载脂蛋白E多态性研究的方法学进展

人载脂蛋白E（apoE）具有明显的遗传多态性，三种常见的等位基因（ε2、ε3、ε4）分别编码三种主要异构体（E2、E3、E4）。apoE多态性不仅是心血管疾病的一种重要易患因素，而且与Alzheimer病及老化密切相关。目前国内外检测apoE多态性的方法主要有两类：一类以极低密度脂蛋白（VLDL）或血清为样品检测apoE蛋白表型；另一类以DNA为样品检测apoE基因型。本文仅对apoE基因结构与多态性、apoE多态性检测方法及方法学评价作一综述，以期为apoE多态性的临床应用研究提供准确实用的方法学保证。     

等位基因特异性多重聚合酶链反应技术对载脂蛋白E基因多态性检测的评价

载脂蛋白E(apolipoproteinE,apoE)是血浆主要载脂蛋白之一,具有明显的遗传多态性,3种常见的等位基因(ε2、ε3、ε4)分别编码3种主要异构体(E2、E3、E4),产生6种不同的基因型(ε2/ε2、ε2/ε3、ε2/ε4、ε3/ε3、ε3/ε4、ε4/ε4)。apoE     

广东粤北地区瑶族载脂蛋白E基因多态性与血脂代谢的关系

目的检测广东粤北地区瑶族人群载脂蛋白E（apoE）基因多态性并探讨其与血脂代谢的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法（PCR-RFLP）对750例23～80岁广东粤北地区瑶族人群进行apoE基因多态性检测,分析瑶族人群apoE基因频率分布特点,并比较分析不同apoE基因型与血脂水平的关系。结果共检测瑶族apoE6种基因型,以E3／3型最常见,占61．47％,其次E3／4型,占23．07％,E2／3、E2／4、E4／4、E2／24种基因型分别占11．87％、1．73％、1．07％、0.8％;apoE有3种等位基因,以ε3分布频率最高,为81．4％,其次是ε4,分布的频率为9．6％,ε2分布频率最低,为9．0％;男性和女性apoE基因型分布无差异;ε4等位基因携带者的TG、TC、LDL、apoB水平显著高于E2携带者和ε3携带者（P〈0．05）。结论apoE基因多态性影响广东粤北地区瑶族人群的血脂代谢,apoEε4等位基因携带者的TG、TC、TC、LDL、apoB水平较高,推测ε4等位基因可能是瑶族人群患高脂血症的危险因素之一。     

保定市中老年人群载脂蛋白E基因多态性与脑梗死遗传易感性关系的研究

目的检测并分析保定市中老年人群中载脂蛋白E（apoE）基因多态性,探讨apoE基因多态性与脑梗死遗传易感性的关系。方法采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术,分析92例脑梗死患者和86例健康对照者apoE的3种等位基因ε2、ε3、ε4,做基因频率和基因型多态性分析。结果健康人群组apoE基因呈多态性,有6种基因型,即3种纯合子（ε2／2、ε3／3、ε4／4）和3种杂合子（ε2／3、ε3／4、ε2／4）。健康人群组apoE3种等位基因的基因频率分别为：ε25．8％、ε387．2％、ε47．0％;apoE基因型频率数为ε2／20、ε3／375．5％、ε4／41．2％、ε2／310．5％、ε2／42．3％、ε3／410．5％。脑梗死组apoE等位基因频率：ε24．3％、ε369．6％、ε426．1％;基因型频数：ε2／23％、ε3／342．3％、ε4／410．8％、ε2／311．9％、ε2／42％、ε3／430％。与健康人群组比较,脑梗死组ε3／3基因型频率较健康组明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）,ε4／4、ε3／4基因型频率较健康组明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）,ε2／2、ε2／3、ε2／4基因型频率较健康组差异无统计学意义（P〉0．05）。与健康组比较,脑梗死组ε3等位基因频率明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）,ε4等位基因频率明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）,ε2等位基因频率较健康组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论保定市健康人群组apoEe3基因出现率最高,ε2和ε4频率较低,以ε3／3基因型最多,而ε2／2、ε4／4相对较少,脑梗死患者中ε3／3、ε2／3基因型频率较低,ε3对脑梗死可能具有保护作用。ε4等位基因频率在脑梗死患者中增高,ε4可能是脑梗死的易感因素和风险因素。     

载脂蛋白E基因多态性与中青年脑梗死的相关性研究

目的:研究载脂蛋白E(apolipoprotein E,apoE)基因多态性与中青年脑梗死的相关性。方法:采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RELP)技术检测110例中青年脑梗死患者和126例健康对照者的apoE基因型,并进行基因多态性分析。结果:中青年脑梗死组ε3等位基因频率及ε3/3基因型频率较对照组降低(P<0.05),而ε4等位基因频率及ε4/4基因型频率较对照组升高(P<0.05)。结论:apoE基因多态性与中青年脑梗死的发病存在相关性,ε3可能对中青年脑梗死发病具有抵御作用,而ε4可能在中青年脑梗死的发病中起促进作用。     

早期复发性脑梗塞患者载脂蛋白E基因多态性分析

目的 探讨载脂蛋白E（apoE)基因多态性与早期脑梗塞复发的关系。方法 将年龄55－75岁之间脑梗塞患分为早期复发性脑梗塞与普通脑梗塞,和对照组三组分别以聚合酶链反应限制性片段长度分析法（PCR－RFLP）检测apoE基因型。结果 对照组apoE基因型以ε3／3最多,其次ε2／3,二组脑梗塞也以ε3／3最多,其次为ε3／4。二组病例ε3／4基因型、ε4等位基因频率均显高于对照组,尤以早期复发性脑梗塞组为突出,且其ε4等位基因频率明显高于普通脑梗塞组。结论 ApoEε4基因是脑梗塞的危险因素,并与脑梗塞早期复发有关。     

应用PCR检测载脂蛋白E表型

为探讨壮族人群载脂蛋白E（apoE）基因与冠心病之间的内在联系，应用FCR方法检测158例壮族健康人群和53例临床确诊的壮族冠心病患者apoE表型和等位基因频率分布，结果健康人群等位基因频率分布是ε20.108、ε3．813、ε40．079，冠心病组为ε20．076、ε30．792、ε40.132。冠心病患者中E4/3频率明显高于健康人群（P＜0．01），提示ε4可能是冠心病的遗传易患因子。     

载脂蛋白E多态性与老年性痴呆症的关系

载脂蛋白E(apolipoproteinE,apoE)是脂类代谢的重要成分,存在多态性,其基因位于19号染色体上,长度为3.7kb。常见的等位基因ε2、ε3和ε4的变异发生在第4外显子的两个位点,分别编码成熟apoE的第112位和158位氨基酸。E2两个位点都是半胱氨酸;E3的112位为半胱氨酸,158位为精氨酸;E4两个位点均为精氨酸。自1993年发现apoE多态性与老年性痴呆症(Alzheimer'sdisease,AD)有关,使apoE成为目前载脂蛋白研究中的热点。1989年,Shimano等人发现AD患者的ε4等位基因频率高于对照组。Namba等人通过尸检发现AD和Creutzfeldt-Jakob病人的脑内有淀粉…     

新疆哈萨克族居民载脂蛋白E基因多态性与血脂的关系

目的探讨新疆哈萨克族居民载脂蛋白E（apoE）基因多态性与血脂的关系。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）对100例新疆石河子地区哈萨克族高脂血症患者和91例健康对照者进行apoE基因分型,并对其血脂水平进行检测。结果高脂血症患者总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）水平明显高于健康对照组（P〈0．01）。共检出5种基因型,两组各基因型、等住基因频率分布无差异（P〉0．05）,均以野生型E3／3基因型和￡3等位基因为主。ε2等位基因携带者的LDL—C水平在两组中与其他等位基因携带者相比均有统计学差异。结论apoE基因多态性对新疆石河子地区哈萨克族的血脂、载脂蛋白水平有影响,即ε2等位基因携带者的LDL—C、apoB水平较低,而84等位基因携带者的LDL—C、apoB水平较高。     

载脂蛋白E基因多态性与辛伐他汀调脂疗效及hs-CRP的关系

目的 研究载脂蛋白E(apoE)基因多态性与辛伐他汀调脂疗效及超敏C反应蛋白(hs-CRP)的关系.方法 采用等位基因特异性多重PCR技术,对178例高脂血症患者进行载脂蛋白E基因分型,分析基因型与血脂水平、辛伐他汀调脂疗效及hs-CRP的关系.结果 载脂蛋白E基因多态性可影响血脂水平,ε3/2组TC,LDL-C低于ε3/3组(t=2.119,P=0.046;t=3.318,P=0.003),ε4/3组TC,LDL-C高于ε3/3组(t=3.079,P=0.004;t=3.038,P=0.004);辛伐他汀治疗12周后(20 mg/d),ε3/2组血清LDL-C下降程度大于ε3/3组(t=2.124,P=0.046);辛伐他汀治疗前,携带等位基因ε4组个体hs-CRP水平低于不携带等位基因ε4组(t=2.083,P=0.043),但未发现ε4等位基因对辛伐他汀降低hs-CRP产生影响(t=0.997,P=0.324).结论 载脂蛋白E基因多态性与辛伐他汀调脂疗效相关.     

载脂蛋白E与脑血管病

载脂蛋白E(apoE)是血液中最重要的载脂蛋白成分之一，它具有基因多态性，有六种遗传表现型。apoE与A1zheimer病(AD)的关系十分密韧，体外研究发现，apoEε3具有减少β—淀粉样蛋白(Aβ)积聚和保护tau蛋白磷酸化区，减少神经纤维缠结形成的作用，apoEε2的作用次之，apoEε4的作用最弱。apoE多态性与脑血管病的关系近几年越来越被重视。apoE为最常见的出血性卒中的危险指标；淀粉样脑血管病(CAA)相关的脑出血病病人可见ε2和ε4等位基因的过度量表达；ε4的脑出血(1CH)病人预后较差，其死亡率是无ε4的3倍；动脉硬化性脑血管病和冠心病的病变基础是相似的，所以叩oE也合影响脑血管病，动脉硬化脑梗塞(ACl)组ε3／3和ε3／4亚组Lp(a)均明显高于对照组，HDL低于对照组，ε3／4型Aβ组的LDL值高于对照组，揭示ε3／4与中青年ACI的发生有关，ε4也是中青年ACI的一种遗传易感性因子。CAA血管内沉积的Aβ与AD老年斑中的Aβ基本相似，93例尸检证实的中、重度CAA病人的ε4频率，与无ε4的病人相比增加2．9倍。13例重度CAA的ICH病人，ε4频率为62％，说明ε4在CAA的发生中起重要作用。ε4携带的CAA病人，与无这一等位基因的病人相比，ICH的发病年龄平均提前5年以上。apoE导致脑出血的可能机制是，apoE基因的表达可导致正常分泌的Aβ在早期CAA血管壁上快速螯合和聚积。CAA分子基础的阐明有助于探索新的、有益的防治方法；在评估相对年轻(小于70岁)的可疑CAA病人时，apoE基因型的确认有助于CAA的诊断。因此，更深入地研究apoE多态性的病理学和分子生物学，将会清楚的阐明其与人类疾病的关系。     

载脂蛋白E基因多态性与小儿肺炎支原体感染的相关性探讨

目的：探讨儿童外周血清中载脂蛋白 E（apolipoprotein E,ApoE）基因多态性与小儿肺炎支原体感染的相关性。方法收集西安医学院第一附属医院和西安市儿童医院2011年3月～2014年3月住院和门诊筛查肺炎支原体感染患儿和健康体检儿童血清共236例,年龄3～8岁,分两组：肺炎支原体感染组患儿110例和正常对照组儿童126例,采用多重等位基因特异性PCR（multi-AS PCR）技术检测各组中 ApoE的基因多态性。结果 ApoE基因呈多态性且有6种基因型,即3种纯合子（ε2/2,ε3/3,ε4/4）和3种杂合子（ε3/2,ε3/4,ε4/2）,其中ε3/2有四条带出现,ε3/3,ε3/4和ε4/2均是出现三条带,ε2/2和ε4/4出现两条带;两组中 ApoE基因型分布以ε3/3多见,对照组为66.7％,感染组为46.4％;小儿肺炎支原体感染组ε3等位基因频率及ε3/3基因型频率较对照组降低（P＜0.05）,而ε4等位基因频率及ε4/4基因型频率较对照组升高（P＜0.05）。结论 ApoE基因多态性与小儿肺炎支原体感染的发病存在相关性,ε3可能对小儿肺炎支原体感染具有抵御作用,而ε4可能在小儿肺炎支原体感染的发病中起促进作用。     

健康瑞典人群的载脂蛋白E多态性等位基因频率及其与血脂水平的关系

载脂蛋白E(apoE)在脂蛋白残体清除中起重要作用.在apoE基因位点通常有3个等位基因,即ε_2、ε_3和ε_4,分别编码3种蛋白异型,即apoE_2、E_3、和E_4.产生6种不同的表型.不同apoE异型之间结构和(或)电荷的不同能影响受体与脂蛋白之间的相互作用,从而影响脂蛋白代谢及血脂水平.很多研究报道不同种族人群的apoE多态性分布频率不同.然而在一些北欧国家中这方面的研究甚少.本研究的目的是调     

人载脂蛋白E表型-基因型差异出现率的调查

ApoE系299氨基酸残基的多肽，由肝合成。ApoE同血浆CM、VI，DI，和HDI，相关，且作为LDL受体及其受体相关蛋白质的配体。ApoE基因位于染色体19、与apoCⅠ和CⅡ成群。ApoE等位基因ε2，ε3和ε4分别编码，表达血浆apoE异形体E2、E3和E4。近年，载脂蛋白E（apoE）基因位点上的遗传变异引起了广泛的注意，其原因首先是aPOE异构体对人群中低密度脂蛋白胆固醇qDI，－C）浓度变化有重要影响；其次，具有E4等位基因者与高I，DL－C浓度相关并有罹患冠。心病（CHD）的危险性，而EZ携带者者亦可能有危险性；第三，E4等位基因与Alzh…     

新疆石河子地区哈萨克族载脂蛋白E基因多态性的检测

目的初步了解新疆石河子地区哈萨克族自然人群载脂蛋白E（apo E）基因多态性和表型分布特征,建立石河子地区哈萨克族apo E基因遗传资源库,并建立一种快速、敏感的apo E基因多态性分析的方法,为临床今后开展apo E基因分型提供实验室依据。方法采用聚合酶链反应（PCR）特异性扩增apo E基因含编码112位和158位氨基酸的基因序列,用限制性内切酶Hha I酶切,经12%聚丙烯酰胺凝胶电泳观察其片段长度多态性（RFLP）,确定PCR产物的基因型。结果新疆石河子地区哈萨克族自然人群apo E基因型频率分布分别是E3/3 65%、E3/4 17%、E2/3 16%、E2/4 1%、E4/4 1%;ε2、ε3、ε4等位基因频率分别是9.0%、81.5%、9.5%。其中ε2等位基因频率明显高于维吾尔族,ε4等位基因频率明显低于维吾尔族,但差异无统计学意义。结论PCR-RFLP简便、敏感、准确,适合一般实验室开展检测及大规模人群调查。     

载脂蛋白E基因分型与HCV感染的相关性分析

目的探讨载脂蛋白E（apoE）基因多态性与HCV感染的关系。方法应用等位基因特异性多重PCR对164例健康对照者和186例HCV感染者进行apoE基因型分析,并对其血脂水平进行检测。结果HCV感染者总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、apoB水平明显低于健康对照组（P〈0．05）;在apoE的3种基因中,HCV感染者E￡2等位基因E2／2明显低于健康对照组（P〈0．05）。结论apoE基因多态性可能是HCV感染的遗传因素之一,E￡2等位基因对防止HCV的感染起到一定的保护性作用。     

中国人群阿尔茨海默病载脂蛋白E基因多态性的Meta分析

目的综合评价中国人群载脂蛋白E基因多态性与阿尔茨海默病的相关性。方法计算机检索PubMed、EBSCO、中国学术期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库和万方数据库,检索时间均为1990年1月至2010年12月,收集载脂蛋白E基因多态性与中国人群阿尔茨海默病相关性的文献。应用RevMan 5.0软件对各个纳入研究的结果进行一致性检验和数据合并,并评估发表偏倚。结果共纳入9个研究,合计1122例患者。Meta分析结果显示:等位基因apoEε4是中国人群阿尔茨海默病危险基因[OR=3.53,95%CI(2.49,5.00),P<0.05];等位基因ApoEε3是中国人群阿尔茨海默病保护基因[OR=0.52,95%CI(0.40,0.68)];基因型ApoEε4/ε4、ApoEε4/ε3、ApoEε4/ε2是中国人群阿尔茨海默病危险基因型[OR=10.17,95%CI(4.25,24.19);OR=2.57,95%CI(2.04,3.25);OR=1.94,95%CI(1.13,3.34)];基因型ApoEε3/ε3是中国人群阿尔茨海默病保护基因型[OR=0.67,95%CI(0.57,0.77)]。结论中国人群阿尔茨海默病与载脂蛋白E的某些等位基因和基因型具有相关性。     

载脂蛋白E基因多态性与血脂水平及高脂血症的相关性

目的:分析载脂蛋白E基因多态性、血脂水平与高脂血症的关系。方法:选择2005-06/2006-03武汉大学中南医院收治的高脂血症患者165例为高脂血症组,另外108例健康体检者为健康对照组。所有受试者均采集空腹静脉血,应用等位基因特异性多重聚合酶链反应技术进行载脂蛋白E基因多态性分析,同时测定所有样本血清中总胆固醇,三酰甘油,载脂蛋白AI,载脂蛋白B,高、低密度脂蛋白胆固醇,脂蛋白α和载脂蛋白E水平,并比较不同载脂蛋白E基因型和等位基因受试者血脂水平的差异。结果:273例受试者全部完成测试进入结果分析。①共检出载脂蛋白E的4种基因型,以E3/3频率最高。高脂血症组ApoEE3/3基因型频率明显低于健康对照组(66.1%,75.0%,P<0.05),载脂蛋白E3/4基因型频率明显高于健康对照组(16.4%,6.5%,P<0.05),载脂蛋白Eε4等位基因频率又明显多于健康对照组(12.3%,3.2%,P<0.05)。②高脂血症组总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白E水平明显高于健康对照组(P<0.05),而高密度脂蛋白胆固醇,载脂蛋白AI明显低于正常对照组(P<0.05)。③高脂血症组中载脂蛋白Eε4携带者的总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平明显高于ε2和ε3携带者;载脂蛋白Eε2携带者的总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、脂蛋白α水平最低。载脂蛋白E水平顺序是E2/3>E3/3>E3/4。结论:载脂蛋白Eε4等位基因与高脂血症有关,载脂蛋白E基因多态性可能是高脂血症患者的遗传因素。     

老年代谢综合征与非酒精性脂肪肝患者载脂蛋白E基因多态性检测的意义

目的探讨老年代谢综合征（MS）与非酒精件脂肪肝（NAFL）的载脂蛋白E（apoE）基因多态性之间的关系及意义。方法本研究以60岁以上农村老年健康体检者筛检出的NAFL126例、NAFL＋MS105例、非脂肪肝125例及体检正常老年者95名为研究对象，其血液应用特异引物扩增人DNAapoE基因265bp片段和特异探针杂交后，通过分析熔解曲线检测基凶突变点及多态性．酶联免疫吸附试验（ELISA）检测apoE、apoE4基因浓度，并进行血脂、血糖、尿素、酶类、体质指数和血压分析。结果NAFL组和NAFL＋MS组以杂合子E2／3、E3／4基因型频率最高，分布频率分别为E2／3（36．5％、28．1％）、E3／4（27．2％、32．6％）、E3／3（32．3％、34．0％）、E2／4（2．4％、1．5％）、E4／4（0．8％、3．8％）、E2／2（0．8％、0．0％）；NAFL＋MS组E4／4频率显著高于对照组，apoE基因总浓度明显升高（P〈0．05），E2／3、E3／42组巾月旨等生化指标和体质指数及血压均有不同程度增高，差异有显著性（P〈0．05）。结论apoE基因多态性与老年NAFL和MS存在相关性，携带E3／4、E2／3型或E4／4型的个体存在，提示在决定个体老年Ms合并NAFL遗传易感性方面有重要作用，apoE基因112位和158位的氨基酸残基发生相应的变化可引起不同程度的脂质代谢障碍。     

阿尔茨海默病、血管性痴呆及轻度认知损害患者载脂蛋白E基因多态性分析

目的探讨载脂蛋白E（ApoE）基因多态性与阿尔茨海默病（AD）、血管性痴呆（VD）和轻度认知损害（MCI）的关系。方法收集AD、VD及MCI患者外周血检测ApoE基因型,进行χ²检验。结果所有患者中ε3/ε3基因型所占比例最大,未检测到ε2/ε2及ε4/ε4基因型。AD组ε3/ε4基因型（P=0.001）及ε4基因（P=0.013）高于MCI组。VD组ε4基因高于MCI组（P=0.044）。结论ApoE ε4基因与AD的关系最为密切,是AD的危险因素。但其与VD和MCI的关系尚需进一步研究。