3种吸血蚋酯酶同工酶的比较研究

目的探讨酯酶（EsT）同工酶酶谱特征在蚋类分类上的价值,并为蚋类系统发育的研究积累生物化学方面的基础资料。方法应用垂直板不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对素木蚋、双齿蚋和五条蚋进行EST同工酶电泳,测量并计算各酶带的迁移率。结果3蚋种的EST同工酶酶谱共显示10条酶带,种问存在明显差异,具有各自的特征性酶谱,种内个体之间、幼虫与蛹之间酶谱主带相同,非主带略有差异。结论EST同工酶酶谱可作为蚋种鉴定的特征之一。     

五株三带喙库蚊的酯酶同工酶比较研究

本文应用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和等电聚焦电泳(IEF)的方法对我国5个三带喙库蚊地区株的酯酶同工酶(EST.)进行了比较研究。结果表明,不同三带喙库蚊地区株的酯酶同工酶在PAGE上表现出3个位点共12条酶带,在IEF上表现出26条酶带。各地区株群体间的EST无显著性差异。     

爱母避孕环用于宫内避孕151例临床观察

目的观察爱母避孕的临床疗效。方法对用爱母环（以下简称A组）；圆形环（以下简称B组）及宫形环（以下简称c组）三组避孕效果及并发症进行比较分析。结果A组带器妊娠为0例，B组带器妊娠14例，C组带器妊娠4例，A组与B、C两组相比，有显著差异（P〈0．05）；并发：腰痛A组为4例，均为子宫屈度大者，B组为1例，C组为4倒，A组与B组比较，P〈0．05有显著差异；A组与C组比较，P〉0．05，无差异。并发月经失常：A组1例，B组10例，C组14例，A组与B组比较，P〈0．05，有显著差异；A组与C组比较，P〈0．01有极显著差异。并发白带增多：A组为1例，B组为5例，C组为1例，A组与B、C组两组比较，P〉0．05，无显著差异。结论爱母避孕环避孕效果好，并发症少，宜推广使用。     

天然酶制剂净普力对蚊卵的杀灭效果及机理研究

目的　研究不同浓度的净普力对不同卵龄的致乏库蚊、白纹伊蚊杀灭效果及其作用机理。方法　浸渍法与显微电镜技术。结果　 4种不同浓度的净普力在 3种不同的作用时间 (2 4h、4h、0 .5h)下对致乏库蚊卵、白纹伊蚊卵杀灭效果差异有极显著性 (P <0 .0 1) ,净普力对不同卵龄的致乏库蚊杀灭效果差异亦具有极显著性 (P <0 .0 1)。在扫描电镜下 ,受到药物作用与未受药物作用的致乏库蚊卵外形无差异 ,但在透射电镜下 ,受到药物作用的致乏库蚊卵内胚胎组织的胎膜成颗粒状 ,内部组织溶解。结论　净普力对蚊卵具有一定杀灭效果 ,由电镜结果可初步确定净普力可杀死蚊卵内的胚胎。     

活检钳不同预清洗方法的清洗质量评价

目的探讨活检钳3种不同预清洗方法的清洗质量。方法选择2014年5—8月某院使用后的宫颈活检钳（180件次）,随机分为A、B、C 组,每组60件次。A组对明显可见污染物进行预冲洗,B组浸泡于1∶500超浓缩酶液5 min,C组浸泡于1∶500超浓缩酶液5 min,并在水面下反复开合活检钳至少10次,同时对齿缝、沟槽处进行刷洗。3组不同预清洗后的活检钳均采用带光源放大镜目测、潜血试验及ATP生物荧光法进行清洗质量检测。结果采用带光源放大镜目测法进行清洗质量检测,A、B、C组器械合格率分别为60.00%、63.33%、80.00%;采用潜血试验进行检测,A、B、C组器械合格率分别为35.00%、50.00%、75.00%;上述两种检测方式均显示 C组器械合格率高于A、B组（均P＜0.05）。采用ATP生物荧光法检测,A、B、C组器械合格率分别为95.00%、98.33%、100.00%,3组比较差异无统计学意义（χ2=3.580,P=0.167）。A、B、C组不同清洗质量检测方法合格率比较,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论活检钳类器械机械清洗前酶液浸泡,手工预清洗时配合反复开合手柄能明显提高清洗质量;目测结合潜血试验是较为理想的清洗质量检测方法。     

胃炎大鼠胃壁神经元细胞蛋白基因产物9．5表达变化的研究

目的研究胃炎大鼠胃壁神经元细胞蛋白基因产物9．5（protein gene product9．5,PGP9．5）表达变化,探讨胃炎出现胃肠运动紊乱在肠神经方面可能的机制。方法将35只清洁级Wistar雄性大鼠按随机数字表法分成胃炎A组（10只）、胃炎B组（15只）、对照组C组（10只）,A组接种幽门螺杆菌菌株、B组接阿司匹林和0．6mol／L盐酸混合液灌胃分别制备胃炎动物模型,C组喂以生理盐水。3组均处死后行胃黏膜病理组织学检查与Hpylori细菌学检查,以PGP9．5标记胃壁肠神经元,测量胃壁神经元胞体最长直径（Dmax）（μm）、平均面积（μm^2）及平均光密度（nm）,并进行比较。结果A组可见Hp散在分布,快速尿素酶试验均阳性。B、C两组大鼠黏膜染色均未检出Hp,快速尿素酶试验均阴性。A、B两组大鼠黏膜深层均可见不同程度炎症细胞浸润;C组大鼠黏膜未见明显炎症细胞浸润和活动性改变。A、B两组胃壁神经元细胞表达PGP9．5平均面积[分别是（77．10±48．46）μm^2、（73．92±39．60）μm^2]、平均光密度值[分别是（53．25±41．40）nm、（45．33±33．20）nm]均明显低于C组[平均面积为（143．51±29．84）μm^2、平均光密度值为（85．00±14．32）nm],差异具有统计学意义（P〈0．01）,而A组与B组比较则差异无统计学意义（P〉0．05）。结论幽门螺杆菌感染和非甾体类抗炎药物引起胃炎时可能逦过改变胃壁神经元的形态与表达产生胃动力障碍或功能性消化不良症状。     

不同方法保湿清洗医疗器械效果的对比分析

目的 检测分析3种不同保湿方法清洗医疗器械的效果.方法 选择＜7d全院临床科室使用后的医疗器械,采用3种不同的保湿和清洗方法处理;A组:0.5％含氯消毒剂保湿+手工清洗,B组:酶清洗剂保湿+机洗,C组:碱性清洗液+酶清洗剂保湿+超声+升级后的清洗机清洗;清洗后的器械用目测方法:裸视和带光源5倍放大镜下观察及隐血试验法检测其清洗效果.结果 3种方法处理器械裸视目测合格率A组:为92.01％,B组:为96.07％,C组:为99.14％,C组明显高于A组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 医院应根据新标准的要求,选择合适的保湿清洗器械方法,建立正确的清洗流程.     

天然酶制剂对蚊幼和卵的杀灭效果研究

目的 探讨、研究天然酶制剂净普力对致乏库蚊、白纹伊蚊的幼虫、卵的杀灭效果及持效作用。方法 浸渍法。结果净普力对致乏库蚊的‰为0.1046％，对致乏库蚊的室内持效时间为15d；白纹伊蚊的LC50为0．1206％，对白纹伊蚊的室内持效时间为14d。结论 净普力对各龄蚊幼具有持效杀灭作用；对蚊卵孵化有抑制作用。     

抗溴氰菊酯淡色库蚊酯酶同工酶IEF初步分析

本文采用等电聚焦法电泳（ＩＥＦ）初步比较分析了ＬＣ５０分别为０．０２４，２．５８和２１．２７ＰＰＭ的敏感品系与抗溴氰菊酯品系淡色库蚊的酯酶同工酶，结果显示各谱带没有质的区别，但在ＰＩ５．６２，ＰＩ５．８０这两条主带宽度有交叉变化现象，这提示淡色库蚊抗溴氰菊酯的抗性产生可能与基因的表达调控有密切关系，这可为今后研究蚊虫抗性的产生机理提供有价值的参考。     

刀豆球蛋白A所致实验性肝损伤模型的构建

目的 建立刀豆球蛋白A（ConA）诱导小鼠实验性肝损伤的模型。方法Balb／C小鼠40只，分别尾静脉注射ConA，根据注射剂量，小鼠被随机分为4组（每组10只）：A组10mg／kg；B组20mg／kg；C组30mg／k；另设D组作为实验对照组，尾静脉仅注射生理盐水。给药后8h观察小鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）活性、死亡率和肝组织的病理改变。选择最佳ConA剂量，观察此剂量下不同时间点ALT活性、死亡率和肝组织的病理改变特点。结果经ConA处理后8h，A组与D组无小鼠死亡，B组死亡3只，C组小鼠全部死亡；各组血清AJJ值：A组为（215．55±70．19）IU／L，B组为（2516．14±764．69）IU／L，均显著高于对照组D组的（57．30±12．21）IU／L（分别t=-8．466、t=10．143，均P=0．000）。光镜下，A组可见肝细胞变性；B组和C组可见肝组织炎症细胞浸润和肝细胞变性、坏死，以C组为甚。20mg／kg Con A尾静脉注射，小鼠死亡率、ALT活性、肝组织炎症细胞浸润和肝细胞变性、坏死在一定时间范围内（24h）随时间增加而加剧。结论ConA小鼠实验性肝损伤模型建立，ConA剂量以20mg／kg、观察时间以8h为宜。     

Genetic association between highly active esterases and organophosphate resistance in Culex tarsalis

The genetics of two highly active esterases, A3H and B3H, in a methyl parathion-resistant strain (MP-R) of Culex tarsalis was investigated in relation to organophosphate (OP) resistance. The increased activity of esterase A3 and of esterase B3 is under the control of two distinct and closely linked (approximately 4.4 centimorgans) genes. Each gene possesses two forms, one controlling high activity (A3H or B3H, respectively) and one controlling low activity (A3L or B3L, respectively) of the enzymes. Organophosphate resistance in the MP-R strain is strongly associated with the presence of these highly active esterases. The results are discussed in relation to the present knowledge on the mechanisms responsible for high activity of esterases observed in other OP-resistant mosquitoes of the genus Culex.     

Amplified esterases B1 and A2-B2 in field populations of Culex pipiens from China

The main organophosphate (OP) resistance mechanism in the Culex pipiens complex is increased activity of esterases A and B. Fourth-stage larvae from 2 field populations of C. pipiens from Gaomi and Kunming, China, were compared for tolerance to parathion, dichlorovos (OP), and bassa (carbamate) insecticides. Both populations were resistant to OPs but not to bassa. Starch gel electrophoresis indicated that elevated esterase activity was correlated with OP resistance. High frequencies of amplified esterase genes B1 and A2-B2 (0.85 and 0.50) were discovered in Gaomi and Kunming, respectively. However, only low levels of gene amplification were detected.     

尖音库蚊复组有机磷抗性相关酯酶B2基因杂合型的分子特征

目的 研究自然种群尖音库蚊复组有机磷抗性相关酯酶B2基因EstB2杂合型的分子特征.方法 采集杭州市自然种群库蚊,提取单蚊DNA基因组,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法进行抗性相关酯酶的基因分型.对酯酶B2基因Estβ2型蚊虫的PCR产物,进一步选用Bfm Ⅰ内切酶进行酶切,确定酯酶B2基因Estβ2纯合犁及Estβ2杂合型.本次研究共提取207只单蚊DNA,156份PCR样本阳性,阳性率75.36%(156/207).结果 在156份PCR样本阳性,酯酶B2基因Estβ2型占28.20%(44/156);对该基因型进一步分型,其中Estβ2纯合型占90.90%(30/33),EstB2杂合型占9%(3/33);Estβ2杂合型是以Estβ2和一种亚型杂合(Estβ2/Estβ2<'1>)形式存在.结论 建立了在自然种群尖音库蚊复组中酯酶B2基因分型方法,研究证明了杭州自然种群库蚊存在一种有机磷抗性相关酯酶B2基因Estβ2杂合型.     

Detection of organophosphate detoxifying esterases by dot-blot immunoassay in Culex mosquitoes

A dot-blot immunoassay, using antiserum raised against esterase B1 responsible for organophosphate (OP) resistance in Culex quinquefasciatus, was used to study different laboratory strains and field collections of this species, as well as of Cx. pipiens, Cx. tarsalis, Anopheles albimanus and An. stephensi. The frequency of esterase B1 positive individuals revealed by this test was in agreement with the data obtained by other methods, indicating the potential of this method for the detection and monitoring of resistance due to increased detoxification by esterases.     

植物精油熏杀致倦库蚊对酯酶活性的影响

目的为揭示植物精油熏杀蚊虫的作用机制.方法用微量滴定板法测定了乙酰胆碱酯酶和非特异性酯酶活性在5种植物精油作用下的变化.结果芸香科植物精油、留兰香油和香茅油处理的致倦库蚊,其乙酰胆碱酯酶活性升高,增长率分别为12.85%,24.68%,23.50%,菊科植物精油和椒样薄荷油处理的蚊虫,其乙酰胆碱酯酶活性降低,分别降低了4.01%和5.92%.结论乙酰胆碱酯酶是留兰香油和香茅油的重要靶标酶,非特异性酯酶是芸香科植物精油、留兰香油、香茅油和椒样薄荷油的重要靶标酶.     

杭州市库蚊复组抗性相关酯酶Estβ基因类型和频率及动态分布

目的 了解杭州市尖音库蚊复组有机磷抗性相关酯酶基因类型、频率和动态分布,为蚊虫防制提供对策。方法 采用聚合酶链反应-限制性内切酶长度多态性（PCR-RFLP）方法进行抗性相关酯酶的基因分型,对2003-2005年杭州市自然种群库蚊酯酶基因的频率进行动态监测。同时结合酯酶淀粉凝胶电泳技术检测抗性酯酶基因表型监测。结果 连续3年用PCR-RFLP法对酯酶等位基因的分子分型结果表明,杭州市存在4种酯酶基因类型,主要存在世界范围内广泛分布的酯酶Estβ1（50％～54％）纯合型,其次是Estβ2（29％～34％）纯合型,Estβ1／B2（5％～10％）杂合型和一种新的EstβN（3．13％）纯合型等位基因型。用淀粉凝胶电泳分析2005年杭州市库蚊种群的抗性酯酶基因表型,主要是Estβ1型（61％）,其次是Estα2／β2型（12％）,Estαβ／β8型（7％）,敏感表型（29％）。结论 杭州市自然种群尖音库蚊复组存在多种抗性酯酶基因型,2003-2005年来Estβ1型为主,其次是Estα2／β2型,在2005年发现EstβN,是一个新的酯酶基因型,但是比例较低,仅占3．13％。该新的酯酶基因可否引起新的杀虫药剂的抗性,尚有待进一步的跟踪研究。扩增酯酶基因分子分型与抗性酯酶表型,也都表明了一致性。     

R2驱避剂对淡色库蚊空间驱避活性的研究

目的为了开发R2空间驱避剂。方法用不同浓度的R2对淡色库蚊做击倒、灭杀和空间驱避实验。结果R2对淡色库蚊无击倒和灭杀作用,R2的剂量增加到300mg／ml和实验时间延长到24h,对淡色库蚊均无直接的击倒和灭杀作用。用四因素三水平L9（3^4）的正交试验设计方法,以A（R2的质量）、B（志愿者与驱避剂的距离）、C（驱避剂放置高度）、D（乙醇与水的体积比）为考虑因素,在室内研究R2对淡色库蚊的空间驱避活性,得到最佳使用条件为：A212C2D2（200mg的R2、距离：1．0瑚、高度：1．0m、体积比：3：7）,各因素对驱避活性的影响程度为A〉B〉D〉C。结论在最佳条件下,R2对淡色库蚊的空间驱避活性较高,这将为开发R2空间驱避剂打下基础。     

淡色库蚊酯酶A2探针应用于现场抗性检测的研究

目的制备淡色库蚊酯酶A2探针,应用于现场蚊虫抗性检测。方法设计酯酶A2上下游引物,5′端地高辛标记,PCR法制备DNA探针并对扩增片段测序、分子杂交检测各现场蚊虫抗性。结果单蚊基因组DNA稀释至1/20时,抗性与敏感品系杂交点的阳性率有差别。应用酯酶A2探针检测各现场蚊虫,唐口种群的杂交阳性率为33%,微山种群的杂交阳性率为38%,滕州种群的杂交阳性率为56%。结论应用酯酶A2探针能够检测现场蚊虫抗性水平。该方法灵敏、可靠,为蚊虫有机磷杀虫剂抗性分子生物学检测提供了选择。