bFGF对大鼠胚胎中脑神经细胞分化和增殖作用的研究

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对大鼠胚胎中脑神经细胞分化和增殖的作用。方法：在培养孕14d的大鼠胚胎中脑神经细胞中加入不同浓度bFGF，通过体外培养计数存活中脑神经细胞集落数及测定细胞相对蛋白质的含量。通过免疫组织化学方法鉴别中脑神经细胞的形态及利用图象分析细胞形态变化。结果：中脑神经细胞胞体较大，突起较长，而且有丰富的神经纤维连结成网络状，细胞相对蛋白质含量增加，显示浓度一效应关系。结论：bFGF能促进中脑神经细胞分化和增殖，增加中脑神经细胞突起的长度，促进中脑神经细胞的活性。     

维生素C与维生素E的联合免疫调节及抗氧化作用

目的：观察维生素C和维生素E联合应用对小鼠免疫功能及抗氧化功能的调节作用。方法：实验主要于2004—04／2005—10在承德医学院附属医院中心实验室完成，部分实验在日本千叶大学完成。选择雌性清洁级BALB／c小鼠60只，按随机数字表法分成6组，每组10只。分别为：①正常对照组：每天灌胃生理盐水0．3mL。②联合维生素组：每天灌胃0．3mL生理盐水内含维生素E0．3mg、维生素C1．5mg。③免疫抑制组：小鼠每5d腹腔注射环磷酰胺0．6mg（30mg／kg），共4次，制备免疫功能低下模型。④免疫抑制＋维生素C组：每天灌胃0．3mL生理盐水内含维生素C1．5mg。⑤免疫抑制＋维生素E组：每天灌胃0．3mL生理盐水内含维生素E0．3mg。⑥免疫抑制＋联合维生素组：每天灌胃0．3mL生理盐水内含维生素E0．3mg、维生素C1．5mg。后4组小鼠均制备免疫功能低下模型，方法同免疫抑制组。连续给药20d后，麻醉小鼠断尾取血，处死后取其脾脏、肝脏及肌肉。通过测定小鼠刀豆蛋白A刺激淋巴细胞转化功能（计算刺激指数，刺激指数与淋巴细胞转化能力成正比）、脾细胞产生白细胞介素2的反应活性、天然杀伤细胞活性（酶标仪490nm处测定吸光度值（A），杀伤活性=（A实验组—A总自然释放）／（A正常对照组—A总自然释放）&;#215;100％）、血清及肝组织中脂质过氧化物含量、肝脏超氧化物超氧化物活性等指标，评估小鼠免疫功能和抗氧化功能的变化情况。结果：实验过程中免疫抑制组有1只小鼠在给药第17天死亡。①各组小鼠淋巴细胞刺激指数比较：免疫抑制组显著低于正常对照组（59.2％，100％，P〈0．01），免疫抑制＋联合维生素组显著高于免疫抑制组（105.2％，P〈0．01）。②各组小鼠天然杀伤细胞活性比较：免疫抑制＋联合维生素组小鼠的天然杀伤细胞活性显著高于免疫抑制组（P〈0．01）。③各组小鼠白细胞介素2生成率比较：免疫抑制＋维生素E组及免疫抑制＋联合维生素组均显著高于免疫抑制组（P〈0．01）。④各组小鼠血清及肝组织中脂质过氧化物含量、肝脏超氧化物歧化酶活性比较：免疫抑制组小鼠的血清、肝脏脂质过氧化物含量显著高于正常对照组（P〈0．01），而免疫抑制＋联合维生素组显著低于免疫抑制组（P〈0．01）。免疫抑制组小鼠的肝脏超氧化物歧化酶活性显著低于正常对照组（P〈0．01），而免疫抑制＋联合维生素组显著高于免疫抑制组（P〈0．01）。结论：维生素C和维生素E联用可提高小鼠的免疫功能及抗氧化能力。     

维生素C与维生素E的联合免疫调节及抗氧化作用

目的:观察维生素C和维生素E联合应用对小鼠免疫功能及抗氧化功能的调节作用。方法:实验主要于2004-04/2005-10在承德医学院附属医院中心实验室完成,部分实验在日本千叶大学完成。选择雌性清洁级BALB/c小鼠60只,按随机数字表法分成6组,每组10只。分别为:①正常对照组:每天灌胃生理盐水0.3mL。②联合维生素组:每天灌胃0.3mL生理盐水内含维生素E0.3mg、维生素C1.5mg。③免疫抑制组:小鼠每5d腹腔注射环磷酰胺0.6mg(30mg/kg),共4次,制备免疫功能低下模型。④免疫抑制 维生素C组:每天灌胃0.3mL生理盐水内含维生素C1.5mg。⑤免疫抑制 维生素E组:每天灌胃0.3mL生理盐水内含维生素E0.3mg。⑥免疫抑制 联合维生素组:每天灌胃0.3mL生理盐水内含维生素E0.3mg、维生素C1.5mg。后4组小鼠均制备免疫功能低下模型,方法同免疫抑制组。连续给药20d后,麻醉小鼠断尾取血,处死后取其脾脏、肝脏及肌肉。通过测定小鼠刀豆蛋白A刺激淋巴细胞转化功能(计算刺激指数,刺激指数与淋巴细胞转化能力成正比)、脾细胞产生白细胞介素2的反应活性、天然杀伤细胞活性(酶标仪490nm处测定吸光度值(A),杀伤活性=(A实验组-A总自然释放)/(A正常对照组-A总自然释放)×100%)、血清及肝组织中脂质过氧化物含量、肝脏超氧化物超氧化物活性等指标,评估小鼠免疫功能和抗氧化功能的变化情况。结果:实验过程中免疫抑制组有1只小鼠在给药第17天死亡。①各组小鼠淋巴细胞刺激指数比较:免疫抑制组显著低于正常对照组(59.2%,100%,P<0.01),免疫抑制 联合维生素组显著高于免疫抑制组(105.2%,P<0.01)。②各组小鼠天然杀伤细胞活性比较:免疫抑制 联合维生素组小鼠的天然杀伤细胞活性显著高于免疫抑制组(P<0.01)。③各组小鼠白细胞介素2生成率比较:免疫抑制 维生素E组及免疫抑制 联合维生素组均显著高于免疫抑制组(P<0.01)。④各组小鼠血清及肝组织中脂质过氧化物含量、肝脏超氧化物歧化酶活性比较:免疫抑制组小鼠的血清、肝脏脂质过氧化物含量显著高于正常对照组(P<0.01),而免疫抑制 联合维生素组显著低于免疫抑制组(P<0.01)。免疫抑制组小鼠的肝脏超氧化物歧化酶活性显著低于正常对照组(P<0.01),而免疫抑制 联合维生素组显著高于免疫抑制组(P<0.01)。结论:维生素C和维生素E联用可提高小鼠的免疫功能及抗氧化能力。     

联合应用维生素E和维生素C对睡眠剥夺后大鼠心肌氧化应激指标的影响

目的观察联合应用维生素E(VE)和维生素C(VC)对睡眠剥夺后大鼠心肌损伤的保护作用,探讨其作用机制。方法将大鼠随机分8组,每组10只。采用改良多平台睡眠剥夺法(MMPM)建立睡眠剥夺模型,联合VE、VC灌胃给药(VE 500 mg/kg;VC 1.5 g/kg)。观察联合VE、VC对睡眠剥夺后心肌组织丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。结果与大平台组比较,睡眠剥夺后心肌细胞中MDA的含量明显增加,SOD活性有明显下降趋势;与睡眠剥夺组比较,联合VE、VC组心肌细胞中SOD活性显著提高,细胞中MDA的含量明显降低。提示联合使用VE、VC干预后,可明显降低睡眠剥夺后心肌组织氧化应激反应。结论 联合使用VE、VC可明显降低睡眠剥夺后大鼠心肌氧化应激损伤。     

联合维生素E和维生素C对维持性血液透析患者脂联素和氧化应激的影响

【目的】研究联合维生素E（VitE）和和维生素C（VitC）对维持性血液透析（MDH）患者脂联素（ADPN）和氧化应激的影响。【方法】MHD患者64例,分为对照组（C组）和联合治疗组（T组,给予VitE200mg／d和VitC200mg／d口服,治疗3个月）,并以正常人20例为正常对照组（N组）。比较三组各项临床指标。【结果】与N组比较,MHD患者血清丙二醛（MDA）水平升高,谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）、超氧化物歧化酶（SOD）水平降低;同时ADPN升高。给予VitE和VitC治疗后,患者血清MDA水平降低,GSH—Px、SOD水平升高,同时ADPN进一步升高,ADPN与GSHPx、SOD呈正相关,与MDA呈负相关。【结论】口服VitE和VitC可能通过抑制MHD患者体内氧化应激状态,上调ADPN的水平,发挥心血管保护作用。     

大剂量维生素C和E对颅脑外伤急性期脑保护作用的研究

目的通过观察大剂量维生素C和E对急性颅脑外伤患者血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量的影响,从脂质氧化反应角度探讨大剂量维生素C和E对急性颅脑外伤脑保护机制。方法将丹阳市中医院外一科及江苏大学附属医院神经外科2014年6月至2015年10月收治的120例急性颅脑损伤患者随机分为依达拉奉组(43例)、维生素C和E组(37例)和常规组(40例)。常规组包括脱水降颅压、止血、抗生素防治感染、护肝、护胃、神经营养药物、禁用具有氧自由基清除剂药物等,有手术指征则急诊开颅血肿清除术,并配合理疗。依达拉奉组在常规组的基础上加用依达拉奉注射液30 mg,加入100 ml生理盐水中稀释后30 min内静滴,2次/d,连续用7 d。维生素C和E组在常规组的基础上加用大剂量维生素C联合维生素E,维生素C第1~4天用量4.0 g,静滴,每日两次,用4 d,第5~7天用量3.0 g,静滴,每日一次,用3 d,同时每日维生素E 100 mg,肌注,用7 d。分别测定患者入院时、第3、7、14天血清中MDA、SOD的含量,并行出院时、3个月后行格拉斯哥预后分级(GOS)评分。结果三组患者颅脑损伤后MDA即出现明显增高,治疗3 d后MDA开始降低,依达拉奉组、维生素C和E组较常规组下降幅度明显,差异有统计学意义(均P<0.05),依达拉奉组、维生素C和E组两组之间第3、7、14天MDA比较差异无统计学意义(P>0.05);三组患者SOD伤后先出现反应性升高,治疗3 d后开始下降,依达拉奉组、维生素C和E组下降幅度与常规组比较差异有统计学意义(均P<0.05),依达拉奉组、维生素C和E组两组之间第3、7、14天SOD比较差异无统计学意义(P>0.05);近期预后出院时GOS评分依达拉奉组、维生素C和E组明显高于常规组,差异有统计学意义(均P<0.05),依达拉奉组、维生素C和E组两组之间比较差异无统计学意义(P>0.05);远期预后3个月GOS评分依达拉奉组、维生素C和E组明显高于常规组,差异有统计学意义(均P<0.05),依达拉奉组、维生素C和E组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论大剂量维生素C联合维生素E可减轻脂类过氧化反应,减少脂质过氧化物的产生,保护SOD等含基酶的活性,清除氧自由基,保护神经细胞。采用大剂量维生素C和E治疗急性颅脑外伤不失为一种安全、廉价、有效的好方法。     

维生素C和维生素E对糖尿病患者肾脏的保护作用

糖尿病肾病 (ＤＮ)是糖尿病 (ＤＭ )最常见的致死致残性微血管并发症。尿白蛋白排泄率 (ＵＡＥＲ)水平升高 ,是 2型ＤＭ进展成终末阶段肾病的高危险性的标志 ,已有几项研究支持降低ＵＡＥＲ是肾脏保护的有效治疗目标[1] 。维生素Ｃ和维生素Ｅ是体内重要的抗氧化剂 ,动物试验及临床试验均已证实 ,补充药理剂量的维生素Ｃ和维生素Ｅ ,可以降低ＵＡＥＲ升高的 2型ＤＭ患者的ＵＡＥＲ[2 ] 。为进一步证实这种作用 ,我们观察了维生素Ｃ和维生素Ｅ联合治疗对 2型ＤＭ患者ＵＡＥＲ的影响。1　资料与方法1.1　对象　 96例 2型ＤＭ患者均符合 1996年…     

大鼠胚胎神经干细胞体外分化时间的特异性

背景：目前对于神经干细胞体外培养过程中神经干细胞自身分化特性的变化研究的较少。目的：观察大鼠胚胎神经干细胞体外分化的时间特异性。方法：利用无血清悬浮培养的方法分离培养大鼠胚胎皮质神经干细胞,取不同培养时间的神经干细胞进行诱导分化,检测其分化特性的改变。结果与结论：体外培养的神经干细胞早期分化以神经元为主,随着培养时间的增加,分化成神经元的比例下降,神经胶质细胞的比例增加,而神经干细胞分化成少突胶质细胞的潜能与培养时间无明显相关。提示体外培养的神经干细胞其分化成神经元的潜能随着培养时间的增加而降低,而分化成神经胶质细胞的潜能随培养时间的增加而增加,神经干细胞分化为少突胶质细胞的潜能无时间相关性。     

硒及维生素E和C对帕金森病患者血液抗氧化功能的调节

目的:探讨不同时期帕金森病患者与正常人体内氧化和抗氧化功能状态及硒、维生素E,C的抗氧化作用。方法:收集2003-03/2005-03大连市友谊医院神经内科门诊与病房帕金森病患者、可能帕金森病患者、健康体检者,共计90例。①帕金森病患者组30例,其中男18例,女12例;年龄43～80岁,平均(66±8.4)岁,病程1～20年。②很可能帕金森病患者30例,男16例,女14例;年龄37～73岁,平均(56±6.3)岁,病程1～12年。③对照组30例,为随机选择的与患者年龄、性别相配的健康人。所有参与者均自愿参加本实验。④受检者首次化验于服药前,清晨空腹时抽取静脉血2mL,采用亚铁嗪显色比色分析法测定血浆维生素C,E,邻苯三酚自氧化抑制法测定超氧化物歧化酶活性,硫代巴比妥酸反应产物比色分析法测定脂质过氧化水平,采用改良的Hafeman法测定谷胱甘肽过氧化物酶活性,2、3-三氨基萘荧光分光光度法测定硒含量。⑤首次检测后每位受试者服用维生素C,每天服用0.1g,维生素E,每天服用0.1g,古稀胶囊,3次/d,每次3粒,均服用3个月。3个月后,再次检测各组受检者血抗氧化指标。结果:参加实验90例研究对象,均进入结果分析。①服药前,帕金森病组血浆硒、维生素E、C水平,超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性明显低于对照组[(121.8±38.6),(145.6±51)μg/L;(21.2±9.5),(26.8±8.2)μmol/L;(45.2±13.0),(53.6±22.8)μmol/L;(281.7±185),(398.4±181.7)μkat/L;(913.5±216.7),(1020.2±188.4)μkat/L],脂质过氧化水平与对照组比较差异无显著性;可能帕金森病组谷胱甘肽过氧化物酶活性、硒水平低于对照组[(945.2±183.4)μkat/L,(130.4±42)μg/L],其余指标比较差异无显著性。②服药后,帕金森病组超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性、硒水平[(343.4±126.7)μkat/L,(953.5±133.4)μkat/L,(132.8±42)μg/L]高于服药前,维生素E、C、脂质过氧化水平无变化;可能帕金森病组硒、维生素E、C、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性水平[(140.2±39)μg/L,(28.9±6.7)μmol/L,(54.3±6.6)μmol/L,(410.1±6.0)μkat/L,(993.5±201.7)μkat/L]高于服药前,脂质过氧化水平无显著变化。结论:帕金森病患者抗氧化的酶类及非酶类系统水平均低于正常,随病情进展而加重。早期干预治疗,有可能提高抗氧化水平。     

维生素E对鼠海马神经元细胞的抗氧化损伤作用

目的观察维生素E对老年痴呆(Alzheimer'sdisease)的治疗作用,研究氧化损伤对鼠海马神经元细胞的损伤作用及维生素E对其氧化损伤的保护作用。方法用氧化(H2O2)、维生素E处理后氧化的方法对鼠海马神经细胞(HT-22)进行分组处理。用二维电泳法、蛋白银染法及特殊氧化蛋白免疫染色法探测被氧化的蛋白。结果氧化处理12h后出现细胞生存率明显下降31.19%;经维生素E处理后再氧化处理的细胞生存率几乎达到正常组水平。经H2O2氧化处理的鼠海马神经元细胞的氧化蛋白数目增加了,而维生素E提前处理过的那组没有增加。结论维生素E对鼠神经元细胞的氧化损伤起保护作用,是有效的抗氧化治疗剂。     

Protective effects of vitamin C, alone or in combination with vitamin A, on endotoxin-induced oxidative renal tissue damage in rats

This study was designed to investigate the protective effects of vitamin C and vitamin A on oxidative renal tissue damage. Male Wistar rats were given an intraperitoneal injection of 0.5 ml saline (control) or 0.5 ml solution of lipopolysaccharide (10 mg/kg), which caused endotoxemia. Immediately (within 5 min) after the endotoxin injection, the endotoxemic rats were untreated or treated with intraperitoneal injection of vitamin A (195 mg/kg bw), vitamin C (500 mg/kg bw) or their combination. After 24 hours, tissue and blood samples were obtained for histopathological and biochemical investigation. Endotoxin injection caused renal tissue damage and increased erythrocyte and tissue malondialdehyde (MDA) and serum nitric oxide (NO), urea and creatinine concentrations, but decreased the superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-Px) and catalase (CAT) activities compared to the parameters of control animals. Treatment with vitamin C or with vitamins C and A significantly decreased the MDA levels and serum NO, urea and creatinine levels, recovered the antioxidant enzyme activities (SOD, GSH-Px and CAT), and prevented the renal tissue damage in endotoxemic rats. In contrast, vitamin A alone did not change the altered parameters except for creatinine levels. Notably, the better effects were observed when vitamins A and C given together. It is concluded that vitamin C treatment, alone or its combination with vitamin A, may be beneficial in preventing endotoxin-induced oxidative renal tissue damage and shows potential for clinical use.     

Vitamins in human arteriosclerosis with emphasis on vitamin C and vitamin E

INTRODUCTION: This review focuses on the process of arteriosclerosis arising from oxidative stress on lipoproteins and the general failure of randomized human trials using vitamins to retard this process. REVIEW: As well as clinical trials, the paper reviews the mechanisms by which a variety of oxidants act. Antioxidants are discussed, emphasizing interactions of vitamins C and E with transition metals that can lead to prooxidation. There is a focus on interactions between supplemental or co-antioxidants that counterbalance prooxidant effects of one another. CONCLUSIONS: It is concluded that normal cellular supplementation mechanisms are poorly accessible in the arteriosclerotic plaque leading to a prooxidant environment in which the haphazard introduction of vitamins could potentially be hazardous. Continued investigations into basic and clinical redox interactions of the kind discussed in this review using new measuring techniques may lead to approaches whereby antioxidants can be introduced into tissue in controlled ways for reducing arteriosclerosis.     

缺氧对大鼠成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响

目的：探讨缺氧对体外培养成骨细胞的影响。方法：应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法及茜素红染色方法观察缺氧对体外培养成骨细胞的增殖、碱性磷酸酶（ALP）表达及矿化结节形成的影响。结果：缺氧具有抑制成骨细胞增殖，降低ALP活性及矿化结节形成的数量的作用，并随缺氧时间的增加而更加明显。结论：缺氧具有抑制体外培养成骨细胞增殖、分化成熟及延缓矿化的作用。     

Effects of in vitro corticosteroids on B cell activation, proliferation, and differentiation.

The present study demonstrates the graded effect of in vitro corticosteroids (CSs) on the different phases of B cell activation, proliferation, and differentiation. Early events such as activation and proliferation of high-dose anti-mu or Staphylococcus aureus-stimulated B cells are profoundly suppressed by the presence of in vitro CSs. The suppressed proliferative response may be mediated by a direct effect on B cells and/or modulation of accessory cell function. Later events in the B cell cycle such as the proliferative response to B cell growth factor after either in vivo or in vitro activation are less sensitive to the suppressive effects of in vitro CSs. The final events in the B cell cycle; namely, the differentiation to the immunoglobulin-producing state, is not suppressed by in vitro CSs. Indeed, depending on the systems employed, there is either no effect or enhancement of immunoglobulin secretion by the presence of in vitro CSs. The graded effect of in vitro CSs on the discrete phases of the B cell activation, proliferation, and differentiation cycle provide new insights into the complex nature of CS-induced modulation of human B cell responses.     

葛根素对大鼠成骨细胞增殖和分化的影响

目的:课题以往的研究已证实,葛根素在体外能够抑制破骨细胞的骨吸收活性,促进骨生长,实验将进一步验证葛根素对大鼠成骨细胞增殖和分化的影响,并评价其对骨形成的作用。方法:实验于2003-03/2004-03在武装警察部队医学院药物化学教研室药物活性筛选室进行。①实验材料:葛根素(Puerarin)购自中国药品生物制品检定所,雌酚酮购自浙江仙居制药厂。大鼠由解放军军事医学科学院实验动物中心提供。②实验方法:实验分5组:雌酚酮阳性对照组、空白对照组(不加药,只加等量细胞悬液和培养基)、0.01,0.1,1μmol/L葛根素组。由新生24hSD大鼠颅盖骨分离培养成骨细胞,调整成骨活细胞密度为0.9×107L-1,接种于24孔培养板,每组12个复孔,分别于第1,3,5天每组取3孔计数,绘制细胞生长曲线。③实验评估:分别于第1,3,5天采用四唑盐法测定吸光度,计算平均增殖率,采用硝基苯基质动力学法测定各组细胞内外碱性磷酸酶活性。结果:①与空白对照组相比,0.1,1μmol/L葛根素干预组与雌酚酮阳性对照组第3,5天细胞增殖速度均加快,差异有显著性意义(P<0.01)。②经1μmol/L葛根素处理的第1,3,5天,细胞内、外碱性磷酸酶活性均明显高于空白对照组(P<0.01)。经0.1μmol/L葛根素处理第3,5天,细胞内、外碱性磷酸酶活性明显高于空白对照组(P<0.05,P<0.01)。经0.01μmol/L葛根素处理后第5天,细胞外碱性磷酸酶活性明显高于空白对照组(P<0.01)。结论:葛根素对骨形成的作用:①通过影响碱磷酸酶活性,而促进成骨细胞分化。②通过雌激素受体介导促进成骨细胞的骨形成效应。     

葛根素在体外对成骨细胞增殖和分化的影响

背景：成骨细胞是骨代谢平衡过程中的关键功能细胞,植物雌激素对成骨细胞的增殖和分化有熏要影响,葛根素作为植物雌激素的一种,在体外以较大范围浓度对成骨细胞功能的影响仍少见报道。目的：观察葛根素在体外对大鼠成骨细胞增殖和分化功能的影响。方法：取新生Wistar大鼠的颅盖骨,对成骨细胞进行分离、培养、纯化及鉴定。将培养的成骨细胞随机分为对照组、10^-3-10-10mol／L不同浓度葛根素组,观察不同浓度葛根素对体外培养的成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性表达的影响。结果与结论：细胞经葛根素处理后10～-10-9gmol／L组成骨细胞增殖活性较对照组明显增加（P〈0．05）,第3天增殖最快（P〈0．01）,第4天开始下降;诱导第4天,各组碱性磷酸酶活性与对照组相比,差异均有显著性意义（P〈0．01）,其中以10μmol／L组最显著（P〈0．01）。然而葛根素10μmol／L组成骨细胞增殖活性、碱性磷酸酶活性表达较对照组均减少（P〈0．05）。提示葛根素对成骨细胞的影响存在剂量依赖性,并且具有双向性,即在低浓度（105--10-8mol／L）下刺激骨形成：在高浓度（10^-3-10^-4mol／L）下抑制骨形成。