辛伐他汀对肺缺血再灌注损伤中肺泡Ⅱ型细胞的保护作用

目的 观察辛伐他汀对大鼠肺缺血再灌注损伤(LIRI)长期存活模型中肺泡Ⅱ型细胞(ATⅡ)的保护作用.方法 建立大鼠肺缺血再灌注损伤长期存活模型,将实验动物分成3组:假手术组(Ⅰ组,仅予开胸,n=36)、缺血再灌注组(Ⅱ组,予左侧肺门阻断1 h后开放,n=36)、辛伐他汀组(Ⅲ组,术前3 d开始予辛伐他汀每天5 mg/kg灌胃持续应用至处死,余处理同Ⅱ组,n=36).分别于开胸后及缺血再灌注后0 h、4 h、1 d、3 d、7 d收集血及左肺组织标本,检测如下指标:血氧分压(PaO2)、组织髓过氧化物酶(MPO)水平、肺组织肺泡表面活性物质C(SP-C)表达及SP-C/增殖细胞核抗原(PCNA)免疫荧光双染检测ATⅡ的增殖.结果 成功建立大鼠肺缺血再灌注损伤长期存活模型.与Ⅱ组比较,Ⅲ组MPO值、PaO2值以及SP-C的mRNA相对值在缺血再灌注4 h和1 d差异均有统计学意义(P＜0.01),余时间点差异均无统计学意义(P＞0.05);SP-C/PCNA免疫荧光双染显示,Ⅲ组在缺血再灌注后1 d ATⅡ增殖水平较Ⅱ组明显增高.结论 ATⅡ细胞是辛伐他汀保护肺缺血再灌注损伤作用的新靶点,促进其增殖是辛伐他汀发挥保护作用的重要机制之一.

Abstract：

Objective To evaluate the protective effects on alveolar type Ⅱ cells induced by simvastatin in a rat lung ischemia-reperfusion injury (LIRI) long-term survival model. Methods 108 healthy SD rats were randomly divided into 3 groups: group Ⅰ, the sham group (n =36, no hilar blocking); group Ⅱ, LIRI group ( n = 36, left hilar blocking); group Ⅲ, simvastatin group ( n = 36, animals were orally lung tissue and blood samples were collected at basehne before hilar occlusion and 1 h after ischemia, 4 h,1 day, 3 days and 7 days after reperfusion respectively. The indices were determined as follows: the myeloperoxidase (MPO) activity of lung tissue, the arterial partial pressure of oxygen ( PaO2 ), pulmonary surfactant-C (SP-C) expression and proliferation of AT Ⅱ cells determined by SP-C/proliferating cell nuclear antigen (PCNA) immunofluorensence double staining. Results The rat LIRI long-term survival model was successfully established. As compared with group Ⅱ , the MPO activity, PaO2 and the SP-C mRNA level were significantly reduced in group Ⅲ at the time-points of 4 h and 1 day after reperfusion (P ＜0. 01 respectively). The number of SP-C/PCNA double positive AT Ⅱ cells displayed that as compared with Group Ⅱ , the proliferation of AT Ⅱ cells in group Ⅲ was significantly increased at day 1 after repeffusion.Conclusion AT Ⅱ cells might be a novel target of simvastatin-induced-attenuation of LIRI, in which enhancing the proliferation ability of AT Ⅱ is involved as one of the important mechanisms.     

辛伐他汀通过PI3K/Akt通路缓解肺泡Ⅱ型细胞缺氧复氧损伤

目的 观察辛伐他汀( SIM)对缺氧复氧损伤肺泡Ⅱ型细胞(ATⅡ)的保护作用并探讨其机制.方法 体外培养人ATⅡ来源的A549细胞株,建立二氯化钴(CoCl2)诱导的缺氧复氧损伤模型;不同浓度辛伐他汀(5～100 μmol/L)处理A549细胞,CCK-8比色法检测细胞增殖率;Hoechst33342染色检测细胞凋亡;Western blot检测ATⅡ特征标志表面蛋白C(SP-C)及PI3K/Akt通路蛋白Akt、P70、mTOR、Caspase-3水平.结果 与对照组比较,缺氧前予低剂量SIM(5～20 μmol/L)预处理30 min,可显著促进A549细胞增殖、抑制其凋亡,并上调SP-C、p-Akt及下游增殖相关蛋白p-P70、mTOR水平,同时下调凋亡蛋白Caspase-3水平,两者差异有统计学意义(P＜0.01).与SIM组比较,给予PI3K抑制剂渥曼青霉素(wortmannin)可拮抗SIM的保护作用,表现为SP-C、p-Akt、mTOR及p-P70蛋白水平下调,Caspase-3蛋白水平上调,两者差异有统计学意义(P＜0.01).结论 辛伐他汀可缓解ATⅡ细胞缺氧复氧损伤,其机制与辛伐他汀活化PI3K/Akt通路有关.     

辛伐他汀促进缺氧复氧损伤后肺泡Ⅱ型上皮细胞转分化的研究

目的 观察辛伐他汀是否能在体外促进缺氧复氧损伤后肺泡Ⅱ型上皮细胞向Ⅰ型细胞转分化,并探讨其作用机制.方法 体外培养小鼠肺泡上皮细胞MLE-12,建立缺氧复氧损伤模型,分为空白对照组(Blank)、辛伐他汀组(Sim)及缺氧复氧组(H/R),分别于缺氧2h后复氧0h、1d、3d和7d共4个时间点获取细胞,流式细胞仪检测肺泡Ⅰ型/Ⅱ型细胞表面特异性标志Caveolin- 1/Pro-SP-C 阳性细胞数百分比,Western blot法测定各组Pro-SP-C和Caveolin-1蛋白水平,最后行甲羟戊酸通路竞争实验观察左旋甲羟戊酸( L-meva)对辛伐他汀作用的影响.结果 流式细胞术结果显示:在缺氧复氧早期(d0及d1),Sim组较H/R组Caveolin-1/Pro-SP-C百分比显著降低;至d3和d7百分比则显著升高;Western blot结果显示:与H/R组比较,Sim组Pro-SP-C蛋白水平在d0及d1最高,至d3和d7则显著下降,Caveolin-1蛋白水平在d1最低,至d3和d7则逐渐升高,两者比较均有显著统计学差异(P＜0.01).L-meva竞争试验显示:与Sim组比较,Sim+ L-meva组在各个时间点Pro-SP-C和Caveolin-1蛋白水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 辛伐他汀可以促进缺氧复氧损伤后肺泡Ⅱ型上皮细胞向Ⅰ型细胞的转分化,但其作用机制不依赖于甲羟戊酸通路.     

肺泡Ⅱ型细胞与急性肺损伤

肺泡Ⅱ型细胞(Alveolar typeⅡcells,Type Ⅱ alveolar epithelial cell,Type Ⅱ pneumocyte,以下简称Ⅱ型细胞)是一种多功能细胞,对维持肺泡的结构和功能具有重要意义.其主要功能有:(1)增殖功能.它是Ⅰ型、Ⅱ型细胞的祖细胞[1,2].在正常细胞更新和损伤修复过程中,Ⅱ型细胞可以分化为Ⅰ型细胞,也可通过有丝分裂补充Ⅱ型细胞数量,起到肺泡上皮干细胞的作用[3,4];(2)合成和分泌肺表面活性物质(Pulmonary surfactant,PS);(3)维持肺泡内外液体平衡;(4)近年还发现Ⅱ型细胞还具有免疫调节作用[5].     

外源性EGF促进吸入性损伤大鼠肺泡Ⅱ型细胞增殖和肺水转运

目的研究表皮细胞生长因子(epidermal growth factor,EGF)对吸入性损伤大鼠的肺泡Ⅱ型细胞(alveolar typeⅡcell,ATⅡ)增殖和肺水转运功能的影响.方法清洁级雄性SD大鼠160只,160～180g.随机分为四组Ⅰ组正常对照(n=10);Ⅱ组单纯EGF给药;Ⅲ组单纯吸入性损伤;Ⅳ组吸入性损伤+EGF治疗.Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组各分为24、48、72、120、168h五个亚组(n=10).Ⅲ组和Ⅳ组的大鼠先造成烟雾吸入性损伤.Ⅱ组和Ⅳ组(伤后立即)用特殊针头经气管喷入EGF(100μg/kg).每组中6只大鼠用于检测肺泡液体清除率(alveolarliquid clearance,ALC),4只用于病理形态学观察和尿嘧啶脱氧核苷(bromodeoxyuridine,BrdU)免疫组化检查.结果烟雾吸入性损伤可以导致各级支气管管壁水肿,肺泡壁破坏,肺泡腔内液体聚积,肺泡隔水肿.外源性EGF显著增加新增殖ATⅡ数量.正常大鼠ALC为(22.07±3.67)%.气管滴入EGF后48、72和120h的ALC显著升高,分别为[(43.37±11.04)%,(P＜0.01);(41.75±7.02)%,(P＜0.01);(35.86±4.09)%,(P＜0.05)],168h后恢复正常水平.吸入性损伤后ALC在第24h下降36.7%,其他时间点ALC也有不同程度减少.EGF治疗可以使吸入性损伤大鼠的ALC在48h后即可恢复到正常水平[(25.25±3.66)%].结论外源性EGF经气管喷入,能有效刺激ATⅡ的增殖,提高肺泡液体转运能力,有助于修复吸入性损伤大鼠的肺泡组织,减轻或消除肺水肿.     

胰岛素样生长因子1对缺氧复氧诱导的HK-2细胞损伤作用

目的探讨胰岛素样生长因子1（IGF-1）对缺氧复氧损伤人肾近曲小管上皮细胞株HK-2的凋亡影响及其作用机制。方法将体外培养的HK-2细胞分为正常对照组（A组）、缺氧复氧损伤模型组（B组）、提前IGF-1干预组（C组）、即时IGF-1干预组（D组）、迟后IGF-1干预组（E组）5组。3个IGF-1干预组在不同时间给予IGF-1干预,复氧培养24h后,MTT比色法检测细胞增殖活性,流式细胞仪分析细胞凋亡,细胞免疫组织化学法检测Bcl—2阳性表达变化,Real-time PCR检测Bcl-2 mRNA表达水平变化。结果与A组相比,B组细胞增殖活性明显降低（P〈0．05）,细胞凋亡率明显升高（P〈0．05）,Bcl-2蛋白与Bcl-2 mRNA表达明显降低（P〈0．05）;与B组比较,IGF-1干预后,细胞增殖活性有所升高,以C组升高最明显（P〈0．01）,细胞凋亡率显著下降（P〈0．05）,又以C组下降最明显（P〈0.01）;Eel-2mRNA和其蛋白表达量均增高（P〈0．05）,以C组表达量增高最明显（P〈0.01）。结论IGF-1能够抑制缺氧复氧损伤HK-2细胞凋亡,可能与其上调Bcl—2蛋白表达有关。     

丙泊酚对缺氧诱导的大鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞凋亡的调控作用

目的 探讨丙泊酚预处理对缺氧条件下大鼠Ⅱ型肺泡七皮(ATⅡ)细胞凋亡的影响.方法 体外分离并培养大鼠ATⅡ细胞,将细胞分为三组:缺氧组(H组)、丙泊酚-缺氧组(P组)和对照组(C组).测定各组细胞存活率、早期凋亡率、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA及Bnip3LmRNA 表达水平.结果 与C组比较,H组和P组细胞存活率显著降低(P＜0.05)、早期凋亡率显著升高(P＜0.05),HIF-1α mRNA及Bnip3LmRNA表达显著增强(P＜0.05).与H组比较,P组上述指标显著降低(P＜0.05).结论 丙泊酚预处理可抑制缺氧条件下大鼠ATⅡ细胞凋亡,推测其与丙泊酚-HIF-1α-缺氧反应元件(HRE)轴的抑制有关.     

辛伐他汀预先给药对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的影响

目的 评价辛伐他汀预先给药对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性SD大鼠96只,体重220～280 g,随机分为3组(n=32):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和辛伐他汀预先给药组(Si组).IR组和Si组采用夹闭腹主动脉45 min后开放的方法制备脊髓缺血再灌注模型,Si组制备模型前3 d开始以辛伐他汀20 mg·kg-1·d-1灌胃,连续3 d.分别于再灌注6、12、24 h时取8只大鼠,进行后肢运动功能评分.分别于再灌注2、6、12、24 h时取8只大鼠,采集静脉血样,测定血清脑型肌酸激酶同工酶(CK-BB)活性.取完血样后取大鼠脊髓组织,测定Toll样受体4(TLR4)mRNA表达、NF-κB活性、TNF-α含量和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)含量,光镜下观察脊髓的病理学结果.结果 与S组比较,IR组和Si组后肢运动功能评分降低,血清CK-BB活性、脊髓TLR4mRNA表达、NF-κB活性、TNF-α和ICAM-1含量升高(P＜0.05或0.01).与IR组比较,Si组后肢运动功能评分升高,血清CK-BB活性、脊髓TLR4 mRNA表达、NF-κB活性、TNF-α和ICAM-1含量降低(P＜0.05或0.01).Si组脊髓病理学损伤程度轻于IR组.结论 辛伐他汀预先给药可减轻大鼠脊髓缺血再灌注损伤,其机制与下调TLR4表达、抑制NF-κB激活,从而减轻炎性反应有关.     

瘦素预先给药对L02肝细胞缺氧复氧时细胞凋亡的影响

目的 探讨瘦素预先给药对L02肝细胞缺氧复氧时细胞凋亡的影响.方法 L02肝细胞接种于6孔培养板中,孵育24 h后,随机分为6组,每组6孔:对照组(C组)、缺氧复氧组(HR组)和不同浓度瘦素预处理组(L_(1～4)组).HR组于37℃95%N_2-5%CO_2培养箱中缺氧12 h,然后于37℃95%O_2-5%CO_2培养箱中复氧12 h;L_(1～4)组先分别加入瘦素100、200,400和800 μg/L,再进行缺氧复氧.取细胞上清液,采用赖氏法测定谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的浓度;采用Hoechst 33342/PI双染色法测定细胞捌亡情况,计算细胞凋亡率;采用荧光定量PCR法测定Bax mRNA和Bcl-2 mRNA的表达.结果 与C组比较,HR组和L_(1～4)组ALT和AST的浓度升高,早期凋亡率和晚期凋亡率升高,Bax mRNA和Bcl-2 mRNA表达上调(P<0.01);与HR组比较,L_(1～4)组ALT和AST的浓度下降,早期凋亡率降低,L_3组Bax mRNA表达下调,L_2组和L_3组Bcl-2 mRNA表达上调(P<0.01);L_(1～4)组间ALT和AST的浓度、早期凋亡率和晚期凋亡率、Bax mRNA和Bcl-2 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 瘦素预先给药可抑制L02肝细胞缺氧复氧时细胞凋亡,其机制与上调肝细胞Bcl-2 mRNA的表达,下调Bax mRNA的表达有关.     

转染血红素氧合酶—1基因减轻人肝细胞体外缺氧—复氧损伤

目的 探讨血红素氧合酶-1重组腺病毒载体(Ad-HO-1)体外转染人肝细胞的转染效果及其对肝细胞缺氧-复氧损伤的影响.方法 取人肝细胞系L-02细胞,滴加低温保存的Ad-HO-1,分别培养24 h、48 h和72 h(24 h组、48 h组和72 h组),并以加入空载体腺病毒共培养的L-02细胞为空白对照.采用逆转录聚合酶链反应法检测各组肝细胞HO-1 mRNA的表达水平;以间接免疫荧光标记法检测各组肝细胞的HO-1表达率;在倒置荧光显微镜下观察转染24 h和72 h的肝细胞中绿色荧光蛋白(EGFP)的表达.取空白对照组肝细胞(培养48 h)和48 h组肝细胞,缺氧培养4 h后再有氧培养8 h,采用四甲基偶氮唑盐法测定两组肝细胞存活率.结果 24 h组、48 h组和72 h组HO-1 mRNA表达水平明显高于空白对照组,且随着转染时间的延长,HO-1 mRNA的表达水平逐渐升高.空白对照组HO-1的表达率为2.0%,24 h组为29%,48 h组为85.6%,72 h组为84.6%.基因转染后24 h和72 h,可以观察到L-02细胞中EGFP的表达.经历缺氧-复氧实验后,空白对照组肝细胞的存活率为(37.7±3.5)%,48 h组肝细胞的存活率为(89.4±5.2)%,二者相比较,差异有统计学意义(P<0.01).结论 Ad-HO-1在体外能有效的转染人肝细胞;与未转染者相比,转染肝细胞的缺氧-复氧损伤程度较轻.     

活性氧在二氮嗪预处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用

目的探讨活性氧(ROS)在线粒体KATP(Mito-KATP)通道特异性开放剂二氮嗪预处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用及其机制。方法培养的成年大鼠心室肌细胞,随机分为5组:对照组、缺氧复氧组、二氮嗪预处理 缺氧复氧组、二氮嗪 ROS清除剂2-硫基丙酰氨基乙酸(MPG)预处理 缺氧复氧组、二氮嗪 蛋白激酶C特异性抑制剂氯化白屈菜赤碱预处理 缺氧复氧组。对照组常规培养;缺氧复氧组缺氧30min复氧40min;其余各组则加入相应的药物预处理10 min,二氮嗪、MPG、氯化白屈菜赤碱的终浓度分别为200、400、2μmol·L-1,更换无血清培养基培养20 min,然后缺氧30 min复氧40 min。采用MTT法、CK检测试剂、Na -K -ATPase活性检测试剂和Western blot等方法分别检测心肌细胞的活力、CK活性、Na -K -ATPase活性、细胞浆和细胞膜PKCε表达情况,计算细胞膜PKCε表达百分比。结果缺氧复氧可导致心肌细胞存活率及Na -K -ATPase活性降低, CK活性升高;二氮嗪预处理能增加细胞存活率及Na -K -ATPase活性,降低CK活性,增加细胞膜PKCε表达百分比;MPG抑制了二氮嗪预处理的心肌保护作用,并且在一定程度上抑制了PKCε的转位;CH可完全阻滞PKCε的转位,并且可降低二氮嗪预处理的心肌保护作用。结论Mito-KATP通道开放后释放的ROS参与了二氮嗪预处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤,其机制与PKCε的转位激活有关。     

异丙酚对鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤中的保护作用

心肌缺血/再灌注损伤是围术期经常面临的一种病理生理变化,静脉麻醉药异丙酚结构上的特殊性使其对各种因素（如缺血/再灌注）所致的氧化应激的诸多环节均有阻断作用,异丙酚的抗氧化性可能为其心肌保护作用的机制之一。本文研究了异丙酚预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及该作用是否与其抗氧化性有关。     

咪达唑仑对新生大鼠心肌细胞缺氧/复氧时细胞凋亡的影响

目的 探讨咪达唑仑对新生大鼠心肌细胞缺氧/复氧时细胞凋亡的影响.方法 分离、培养出生2～4 d的Wistar大鼠心肌细胞,将培养融合的心肌细胞随机分为7组(n=7):正常对照组(C组)、缺氧/复氧组(HR组)、外周型苯二氮革类受体(PBR)拮抗剂PK 11195组(P组)、PBR激动剂Ro 5-4864组(R组)、咪达唑仑组(M组)、PK 11195+Ro 5-4864组(PR组)和PK 11195+咪达唑仑组(PM组).HR组缺氧30 min复氧2 h建立缺氧/复氧模型.P组、R组、M组、PR组、PM组在培养皿中分别加入终浓度为10-4mol/L的PK 11195、Ro 5-4864和咪达唑仑及相应混合药物共同孵育,30 min后行缺氧/复氧.复氧2 h时收集细胞,采用HTC-Annexin V/PI双标法检测细胞凋亡情况,计算细胞凋亡指数(AI);Western blot法测定心肌细胞蛋白激酶C(PKc)表达水平;Meta Flour单细胞内钙测定系统测定细胞内钙离子浓度.结果 与C组比较,其余各组AI升高,除R组外其余各组细胞内钙离子浓度升高,PKC表达下调(P<0.01);与HR组比较,R组AI和细胞内钙离子浓度降低,PKC表达上调,M组和PM组AI降低(P<0.01);与P组比较,R组AI和细胞内钙离子浓度降低,PKC表达上调(P<0.01),PR组、PM组差异无统计学意义(P>0.05);与R组比较,M组、PR组、PM组Al和细胞内钙离子浓度均升高,PKC表达下调(P<0.01).结论 咪达唑仑10-4mol/L可减轻新生大鼠心肌细胞缺氧/复氧时细胞凋亡,其作用机制可能是非PBR依赖性的,且与细胞内钙离子浓度和PKC表达无关.     

hsa_circ_0081596在人神经细胞氧糖剥夺/复糖复氧损伤中的作用

目的:评价 hsa_circ_0081596在人神经细胞氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)损伤中的作用。 方法:培养人神经母细胞瘤细胞,采用随机数字表法将细胞(5代以内)分为4组( n＝20)：对照组(C组)、OGD/R组(O组)、OGD/R+小干扰RNA(siRNA)组(S组)、OGD...     

辛伐他汀对兔髓核细胞的影响

目的 观察辛伐他汀对兔髓核细胞Ⅱ型胶原(ColⅡ)及聚集蛋白聚糖(Agg)表达的影响.方法 取兔髓核细胞进行原代培养,传至第3代行ColⅡ免疫组织化学鉴定后随机分为5组,以不同浓度辛伐他汀处理:A组:空白对照组;B、C、D、E组分别为0.1、0.2、0.4、0.8 μmol/L辛伐他汀组.运用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测ColⅡ、Agg含量的变化,并行细胞活力检测.结果 辛伐他汀浓度超过0.2 μmol/L时ColⅡ及Agg的表达增加,0.4 μmoL/L时达到高峰(P＜0.05),0.8 μmol/L时ColⅡ及Agg表达下降.0.8 μmol/L处理组影响细胞活力,0.1～0.4 μmol/L范围时细胞活性无明显影响(P＜0.05).结论 辛伐他汀可促进兔髓核细胞ColⅡ及Agg的表达,改善椎间盘退变进程;在＜0.4 μmol/L的较低浓度内对细胞活力无明显影响.     

丙泊酚对大鼠海马神经元缺氧/复氧损伤中线粒体分裂及其超微结构的影响

目的 探讨丙泊酚在大鼠海马神经元缺氧/复氧损伤模型中对线粒体分裂及其超微结构的影响. 方法 培养原代海马神经元细胞至第8天,氧糖剥夺法建立海马神经元缺氧/复氧模型,按照随机数字表法分为6组(每组6瓶):空白对照组(C组),细胞未给予任何处理;赋形剂组(V组),赋形剂[二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO),终浓度为0.01％]加入细胞培养基;缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)组(I/R组);I/R+丙泊酚1μmol/L组(P1组)、I/R+丙泊酚10μmol/L组(P10组)、I/R+丙泊酚50 μmol/L组(P5o组),在细胞缺氧/复氧期间分别加入丙泊酚1、10、50 μmol/L.缺氧6h,复氧20 h后,用透射电子显微镜观察线粒体超微结构,激光共聚焦显微镜检测神经元细胞线粒体荧光强度及Drp1与Fis1蛋白的共定位程度,用Western blot检测线粒体分裂相关蛋白Drp1 、Fis1的表达. 结果 与C组比较,I/R组线粒体超微结构破坏明显、线粒体荧光强度(0.079±0.032)明显增高(P＜0.05),蛋白Drp1 (0.756±0.082)与Fis1 (1.164±0.070)的表达及共定位程度(0.815±0.048)明显升高(P＜0.05);与I/R组比较,P1组、P10组、P50组线粒体超微结构破坏减轻、线粒体荧光强度(0.065±0.010、0.056±0.011、0.070±0.024)明显减弱(P＜0.05),蛋白Drp1(0.627±0.005、0.322±0.009、0.696±0.007)与Fis1(0.773±0.012、0.670±0.022、0.796±0.016)的表达及共定位程度(0.649±0.015、0.627±0.008、0.702±0.029)明显降低(P＜0.05). 结论 丙泊酚1、10、50 μmol/L可以抑制体外大鼠海马神经元中线粒体分裂相关蛋白Drp1与Fis1的表达及两者的结合,从而抑制线粒体分裂.     

测定胎盘型碱性磷酸酶判定烟雾吸入所致肺泡I型细胞损害

通过动态观察血浆及支气管肺泡灌洗液中ＰＬＡＰ的变化，探讨烟雾吸入所致肺泡Ｉ型细胞损害及其与肺损伤发生发展的关系，采用大鼠烟雾吸入伤模型，分别检测了正常对照及致伤２，６，１２和２４小时动物的动脉血气，肺水量、ＢＡＬＦ中总蛋白和白蛋白含量，ＢＡＬＦ和血浆中ＰＬＡＰ含量，并作了病理检查，结果表明：动物伤后出现急性呼吸衰竭和严重肺水肿，ＢＡＬＦ中总蛋白及白蛋白含量明显升高，血浆及ＢＡＬＦＰＬＡＰ水平亦显著     

依托咪酯对大鼠皮层、海马脑片缺氧复氧损伤的保护作用

目的观察依托眯酯对大鼠皮层、海马脑片缺氧复氧损伤的保护作用及其机制。方法雄性SD大鼠10只,体重90-100 g,制备大脑皮质和海马脑片,随机分为对照组、缺氧复氧组、3 μmol ·L-1依托咪酯组、6μmol·L-1依托咪酯组、15 μmol·L-1依托咪酯组和6 μmol·L-1依托咪酯+γ-氨基丁酸 A(GABAA)受体拮抗剂Picrotoxin 50 μmol·L-1组。各组脑片缺氧10 min复氧120 min时,测定经三苯基氯化四唑氮染色的吸光度(A490),Fluo-3荧光染色后计算细胞内Ca2+浓度。结果缺氧复氧可导致大脑皮层、海马A490降低,细胞内Ca2+浓度升高,不同浓度依托咪酯可减弱缺氧复氧导致的上述改变,以 6 μmol·L-1依托咪酯的效果较好,且此作用可被GABAA受体拮抗剂完全拮抗。结论依托咪酯对大鼠皮层、海马脑片缺氧复氧损伤有一定的保护作用,可能通过GABAA受体介导,并降低Ca2+负荷有关。     

地氟醚对大鼠肺泡Ⅱ型细胞Na+-K+-ATP酶活性的影响

地氟醚(Desflurane,Des)作为一种新型的氟化麻醉剂,是否对Ⅱ型细胞Na+ -K+ -ATP酶产生同样的影响尚不清楚。本实验采用分离培养的大鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞(ATⅡ细胞),观察地氟醚对Ⅱ型细胞Na+ -K+ -ATP酶活性的影响,并探讨其可能机制。     

缺氧、氧损伤对肾小管上皮细胞α3整合素表达及粘附性的影响

目的 观察体外培养肾小管上皮细胞缺氧，氧损伤后细胞粘附性及α3整合素的改变，为细胞粘附性改变在急性缺血性肾功能衰竭发病机制中的作用提供理论依据。方法 采用化学缺氧与氧损伤模型。免疫荧光激光共聚焦显微镜观察培养人肾小管上皮细胞α3整合素分子表达及分布的改变，微管吸吮法观察细胞与基质以及细胞间粘附力的改变。结果 单纯氧损伤后肾小管上皮细胞α3整合素的表达无显著改变，缺氧损伤后其极性分布减弱，缺氧-氧损伤后极分布改变显著，这种分布改变与细胞和基质间的粘附性减弱和细胞间粘附性增强显著相关，结论 缺氧，氧损伤后肾小管上皮细胞α3整合素的极性分布改变对肾小管与基质和细胞间的粘附性均有显著影响。这种改变有可能在急性缺血性肾功能衰竭中发挥作用。