纳米银改性钛片对口腔常见致病菌抗菌性能实验研究

目的：通过纳米银改性钛片对牙龈卟啉单胞菌和伴放线放线杆菌抗菌能力的观察,探讨口腔种植体颈部钛表面抗菌改性的可行性。方法：实验组为纳米银改性钛片,对照组为光滑钛片,每组各10片。通过贴膜法和抗粘附实验两种方法检测纳米银改性钛片的抗菌性能。结果：贴膜法显示培养24 h后纳米银改性钛片对牙龈卟啉单胞菌和伴放线放线杆菌的抗菌率达到90％;抗粘附实验显示牙龈卟啉单胞菌散在分布,且对照组多于实验组,伴放线放线杆菌散在分布对照组钛片上大量粘附,呈片状或团状集聚在一起。结论：纳米银改性后的钛片抗菌性能突出,是一种具有前景的抗菌生物植入材料。     

牙周致病菌的共聚及其对人工牙根面黏附力的影响

目的比较具核梭杆菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普雷沃菌和伴放线嗜血菌等牙周病致病菌彼此之间的共聚力大小,观察四者在具核梭杆菌介导下对人工牙根面黏附力的影响,了解牙周生物膜结构中细菌间可能存在的相互作用。方法目测具核梭杆菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普雷沃菌和伴放线嗜血菌彼此间的共聚力,以放射性核素闪烁计数四者在具核梭杆菌黏附和未黏附状况下对胶原包被羟磷灰石（c—HA）的黏附间是否存在着差异。结果具核梭杆菌、牙龈啉单胞菌、中间普雷沃菌和伴放线嗜血菌彼此间存在着共聚作用,其中,具核梭杆菌与牙龈卟啉单胞菌、牙龈卟啉单胞菌与中间普雷沃菌间的共聚度均可达4度,具核梭杆菌与其他三菌间的共聚度均大于3度。牙龈卟啉单胞菌、中间普雷沃菌和伴放线嗜血菌在具核梭杆菌黏附的状况下对c—HA的黏附率高于其在具核梭杆菌未黏附时的黏附率,具核梭杆菌在未黏附的状况下对c—HA的黏附率高于其在黏附后的黏附率。结论具核梭杆菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普雷沃菌和伴放线嗜血菌彼此间均存在共聚关系,具核梭杆菌可能对其他牙周病致病菌定植于牙菌斑起到了桥梁作用。     

牙周致病菌的共聚及其对人工牙根面黏附力的影响

目的比较具核梭杆菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普雷沃菌和伴放线嗜血菌等牙周病致病菌彼此之间的共聚力大小,观察四者在具核梭杆菌介导下对人工牙根面黏附力的影响,了解牙周生物膜结构中细菌间可能存在的相互作用。方法目测具核梭杆菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普雷沃菌和伴放线嗜血菌彼此间的共聚力,以放射性核素闪烁计数四者在具核梭杆菌黏附和未黏附状况下对胶原包被羟磷灰石(c-HA)的黏附间是否存在着差异。结果具核梭杆菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普雷沃菌和伴放线嗜血菌彼此间存在着共聚作用,其中,具核梭杆菌与牙龈卟啉单胞菌、牙龈卟啉单胞菌与中间普雷沃菌间的共聚度均可达4度,具核梭杆菌与其他三菌间的共聚度均大于3度。牙龈卟啉单胞菌、中间普雷沃菌和伴放线嗜血菌在具核梭杆菌黏附的状况下对c-HA的黏附率高于其在具核梭杆菌未黏附时的黏附率,具核梭杆菌在未黏附的状况下对c-HA的黏附率高于其在黏附后的黏附率。结论具核梭杆菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普雷沃菌和伴放线嗜血菌彼此间均存在共聚关系,具核梭杆菌可能对其他牙周病致病菌定植于牙菌斑起到了桥梁作用。     

三种纳米载银无机抗菌剂对口腔致病菌的抗菌活性比较

目的：比较3种国内纳米级载银无机抗菌剂对口腔病原菌的抗菌活性。方法：采用微量板液体稀释法．测定GKJ-R、Conval PAg-40、TiO2／Ag3种纳米级载银无机抗菌剂对变形链球菌（ATCC25135）、乳酸杆菌（ATCC393）、黏性放线菌（ATCC19246）、牙龈卟啉单胞菌（ATCC33277）的最小杀菌浓度（MBC）。结果：3种纳米级载银无机抗菌剂对变形链球菌、乳酸杆菌、黏性放线菌、牙龈卟啉单胞菌均有良好的杀菌效果，且抗菌能力没有显著区别。结论：为纳米载银无机抗菌剂在牙科抗菌材料领域应用提供理论依据。     

含银离子羟基磷灰石表面涂层的钛板对6种牙周致病菌的体外抑菌作用

目的 探讨含银离子羟基磷灰石表面涂层的钛板对于牙周致病菌的体外抑菌作用.方法 对比普通羟基磷灰石表面钛板与含银离子羟基磷灰石表面钛板的抗菌能力,采用平板菌落计数法比较2种材料对6种常见牙周致病菌的体外抑菌作用,包括:A.牙龈卟啉单胞菌(ATCC,33277),B.牙龈卟啉单胞菌381,C.牙髓卟啉单胞菌(ATCC,34...     

五倍子对5种常见牙周细菌抑制作用的体外研究

目的：观察五倍子对5种常见牙周细菌的作用。方法：采用试管二倍稀释法，测定五倍子水提取物在体外厌氧环境对牙龈卟啉单胞菌，中间普氏菌，伴放线放线杆菌，具核俊杆菌和血链球菌的最小抑菌浓度（MIC），结果：五倍子对各实验细菌均有抑制作用。对牙周常见可疑致病菌牙龈卟啉单胞菌，伴放线放线杆菌，中间普错菌，具核梭杆菌的MIC值均为3．12％，对牙周有益菌血链球菌的MIC值则为12．5％，结论：浓度为3．12％的五倍子在不破坏牙周局部生态平衡的情况下可有效抑制牙周细菌的生长。     

龈下优势菌在金合金、镍铬合金与纯钛表面黏附的实验观察

目的研究龈下优势菌在种植钛与冠修复材料表面的黏附特征。方法将烤瓷冠修复的两种基底冠材料（金铂合金、镍铬合金）分别粘接在种植纯钛板上，与四种龈下优势菌：伴放线放线杆菌（Aa），牙龈卟啉单胞菌（Pg），具核梭杆菌（Fn），中间普氏菌（Pi）共同厌氧孵育，采用菌落形成单位计数法（CFU）量化测定培养试件表面的细菌黏附量；扫描电镜（SME）观察试件表面细菌黏附的情况。结果四种龈下优势菌在金铂合金-钛试件表面细菌黏附量明显多余镍铬合金-钛试件。结论四种龈下优势菌单独附着能力有差异，Aa〉Fn〉Pg〉Pi。金铂合金的组织相容性优于镍铬合金。     

抗牙龈卟啉单胞菌IgY的制备及抑菌效果

目的:使用牙龈卟啉单胞菌(P.g)诱导产蛋母鸡特异性IgY抗体产生及制备,特异性IgY抗体抑制P.g及其它牙周病病因菌生长.方法:采用免疫接种、水稀释、盐析、液体培养抑菌及ELISA等方法,诱导、提纯IgY抗体,抑制P.g及其它牙周病病因菌生长.结果:诱导产生的IgY抗体经硫酸铵盐析提取纯度达87.6%～89.1%,IgY特异性结合牙龈卟啉单胞菌抗原的结合效价1∶ 1 600.制备的抗牙龈卟啉单胞菌IgY抗体与牙龈二氧化碳噬纤维菌、中间普氏菌、伴放线放线杆菌、具核梭杆菌等牙周病致病菌的交叉免疫反应抗原结合效价分别为1∶ 800、1∶ 800、1∶ 6 400、1∶ 12 800.抗牙龈卟啉单胞菌IgY在5.0、1.0、0.1 g/L时,分别与牙龈卟啉单胞菌、牙龈二氧化碳噬纤维菌、伴放线放线杆菌、中间普氏菌、具核梭杆菌、粘性放线菌、变形链球菌等厌氧菌在(1×108) CFU/L和(5×108) CFU/L时培养24 h和72 h均有不同程度的抑制其生长作用.结论:牙龈卟啉单胞菌免疫产蛋母鸡诱导产生的特异性IgY抗体在一定的浓度内有抑制牙龈卟啉单胞菌生长,以及抑制多种牙周病致病菌生长的作用.牙龈卟啉单胞菌与这些牙周病病因均存在着共同抗原,其可能具有防治牙周病的前景.     

三种无机抗菌剂对常见牙体牙周致病菌的抗菌效果

目的 比较三种国内纳米级载银无机抗菌剂对口腔病原菌的抗菌活性。方法 采用微量板液体稀释法，测定GKJ-R、Conval PAg-40、TiO2／Ag三种纳米级载银无机抗菌剂对变形链球菌（ATCC140）、乳酸杆菌（ATCC393）、粘性放线菌（ATCC19246）、牙龈卟啉单胞菌（ATCC25261）的最小杀菌浓度（MBC）。结果 三种纳米级载银无机抗菌剂对变形链球菌、乳酸杆菌、粘性放线菌、牙龈卟啉单胞菌均有良好的杀菌效果，且抗菌能力没有显著区别。结论 为纳米载银无机抗菌剂在牙科抗菌材料领域应用提供理论依据。     

二甲胺四环素胶原制剂体外抗菌研究

目的研究胶原蛋白为载体复合二甲胺四环素制成的牙周缓释制剂的抗菌效果,以期寻找辅助治疗牙周炎的新制剂。方法采用杯碟法对含20mg/g盐酸二甲胺四环素的胶原牙周缓释剂和派丽奥软膏进行牙周常见致病菌的抑菌实验,测定最小抑菌浓度（MIC）和抑菌环直径。菌珠选用国际标准菌株牙龈卟啉单胞菌、中间型普里沃氏菌、巨核梭形杆菌、伴放线放线杆菌和粘性放线菌。结果胶原牙周缓释制剂和派丽奥软膏对各实验菌株均有抑菌作用,牙龈卟啉单胞菌、中间型普里沃氏菌、巨核梭形杆菌、伴放线放线杆菌的MIC为0.31mg/L,粘性放线菌的MIC为1.2mg/L。2种药物比较抑菌效果无显著性差异（P〉0.05）。结论胶原牙周缓释制剂对牙周主要致病菌具有良好的抑制作用。     

纳米抗菌复合膜的理化性能及对口腔细菌抗菌性能的实验研究

目的采用载银纳米磷灰石/二氧化钛（Ag- nHA- nTiO2）和聚酰胺66（PA66）的浆料在常压共溶法下制成纳米抗菌复合膜,并对该膜的理化性能和抗菌性能进行测试。方法采用原子吸收光谱仪（AAS）、X射线衍射仪（XRD）、扫描电镜（SEM）和X射线能谱分析仪（EDX）等检测手段分析Ag- nHA- nTiO2/PA66（实验组）和n- HA/PA66（对照组）膜的表面形貌和横切面、元素构成和分布。使用金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌和变异链球菌来检测两种膜的抗菌性能。结果XRD检测显示两种膜中有HA的衍射峰。EDX结果显示实验组膜中含有Ca、P、Ti和Ag等元素,而且它们分布均匀。SEM发现两种膜的表面和横切面均为多孔结构,孔的直径为20～30 μm。抗菌实验显示对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抗菌率为50.10%和56.31%,而对牙龈卟啉单胞菌、变异链球菌和具核梭杆菌分别为91.84%、90.49%和90.64%。SEM还发现实验组膜表面黏附的细菌明显少于对照组。结论纳米复合抗菌膜为口腔引导性骨再生技术提供了一种既具有良好生物相容性又有抗菌活性的新材料。     

应用IBAD方法制备纯钛表面多孔TCP／HA涂层材料的微观分析

目的:为了改善钛种植体的生物相容性,对纯钛表面沉积多孔磷酸三钙/羟基磷灰石(Tricalciumphosphate/hydroxyapatite,TCP/HA)复合涂层材料的表面结构和化学成分进行分析,并与沉积羟基磷灰石(Hydroxyapatite,HA)的钛表面进行对比。方法:用离子束辅助沉积方法(Ionbeamassisteddeposition,IBAD)在纯钛表面沉积HA和TCP/HA涂层材料,通过扫描电镜(Scanningelectronmicroscope,SEM)、原子力显微镜(Atomicforcemicroscopy,AFM)、X射线能谱分析(EnergydispersiveX-rayanalysis,EDX)以及X射线衍射(X-raydiffraction,XRD)技术,检测两种涂层材料表面的微观形态和化学成分,并进行比较。结果:SEM和AFM显示TCP/HA涂层材料表面存在多孔结构,表面化学成分分析显示TCP/HA涂层的钙磷比低于HA,XRD证实TCP/HA涂层内同时存在TCP和HA两种化合物。结论:用IBAD方法在纯钛表面成功地沉积了具有多孔结构的TCP/HA复合涂层材料,该涂层材料和基体材料的结合牢固,改善了基体材料的生物相容性,是一种有应用前景的种植体表面涂层材料。     

钛表面羟磷灰石/壳聚糖-转化生长因子-β1缓释微球复合涂层的制备及其对成骨细胞黏附与增殖的影响

目的 探讨在钛表面制备羟磷灰石（HA）/壳聚糖（CS）-转化生长因子-β1（TGF-β1）缓释微球复合涂层及其对成骨细胞黏附与增殖的影响。方法 通过物理-化学-生物改性联合方式制备HA/CS-TGF-β1 缓释微球复合涂层。运用扫描电镜（SEM）、X射线衍射仪（XRD）、傅里叶变换红外光谱（FTIR）等分析涂层的形貌和物相;使用CCK-8及免疫荧光检测其对成骨细胞的细胞毒性及细胞黏附和增殖的影响。结果 成功制备HA/CS-TGF-β1缓释微球复合涂层,该涂层制备具有超亲水性,体外释药稳定且时间长,成骨细胞在此复合涂层的钛片上生长无抑制,且对细胞的黏附与增殖具有促进作用。结论 HA/CS-TGF-β1缓释微球复合涂层在体外对于成骨细胞的黏附与早期增殖有明显的促进作用,具有良好的运用前景。     

次氯酸钠溶液抗菌体积分数的测定

目的评价次氯酸钠溶液对牙龈卟啉单胞菌、中间普雷沃菌、具核梭杆菌和粪肠球菌牙髓病原菌的体外抗菌性能。方法采用琼脂稀释法测定次氯酸钠溶液对牙龈卟啉单胞菌、中间普雷沃菌、具核梭杆菌和粪肠球菌的抗菌活性,其抗菌活性以最低抑菌体积分数(MIVF)和最低杀菌体积分数(MBVF)表示。结果次氯酸钠溶液对牙龈卟啉单胞菌、中间普雷沃菌、具核梭杆菌和粪肠球菌的MIVF分别为0.035%、0.07%、0.018%和0.28%,MBVF分别为0.035%、0.07%、0.035%和0.28%,其总的抗菌效果排序分别为具核梭杆菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普雷沃菌和粪肠球菌。结论次氯酸钠对口腔常见厌氧菌有抑制和杀灭作用,具有理想的抗菌性能。0.5%MBVF的次氯酸钠溶液的抑菌性能可满足临床需求。     

多孔磷酸三钙-羟基磷灰石对人牙龈成纤维细胞黏附行为的影响

目的　研究多孔磷酸三钙 羟基磷灰石 (tricalcium phosphate hydroxyapatite ,TCP HA)复合材料对人牙龈成纤维细胞黏附行为的影响。方法　应用离子束辅助沉积法在纯钛试件表面制备多孔TCP HA复合涂层材料和羟基磷灰石 (hydroxyapatite,HA)涂层材料 ,定量对比人牙龈成纤维细胞在涂层和未涂层材料表面初期黏附、增殖、细胞铺展面积、细胞外基质和黏着斑形成的情况。结果　TCP HA和HA涂层材料表面黏附的细胞数、细胞铺展面积高于纯钛未涂层组 ,差异有显著性(P <0 0 5 ) ,黏着斑的形成早于未涂层组 ;TCP HA表面黏附的细胞数和Ⅰ型胶原的形成都高于纯钛未涂层组和HA涂层组。在培养 2 4h后TCP HA组表面黏附细胞数为 198 1± 2 7 7,Ⅰ型胶原形成的荧光强度为 15 4 10± 31 5 6 ,同纯钛组表面的细胞数 ( 12 5 1± 2 9 9)和Ⅰ型胶原荧光强度( 132 6 3± 35 2 6 )相比 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论　与纯钛未涂层和HA涂层材料相比 ,多孔TCP HA复合涂层材料更有利于人牙龈成纤维细胞的初期黏附 ,具有更良好的生物相容性     

Modulation of the antibody response by Porphyromonas gingivalis and Fusobacterium nucleatum in a mouse model

Successive immunization of mice with Fusobacterium nucleatum and Porphyromonas gingivalis has been shown to modulate the specific serum IgG responses to these organisms. The aim of this study was to investigate these antibody responses further by examining the IgG subclasses induced as well as the opsonizing properties of the specific antibodies. Serum samples from BALB/c mice immunized with F. nucleatum (gp1-F), P. gingivalis (gp2-P), P. gingivalis followed by F. nucleatum (gp3-PF) F. nucleatum followed by P. gingivalis (gp4-FP) or saline alone (gp5-S) were examined for specific IgG1 (Th2) and IgG2a (Th1) antibody levels using an ELISA and the opsonizing properties measured using a neutrophil chemiluminescence assay. While IgG1 and IgG2a subclasses were induced in all immunized groups, there was a tendency towards an IgG1 response in mice immunized with P. gingivalis alone, while immunization with F. nucleatum followed by P. gingivalis induced significantly higher anti-P. gingivalis IgG2a levels than IgG1. The maximum light output due to neutrophil phagocytosis of P. gingivalis occurred at 10 min using nonopsonized bacteria. Chemiluminescence was reduced using serum-opsonized P. gingivalis and, in particular, sera from P. gingivalis-immunized mice (gp2-P), with maximum responses occurring at 40 min. In contrast, phagocytosis of immune serum-opsonized F. nucleatum demonstrated peak light output at 10 min, while that of F. nucleatum opsonized with sera from saline injected mice (gp5-S) and control nonopsonized bacteria showed peak responses at 40 min. The lowest phagocytic response occurred using gp4-FP serum-opsonized F. nucleatum. In conclusion, the results of the present study have demonstrated a systemic Th1/Th2 response in mice immunized with P. gingivalis and/or F. nucleatum with a trend towards a Th2 response in P. gingivalis-immunized mice and a significantly increased anti-P. gingivalis IgG2a (Th1) response in mice immunized with F. nucleatum prior to P. gingivalis. Further, the inhibition of neutrophil phagocytosis of immune serum-opsonized P. gingivalis was modulated by the presence of anti-F. nucleatum antibodies, while anti-P. gingivalis antibodies induced an inhibitory effect on the phagocytic response to F. nucleatum.     

牙周菌斑生物膜的体外模型建立

目的 观察血链球菌、牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌在人工牙根面上随培养时间变化形成单菌种、双菌种和三菌种生物膜的能力,期望在体外建立龈下菌斑生物膜模型.方法 培养血链球菌、牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌试验菌株,制备胶原包被羟磷灰石的人工牙根面,在人工牙根面上培养形成试验菌株的单菌种、双菌种和多菌种生物膜,并用扫描电镜观察三种试验菌株分别在培养24、48和72 h后形成单菌种、双菌种和三菌种生物膜的情况.结果 单独培养24h的血链球菌在人工牙根面上形成的完整生物膜,具备三维立体结构;培养48和72 h后,细菌密度逐渐增大,生物膜更加成熟.单独培养48 h的牙龈卟啉单胞菌形成的完整生物膜,具备三维立体结构;培养72 h后,细菌密度有所降低.牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌培养24h形成的完整的双菌种生物膜,具备三维立体结构;培养48和72h后已看不出完整的生物膜结构,两菌的数量大幅度降低.血链球菌、牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌在培养24h时形成的较完整的三菌种生物膜,初步具备三维立体结构;三菌中,血链球菌、具核梭杆菌所占比列远大于牙龈卟啉单胞菌;培养48 h后,三菌种生物膜更加成熟,牙龈卟啉单胞菌所占比例有所增加,此时的生物膜已具备三维立体结构;培养72 h后,三菌种仍保持较完整的生物膜结构,但数量均有所下降.结论 血链球菌、牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌在培养24h时间点已基本形成了完整的单菌种、双菌种和三菌种生物膜结构,故在今后建立龈下菌斑生物膜模型时可选取24h这一时间点.     

牙周菌斑生物膜的体外模型建立

目的观察血链球菌、牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌在人工牙根面上随培养时间变化形成单菌种、双菌种和三菌种生物膜的能力,期望在体外建立龈下菌斑生物膜模型。方法培养血链球菌、牙龈卟啉单胞茵和具核梭杆菌试验菌株,制备胶原包被羟磷灰石的人工牙根面,在人工牙根面上培养形成试验菌株的单菌种、双菌种和多菌种生物膜,并用扫描电镜观察三种试验菌株分别在培养24、48和72h后形成单菌种、双菌种和三菌种生物膜的情况。结果单独培养24h的血链球菌在人工牙根面上形成的完整生物膜,具备三维立体结构;培养48和72h后,细菌密度逐渐增大,生物膜更加成熟。单独培养48h的牙龈卟啉单胞菌形成的完整生物膜,具备三维立体结构;培养72h后,细菌密度有所降低。牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌培养24h形成的完整的双菌种生物膜,具备三维立体结构;培养48和72h后已看不出完整的生物膜结构,两菌的数量大幅度降低。血链球菌、牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌在培养24h时形成的较完整的三菌种生物膜,初步具备三维立体结构;三菌中,血链球菌、具核梭杆菌所占比列远大于牙龈卟啉单胞菌;培养48h后,三菌种生物膜更加成熟,牙龈卟啉单胞菌所占比例有所增加,此时的生物膜已具备三维立体结构;培养72h后,三菌种仍保持较完整的生物膜结构,但数量均有所下降。结论血链球菌、牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌在培养24h时间点已基本形成了完整的单菌种、双菌种和三菌种生物膜结构,故在今后建立龈下菌斑生物膜模型时可选取24h这一时间点。