供体肺保存研究现状

肺移植是治疗患者中晚期肺疾患的唯一有效方法。安全有效的器官保存是移植成功的先决条件。本文介绍了低温保存离体肺的能量代谢、病理生理改变以及保存离体肺的保存液的理想要求、条件、种类、所含胶体物质、评价指标等方面的研究现状。     

移植肺保护的研究进展

肺移植已成为治疗终末期肺疾病的有效方法之一。作者结合近几年文献，针对术后原发性移植物无功能(PGF)所采取的肺保护方法如低温、肺通气、肺保存等作一系统性回顾，旨在为临床移植肺保护提供更好的方法和策略。     

缺血预处理减轻在体肺缺血再灌注损伤

３０ 只日本雄性大耳兔,随机等分为２ 组。缺血预处理组先采用左肺门阻断１０ ｍｉｎ ,开放再灌注１５ ｍｉｎ 的肺缺血预处理,然后阻断左肺门６０ ｍｉｎ ,开放再灌注６０ ｍｉｎ ,对照组未采用预处理。结果示在再灌注后６０ ｍｉｎ ,预处理组血中血管紧张素Ⅱ含量、动脉氧分压及肺组织中超氧化物歧化酶含量较对照组明显增加,而平均肺动脉压和肺组织的丙二醛含量及肺泡损伤较对照组明显减低。提示缺血预处理能减轻在体兔肺缺血再灌注损伤。     

缺血预处理减轻在体肺缺血再灌注损伤

３０只日本雄性大耳兔,随机等分为２组。缺血预处理先采用左肺门阻断１０ｍｉｎ,开放再灌注１５ｍｉｎ的肺血预处理,然后阻断左肺门６０ｍｉｎ,开放再灌注６０ｍｉｎ,对照组未采用预处理。结果示在再灌注后６０ｍｉｎ,预处理组血中血管紧张素Ⅱ含量、动脉氧分压及肺组织中超氧化物歧化酶含量罗对照组明显增加,而平均肺动脉压和肺组织的丙二醛含量及肺泡损伤较对照组明显减低。提示缺血预处理能减轻在体兔肺缺血再灌注损作     

犬肺移植手术麻醉的管理

目的 探讨犬肺移植外科手术的麻醉管理,为临床人体肺移植手术做准备.方法 本组共完成16例犬肺移植麻醉,其中11例为自体肺移植,5例同种异体肺移植.供肺冷缺血时间为2～22 h.手术在气管插管全凭静脉全麻下完成,股动脉穿刺置管有创动脉监测血压,连续SpO2监测,定时抽动脉血行血气分析.分析调整呼吸参数,根据循环情况用血管活性药物.结果 11例犬术毕麻醉苏醒,气管导管顺利拔出,能站立行走并存活4～72 h,有4例犬移植肺动脉开放后,1例犬麻醉苏醒拔出气管导管后发生急性肺水肿,体循环衰竭而死亡.犬肺移植后供肺早期换气功能良好.结论 肺移植缺血再灌注损伤是早期发生肺功能损伤和急性肺水肿主要原因,经体液治疗,提高胶体渗透压,呼吸道的管理、血管活性药物的应用等措施可减少或延缓肺功能损伤和急性肺水肿的发生,以保证供肺换气功能.     

大鼠肺移植供肺保存过程中细胞死亡类型的动态变化

 目的 通过对供肺保存过程中细胞凋亡和细胞坏死的动态变化的研究,探讨建立一种可以准确评估供肺保存质量的实验模型 方法 清洁级健康雄性Sprague-Dawley大鼠42只,体重250～300g,预先分为7组,每组6只。整体获取心肺,置于4℃的新鲜制备的低钾右旋糖苷液（LPD）溶液中保存。保存不同的时间（0、2、4、6、12、18、24h）后,通过主肺动脉向肺内灌注20mL的500mmol/L锥虫蓝、20mL生理盐水和10mL4％的多聚甲醛后固定,蜡块包埋后按4mm层厚切片。在光学显微镜下观察锥虫蓝染色情况;另一方面作TUNEL染色和Hoechst染色,在荧光显微镜下观察,严格按照盲法原则由两位研究者对死亡细胞进行分类计数。 结果 随着供肺低温保存时间的延长,细胞死亡数量上逐渐增加,而且细胞的死亡类型上发生动态变化。在低温保存的条件下,4h组才开始有少量的坏死细胞出现,随着保存时间的逐渐延长,细胞坏死也逐渐增加,在供肺保存18小时以上组,坏死细胞显著增加;而细胞的凋亡开始于供肺保存2h组,在供肺保存12h组达到高峰,约占所有细胞的9％,在供肺保存18h组基本消失。 结论 通过对不同保存时间的供肺进行锥虫蓝、TUNEL、Hoechst三染色的方法,能很好的显示供肺保存后的细胞凋亡和坏死的情况。     

缺血预适血减轻大鼠后肢缺血再灌注后肺损伤的实验研究

目的 探讨缺血预适应（IPC）对大鼠双侧后肢缺血再灌注（I／R）后肺损伤的影响及意义。方法 通过阻断肾下腹主动脉的方法建立双侧后肢I／R损伤模型。60只大鼠随机分为4组：假手术组（Ⅰ组，11：6）、缺血组（Ⅱ组，11=6）、I／R组（m组，n=24）、IPC＋I／R组（Ⅳ组，Ⅱ=24）。Ⅱ组在缺血4h末，Ⅲ组、Ⅳ组缺血4h并分别于再灌注后4、12、24和48h留取标本。观察肺组织形态学、湿／干重比、丙二醛（MDA）及髓过氧化物酶（MPO）的变化。原位杂交和逆转录多聚酶链反应（RT～PCR）方法检测肺组织中胞同粘附分子（I-CAM）-1的mRNA表达，Western蛋白印迹检测ICAIM-1。结果 Ⅲ组中，PMN计数、肺组织的湿／干重比、MDA、MPO显著增加（P〈0．01）、ICAM-1 mRNA反蛋白产物表达明显增强，与Ⅰ组或Ⅱ组比较差异显著（P〈0.01）。经IPC处理的Ⅳ组中上述各项指标明显减少，与Ⅲ组比较差异显著（P〈0．01）。结论 IPC减轻大鼠双侧后肢缺血再灌注后肺损伤，其作用机制可能是通过抑制ICAM-1介导的中性粒细胞在肺组织内的粘附、浸润而实现的。     

缺血预处理对未成熟心肌的保护作用

目的研究单纯缺血预处理对未成熟心肌缺彬再灌注损伤的保护作用。方法20只健康新西兰幼兔（3—4周龄）,利用Langendorff灌注装置灌注其离体心脏,建立全心缺血／再灌注模型。KH液自主动脉逆行灌注心脏,向球囊缓慢注入生理盐水,调整至左室舒张末压（LVEDP）为10mmHg（1 mmHg=0．133kPa）,平衡灌注心脏15min,随机等分为两组：对照（Control）组：继续灌注15min;缺血预处理（IPC）组：缺血5分钟,再灌注10分钟。然后两组心脏均st．Thomas停搏液诱导停跳,常温（37℃）缺血60min（保湿保温）,再灌注60min。记录冠脉流量（CF）,多导生理记录仪记录左心功能指标,硫代巴比妥酸法测定心肌细胞内丙二醛（MDA）,高压液相色谱测心肌细胞内三磷酸腺甘（ATP）含量,自动生化分析仪测量冠脉流出液中磷酸肌酸激酶（CK）、磷酸肌酸激酶同工酶（CK—MB）、乳酸脱氢酶（LDH）含量,计算心肌含水量（WC）。结果除IPC组再灌注60min时点的CF恢复率与对照组相近,其余再灌注时点IPC组的LVDP恢复率、＋dp／dtmax恢复率、-dp／dtmax恢复率和CAF恢复率均优于对照组。IPC组LDH、心肌含水量、MDA低于对照组,而ATP高于对照组。结论单纯预处理能减轻未成熟心肌缺血／再灌注损伤。     

HSP70在大鼠肝移植缺血预处理中的变化及其保护效应

目的:研究热休克蛋白70(heat shock protein,HSP70)在大鼠肝移植供肝缺血预处理中的变化及其产生的保护效应.方法:建立大鼠原位肝移植缺血预处理模型.随机分成3组:未行肝移植对照组(C组)、肝移植(liver transplantation,LT)组和缺血预处理肝移植(ischemic precondition,IP)组.术后在分析各组供肝组织HSP70表达变化的同时,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活性,供肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、ATP含量,并在光镜下观察各组肝细胞形态学改变.结果:与C组相比,LT组HSP70表达量轻度增高,而IP组显著升高(P＜0.05).LT组血清ALT、AST活性显著高于C组,肝组织SOD、ATP含量呈相反变化(P＜0.05);与LT组相比,IP组血清ALT、AST活性明显降低,肝组织SOD、ATP含量显著升高(P＜0.05).光镜下观察到LT组供肝细胞形态学出现明显损伤性改变,而IP组改变较小.结论:缺血预处理可以诱导大鼠原位移植肝高表达HSP70,后者可能是减轻缺血再灌注对供肝损伤的一个重要保护分子.     

腺苷A1受体激动剂预处理延迟效应保护大鼠心脏的实验研究

目的探讨腺苷A1受体激动剂预处理延迟效应对大鼠心脏的保护效果.方法A组以高选择性A1受体激动剂CCPA预处理Wistar大鼠24 h后制成离体心脏,4℃改良St.Thomas液,诱导心脏停搏,并放入该液中低温保存4 h,再灌注1 h.观察心功能恢复率、心肌ATP、Ck-Mb释放量.另设单纯改良St.Thomas液保存对照组(C).结果A组左室内压上升与下降最大速率恢复率(±dp/dtmax,%)为(62.83±17.27),(66.81±18.99),心肌ATP含量10-3μmol/wet·g(3.67±1.42);而B组分别为(40.41±18.29),(44.70±25.14),(1.46±0.54).A组都明显高于B组,差别均有显著性(P＜0.01或P＜0.05).结论以腺苷A1受体激动剂预处理延迟效应能改善离体大鼠心脏的保存效果.     

大鼠无心跳供体肺移植尸体肺的保护方法

目的:探讨减轻无心跳供体(non-heart-beating donor,NHBD)肺热缺血损伤的方法,以更好地保存尸体肺的结构和功能.方法:将64只SD大鼠随机分成4组,每组8对,用"两套管一支架法"完成左肺原位移植.HBD组为有心跳供体组,NHBD-N组为无心跳供体且未采取保护措施组,NHBD-V和NHBD-I组分别采取持续机械通气和胸腔冰盐水降温的保护措施.完成肺移植后,比较4组的肺顺应性、肺功能、肺水含量、能量代谢物含量等各项指标.结果:NHBD肺存在较长的热缺血时间,与HBD肺相比肺损伤更为严重.但是NHBD-V和NHBD-I组与NHBD-N组比较,移植术后肺水含量更低(4.21±0.85,4.14±1.33,5.28±1.24,均P<0.01)、肺损伤指数(11.28±3.26,10.41±2.85,14.35±3.21,均P<0.01)和白细胞浸润程度(316.30±56.24,295.50±70.26,425.60±86.47,均P<0.01)更轻,而肺顺应性和肺能量代谢物保存更好.结论:大鼠NHBD肺在热缺血时给予持续机械通气或胸腔低温浸泡均可取得良好的肺保护效果.     

含HOE642的新型器官保存液对离体兔肺移植供肺细胞凋亡的影响

目的 探索含Ⅰ型钠氢通道拮抗剂HOE642的新型器官保存液对离体兔肺移植供肺细胞凋亡的影响.方法 24只雄性成年新西兰大白兔分2组[低钾葡聚糖(LPD)组和HOE组],分别用LPD液及新型器官保存液灌洗供肺,建立兔改良离体单肺移植模型并再灌注2h.测定供肺细胞凋亡指数、caspase-3、Fas/Fas-L及Bax/Bcl-2表达水平.结果 与LPD组比较,HOE组供肺细胞凋亡指数和caspase-3的阳性细胞计数明显下降(P＜0.05),Fas、Fas-L、Bax表达水平明显降低,Bcl-2表达升高(P＜0.05).结论 含HOE642的新型器官保存液可通过抑制细胞内外源性凋亡途径抑制细胞凋亡.     

供体应用钙调磷酸酶抑制剂预处理减少大鼠肾移植缺血再灌注损伤及机制

目的缺血性预处理被证实能够提高器官对缺血再灌注损伤的耐受性,在肾移植领域具有较大的应用价值。但因其实施过程中还具有一系列问题从而限制了这一技术的临床应用。因此笔者提出使用药物钙调磷酸酶抑制剂（CNIs）对供体进行预处理,以期减少移植后缺血再灌注损伤。方法采用近交系Lewis大鼠肾移植模型,设置环孢素A组（CsA,10mg／kg）、他克莫司组（Tac,1mg／kg）、生理盐水对照组。通过比较肾移植后第3天各实验组与对照组移植肾功能（血清肌酐）、组织病理学改变,以及移植肾组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、热休克蛋白70（HSP-70）的表达水平,评估移植肾缺血再灌注损伤程度并探讨其发生机制。结果各实验组血清肌酐值均小于对照组,组织病理学改变优于对照组,TNF-α表达水平低于对照组,HSP-70水平高于对照组。结论钙调磷酸酶抑制剂供体预处理能降低移植肾组织TNF-α,增加HSP-70的表达,从而减少肾移植缺血再灌注损伤。     

缺血预处理联合停搏液对未成熟兔心脏的保护作用

目的 利用Langendorff模型研究缺血预处理(1schemic Preconditioning，IPC)联合高钾停搏液对兔未成熟心脏缺血再灌注损伤的影响。方法 幼兔(14—21d)离体灌注心脏，经历5min缺血、10min再灌的IPC处理后，使用St．ThomasⅡ号液使其停跳，观察其在生理体温(39℃)下接受45min缺血、40min再灌注后血流动力学、冠脉流出液心肌酶及心肌能量变化。结果 IPC联合高钾停搏液组较单纯高钾停搏液组再灌注后心事(HR)、冠脉流出量(CF)、左室发展压(LVDP)及左室最大上升和下降速率(土dp／dt)的恢复率明显改善，井保存了心肌ATP含量，减少了肌酸磷酸激酶同工酶(CK—MB)漏出。结论 对于未成熟心肌IPC联合高钾停搏液较单纯高钾停搏液能够提供更加有效的心肌保护作用。     

犬活体肝移植的应用解剖学研究

目的 观察家犬肝脏的解剖学特点,为犬活体肝脏移植实验研究奠定基础.方法 健康本地家犬12例,活体和离体进行肝脏解剖学观测.结果 家犬肝脏重量、体积与体重成正相关,根据体重(kg)可较准确估计肝脏重量(g)和体积(cm3),回归方程式分别为:①Y =231.73+ 16.67X,R2=0.87,②Y=56.52+0.91X,R2=0.94;家犬肝脏分为七叶,其中左外侧叶、左中叶和乳状突各占全肝比例分别为(30.02±1.07)％、(15.05±0.59)％和(2.84±0.14)％.结论 犬与人肝脏管道系统大致相近,变异较少见,是建立大动物活体肝移植模型较理想的动物之一.     

缺血后处理对大鼠无心跳供体肺移植的保护作用

目的: 在大鼠无心跳供体(non-heart-beating donor,NHBD)肺移植动物模型上观察缺血后处理对NHBD供肺的保护作用。方法: 将40只大鼠随机分成缺血后处理组(IPO组)和对照组(C组),每组10对,用“两套管一支架法”完成无心跳供体左肺原位移植。C组肺移植后直接开放肺动脉恢复灌注,而IPO组肺移植后给予5次1 min再灌 /1 min再阻断的后处理措施,然后全面恢复再灌注。结果: IPO组与C组比较,NHBD肺移植术后肺水含量低、肺损伤程度轻,而肺顺应性、肺结构和功能保存更好。此外,IPO组移植术后供肺细胞凋亡程度和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量较C组低,而SOD含量较C组高。结论: 缺血后处理可以减轻NHBD肺移植术后供肺缺血再灌注损伤,保存供肺结构和功能,还可抑制NHBD肺移植术后脂质过氧化反应和细胞凋亡。     

改良自制低钾右旋糖酐液用于犬肺移植肺保存质量的观察

目的 探讨改良自制低钾右旋糖酐液(LPD液)的配制方法及对移植肺的保存质量.方法 参照Per-fadex液公开配方加入前列腺素E1(PGE1)和硝酸甘油(NTG)进行改良,自行配制LPD液.于2007年4月至2008年8月通过动物实验验证LPD液对移植肺的保存质量.32只家犬随机分成供体组和受体组,每组16只.完成16...     

Paediatric lobar lung transplantation: addressing the paucity of donor organs

Two children with advanced lung disease underwent successful cadaveric bilateral lobar lung transplantation, using lungs "cut down" from deceased adult donors - the first reported use of the technique in Australia. This approach, while it cannot address the lack of donor organs, may enable us to redress any size bias limiting paediatric lung transplantation.     

脑死亡供体肺脏病理改变及临床移植应用前景探讨

目的观察脑死亡供体肺病理改变,探讨临床移植应用的可行性。方法对23例脑死亡供体肺进行了病理活检,HE染色、网状纤维染色及PASM染色观察肺脏组织变化,电镜观察超微结构变化。结果气管、支气管及肺泡结构尚完整,仅见局灶肺泡上皮细胞及支气管纤毛上皮细胞脱落,未见肺透明膜形成;肺泡间隔未见明显增宽、血管充血易见,血管内皮细胞未见明显改变,未见纤维化表现。电镜下肺泡Ⅱ型上皮细胞胞质轻微水肿,但结构尚完整;内质网扩张,基底膜未见明显改变。结论严格限定纳入标准,脑死亡供肺可以实施移植。     

A study on continuous low-flow perfusion with low-potassium dextran for donor isolated lung preservation.

OBJECTIVE: To test the validity of continuous low-flow perfusion with low-potassium dextran (LPD) to preserve rabbit lung. METHODS: Isolated rabbit lungs were preserved for eight hours either in Ringer's solution by simple storage (Group I) or in continuous low-flow perfusion with LPD (Group II). After preservation, lung functions were assessed to compare these two methods. RESULTS: The water gain in Group I was higher than that in Group II. During reperfusion, the functional test values for the immersed lungs were lower than those for the perfused lungs. The lipid peroxidation product (MDA) was significantly decreased in perfused lungs during reperfusion. CONCLUSIONS: Low-flow perfusion with LPD is better than immersion for the lung preservation.