补肾更年方对去除卵巢大鼠血清E_2水平及下丘脑ERα蛋白表达的影响

目的治疗补肾更年方对去除卵巢大鼠血清E_2水平和下丘脑ERα蛋白表达的影响,探讨其效应机制。方法将40只大鼠用手术去除卵巢后随机分为补肾更年方大剂量组、中剂量组、小剂量组和己烯雌酚组,并与10只模型组和10只空白组做对照,补肾更年方大、中、小剂量组以不同剂量灌胃,模型组和空白组以生理盐水灌胃,己烯雌酚组以己烯雌酚按1mL/100g的剂量灌胃,连续45 d,结束后,取血,放免法检测血清E_2,Western blot法检测大鼠下丘脑ERα蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠血清E_2水平显著降低、下丘脑ERα蛋白表达显著减少(P 0. 01);与模型组比较,补肾更年方大、中剂量组和己烯雌酚组能够显著升高大鼠血清E_2水平并增加下丘脑ERα蛋白表达(P 0. 05),补肾更年方小剂量组对其无明显影响(P 0. 05)。结论补肾更年方在改善去除卵巢大鼠血清E_2水平同时,可能通过影响ERα蛋白的表达,提高ER的生物效应,从而发挥对更年期综合征的治疗效应。     

交通心肾中药宁更丹对老龄雌鼠下丘脑-垂体-卵巢ERmRNA的影响

目的:探讨交通心肾法中药宁更丹对老龄雌鼠下丘脑-垂体-卵巢雌激素受体ER m RNA的影响。方法:选用15月龄雌性SD大鼠,将其分为空白组、中药治疗组、西药对照组和中药对照组,分别给予0.9%氯化钠溶液、宁更丹、戊酸雌二醇和更年安灌胃,采用荧光定量PCR检测大鼠下丘脑、垂体、卵巢ERαm RNA和ERβm RNA。结果:交通心肾法中药宁更丹对下丘脑ERαm RNA的作用不明显,能显著提高垂体ERαm RNA,对卵巢ERαm RNA有降低作用;下丘脑、垂体、卵巢的ERβm RNA均有明显升高。结论:交通心肾中药可能主要通过影响下丘脑、垂体、卵巢ERβm RNA发挥作用。     

马鬃蛇醇提物对下丘脑抑制大鼠雌激素水平及卵巢ER的影响

目的:研究马鬃蛇醇提物(CVAE)对下丘脑抑制大鼠雌激素水平及卵巢雌激素受体(ER)的影响。方法:sc吗啡建立未成年雌性大鼠下丘脑抑制模型,灌胃给药21d,用放射免疫法测定血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)水平,用免疫组化法测定卵巢ER。结果:CVAE可提高雌激素受体阳性细胞表达,明显升高血清中E2、FSH水平,大鼠出现动情期提前,并可升高子宫、卵巢的脏器系数。显微镜观察显示,大鼠子宫内膜增厚,腺体数量增多,间质致密。结论:CVAE可提高未成年雌性大鼠下丘脑抑制的E2、FSH水平,增加卵巢ER阳性细胞表达,提示其作用机制可能是通过下丘脑-垂体-卵巢轴的调节。     

更年乐颗粒剂对12月龄大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的调节作用

目的:通过检测内分泌激素的水平,下丘脑雌激素受体(ER)表达,考察更年乐对下丘脑-垂体-卵巢轴(HPO)的调节作用。方法:采用12-15月龄SD大鼠,同时设青年鼠作对照,灌胃给药30 d后,放免法检测血清E2、P、Te、FSH、LH水平,免疫组化法检测下丘脑GnRH,垂体和下丘脑ER表达。结果:与更年组比,12月龄组可以升高12月龄大鼠血清中E2,P(P<0.05或P<0,01)水平,有降低LH水平的趋势(P>0.05),明显降低下丘脑GnRH的表达(P<0.05),上调下丘脑ER表达。结论:更年乐能改善因体内雌激素水平降低导致的下丘脑、垂体功能的相对亢进状态,上调下丘脑ER表达,增强雌激素效应,调节HPO轴的失调。     

更年健上调老年雌性大鼠下丘脑雌激素受体mRNA表达对P物质和β-内啡肽的影响

目的：探讨中药复方更年健上调老年雌性大鼠下丘脑雌激素受体（ ＥＲ）和 ＥＲ信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）对Ｐ物质（ＳＰ）和β－内啡肽（β－ＥＰ）的影响。方法：建立自然衰老的雌性大鼠模型，用放射配体结合分析法检测 ＥＲ，用 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析 ＥＲｍＲＮＡ的改变，用放射免疫分析法检测 ＳＰ和β－ＥＰ含量。结果：老年雌性大鼠性减退期下丘脑 ＥＲ和 ＥＲｍＲＮＡ水平随血清Ｅ_２水平的下降较性成熟期显著下降，而更年健则使下降了的ＥＲ和ＥＲｍＲＮＡ水平明显提高，并通过上调下丘脑ＥＲｍＲＮＡ使ＳＰ明显下降，而β－ＥＰ则显著提高，与提高体内雌激素水平具有同样的效果。结论：更年健可增加ＲＲ在下丘脑的表达以增强雌激素的生物学效应，同时降低下丘脑 ＳＰ水平而提高 β－ＥＰ的含量。     

更年健上调老年雌性大鼠下丘脑雌激素受体mRNA表达对P物质和β-内啡肽的影响

目的：探讨中药复方更年健上调老年雌性大鼠下丘脑雌激素受体（ ＥＲ）和 ＥＲ信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）对Ｐ物质（ＳＰ）和β－内啡肽（β－ＥＰ）的影响。方法：建立自然衰老的雌性大鼠模型，用放射配体结合分析法检测 ＥＲ，用 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析 ＥＲｍＲＮＡ的改变，用放射免疫分析法检测 ＳＰ和β－ＥＰ含量。结果：老年雌性大鼠性减退期下丘脑 ＥＲ和 ＥＲｍＲＮＡ水平随血清Ｅ_２水平的下降较性成熟期显著下降，而更年健则使下降了的ＥＲ和ＥＲｍＲＮＡ水平明显提高，并通过上调下丘脑ＥＲｍＲＮＡ使ＳＰ明显下降，而β－ＥＰ则显著提高，与提高体内雌激素水平具有同样的效果。结论：更年健可增加ＲＲ在下丘脑的表达以增强雌激素的生物学效应，同时降低下丘脑 ＳＰ水平而提高 β－ＥＰ的含量。     

中药复方更年春对老年雌性大鼠脾细胞雌激素受体及白细胞介素2、肿瘤坏死因子活性的影响

中药复方更年春,原名更年健,治疗更年期综合征已取得良好疗效,且无副作用发现,并已证实该药能改善老化机体衰退的免疫及神经内分泌功能,如使绝经妇女辅助性 T 细胞(TH)增加、及白细胞介素-2(IL-2)活性上升,并给老年大鼠灌服该药后下丘脑、垂体、卵巢雌激素受体(ER)水平上升,血和下丘脑β-内啡肽(β-EP)水平升高、P 物质水平下降、中脑中缝背核内5-羟色胺含量减少,为进一步研究更年春对免疫功能的影响是否与免疫细胞雌激素受体的变化有关,以了解更年春对部分神经内分泌免疫调节网络的影响,本研究应用放射配体结合分析法、放射免疫法、MTT 法、细胞毒法观察更年春对老年雌性大鼠(取     

更年春方对卵巢切除大鼠学习记忆能力和海马ER亚型的调节

目的观察更年春方(GNC)对卵巢切除大鼠学习和记忆能力下降的预防和治疗作用,以及GNC对大鼠海马中雌激素核受体(ER)亚型的调节。方法采用10～12月龄SD雌性大鼠切除双侧卵巢建立学习和记忆能力下降的模型,用GNC灌药12周后行Morris水迷宫实验(MWM),实时荧光定量PCR法测定海马ERα和ERβmRNA的变化,免疫组化的方法测定海马CA3区ERα和ERβ蛋白的表达。结果大鼠切除卵巢后,血清E2和MWM成绩下降,海马中ERβmRNA与蛋白的表达均降低,而ERαmRNA和蛋白变化不明显。使用GNC者E2无明显变化,MWM成绩和海马中ERβmRNA与蛋白的表达提高,对ERαmRNA和蛋白无明显影响。结论提示GNC可能通过调节海马中的ERβ改善学习和记忆能力低下。     

更年汤对围绝经期模型大鼠雌激素受体及细胞凋亡相关因子的影响及作用机理研究

目的:探讨更年汤对围绝经期模型大鼠下丘脑ER及卵巢颗粒细胞凋亡因子Bax及BaxmRNA的影响。方法:将雌性11-14月龄SD大鼠经阴道脱落细胞筛选,符合自然老化型围绝经期大鼠模型要求的大鼠随机分为生理盐水组、教材方组、更年汤组,另选4月龄雌性大鼠为青年对照组,18月龄雌性大鼠为老年对照组。相应药物灌胃成功后,采用病理切片了解大鼠卵巢形态学变化,免疫组化及原位杂交检测方法观察大鼠下丘脑ER、Bax及BaxmRNA的阳性表达情况。结果:生理盐水组的ER阳性表达与教材方组、更年汤组比较均有统计学意义(P<0.05),更年汤组与教材方组ER阳性表达比较无统计学意义(P>0.05);更年汤组与生理盐水组比较,卵泡发育、闭锁及扩张观察有统计学意义或有显著统计学意义(P<0.05或P<0.01);与教材方组比较,卵泡发育及闭锁观察比较有显著统计学意义或有统计学意义(P<0.01或P<0.05),卵泡扩张观察无统计学意义(P>0.05);更年汤组的Bax及BaxmRNA阳性表达与生理盐水组及教材方组的比较均有统计学意义(P<0.05)。结论:更年汤能改善围绝经期模型大鼠下丘脑ER阳性表达,有促进卵巢内卵泡发育,抑制卵巢颗粒细胞凋亡因子Bax及BaxmRNA阳性表达的作用,并且作用较教材方显著。     

加味左归饮对去卵巢骨质疏松大鼠下丘脑雌激素α受体的影响

目的观察加味左归饮对绝经后骨质疏松大鼠下丘脑雌激素受体α(ERα)及其基因表达的影响.方法 以切除卵巢的雌性大鼠作为骨质疏松的动物模型,将大鼠分为假手术组、模型组、阳性对照组和加味左归饮低、中、高剂量组,用免疫组织化学方法和原位杂交方法检测下丘脑ERα及其mRNA表达.结果模型组ERα受体及其mRNA阳性细胞与假手术组比较显著减少;而加味左归饮能够提高去卵巢后下丘脑ERα及其mRNA阳性细胞数.结论加味左归饮可通过增加去卵巢大鼠下丘脑ERα表达以增强雌激素的生物效应.     

更年春方预防实验性原发性骨质疏松作用机理初探

为探讨更年春方(GNC)预防实验性原发性骨质疏松的作用机理,采用10～12月龄SD雌性大鼠去卵巢建立骨质疏松模型,用GNC灌药4个月,RT-PCR法检测胫骨骨骺ERα、ERβ、OPG、RANKL、osf2／cbfal与TRAP mRNA的表达。结果：大鼠去卵巢后,血清E2水平及胫骨骨骺ERα、ERβ、OPG及osf2／cbfal mRNA的表达均明显下降,RANKL与TRAP mRNA的表达明显增高。GNC治疗后,血清E2水平无明显变化,胫骨骨骺ERβ、OPG及osf2／cbfal mRNA的表达均明显增高,RANKL与TRAP mRNA的表达明显下降。提示GNC可能通过上调胫骨骨骺ERβ mRNA的表达,有促进成骨细胞、抑制破骨细胞的作用,从而对实验性原发性骨质疏松有预防功效。     

自拟更年汤对肾阳虚型围绝经期模型大鼠下丘脑雌激素受体及肾上腺皮质Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨自拟更年汤治疗围绝经期综合征肾阳虚证的可能作用机制。方法选取11~12月龄动情周期紊乱、动情间期延长的雌性大鼠,并予氢化可的松注射液0.5ml/100 g连续肌注9天,建立肾阳虚型围绝经期综合征大鼠模型。将造模成功大鼠随机分为更年汤组、右归丸组、替勃龙组和模型组,每组20只。更年汤组大鼠给予自拟更年汤溶液18 g/(kg·d)灌胃,右归丸组给予右归丸溶液16 g/(kg·d)灌胃,替勃龙组给予替勃龙片溶液0.294 mg/(kg·d)灌胃。另取4月龄大鼠(青年组)20只,18月龄大鼠(老年组)20只,模型组、青年组、老年组大鼠用生理盐水4ml灌胃,各组连续灌胃15天。检测各组大鼠下丘脑雌激素受体(ER)和ER mRNA表达及肾上腺皮质Bax、Bcl-2蛋白表达。结果更年汤组与右归丸组、模型组、青年组下丘脑ER阳性表达比较差异均有统计学意义(P0.05或P0.01);各组大鼠下丘脑ER mRNA阳性表达均无统计学意义(P0.05)。模型组肾上腺球状带Bax蛋白表达显著增加,而Bcl-2蛋白明显降低,自拟更年汤可下调Bax蛋白表达、上调Bcl-2蛋白表达(P0.05);在束状带,自拟更年汤亦可下调Bax蛋白表达(P0.05),而对Bcl-2蛋白表达影响不明显(P0.05);在网状带,自拟更年汤对Bax蛋白表达具有降低作用,对Bcl-2蛋白明显上调,优于右归丸组和替勃龙组(P0.05)。结论自拟更年汤治疗围绝经期综合征肾阳虚证可能与提高下丘脑ER、肾上腺皮质Bcl-2蛋白表达及降低肾上腺皮质Bax蛋白表达水平有关。     

补肾调冲方对去卵巢大鼠性激素水平及下丘脑雌激素受体α、雌激素受体β mRNA表达的影响

[目的]探讨补肾调冲方对去卵巢大鼠血清性激素水平及下丘脑雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)mRNA表达的影响。[方法]以假手术组为对照,将去卵巢大鼠随机分为去卵巢空白组,补肾调冲方高、中、低剂量组,已烯雌酚组。采用放射免疫分析法测定血清雌二醇(E2)、促卵泡生成激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)水平,采用逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)检测下丘脑ERα、ERβmRNA表达。[结果]去卵巢大鼠血清FSH、LH水平升高,E2及下丘脑ERα、ERβmRNA水平降低,补肾调冲方大鼠血清E2有升高趋势,FSH有降低趋势,补肾调冲方能降低去卵巢大鼠血清LH水平,升高下丘脑ERα、βmRNA的表达。[结论]补肾调冲方在改善去卵巢大鼠性激素水平同时,可能通过影响ERα、ERβmRNA的表达,提高ER的生物效应,从而降低更年期综合征的发生。     

淫羊藿苷对去势大鼠ERβ基因表达及血清E_2水平的影响

目的:观察淫羊藿苷对去势大鼠血清E_2水平及骨组织ERB基因表达的影响。方法:将72只雌性SD大鼠建立去卵巢骨质疏松症病理模型,随机分为淫羊藿苷高剂量组(A)、淫羊藿苷低剂量组(B)、壮骨止痛方中剂量组(C)、模型组(D)、戌酸雌乙醇对照组(E),另选取12只雌性SD大鼠为假手术组(F)。各组分别灌胃给药13周。每组随机选取8只实验大鼠经腹主动脉采血,凝固后离心采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定检测各组血清E_2浓度,并提取股骨组织mRNA样本进行PCR反应,检测ERβ基因的表达。结果:各给药组血清E_2水平上升明显,ERβ基因表达回调明显,A、C、E、F组较D组血清E_2水平上升、ERB基因表达上调差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);B组上述指标与F组比较,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:淫羊藿苷可能通过改善去势大鼠血清E_2水平,同时上调去势大鼠骨组织ERβmRNA的表达,使ERβ合成增加,从而提高ER的生物效应,达到抗绝经后骨质疏松的作用。     

补肾中药与利维爱延缓老年雌性大鼠衰老的实验研究

目的:针对中老年妇女卵巢机能逐渐衰退的生理特点,寻找一种可供中老年妇女服用的延缓衰老的有效药物。方法:分别用更年平调液,金匮肾气丸,古汉养生精和利维爱处理老年雌性大鼠,8周后测血、肝、脑中的脂质过氧化物(LPO),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,血中一氧化氮(NO)含量及雌二醇(E_2)、催乳素(PRL)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、孕激素(PRO)、雄激素(T)等性激素水平;在光镜下观察子宫、卵巢的形态学改变。结果:更年平调液能有效升高老年大鼠的 E_2、PRL 水平,降低 FSH、LH 水平,改善内分泌状况;升高 SOD、GSH-Px 水平,降低 LPO 含量,改善自由基代谢;升高血中NO水平;改善子宫、卵巢形态;其作用与利维爱类似。结论:更年平调液与利维爱的效果类似,适于中老年妇女服用,以延缓衰老。     

针刺对痛经大鼠神经-内分泌影响的机制初探

目的:探讨针刺对痛经大鼠下丘脑-垂体-卵巢功能活动的影响。方法:雌性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、针刺组、益母草膏组,每组10只,己烯雌酚灌胃12 d建立痛经模型。针刺组取"关元",双侧"地机"三阴交"穴,留针30 min;益母草膏组采用益母草膏(每日80 g/kg)灌胃治疗。两组均在灌服己烯雌酚的第5天开始治疗,每日1次,连续7 d。末次给予己烯雌酚1 h后,腹腔注射催产素,观察各组大鼠的扭体反应潜伏期和30 min内扭体数;放射免疫法检测血清促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)的水平;RT-PCR检测各组大鼠下丘脑、卵巢促性腺激素释放激素(GnRH),垂体促性腺激素释放激素受体(GnRH-R),子宫雌激素受体(ER)及孕激素受体(PR)mRNA表达的差异。结果:①针刺组和益母草膏组的大鼠扭体次数明显低于模型组,潜伏期高于模型组(P<0.05);②针刺组和益母草膏组与模型组比较,FSH、LH、E2含量显著降低(P<0.05),P含量明显升高(P<0.05);③针刺组和益母草膏组下丘脑、卵巢GnRH,垂体GnRH-R,子宫ER mRNA表达水平均低于模型组(P<0.05),子宫PR mRNA表达水平高于模型组(P<0.05)。结论:针刺治疗原发性痛经的神经-内分泌机制可能与针刺调节大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的性激素及其受体表达有关。     

菟丝子总黄酮对来曲唑致多囊卵巢综合征大鼠模型的影响

目的:探讨菟丝子总黄酮对来曲唑致大鼠多囊卵巢综合征(PCOS)模型的影响。方法:正常组除外,其余大鼠每天灌服来曲唑1 mg·kg~(-1)复制PCOS动物模型,连续21 d。造模第16天,阴道涂片检测动物周期,以阴道上皮细胞持续角化者为PCOS成模大鼠,并随机分为模型组、达英-35组(0. 339 2 mg·kg~(-1))和菟丝子总黄酮高、中、低剂量组(200,100,50 mg·kg~(-1))。依据组别给予相应药物,连续21 d。给药结束后,取材,计算卵巢指数;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清雌激素(E_2),睾酮(T),促性腺激素释放激素(GnRH),卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH)水平;取大鼠右侧卵巢,苏木素-伊红(HE)染色光镜观察病理改变;免疫组化法检测下丘脑、垂体、左侧卵巢雄激素受体(AR)表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清T,GnRH,LH水平显著升高,卵巢指数和LH/FSH值显著升高,FSH和E_2水平显著降低(P 0. 05,P 0. 01),卵巢组织闭锁卵泡增多、卵泡膜细胞层增厚明显,下丘脑、垂体和卵巢组织AR表达显著升高(P 0. 01)。与模型组比较,菟丝子总黄酮高、中、低剂量组可显著降低PCOS模型大鼠血清T,GnRH和LH水平,降低卵巢指数和LH/FSH值(P 0. 01);菟丝子总黄酮高、中剂量组可显著升高PCOS模型大鼠血清E_2水平(P 0. 01),明显升高FSH水平(P 0. 05),菟丝子总黄酮低剂量组可明显升高PCOS模型大鼠血清E_2水平(P 0. 05)。菟丝子总黄酮高、中、低剂量组可不同程度改善PCOS模型大鼠卵巢组织皮质增厚胶原化、闭锁卵泡增多、黄体减少等病理改变。免疫组化结果表明,菟丝子总黄酮高、中、低剂量组可显著降低下丘脑、垂体和卵巢AR表达(P 0. 01)。结论:菟丝子总黄酮可能通过调节雌雄激素分泌、影响下丘脑-垂体-卵巢轴途径发挥对PCOS模型大鼠的保护作用。     

电针命门穴对去势骨质疏松模型大鼠肾上腺雌激素受体ERαmRNA表达的影响

目的研究电针命门穴对去卵巢骨质疏松模型(OVX)大鼠肾上腺功能的影响。方法造模成功的雌性SD大鼠18只,随机分为假手术组、模型组、电针组,每组6只。大鼠处死后,用放免法测各组大鼠血清中雌二醇(estradiol,E2)水平,荧光定量PCR(探针法)检测各组大鼠肾上腺ERαmRNA表达。结果模型组与假手术组比较,血清E2水平明显下降,有显著性差异(P0.05),电针组血清E2水平有一定升高,与模型组比较,无统计学意义(P0.05);模型组肾上腺ERαmRNA表达强于假手术组,有统计学意义(P0.05),电针组肾上腺ERαmRNA表达降低,与模型组相比,有显著性差异(P0.05)。结论去卵巢后,大鼠肾上腺可起代偿作用,电针能提高去卵巢骨质疏松大鼠血清雌激素水平,并影响大鼠ERα在肾上腺的表达。     

更年春方对卵巢切除大鼠海马中脑源性神经营养因子的影响

目的: 研究中药更年春方(GNC)对卵巢切除大鼠海马中脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的调节作用。 方法: 选择10~12月龄SD雌性大鼠随机分为5组(假手术组,模型组,GNC 6.58 g ·kg^-1组,GNC 3.29 g ·kg^-1组,尼尔雌醇3.05×10^-4 g ·kg^-1组),切除双侧卵巢建立学习和记忆能力下降的模型,分别用高、低剂量GNC、尼尔雌醇和生理盐水ig 12周,行Morris水迷宫试验,取海马组织,real time PCR 法测定海马BDNF mRNA的变化,免疫组化法测定海马CA3区BDNF蛋白的表达。 结果: 卵巢切除大鼠海马BDNF mRNA和BDNF蛋白水平下降,而高剂量更年春方和尼尔雌醇提高切除卵巢大鼠海马中BDNF mRNA和蛋白的表达。 结论: 更年春方可以提高卵巢切除大鼠海马中BDNF的表达,可能通过这个机制改善卵巢切除大鼠的学习记忆能力。     

补肾健脾方对下丘脑-垂体-卵巢轴功能的影响

目的:观察补肾健脾方对下丘脑-垂体-卵巢轴功能的影响。方法:以未成年雌性大鼠为对象,采用放免法检测补肾健脾方高、中、低剂量组、阳性对照组和空白对照组大鼠血清FSH、LH、E2和P水平;各组大鼠卵巢、子宫称重,并作比较。结果:补肾健脾方组血清FSH、LH、E2、P水平显著增高,卵巢和子宫重量明显增重。结论:补肾健脾方能提高大鼠生殖激素水平,改善卵巢功能以促进排卵。说明本方对下丘脑-垂体-卵巢轴功能有整体调节作用。