1,25(OH)_2D_3干预实验性自身免疫性甲状腺炎TH1/TH2细胞失衡的研究

目的 观察1,25(OH)2D3对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)大鼠炎症及Th1/Th2细胞的干预效果.方法 48只雌性Wistar大鼠随机分为预防组(n=10),治疗组(n=10),阳性对照组(n=12)和阴性对照组(n=16).除阴性对照组外,其余大鼠均给予pTG免疫致敏.预防和治疗组每只大鼠使用维生素D3 5 μg/kg.,隔日腹腔注射,分别从建模0～6周和2～8周作干预,阴性对照组和阳性对照组应用花生油作对照.各组大鼠在处死后取甲状腺组织做病理学检查,检测血清自身抗体,及细胞冈子的改变.结果 阴性对照大鼠的甲状腺结构完整;阳性对照组大鼠甲状腺滤泡结构破坏严重,部分滤泡萎缩或消失,1,25(OH)2D3干预组大鼠甲状腺结构保持较完整,萎缩滤泡减少,淋巴细胞浸润不明显.与阴性对照组相比,预防组其自身抗体及细胞因子水平均无显著性差异;治疗组大鼠血清抗体水平与同时期的阳性对照相比水平明显降低(P<0.05),但较阴性对照明显升高(P<0.05);与阳性对照组相比,治疗组大鼠IFN-γ及IL-12水平显著下降(P<0.05),IL-4和IL-10水平升高(P<0.01).结论 在EAT大鼠建模开始就使用1,25(OH)2D3可使大鼠甲状腺组织保持较完整形态,维持血清抗体及细胞因子正常范围.对EAT大鼠,1,25(OH)2D3有可能减缓病理损害,调整细胞因子的失衡.     

多聚物-1反应性 T细胞对高眼压大鼠视网膜神经节细胞的保护机制

 目的 探讨多聚物-1（copolymer-1,Cop-1）反应性T细胞对高眼压大鼠视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells,RGCs）的保护机制。方法 大鼠后肢足垫注入0.2mgCop-1或磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution，PBS）后10d，取出腹股沟淋巴结，培养Cop-1反应性T细胞（TCop-1）或PBS对照组T细胞（TPBS），用逆转录聚合酶链反应测定gamma干扰素（interferon –gamma，γ-IFN）和IL-4 mRNA的表达水平，从而分析培养的T细胞亚型；39只高眼压大鼠随机分为2组，1组（n=19）腹膜内注射TCop-1，另1组 (n=20)注入TPBS作为对照，21d后观察RGCs的存活情况；用ELISA法测定T细胞上清液中脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）的分泌量。结果 免疫后21d，Cop-1组RGCs存活数目较PBS组多（t=8.0204,P<0.01）,TCop-1组gamma干扰素（interferon –gamma，γ-IFN）mRNA表达水平较PBS组高，而IL-4在两组间的表达差别无统计学意义。TCop-1在Cop-1刺激后脑源性神经营养因子分泌量为（3385.42±836.33）pg/mL，单纯TCop-1分泌量为（1026.24±135.10）pg/mL，而TPBS分泌量为（19.87±71.20）pg/mL。前者分泌量远大于后两者（F=175.66,P<0.01,P<0.01,单因素方差分析，Bonferroi）。结论 Cop-1反应性Th1细胞是发挥视神经保护作用的重要细胞，保护机制之一可能通过TCop-1在局部分泌BDNF来实现。     

急性高眼压致大鼠视网膜节细胞焦亡及抗Caspase-1处理的神经保护作用

目的 探讨在SD大鼠急性高眼压模型中,细胞焦亡及抗Caspase-1处理对视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGCs)的保护作用.方法 42只SPF级雄性SD大鼠采用随机数字表法分为正常对照组、急性高眼压模型组和VX-765(Caspase-1抑制剂)干预组,均以右眼为实验眼.模型组和干预组...     

应激性胃溃疡中Th1/Th2细胞与Th17/Treg细胞平衡的变化及凯时的干预作用研究

目的 探讨应激性胃溃疡中Th1/Th2细胞和Th17/Treg细胞平衡的变化及凯时的干预作用.方法 将40只雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组(N组)、应激组(S组)、脂微球空载体10 μg/kg组(L组)、凯时低剂量1μg/kg组(M组)和凯时高剂量10 μg/kg组(P组).大鼠经上述药物预处理后,制作应激性胃溃疡模型.造模完成后采集外周血分离淋巴细胞及血浆,采用荧光定量PCR方法分析Th1/Th2/Th17/Treg细胞相对应的转录因子T-bet/Gata-3/RORγt/Foxp3 mRNA的表达量,采用试剂盒检测血浆中的超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)浓度,并评价胃溃疡指数(UI)及制作病理切片.结果 与N组比,S组UI加重,血浆MDA含量增高,SOD活性降低(P＜0.05),Gata-3 mRNA表达上调(P＜0.05);RORγt与Foxp3 mRNA表达均下调(P＜0.05),而T-bet/Gata-3比值下降(P＜0.05).与S组比,P组UI减轻,血浆MDA含量降低,SOD活性升高(P＜0.05),Gata-3 mRNA表达下调(P＜0.05),Foxp3 mRNA表达上调(P＜0.05).结论 应激性胃溃疡的发生发展可能与Th1/Th2细胞和Th17/Treg细胞失衡有关.凯时具有抗氧化作用,能减少应激性胃溃疡的发生,且在急性应激早期可能有保护机体免疫功能的作用.     

共聚物-1直接免疫MPTP模型小鼠保护多巴胺能神经元

目的探讨共聚物-1(copolymer-1,Cop-1)直接免疫对小剂量1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)持续注射C57BL/6J小鼠黑质多巴胺(dopamine,DA)神经元保护作用的影响。方法雄性C57BL/6J小鼠分为MPTP模型组、造模后Cop-1免疫组、造模时Cop-1免疫组、造模前Cop-1免疫组、Cop-1免疫组和正常对照组。MPTP模型组动物仅接受MPTP注射,造模后Cop-1免疫组在MPTP连续注射7d后接受Cop-1免疫;造模时Cop-1免疫组在第1次MPTP注射后立即接受Cop-1免疫;造模前Cop-1免疫组在接受Cop-1免疫7d后开始注射MPTP,Cop-1免疫组仅接受Cop-1抗原免疫,正常对照组动物仅接受0.9%氯化钠注射液注射。MPTP连续注射24d后处死动物,取脑、脾。脑切片酪氨酸羟化酶免疫组化定量分析黑质DA神经元数;高效液相色谱法(high performance liquidchrom atography,HPLC)分析纹状体DA及其代谢产物含量;苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)观察脾病理学变化;分离造模后Cop-1免疫组、造模时Cop-1免疫组、造模前Cop-1免疫组和Cop-1免疫组动物脾脏并进行Cop-1致敏淋巴细胞培养。结果与正常对照组相比,MPTP模型组、造模后Cop-1免疫组、造模时Cop-1免疫组、造模前Cop-1免疫组动物脾脏HE染色未见明显差异。与Cop-1免疫组相比,造模后Cop-1免疫组、造模时Cop-1免疫组、造模前Cop-1免疫组均出现大量Cop-1致敏淋巴细胞。黑质DA神经元定量分析显示,与正常对照组比较,持续低剂量MPTP注射使模型对照组黑质DA神经元减少了65.13%,造模后Cop-1免疫组、造模时Cop-1免疫组、造模前Cop-1免疫组黑质DA神经元分别减少了31.68%、27.55%和28.29%,各组DA神经元数明显高于模型对照组(P=0.000,P=0.000,P=0.000)。HPLC法测定纹状体内DA及其代谢产物含量结果显示,与正常对照组相比,模型组DA及其代谢产物含量明显减少。造模后Cop-1免疫组、造模时Cop-1免疫组、造模前Cop-1免疫组类似,但均明显高于模型组。结论在C57BL/6J小鼠慢性MPTP模型中,持续低剂量MPTP注射对小鼠的免疫器官脾的破坏不明显,Cop-1直接免疫可有效对抗MPTP毒性,保护黑质-纹状体系统的DA神经元。     

匹多莫德对重症胸部创伤大鼠Th1/Th2细胞平衡的影响

目的 观察重症胸部创伤大鼠Th1/Th2细胞平衡的变化,评价匹多莫德对重症胸部创伤大鼠Th1/h2细胞平衡的影响.方法 20只雄性SD大鼠随机平均分配到单纯创伤组(A组)和创伤+匹多莫德组(B组).大鼠均经胸部撞击致伤建立重症胸部创伤模型,B组大鼠每日予匹多莫德100 mg/kg腹腔注射,A组大鼠予等体积生理盐水腹腔沣射.分别于受伤前及受伤后第1、3、5、7天采取全血各1.0 ml,分离外周血单个核细胞(PBMC),体外培养72h,收集上清液冻存,ELISA法集中检测IFN-γ、IL-4浓度.结果 两组大鼠PBMC培养上清液中IFN-γ浓度在受伤后均迅速升高,随即回落,B组明显高于A组,差异有统计学意义(P<0.05);IL-4浓度在受伤后均持续升高,两组间差异无统计学意义(P>0.05);IFN-γ浓度上升倍数/IH-4浓度上升倍数比值在受伤后均升高,随后逐步降低至1.0以下,B组高于A组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 大鼠在重症创伤后早期,Th1细胞功能迅速增强,随后逐步受到抑制,Th2细胞功能则持续增强,发生Th1细胞向Th2细胞的漂移.匹多莫德提高了重症刨伤大鼠IFN-γ的合成分泌,减轻了Th1细胞功能抑制的程度,有助于维持Th1/Th2细胞平衡.     

萸芪糖浆调节Th1/Th2平衡改善免疫性重症肌无力大鼠免疫功能的研究

目的 观察萸芪糖浆对重症肌无力大鼠Th1/Th2平衡的调节及改善重症肌无力大鼠免疫应答的影响。方法 取70只大鼠采用乙酰胆碱受体前体蛋白(acetylcholine receptor precursor protein,AchR)多点注射造模,筛选50只自身免疫性重症肌无力大鼠模型,随机分为模型组、泼尼松组、萸芪糖浆低剂量组、萸芪糖浆中剂量组、萸芪糖浆高剂量组,每组10只,另外设置空白组10只。造模完成后,分别给予萸芪糖浆31.84、15.92、7.96 g·(kg·d)^-1灌胃,泼尼松组给予泼尼松5.4 g·(kg·d)^-1灌胃,空白组、模型组给予同体积生理盐水灌胃。30 d后取材,比较各组大鼠体质量、胸腺指数、脾脏指数;疲劳试验及Lennon 14评分评估各组大鼠肌无力症状;ELISA法检测血清AchR、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)炎性细胞因子水平;流式细胞仪检测T细胞中CD4⁺/CD8⁺     

利鲁唑对急性高眼压致大鼠视网膜损伤的保护作用

目的 探讨腹腔内注射利鲁唑对急性高眼压所致的大鼠视网膜损伤的保护作用.方法 将120只大鼠分为正常对照组、高眼压对照组及利鲁唑干预组,每组40只.采用前房灌注的方式建立急性高眼压模型,免疫组化及末端脱氧核苷酸转移酶介导的 dUTP 缺口末端标记法(TUNEL) 分别测定3组大鼠再灌注后12、24、48、72 h的Caspase-3蛋白表达情况及大鼠视网膜各层细胞的凋亡水平,HE染色观察各组大鼠视网膜结构改变.结果 与高眼压对照组相比,利鲁唑干预组视网膜增厚及结构紊乱情况明显减轻,不同时间点Caspase-3的表达水平及凋亡细胞数明显降低(P< 0.05).结论 利鲁唑可减少大鼠急性高眼压损伤后视网膜神经节细胞凋亡,对视网膜具有一定的保护作用.     

咳喘穴位敷贴对哮喘大鼠Th1/Th2免疫平衡的影响

目的 探讨咳喘穴位敷贴对哮喘大鼠辅助性T淋巴细胞1(Th1)/辅助性T淋巴细胞2(Th2)免疫平衡的影响.方法 60只雄性SD大鼠随机分为6组:正常对照组、哮喘模型组、生芥子组、生炒各半组、炒芥子组、地塞米松组,每组10只.采用卵清蛋白致敏并激发的方法制备大鼠慢性哮喘模型,白芥子不同配比咳喘穴位敷贴散贴敷穴位干预治疗.采用酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)测定各组大鼠血清中干扰素(IFN)-γ、白介素(IL)-4、白介素(IL)-13的含量.结果 与正常对照组比较,哮喘模型组大鼠血清IFN-γ含量明显降低,而IL-4、IL-13的含量明显升高(P＜0.01).与哮喘模型组比较,生芥子组、生炒各半组、炒芥子组和地塞米松组的大鼠血清IFN-γ含量明显升高,而IL-4、IL-13的含量明显降低(P＜0.01),各治疗组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 咳喘穴位敷贴能够调节哮喘大鼠Th1/Th2免疫平衡,改善炎症反应,从而改善哮喘病情.     

蒙药嘎日迪散对溃疡性结肠炎大鼠Th1细胞和Th17细胞的影响

目的探讨蒙药嘎日迪散对溃疡性结肠炎(UC)大鼠Th1细胞和Th17细胞的影响。方法将Wistar大鼠随机分为正常组、UC模型组、嘎日迪散低剂量组、嘎日迪散中剂量组、嘎日迪散高剂量组、柳氮磺吡啶组和补脾益肠丸组,采用免疫法加2,4,6-三硝基苯磺酸乙醇诱导UC模型。嘎日迪散低、中、高剂量组(1.76、3.51、7.02 g/kg),柳氮磺吡啶组(0.36 g/kg)和补脾益肠丸组(1.62g/kg)分别灌胃相应药物4周后,取外周血检测指标。采用流式细胞术观察全血中Th1细胞/Th17细胞(Th1/Th17),ELISA法检测血清中转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17(IL-17)、干扰素γ(IFN-γ)的含量。结果嘎日迪散中、低剂量和柳氮磺吡啶能显著降低UC大鼠血清中TGF-β,各药物均能显著降低UC大鼠血清中IL-6、IL-17的含量(P0.05)、升高IFN-γ的含量(P0.05),升高Th1/Th17值(P0.05)。结论嘎日迪散调节UC大鼠体内Th0细胞的分化方向,恢复Th1/Th17的平衡可能是其治疗UC的机制之一。     

多聚物1诱导自身免疫对大鼠高眼压模型视神经的保护作用

目的 探讨多聚物1诱导自身免疫对大鼠高眼压模型视神经的保护作用及其机制.方法 高眼压大鼠随机分为2组,分别皮下注射200μg多聚物1和同等剂量的磷酸盐缓冲液(PBS).荧光金逆行标记视网膜神经节细胞(RGC),在荧光显微镜下进行计数.免疫组织化学方法 观察T细胞在视神经及视网膜的聚集情况.结果 多聚物1组免疫后17、24、31 d RGC存活数目(个/mm2:2617±17、2588±206、2394±15)均多于PBS组(个/mm2:2357±37、2277±340、2129±17,P<0.01、0.05、0.01).免疫后10、17、24、31 d视网膜上聚集的T细胞数多聚物1组(个/mm2:11.3±2.8、36.7±5.2、33.9±3.0、21.4±5.9)也均多于PBS组(个/mm2:4.7±3.6、19.7±2.4、15.3±4.0、13.3±4.4,均P<0.01).结论 多聚物1对大鼠高眼压模型的视网膜神经节细胞RGC有保护作用;高眼压造成的损害引起视网膜处T细胞的聚集,多聚物1能增加聚集于视网膜上的T细胞数量,这可能与多聚物1的视神经保护作用有关.     

Effect of IL-10 gene transmission on the PTg-stimulated splenocytes proliferation and Th1 cytokines production from experimental autoimminue thyroiditis rats

Objective: To investigate the effects of gene therapy with IL-10 on PTg-induced proliferation of splenocytes and Th1 cytokine production from PTg-stimulated splenocytes. Methods: EAT rats were divided into four groups:group A (PBS PLL) , group B (pORF PLL), group C (pORFmIL10 PLL), and group D (pORFmIL10 MEM). The substances mixed with lipofectamine were injected into the thyroid tissues of rats on the 18th dday after immunization. The rats were sacrificed at the 8th week. In vitro proliferative responses to ConA and different concentration of PTg were measured by culturing 4×105 splenocytes pulsed with 18.SKBq of [3H] thymidine for the final 12h and then harvested for liquid scintillation counting. In vitro splenocytes were cultured with PTg (25 mg/L). Th1 cytokine IFN-γ,TNF-αand IL-2 were detected by ELISA. Results: The proliferative response to PTg was suppressed in group C, compared with that of group A and B (P＜0.05). The levels of IFN-γ,TNF-oand IL-2 in the supernatant of PTg-stimulated splenocytes were 3548.25 ± 779.47 pg/ml, 27.66±10.50 pg/ml and 3617.73± 609.15 pg/ml, respectively,which were much lower in group C than those in group A and B(P＜0.01, P＜0.05, P＜0.001, respectively). Conclusion: IL-10 gene transmission in thyroid tissues could inhibit PTg specific proliferation of splenocytes from EAT rats and the secretion of Thl cytokines from PTg-stimulated splenocytes.     

子痫前期患者外周血单个核细胞分泌Th1、Th2型细胞因子功能变化研究

目的研究子痫前期患者外周血单个核细胞分泌Th1/Th2细胞因子功能变化.方法子痫前期患者29例,正常妊娠妇女15例,分离外周血单个核细胞,体外培养72小时,ELISA方法检测培养上清液中Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ及Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平.结果子痫前期组PBMC培养上清液中,Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ水平(259.4±90.5)pg/mL,(452.0±122.6)=pg/mL与正常妊娠组(140.3±73.2)pg/mL,(307.5±106.4)pg/mL相比,显著升高,分别为P＜0.01,P＜0.05;Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平(28.8±7.7)pg/mL,(178.9±98.6)pg/mL与正常妊娠组(41.9±11.4)pg/mL,(316.1±284.6)pg/mL相比,显著下降,分别为P＜0.01,P＜0.05.结论子痫前期患者外周血单个核细胞分泌Th1型细胞因子功能增强,分泌Th2型细胞因子功能减弱.     

Th1、Th2、Th17 细胞变化及环境因素与习惯性流产的关系研究

目的 探讨Th1、Th2和Th17细胞的变化、转录因子T-bet、GATA-3和STAT-3 mRNA的表达及环境因素与习惯性流产的关系.方法 选取2011年6月～2012年9月河南省开封市妇产医院就诊的50例习惯性流产非孕期患者作为病例组（HA组）,同期某社区50例正常非孕妇女为健康对照组（NNP组）,分别抽取抗凝静脉血5 mL,应用聚多糖密度梯度离心法分离外周血单个核细胞（PBMC）,采用流式细胞仪检测三种亚群细胞的比例,酶联免疫吸附法（ELISA）检测IFN-γ、IL-4和IL-17的含量,实时荧光定量PCR检测T-bet 、GATA-3和STAT-3 mRNA的表达.同时进行环境因素问卷调查,比较两组各环境因素的差异.结果 ①HA组患者Th1、Th17细胞百分比[（11.66±3.45）％、（3.65±0.75）％]均明显高于NNP组[（7.05±1.83）％、（0.72±0.11）％],差异有统计学意义（P＜0.05）,Th2细胞的百分比[（1.15±0.33）％]低于NNP组[（3.59±0.62）％],差异有统计学意义（P＜0.05）.②HA组IFN-γ和IL-17在的含量分别为（1163.27±45.25）μg/L和（162.26±25.28）μg/L,明显高于NNP组[（736.25±44.32）、（57.45±11.26） μg/L],差异有统计学意义（P＜0.05）,而IL-4的含量[（118.45±26.75） μg/L]低于NNP组[（220.45±24.63）μg/L],差异有统计学意义（P＜0.05）.③与NNP组比较,HA组T-bet和STAT-3 mRNA表达均明显升高,而GATA-3 mRNA的表达明显降低,差异均有统计学意义（均P＜ 0.05）.④HA组BMI≥24.0 kg/m2者所占比例为58％,明显高于NNP组（28％）,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 习惯性流产患者IFN-γ、IL-17的水平较高,而IL-4的水平较低,提示习惯性流产患者体内存在T细胞亚群分化失衡,且此种失衡可能与转录因子T-bet、GATA-3和STAT-3 mRNA的调控有关,同时肥胖可增加习惯性流产发生的可能性.     

卵巢癌患者外周血Th1/Th2及Treg/Th17细胞平衡关系

目的 探讨卵巢癌患者外周血中CD4+T细胞亚群:辅助T细胞(Th,包括Th1、Th2、Th17)及调节性T淋巴细胞(Treg)表达、平衡关系的变化,以及在卵巢癌发病机制中的作用.方法 流式细胞术检测30例卵巢癌疾病组及20例健康对照组外周血中Thl、Th2、Thl7、Treg表达占CD4+T细胞的百分率,并计算Th1/Th2、Th17/Treg的比值.结果 卵巢癌患者外周血中Th2、Th17及Treg亚群占CD4+T细胞的百分率明显高于健康对照组(P<0.05),而Th1百分率低于健康对照组(P<0.05),各亚群变化与临床分期相关,但与组织类型及细胞分化无关(P>0.05).卵巢癌组Th1/Th2比值降低,与对照组比较有统计学意义(P<0.05),卵巢癌患者存在Th2方向极化;卵巢癌组Treg/Th17比值升高,与对照组比较有统计学意义(P<0.05).结论 卵巢癌患者外周血中存在CD4+细胞亚群表达异常,存在Th1/Th2、Treg/Th17比值失衡,为卵巢癌临床免疫治疗提供理论支持.     

终止香烟烟雾暴露后大鼠Th1/Tc1介导气道炎症及调节性T细胞的变化

目的 观察香烟烟雾暴露和终止香烟烟雾暴露后大鼠Th1/Tc1介导气道炎症及支气管肺泡灌洗液(BALF)中调节性T细胞(Treg)的变化.方法 将50只健康清洁级雄性Wistar大鼠随机分为5组:12周正常对照组(简称12周对照组)、24周正常对照组(简称24周对照组)、12周香烟烟雾暴露组(简称12周暴露组)、24周香烟烟雾暴露组(简称24周暴露组)、终止香烟烟雾暴露组(简称终止暴露组).烟熏法复制大鼠气道炎症的动物模型.12周后,12周对照组、12周暴露组处置取材,24周暴露组继续烟熏12周,终止暴露组终止烟雾暴露12周,将后2组及24周对照组处置取材.HE染色观察小气道病理改变,进行气道评分;收集BALF进行细胞学计数和分类计数;酶联免疫吸附法(ELISA)法测BALF中4种细胞因子:Th1/Th2型细胞因子干扰素(IFN)γ、白细胞介素(IL)4及促炎因子IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)α的浓度;流式细胞术检测各组大鼠BALF中Treg细胞的比例,RT-PCR检测各组大鼠BALF中Foxp3 mRNA的表达.结果 (1)12周暴露组、24周暴露组、终止暴露组气道炎症评分较12周对照组、24周对照组明显高(均P＜0.01).24周暴露组、终止暴露组气道炎症评分均较12周暴露组高(均P＜0.01).(2)与12周对照组、24周对照组相比,12周暴露组、24周暴露组、终止暴露组BALF中IFN-γ、TNF-α和IL-8高,IL-4低(均P＜0.01).与12周暴露组相比,终止暴露组IFN-γ、IL-4、TNF-α差异均无统计学意义(均P＞0.05),IL-8较高(P＜0.01),24周暴露组IFN-γ、TNF-α和IL-8明显高(均P＜0.01).(3)BALF中Treg细胞比例,12周暴露组(7.4%±0.8%)、24周暴露组(7.8%±1.7%)、终止暴露组(7.0%±1.4%)较12周对照组(4.8%±1.2%)、24周对照组(4.7%±1.2%)高(均P＜0.01),前3组之间BALF中Treg细胞比例差异均无统计学意义(均P＞0.05).(4)12周暴露组(0.22±0.02)、24周暴露组(0.23±0.03)、终止暴露组(0.20±0.04)BALF中Foxp3 mRNA表达较12周暴露组(0.13±0.01)、24周暴露组(0.11±0.02)高(均P＜0.01).前3者之间BALF中Foxp3 mRNA表达差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 香烟暴露致大鼠气道Th1/Tc1介导炎症伴Treg细胞表达增高,终止香烟烟雾暴露后其炎症及Treg细胞高表达仍持续存在,提示该免疫失衡可能是导致终止香烟暴露后Th1/Tc1气道炎症仍持续进展的原因之一.     

黄连阿胶汤对失眠大鼠血清Th1/Th2平衡的影响

目的观察黄连阿胶汤对失眠模型大鼠Th1/Th2平衡的影响。方法将36只SD大鼠随机分为3组,PCPA法复制失眠大鼠模型,ELISA法检测大鼠血清IFN-γ、IL-1β、IL-4、IL-10及IFN-γ/IL-4的水平。结果模型组大鼠IFN-γ、IL-1β的水平明显下降（P〈0.01）,IL-4、IL-10的表达则明显升高（P〈0.01）,IFN-γ/IL-4比值降低（P〈0.01）;黄连阿胶汤组IFN-γ、IL-1β的表达有不同程度的升高（P〈0.05,P〈0.01）,IL-4、IL-10的表达降低（P〈0.05）,IFN-γ/IL-4比值升高（P〈0.01）。结论黄连阿胶汤能提高失眠大鼠Th1细胞因子的表达,降低Th2细胞因子的表达,促进Th1/Th2平衡向Th1方向偏移,是其治疗失眠的可能机制之一。     

妊娠肝内胆汁淤积症患者胎盘组织HLA-G蛋白表达 及其对外周血Th1/Th2细胞因子的影响

目的：探讨人类白细胞抗原G（HLA-G）和Th1/Th2细胞因子在妊娠肝内胆汁淤积症（ICP）中的表达变化及其与ICP发病的相关性。方法：选取2007年12月至2008年3月在中南大学湘雅二医院确诊为ICP,行剖宫产终止妊娠的初产妇26例为ICP组,同期在该院行剖宫产的正常初产妇22例作为对照（NP）组。用免疫组织化学法检测孕妇胎盘组织HLA-G蛋白的表达,同时用酶联免疫吸附法（ELISA）检测孕妇外周血中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素-4（IL-4）水平,并测定血清中总胆汁酸（TBA）水平。结果：ICP组孕妇外周血中TBA浓度为（27.05±6.08） μmol/L,明显高于NP组（4.35±2.68） μmol/L（P＜0.01）;ICP组胎盘组织绒毛外滋养层细胞（EVT）中HLA-G蛋白的表达程度（弱阳性61.54％,阳性30.77％,强阳性7.7％）,明显低于NP组（弱阳性13.64％,阳性18.19％,强阳性68.19％）（P＜0.01）;ICP组胎盘组织HLA-G蛋白表达的平均光密度（MOD）值52.91±7.19,明显低于NP组69.26±7.72（P＜0.01）;ICP组中TNF-α水平（101.31±19.30） pg/mL,明显高于NP组（54.51±23.72） pg/mL（P＜0.01）;ICP组IL-4水平（22.16±6.55） pg/mL,明显低于NP组（31.69±8.25） pg/mL（P＜0.01）;ICP组TNF-α/ IL-4为（4.52±1.91）明显高于NP组（1.72±0.61）（P＜0.01）;ICP组中HLA-G表达的 MOD值与TNF-α呈负相关（r=-0.98,P＜0.01）,与IL-4及TNF-α/ IL-4无明显相关性（P＞0.05）;ICP组中TBA与TNF-α呈正相关（r=0.99,P＜0.01）,与HLA-G 表达的MOD值呈负相关（r=-1.00,P＜0.01）,与IL-4及TNF-α/ IL-4无明显相关性（P＞0.05）。结论：ICP患者外周血存在Th1/Th2细胞因子失衡,向Th1偏移的现象;其胎盘组织中HLA-G的表达下降,外周血中Th1型细胞因子增多,可能是ICP肝脏损害的原因之一。     

慢性心衰患者 Th1与 Th2型细胞及 Treg细胞的表达

目的探讨Th1、Th2型细胞及Treg细胞在慢性心衰发病中的作用机制。方法采用RT-PCR技术检测62例慢性心衰患者和42例正常人外周血单个核细胞中T—bet、GATA-3及Foxp3mRNA的表达水平;ELISA法检测血浆中Th1／Th2型细胞因子IFN-γ／IL-4水平。结果慢性心衰患者T-bet表达水平高于正常对照组,GATA-3及Foxp3表达水平低于正常对照组（均P〈0．05）。慢性心衰组患者血浆中IFN-γ水平及IFN-γ／IL-4高于对照组（均P〈0．01）。结论慢性心衰患者T-bet／GATA-3及IFN-γ／IL-4升高,Foxp3降低,提示Th1细胞亚群表达升高,Th2型细胞及CD4＋、CD25＋调节性T细胞减少,细胞免疫异常可能参与慢性心衰的发病机制。     

内皮祖细胞对慢性脑缺血大鼠空间学习记忆影响的机制研究

目的 探讨自体移植内皮祖细胞对慢性脑缺血大鼠行为学习功能的影响.方法 制作慢性脑缺血大鼠模型,静脉自体移植内皮祖细胞,进行水迷宫检测学习记忆功能,并从脑缺血区新生细胞、脑部血管、血管内皮生长因子(VEGF)等方面探讨可能的机制.结果 ①Morris水迷宫实验中,训练第2～5天的逃避潜伏期实验组(EPC组)[分别为(44.45 ±9.44)s,(38.32±1.51)s,(34.95±6.76)s,(24.46±5.47)s明显短于对照组(PBS组)[对应为(52.79 ±6.47)s,(43.15±11.21)s,(50.29±11.41)s,(53.75±7.35)s](P＜0.01);第一象限游泳时间EPC组(26.76±3.79)s明显长于PBS组[(14.28±2.40)s],(P＜0.0).②缺血脑组织内的BrdU阳性细胞数PBS组为(12.17±3.49)个,实验组为(26.8±5.76)个,差异有显著性(P＜0.05).③脑血管共聚焦检测结果显示:EPC组较PBS组比较毛细血管内径显著性变小(分别为(2.8±0.2)μm与(3.4±0.24)μm,同源组织缺血边界地区的分支点数目显著增加[(分别为:(210.1±13.80)与(164.2±12.3)],EPC组可以显著增加微血管总面积(分别为:(84365±3897)与(74568±4626)μm2/0.002mm3),P＜0.05].④大鼠血浆VEGF检测[分别为(63.91±6.71)pg/ml;(21.81 ±4.25)pg/ml,P＜0.05]显示干预组明显增加(P＜0.05).结论 内皮祖细胞可以显著改善慢性脑缺血大鼠的学习记忆行为能力,其可能的机制是VEGF相关联的神经保护和血管再生,在治疗慢性脑缺血疾病中有着很大的应用前景.