼠肝脏中的表达

目的探讨脂联素受体2在1型和2型糖尿病大鼠肝脏中的表达差异以及与糖尿病发病的可能机制的关系。方法 30只SD大鼠分为3组：对照组（con）,腹腔注射等体积量枸橼酸缓冲液;1型糖尿病组（1-DM）：一次性腹腔内注射高剂量链脲佐菌素60 mg/kg;2型糖尿病组（2-DM）：大鼠高脂饲料喂养1个月,禁食12 h后腹腔注射低剂量链脲佐菌素35 mg/kg,继续高脂饮食喂养。采用ELISA试剂盒检测血清胰岛素和脂联素水平,免疫组化法分析肝脏脂联素受体2（Adipo R2）的表达,HE染色观察各组肝脏病理改变。结果糖尿病组大鼠血糖均高于对照组,与con组（8239±2259）ng/ml比较,1-DM组血清脂联素降低[（5266±1985）ng/ml,P〈0.05],肝Adipo R2表达无明显改变[（13.39±3.09）%,（11.92±5.62）%,P﹥0.05];与con组（8239±2259）ng/ml和1-DM组（5266±1985）ng/ml比较,2-DM组血清脂联素（3533±1048）ng/ml降低（P〈0.05）,肝Adipo R2表达升高（69.76±10.8）%,P〈0.01,且有脂肪变性等损伤。结论肝Adipo R2在1-DM大鼠肝脏的表达与正常组无异,在2-DM大鼠肝脏高表达,与2-DM肝脏的损伤和脂代谢异常相关。     

六味地黄丸对自发性2型糖尿病大鼠血浆脂联素水平的影响

目的 观察六味地黄丸对自发性2型糖尿病大鼠模型血浆脂联素水平的影响.方法 自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠40只,随机分为六味地黄丸干预组和对照组,LETO鼠10只作为正常对照组.干预组从8周龄起以六味地黄丸2.4 mg·kg-1·d-1灌胃给药,其余两组以等量清水灌胃.定期OGTT试验,监测各组大鼠摄食及体质量增长情况,每周称量大鼠体质量和摄食量.于8、32和40周龄时分批宰杀大鼠.检测血浆脂联素、血浆胰岛素水平.结果 与对照组相比,干预组的血浆脂联素水平均明显增加.对照组血浆脂联素水平与LETO组相比显著降低.结论 OLETF鼠血浆脂联素水平与胰岛素敏感性呈正相关.六味地黄丸早期干预能明显增加OLETF鼠血浆脂联素水平,改善OLETF鼠胰岛素抵抗.     

脂联素与2型糖尿病

脂联素(adiponectin)是由脂肪细胞所专一分泌的一种细胞因子，具有抗炎、抗动脉粥样硬化、维持机体的能量平衡、增加胰岛素的敏感性、抗胰岛素抵抗等生物学效应。胰岛素抵抗是2型糖尿病发病环节中的一个重要方面，因此脂联素在2型糖尿病的发病中具有重要的作用。     

1型和2型糖尿病大鼠肺组织脂联素受体的表达

目的观察1型糖尿病（1-DM）和2型糖尿病（2-DM）大鼠肺组织脂联素受体（AdipoRl和AdipoR2）的表达情况。方法sD大鼠随机分为1一DM组（一次性腹腔内注射高剂量链脲佐菌素建模,普通饮食,8周后处死）、72h组（一次性腹腔内注射高剂量链脲佐菌素建模,普通饮食,72h后处死）、2-DM组（高脂饮食配合一次性腹腔内注射低剂量链脲佐菌素建模,8周后处死）和对照组（一次性腹腔内注射等容量枸橼酸缓冲液,普通饮食）。分别检测血清胰岛素和脂联素水平以及肺组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性以及AdipoRl和AdipoR2的表达,HE染色观察肺组织病理学改变。结果与对照组比较,1-DM组和2-DM组血清脂联素水平均显著降低（P〈0．05）;2-DM组血清脂联素水平显著低于1-DM组（P〈0．05）;1-DM组和2-DM组肺组织AdipoRl表达及SOD活性均显著低于对照组,而72h组与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;1一DM组和2-DM组肺组织有基膜增厚、血管堵塞等病理学改变。结论肺组织脂联素受体表达以AdipoRl为主,高血糖可引起肺损伤、肺AdipoRl表达及SOD活性降低。     

2型糖尿病大鼠心肌脂联素及其受体1的表达

目的 观察2型糖尿病大鼠心肌病变中心肌脂联素(adiponectin,APN)以及心肌脂联素受体1(adiponectin receptor 1,AdipoR1)的表达情况,探讨心肌APN、AdipoR1的表达与糖尿病心肌病变的关系.方法 23只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组,n=10)和糖尿病组(B组,n=13).用高糖高脂饲料加小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型.喂养3个月后应用免疫组织化学方法测定心肌AdipoR1的表达.用酶联免疫吸附法检测血浆和心肌APN水平.通过颈动脉插管测等容舒张期左室内压力下降最大速率(-dp/dtmax)和等容收缩期左室内压上升的最大速率(+dp/dtmax).结果 与A组比较,B组糖尿病大鼠3个月时出现心脏重量/体重水平升高(P<0.05),等容舒张期左室内压降低,血浆和心肌APN水平以及心肌AdipoR1表达水平降低(P<0.05). 结论 2型糖尿病大鼠心肌APN及其AdipoR1表达水平的降低可能与糖尿病心脏肥大和心功能降低有关.     

黄连素对2型糖尿病大鼠脂联素基因表达的影响

目的观察黄连素对高脂膳食加小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病(2-DM)大鼠胰岛素抵抗指数及肾周脂肪组织脂联素基因mRNA表达的影响。方法选用高脂饲料加小剂量STZ建立2-DM大鼠模型共40只,将2-DM大鼠随机分为模型组(水)和黄连素高、中、低剂量组(0.20、0.10、0.05g/kg),每组10只,另选10只大鼠为正常组,各组灌胃8周后,空腹取材,采用逆转录聚合酶链式反应检测肾周白色脂肪组织脂联素基因mRNA水平,放射免疫法测定空腹胰岛素并计算胰岛素抵抗指数(IRI)。结果正常对照组大鼠与2型糖尿病模型组大鼠脂联素基因表达、IRI间比较差异有统计学意义(P<0.01);模型组与黄连素高、中剂量组大鼠脂联素基因表达、IRI间差异有统计学意义(P<0.01)。结论黄连素可增加2-DM大鼠脂联素基因mRNA的表达,降低IRI。     

运动对2型糖尿病大鼠脂联素和 GLUT4基因表达的影响

目的 观察游泳运动对2型糖尿病大鼠肾周脂肪脂联素和骨骼肌GLUT4基因表达的影响。方法 采用小剂量链脲佐菌素加高脂高热量饲料喂养的方法建立Wistar大鼠2型糖尿病模型，给予游泳运动训练8周，检测大鼠肾周脂肪脂联素mRNA和骨骼肌GLUT4mRNA表达的变化以及血糖、胰岛素、血脂等代谢指标。结果 糖尿病模型组肾周脂肪脂联素mRNA和骨骼肌GLUT4 mRNA表达显著降低，分别较正常对照组降低了45％（P〈0．01）和43％（P〈0．01），空腹血清胰岛素，甘油三酯、总胆固醇和游离脂肪酸水平较对照组显著升高：游泳运动组脂联素和骨骼肌GLUT4mRNA的表达较模型组显著升高，分别为模型组的1．39倍（P〈0．05）和1，62倍（P〈0．01），接近对照水平，空腹胰岛素较模型组显著降低（P〈0．01），甘油三酯、总胆固醇和游离脂肪酸水平均显著低于模型组（P〈0.05或P〈0．01）。结论 游泳运动可能通过提高脂肪脂联素和骨骼肌GLUT4 mRNA的表达，改善胰岛素抵抗。     

银杏叶提取物对2型糖尿病患者血清脂联素的影响

目的 通过观察银杏叶提取物对2型糖尿病患者血清脂联素水平的影响,探讨银杏叶提取物对2型糖尿病胰岛素抵抗的影响.方法 健康对照组20例,2型糖尿病组40例随机分为常规治疗组20例、中西药治疗组20例,测定对照组及各治疗组治疗前后空腹血糖、空腹胰岛素、三酰甘油、血清脂联素的水平,计算各组胰岛素抵抗指数.结果 健康对照组的血清脂联素明显高于2型糖尿病组,治疗后中西药治疗组血清脂联素水平较常规治疗组升高更明显,差异均有显著性(P<0.01).结论 2型糖尿病胰岛素抵抗与血清脂联素水平呈负相关,银杏叶提取物能显著升高2型糖尿病患者血清脂联素水平,有减轻胰岛素抵抗的作用.     

2型糖尿病血清脂联素水平与糖脂代谢异常的相关性研究

目的研究武汉地区人群血清脂联素(adiponectin)水平与年龄、体重指数、血脂、血糖及胰岛素水平的关系.方法用ELISA 法测定55便单纯肥胖个体和55例2型糖尿病肥胖个体[体重指数(BMI)>25kg/m2]的血浆脂联素水平,运用电化学发光法测定空腹胰岛素(FIN),并测定空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG).结果肥胖2型糖尿病组与单纯肥胖组血清脂联素水平差异有显著性,单因素相关分析显示脂联素与TG,BMI和FPG呈负相关.在该年龄段中,脂联素水平与年龄关系不大.结论脂联素作为脂肪组织分泌的一种激素蛋白,其浓度变化与2型糖尿病的病变、血脂水平密切相关,脂联素的增加可能对抑制2型糖尿病的病程进展及血脂水平的升高有益.     

IRS-2G1057D突变与2型糖尿病

胰岛素受体底物（IRS）-2分子1995年由ARAKI等成功克隆。作为细胞质中的适配蛋白，IRS-2主要连接胰岛素受体和含SH2区蛋白，介导胰岛素（INS）、胰岛素样生长因子（IGF）-1等信号通道，调节细胞新陈代谢、生长和分化，是INS信号胞内传导的重要分子。人类IRS-2基因定位于13q8．6，有两个外显子和一个内含子，黄体酮可增强其转录，TZD（PPAPγ激动剂）能快捷明显地增加其表达。IRS-2^-/-动物具有2型糖尿病（T2DM）的全部特征，IRS-2基因突变可能参与人类T2DM的发生。     

运动对高脂血症大鼠肝脏胰岛素受体底物-2表达的影响

目的观察高脂血症大鼠运动后肝脏胰岛素受体底物-2(IRS-2)的变化,探讨IRS-2在运动改善大鼠糖脂代谢中的作用。方法将26只Wistar大鼠分为正常对照组(9只)、高脂膳食组(9只)和高脂膳食 60 min运动组(运动组,8只)。测定各组大鼠肝脏IRS-2 mRNA及蛋白表达的变化。结果①高脂膳食组的三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)显著高于正常对照组和运动组(P值均<0.05),运动组的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著高于高脂膳食组(P<0.05)。②高脂膳食组大鼠肝脏IRS-2 mRNA及蛋白表达水平显著低于正常对照组和运动组(P值分别<0.01、0.05)。结论高脂饮食在导致大鼠血糖、血脂代谢异常的同时,能降低大鼠肝脏IRS-2的表达,而运动能够增加大鼠肝脏IRS-2的表达,运动对血糖和血脂的改善作用可能与IRS-2的表达增加有关。     

老年2型糖尿病患者的脂类代谢分析

目的 探讨老年2型糖尿病患者血清脂类代谢变化及临床应用价值.方法 选择我所45例老年2型糖尿病患者作为病例组,同期58例老年人为健康对照组,分别检测血清脂类各项指标.结果 病例组与健康对照组相比较,血清甘油三酯明显增高,载脂蛋白(Apo)A明显降低,ApoB增高、ApoA/ApoB降低、高密度脂蛋白降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 血清脂类代谢指标作为老年2型糖尿病患者一项重要辅助指标,对于了解病情进展、指导临床诊断和治疗具有一定临床价值.     

Role of cyclooxygenase-2 in lipid metabolism in hepatic stellate cells

Hepatic stellate cells （HSCs） are a kind of adipocytes. In HSCs lipids mainly exist in the form of lipid droplets. They are abundantly found in the cytoplasm and their main constituents are triglycerides. Lipid metabolism in HSCs is closely related to its biological activity, however the mechanism of lipid droplets disappearance after HSC activation is not clearly established yet. Recent research shows that, cyclooxygenase-2 plays an important regulatory role in the lipid metabolism of HSCs. This paper seeks to review the subject based on studies that have been conducted so far to understand the role of cyclooxygenase-2 in the metabolism of lipids in HSCs     

津力达颗粒对1型糖尿病大鼠脂代谢及氧化应激的影响

目的 探讨津力达颗粒对1型糖尿病大鼠脂代谢及氧化应激的影响及其作用机制.方法 采用链脲佐菌素(STZ) 60 mg/kg腹腔注射后制备1型糖尿病模型.取造模成功的糖尿病雄性SD大鼠35只,随机分为模型组、津力达组(0.75,1.5,3.0 g/kg)和沙格列汀组(1 mg/kg),每组7只.并另设正常对照组.各组均灌胃给药,给药体积均为10 ml/kg,其中糖尿病模型组和正常对照组予等体积0.5％ CMC-Na.连续给药8周后检测血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)含量以及丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性.结果 同模型组相比,津力达组大鼠血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白-胆固醇显著降低,而高密度脂蛋白-胆固醇显著升高,血清超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性显著升高,丙二醛含量明显降低.结论 津力达颗粒能有效降低STZ诱导的1型糖尿病大鼠的血脂,并提高机体抗氧化能力.     

肝脂酶基因启动子区-514C/T多态性与2型糖尿病血脂代谢和胰岛素抵抗的相关性研究

目的探讨肝脂酶(HL)基因启动子区-514C/T多态性与2型糖尿病(DM)血脂代谢和胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法采用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)结合DNA测序技术,对2型DM患者284例(DM组)和糖耐量正常的健康对照者197例(NC组)进行HL-514C/T多态性检测,并观察该基因多态性与血脂代谢、IR的相关性。结果(1)DM组患者C/C基因型和C/T+T/T基因型频率分别为39.2%和60.8%,等位基因C和T频率分别为64.5%和35.5%,NC组分别为32.7%、67.3%和63.2%、36.8%,2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)DM组中C/T+T/T基因型患者三酰甘油水平为(2.93±1.37)mmol/L,C/C基因型患者为(2.07±1.82)mmol/L,2组比较差异有统计学意义(P<0.05),余指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。(3)DM组中C/T+T/T基因型患者与C/C基因型患者IR相关指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。(4)Logistic回归分析表明,DM组中HL-514C/T基因多态性、BMI与TG异常呈正相关(OR=3.042,95%CI 1.265⁷.317;OR=2.600,95%CI 1.5207.317;OR=2.600,95%CI 1.520⁴.447,P均<0.05)。结论 HL-514C/T基因多态性可能与2型DM的发生无相关性,与2型DM患者IR亦无关,但是HL-514T等位基因可能是2型DM患者发生高TG血症的危险因素。     

吸烟对男性糖尿病患者血脂代谢的影响

目的 探讨吸烟对男性糖尿病患者血脂代谢的影响.方法 选择男性糖尿病患者156例,按照吸烟情况分为不吸烟组、戒烟组、少量吸烟组(少量组)和大量吸烟组(大量组),询问患者糖尿病病史、吸烟(包括吸烟时间、每日吸烟支数、戒烟年限)、饮食及运动情况(每日运动时间和运动量),测量身高、体重、腰围、臀围和体脂分数等,检测血液中空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 hPBG)以及甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)水平,采用协方差分析和多元逐步回归法分析吸烟对血脂的影响.结果 与不吸烟组比较,大量组TG水平明显较高(P<0.05);协方差分析表明,大量组HDL-C水平较不吸烟组显著降低(P<0.05),但TC、TG和LDL-C间比较差异均无统计学意义(P>0.05);与戒烟组比较,少量组HDL-C显著较低(P<0.05),大量组TG水平较高而HDL-C水平较低(P<0.05);协方差分析表明,大量组TG和HDL-C水平与戒烟组比较差异均具有统计学意义(P<0.05).吸烟与HDL-C间呈显著负相关性(P<0.05).结论 吸烟是男性糖尿病患者体内脂代谢紊乱的独立危险因素,戒烟对调节脂代谢具有重要意义.     

脂联素在OLETF大鼠脂肪组织中的表达及意义

目的观察自发2型糖尿病动物模型OLETF大鼠脂肪组织脂联素mRNA表达的变化。方法选择4周龄的雄性OLETF大鼠20只,LETO大鼠10只作为对照组,饲养28周后,行口服葡萄糖耐量试验(OGTT);取空腹血清测甘油三酯、游离脂肪酸、胆固醇和血浆胰岛素水平;取大网膜脂肪组织,RT-PCR检测脂联素mRNA表达。结果OGTT试验结果显示,OLETF组大鼠负荷后0.5h和1h血糖明显高于LETO大鼠(P<0.05);OLETF组大鼠血清甘油三酯和血浆胰岛素水平显著高于LETO组(P<0.05)。OLETF组大鼠脂肪组织脂联素mRNA表达量明显低于LETO组(P<0.05)。结论OLETF大鼠脂肪组织脂联素mRNA表达水平明显降低。     

吉非替尼对糖尿病大鼠胰岛素敏感性的影响

目的 探讨吉非替尼对2型糖尿病鼠胰岛素敏感性的影响及其相关机制.方法 高糖高脂饲料喂养大鼠1个月后腹腔注射链脲霉素制成2型糖尿病鼠模型,分为生理盐水对照组、吉非替尼低剂量组(12.5 mg/kg)和高剂量(25 mg/kg)组、各干预8 d测量给药前、后以及停药7 d后大鼠的体重、空腹血糖和基础胰岛素水平;第二轮给药后留取肝脏组织,提取RNA进行半定量逆转录-聚合酶链反应比较胰岛素受体底物-1(IRS-1)和磷酸酰肌醇3激酶(PI3K)基因的表达.结果 成功建立2型糖尿病鼠模型,高剂量干预组大鼠的胰岛素敏感指数(ISI)较对照组显著增高(2.96±1.38比0.92±0.20,P<0.05),低剂量组和高剂量组差异无统计学意义(2.95±1.51比2.96±1.38,P>0.05);停药7 d后ISI无明显变化(2.03±0.72比2.99±0.63,P>0.05);3组大鼠体重改变差异无统计学意义(P>0.05);肝脏组织内IRS-1基因的表达对照组显著高于干预组[(6.3±2.4)%比(3.3±1.5)%,(3.2±1.8)%,P<0.05],低剂量组和高剂量组间差异无统计学意义(P>0.05);PI3K基因的表达干预组显著高于对照组[(1.27±0.73)%,(1.43±0.71)%比(0.41±0.24)%,P<0.05],低剂量组和高剂量组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 吉非替尼可以改善2型糖尿病鼠的胰岛素敏感性,停药2个半衰期之后该改善作用仍然存在.可能与增强胰岛素信号传导的PI3K/Akt途径相关,与体重无明显相关性.