荧光定量聚合酶链反应检测c-myc在乳腺癌诊断中的临床应用

目的建立荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）法检测核内原癌基因c—myc表达水平,探讨其在乳腺癌诊断和治疗监测中的应用。方法建立FQ—PCR法,并以β2-微球蛋白作为内对照测定30名健康女性体检者、30例良性乳腺疾病患者和81例乳腺癌患者外周血中c-myc的表达水平。结果c—myc表达水平在正常对照组和良性乳腺疾病组间差异无统计学意义（P〉0．05）,乳腺癌组均高于前2组（P〈0．05）,β2-微球蛋自在3组间差异无统计学意义（P〉0．05）。81例乳腺癌患者阳性率为40．7％,良性乳腺疾病组为0。c—myc表达水平与患者年龄和肿瘤大小和类型无关（P〉0．05）,与乳腺癌临床分期、组织学分级以及腋淋巴结转移相关（P〈0．05）。结论FQ—PCR技术是高灵敏度、高特异性的快速定量检测c—myc方法,可有效监测乳腺癌的诊断、疗效、转移和预后。     

荧光定量聚合酶链反应检测CCND1基因扩增在乳腺癌诊断中的应用

目的应用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）法检测细胞周期蛋白D1（CCND1）基因表达水平,探讨其在乳腺癌诊断和治疗监测中的应用价值。方法应用FQ-PCR法,并以β2-微球蛋白为内对照测定15例健康女性体检者、30例良性乳腺疾病患者和81例乳腺癌患者外周血中CCND1的表达量。结果CCND1表达水平在健康对照组和良性乳腺疾病组间差异无统计学意义（P〉0．05）,乳腺癌组均高于前2组（P〈0．05）,β2-微球蛋白在3组间差异无统计学意义（P〉0．05）。81例乳腺癌患者阳性率为45．7％,良性乳腺疾病组为0。结论FQ-PCR技术是高度灵敏、高度特异的快速定量检测CCND1方法,可有效监测乳腺癌的诊断：疗效、转移,评估其预后。     

佛波酯诱导K562细胞分化过程中WT1基因表达及其异构体比例变化的研究

目的 分析佛波酯（TPA）诱导K562细胞分化过程中WT1基因及其四种异构体表达水平及比例变化，探讨WT1基因不同异构体与细胞分化的关系。方法采用TPA诱导K562细胞分化，以硝基四氮唑蓝（NBT）还原实验及细胞免疫表型CD9检测判断细胞分化程度；实时荧光定量RT—PCR技术检测K562细胞被诱导分化过程中总WT1基因表达水平，并计算出WT1（＋／＋）、WT1（＋／-）、WT1（-／＋）、WT1（-／-）四种异构体在细胞分化过程中的比例变化。结果 TPA诱导K562细胞分化过程中NBT阳性率及CD9表达阳性率均有显著增加（P〈0．05）。WT1相对表达水平由分化前（4．67±1．11）×10^-3，降到（1．67±0．45）×10^-3（P〈0．05），随后回升，96h达（4．64±1．53）×10^-1；四种异构体比例变化不-致，WT1（＋／＋）比例由0h的（39．65±19．46）％降至96h的（15．25±7．27）％，而WT1（-／-）异构体由0h的（15．38±11．34）％上升至96h的（37．60±11．90）％，另外两种异构体比例变化无显著性差异。结论 TPA诱导K562细胞分化过程中总WT1表达水平24h内迅速下降，随后回升。分化前异构体以WT1（＋／＋）为主，而分化后以WT1（-／-）为主，提示WT1基因可能通过调节四种异构体的比例而发挥抑制分化或促进分化的作用。     

人工肝和肝移植术后的乙肝三系统定量观察

目的观察人工肝技术和肝移植手术对重症乙肝患者乙肝病毒标志物的影响。方法乙肝三系统定量采用时间分辨免疫荧光技术,乙肝病毒DNA定量采用实时荧光定量PCR法。结果28例实施人工肝技术的重型肝炎患者治疗前后的乙肝三系统定量和HBVDNA定量结果为：HBsAg171．19±32．10ng／mL,HBeAg0．03±0．029NCU／mL,抗-HBe3．97±4．61NCU／mL,抗-HBc5．98±3．31NCU／mL,HBVDNA（1．1×10^7）±（6．81×10^6）copy／mL和HBsAg168．14±39．40ng／mL,HBeAg0．02±0．023NCU／mL,抗-HBe3．95±4．34NCU／mL,抗-HBc6．41±3．13NCU／mL,HBVDNA（1．1×10^7）±（6．23×10^6）copy／mL。P值均大于0．05,差异无统计学意义。26例施行肝移植手术的患者治疗前后的乙肝三系统定量和HBVDNA定量结果分别为HBsAg144．65±77．00ng／mL,HBeAg0．02±0．028NCU／mL,抗-HBe4．32±6．43NCU／mL,抗-HBc6．04±4．88NCU／mL,HBV DNA（1．0×10^7）±（6．89×10^6）copy／mL和HBsAg6．54±3．32ng／mL,HBeAg0．02±0．016NCU／mL,抗-HBe4．79±6．44NCU／mL,抗-HBc5．97±4．64NCU／mL,HBV DNA（1．04×10^2）±（3．40×10^2）copy／mL。除抗-HBe和抗-HBc,P值大于0．05外,其他项目P值均小于0．05,差异有统计学意义。结论肝移植手术可有效清除乙肝患者体内的乙肝病毒,人工肝支持系统虽不能有效清除乙肝患者体内的乙肝病毒,但可改善重型肝炎患者体内严重紊乱的内环境,为肝移植手术创造合适的条件和机会,赢得宝贵时间。     

隐球菌性脑膜炎患者外周血中TLR4的表达以及血清中TNF-α,IL-10的水平研究

目的探讨Toll样受体4（TLR4）在隐球菌性脑膜炎患者外周血中的表达,以及研究血清中TNF—α,IL-10的变化情况。方法收集25例隐球菌性脑膜炎患者和25例健康体检者全血,采用荧光定量PCR（FQ—PCR）检测TLR2,TLR4的mRNA表达。ELISA法检测血清中TNF—α,IL-10的表达。结果隐球菌性脑膜炎患：者TLR4 mRNA的表达显著低于对照组（0．35±0．18）（P〈0．05）,TLR2均无显著变化（0．87±0．23）（P〉0．05）。血清中的IL-10显著升高（4．25±1．30）pg／ml（P〈0．05）,TNF—α的变化不显著（1．49±0．87）pg／ml（P〉0．05）。结论隐球菌性脑膜炎患者TLR4 mRNA表达显著下降,可能在隐球菌性脑膜炎的发病过程中起一定的作用。     

二维激光法和电阻法计数血小板的比较研究

目的对二维激光法和电阻法血小板计数进行比较研究。方法用德国拜耳ADVIA 2120（Bayer-2120,二维激光法）、美国雅培3700（CD-3700,电阻法）2台仪器及手工法分别对70份血液样本进行血小板计数,其中对照组30例、大血小板组（大血小板＋＋＋）20例、小红细胞组（平均红细胞容积〈60f1）20例。结果对照组检测结果为Bayer-2120：（172．9±89．2）×10^9／L,CD-3700：（165．8±82．7）×10^9／L,手工法：（169．8±78．7）×10^9／L;大血小板组检测结果为Bayer-2120：（70．0±31．8）×10^9／L,CD-3700：（30．9±17．4）×10^9／L,手工法：（65．2±30．1）×10^9／L。小红细胞组检测结果为Baye-2120：（150．6±100．6）×10^9／L,CD-3700：（194．8±124．3）×10^9／L,手工法：（144．6±91．3）×10^9／L。对照组3种计数方法差异无统计学意义（P〉0．05）;在病理情况下,大血小板组：二维激光法与手工法比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;而电阻法与二维激光法和手工法比较,其结果明显偏低,差异有统计学意义（P〈0．01）。小红细胞组：二维激光法与手工法结果接近,差异无统计学意义（P〉0．05）;而电阻法结果明显高于其他2种方法所得结果,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论在正常情况下,3种计数方法呈高度相关,差异无统计学意义;在病理情况下的大血小板、小红细胞,特别是临界值的血小板计数,电阻法结果差异较大,而二维激光法更接近手工法所检测结果,计数结果比较准确、可靠。     

湿疹患者外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞和血清IL-4,IL-10,TGF-β检测及临床研究

目的通过对湿疹患者外周血单个核细胞（PBMC）中转录调节因子3（FOXP3）阳性的天然调节性T细胞（nTreg,CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋）表达率及其血清白介素4（IL-4）、白介素10（IL-10）、转化生长因子β（TGF—β）水平的检测结合心理评定并与对照组进行对比分析,探讨其在湿疹发病过程中的作用及患者发病的可能机制。方法应用流式细胞术（flow cytometry,FCM）和ELISA法对湿疹患者（n=32）、对照组（n=32）分别进行PBMC中nT表达率及血清IL-4,IL-10,TGF-β水平进行检测,同时应用症状自评量表（SCL-90）进行心理评定。结果湿疹患者PBMC中nTreg细胞表达率（％）为4．86±1.69,明显低于对照组6．10±2．21;血清IL-4（96．21±20．07pg／ml）,IL-10（12．6±1．95pg／ml）含量高于对照组相应检测值53．93±13．10,9．82±1．34pg／ml;TGF-β 15．76±3．11ng／ml含量明显低于对照组（24．39±4．44ng／ml）,各项检测指标两纽之间比较差并均有统计学意义（P〈0．01）,患者心理健康状态与对照组比较也有显著性差异。结论nTreg数量降低减弱了对Th2细胞的抑制作用是湿疹患者发病的关键环节,Th1／Th2失衡、细胞因子分泌异常在疾病的发生发展中起重要作用,是湿疹发病和慢性化的重要原因,加强对湿疹患者的心理疏导以减少对患者精神、躯体造成的伤害,提高疗效具有重要临床意义。     

老年慢性心力衰竭患者基质金属蛋白酶-1和层粘连蛋白水平变化的临床意义

目的 心肌细胞外基质变化是引起慢性心力衰竭左室扩大及心脏重构的主要因素之一，基质重构引起心肌纤维化和进行性心室扩大，更加重心力衰竭。本文讨论基质金属蛋白酶-1（Martix metal oproteinases，mmP-1）和层粘连蛋白（LN）在慢性心衰中的临床意义。方法 共检测冠心病心衰17例，其他原因心衰18例，男性30例，女性5例，基质金属蛋白酶测定用ELISA法，试剂由美国Orionodiagostica公司提供。结果 心衰二组患者与对照组比较均有显著差异（P〈0．01），分别为（1．60±9．8）ng／ml，（182±11．6）ng/ml，VS（119．4±10．2）ng／ml；粘连接蛋白为（74．6±6．0）mg／L，（82．7±6．4）mg/L VS（49．5±10．3）mg/L。慢性心衰患者急性发作治疗前mmP-1为（174．6±4．6）ng／ml VS治疗后（165．1±3．2）ng／ml（P〈0．05）；LN治疗前（80．2±10．7）mg/L；治疗后（71．3±5．6）mg／L。结论测定基质金属蛋白酶（mmP-1）、LN水平可以了解心衰患者心脏重构的程度，同时对患者重构的情况和病情作客观评价，对患者治疗和评估预后有一定意义。     

骨髓增生异常综合征患者外周血树突细胞数量、亚群及其表面协同刺激分子表达的研究

目的 检测骨髓增生异常综合征（MDS）患者外周血树突细胞（DC）总量、亚群（pDC和mDC）比例及其表面协同刺激分子（CD80、CD86和CIMO）表达，探讨MDS患者细胞免疫异常的形成机制。方法 选取38例MDS患者及19名正常对照，采用荧光素单克隆抗体标记法和流式细胞术检测MDS患者外周血中Lin1^—HLA-DR^＋细胞（DC）、Lin1^-HLA—DR^＋CD123^＋细胞（pDC）、Lin1—HLA—DR^＋CD11c^＋细胞（mDC）的数量以及CD80、CD86和CIMO在DC膜上的表达。结果低危MDS组、高危MDS组和正常对照组外周血DC总量分别为（33．7±7．0）×10^6／L、（56．3±29．0）×10^6／L和（12．1±1．4）×10^6／L（P〈0．05），pDC数量分另U为（12．6±4．1）×10^6／L、（3．6±1．0）×10^6／L和（6．6±0．7）×10^6／L（P〉0．05），mDC数量分别为（16．7±6．3）×10^6／L、（28．7±17．6）×10^6／L和（5．5±0．9）×10^6／L（P〈0．05）。低危MDS组、高危MDS组和正常对照组DC占外周血单个核细胞（PBMNC）百分比分别为（2．37±0．53）％、（3．58±1．39）％和（0．68±0．08）％（P〈0．05），pDC占PBMNC百分比分别为（0．82±0．29）％、（0．31±0．06）％和（0．37±0．04）％（P〉0．05），mDC占PBMNC百分比分别为（0．96±0．35）％、（1．51±0．70）％和（0．32±0．05）％（P〈0．05）。低危MDS组、高危MDS组和正常对照组外周血中CD80^＋DC分别为（30．6±11．8）×10^6／L、（2．3±0．9）×10^6／L和（2．3±0．6）×10^6／L（P〈0．05），CD86^＋DC分别为（25．1±7．4）×10^6／L、（12．4±6．3）×10^6／L和（6．2±3．2）×10^6／L（P〈0．05），CD40^＋DC分别为（2．8±1．0）×10^6／L、（1．5±0．9）×10^6／L和（3．2±2．3）×10^6／L（P〉0．05）。结论 MDS患者外周血中DC数量增多、比例异常；以mDC增多为主，pDC无明显增多；MDS患者DC高表达CD80和CD86，CD40表达不增高。提示MDS患者诱导抗肿瘤细胞免疫的抗原呈递细胞（pDC）数量及功能不足；而与正常造血克隆炎性损伤有关的抗原呈递细胞（mDC）却增多。这可能是导致MDS患者细胞免疫异常的重要机制之一。     

大剂量丙种球蛋白联合地塞米松治疗急重型ITP疗效观察

目的：评价大剂量静脉丙种球蛋白联合地塞米松、单独大剂量静脉丙种球蛋白及单独大剂量地塞米松3种方法治疗急重型儿童ITP的疗效。方法：对入院时血小板计数≤25×10^0／L、出血倾向明显的45例患儿随机分为三组，每组15例。联合组：丙种球蛋白400mg／（kg·d）联合地塞米松1.5mg／（kg·d）静脉滴注，连用5d，于治疗第6d起口服强的松2mg／（kg·d）；丙种球蛋白组：静脉滴注丙种球蛋白；地塞米松组：静脉滴注地塞米松。连续监测血小板计数。结果：联合组、丙种球蛋白组、地塞米松组血小板计数≥50×10^9／L时间分别为（2．1±0．6）d，（2．7±0．6）d，（3．9±0．8）d，血小板数达峰值时间分别为（10．1±1．2）d，（11．2±1．3）d，（13．5±1．9）d，两两相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：大剂量静脉丙种球蛋白联合地塞米松静脉滴注治疗急重型儿童ITP比单独使用其中任一种药物升高血小板的作用更迅速。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感,不同性别孤独感发生率无差异性,不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）;随年级增加,孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970,P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题,老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童,以减少其孤独感的发生。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

肇庆市居民颈椎病流行病学调查

目的 :调查肇庆市居民颈椎病发病情况及相关问题。方法 :通过分层随机抽样选择该市区18～70岁居民5000人为研究对象 ,入户或至单位询问调查。结果 :该市居民颈椎病发病率为8.11% ,男女差异无显著性 ,随着年龄的增长 ,发病率逐渐增加。经多因素分析 :体位姿势不正确、情绪紧张、潮湿、疲劳是发病的主要诱因。结论 :该病严重影响肇庆市居民的健康 ,做好防治应从早做起 ,综合防治。     

中国人四肢瘫日常生活能力评定量表的信度研究

目的研究四肢瘫日常生活能力评定量表评测四肢瘫患者的重测信度及观察者间信度。方法由1位评定者应用四肢瘫日常生活能力评定量表对20例四肢瘫患者进行评定,评定后1周内再次对该患者进行评定;另1位评定者在第1位评定者初次评定后2 d内对该患者进行评定。结果第1位评定者两次评定总分的组内相关系数为0.994(P<0.01);第1位评定者与第2位评定者评定总分的组内相关系数为0.971(P<0.01)。结论四肢瘫日常生活能力评定量表具有良好的重测信度及观察者间信度。