RPLC-ESI/MS法测定人血浆中阿普唑仑及其代谢产物的浓度

目的 建立RPLC-ESI/MS法测定人血浆中阿普唑仑及其代谢产物浓度的方法.方法 以地西泮为内标物;色谱柱:Agilent Zorbax SB C18柱(2.1 mm×30 mm,3.5 μm),流动相为10 mol/L乙酰胺-乙腈(2∶8),流速为0.2 ml/min,柱温30℃,进样量10μl;质谱条件为电喷雾电离源(ESI),检测方式为正离子电离、多离子反应监测(MRM).结果 阿普唑仑、α-羟基阿普唑仑和4-羟基阿普唑仑在0.5～50 ng/ml血浆浓度范围内线性关系良好(r=0.9996,r=0.9997,r=0.9994;n=7);批内和批间精密度均低于5%;最低检测限为0.5 ng/ml.结论 该方法灵敏、准确可用于临床上阿普唑仑及α-羟基阿普唑仑和4-羟基阿普唑仑的药代动力学研究.     

LC-MS法测定大鼠血浆中EXH-1626的浓度

目的:建立测定大鼠血浆中EXH-1626浓度的液相色谱-质谱(LC-MS)方法?方法:大鼠血浆样品中加入内标卡马西平,经蛋白沉淀剂(甲醇∶5%硫酸锌溶液 = 70∶30,V/V)沉淀血浆蛋白后取上清液5 μl进行LC-MS测定?色谱条件:色谱柱为汉邦ODS C18柱(5 μm,150 mm × 4.6 mm),流动相为乙腈∶10 mmol/L醋酸铵水溶液(用乙酸调pH至3)70∶30,流速为0.6 ml/min,柱温30℃;质谱条件:采用电喷雾离子化(ESI)方式,以选择性离子监测(SIM)方式检测,EXH-1626和内标选择检测离子的质荷比(m/z)分别为453.3([M+H]+)和274.3([M+H]+)?结果:大鼠血浆中EXH-1626在5~10 000 ng/ml内线性关系良好(r = 0.999 7),最低定量限(LOQ)为5 ng/ml,由低到高(10?100?1 000和10 000 ng/ml)4个浓度的日内和日间精密度RSD均< 10%,绝对回收率均> 70%,相对回收率90%~110%?结论:该方法快速?准确,灵敏度高,操作简便,适用于EXH-1626血药浓度测定及其非临床药代动力学研究?     

LC-MS/MS检测血浆中黄连吴茱萸药对生物碱的研究

目的：快速准确测定黄连-吴茱萸药对中生物碱的血药浓度。方法：采用高效液相色谱-质谱联用法对黄连-吴茱萸药对中盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、盐酸药根碱和吴茱萸碱的血药浓度进行测定,以甲醇-水为流动相梯度洗脱,Hypersil GOLD C18柱（50 mm×2.1 mm,3μm）为固定相,流速为0.2 ml/min,柱温为35℃。质谱采用高温电喷雾离子源,以选择反应监测模式进行定量分析,血浆样品用乙腈直接沉淀处理。结果：盐酸小檗碱在1.243～30.578 ng/ml,盐酸巴马汀在1.240～30.541 ng/ml,盐酸药根碱在1.248～30.647 ng/ml,吴茱萸碱在28.432～553.314 ng/ml范围内均呈良好线性关系。日内、日间RSD均小于15%（n=5）。结论：本方法操作简单、灵敏度高、分析时间短,适用于黄连-吴茱萸药对生物碱血药浓度监测及药代动力学研究。     

HPLC-MS法测定大鼠尿中黄芪甲甙的含量及其尿药动力学研究

目的　建立测定大鼠尿中黄芪甲甙含量的新方法。方法　采用固相萃取高效液相色谱 质谱联用法对大鼠尿中黄芪甲甙的含量进行测定。色谱条件为 :DiamonsilTM C18(4.6mm× 2 5 0mm)柱 ,流动相 :乙腈 水 (40∶6 0 ,v/v) ,流速 0 .8ml/min ,电喷雾型质谱检测器。结果　黄芪甲甙在 0 .1～ 10 μg/ml线性良好 (r=0 .9991,n =5 ) ,最低检测限为 10ng/ml。高、中、低浓度的日内和日间变异系数均小于 10 % ,平均回收率 >90 %。用此法测定了大鼠静注黄芪甲甙后的尿药浓度并计算了药代动力学参数 ,消除速率常数k =0 .2 7h-1,肾排泄速率常数ke=2 .5× 10 -2 h-1。结论　该方法符合生物样品分析要求 ,为黄芪甲甙的体内含量测定提供了新的方法。     

HPLC-MS法同时测定扶正平消胶囊中龙胆苦苷、甘草苷、迷迭香酸、哈巴俄苷的含量

目的建立扶正平消胶囊中4种成分含量的高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)测定方法。方法色谱条件:Agilent Eclipse plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)为流动相,梯度洗脱程序为0 min(A∶B=15∶85);30 min(A∶B=40∶60)。质谱条件:采用电喷雾离子源(ESI),负离子电离,选择性离子监测(SIM)模式。结果龙胆苦苷、甘草苷、迷迭香酸和哈巴俄苷的定量限分别为5.73、6.37、6.50和6.46 ng/ml,检测限分别为0.46、0.32、0.33和0.32 ng/ml;在相应的线性范围内,r>0.999 0;待测物与内标的峰面积之比的日内精密度和日间精密度均小于2%,平均回收率为98%～102%。结论所建立的HPLC-MS方法可同时测定扶正平消胶囊中龙胆苦苷、甘草苷、迷迭香酸和哈巴俄苷的含量,快速、简便,实用性强。     

高效液相色谱法测定人脑脊液中左氧氟沙星的方法学研究

目的:建立脑脊液中左氧氟沙廑含量的RP-HPLC测定方法.方法:采用Shim-pack VP-ODS C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm);乙腈-0.1%甲酸(三乙胺调PH2.52)=16:84为流动相,用前经0.45μm的滤膜过滤,超声脱气;流速为1.0ml/min;紫外检测波长为297nm;柱温为30℃,进样量20μl.结果:此方法最低检测浓度为24.19ng/ml,线性范围为24.19～6200ng/ml,方法平均回收率在96.03%～102.08%,日内及日间精密度的相对标准差分别为2.64%～9.12%和2.59%～8.38%.结论:该方法简单、快速、灵敏度高,重复性好,可用于左氧氟沙星的脑脊液浓度检测.     

超高效液相色谱-串联质谱法测定新生儿血浆中氟康唑的浓度

目的建立快速测定新生儿血浆中氟康唑浓度的方法。方法以非那西丁为内标,用乙腈沉淀蛋白处理血浆。色谱柱:Eclipse Plus C18RRHD(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相:0.1%甲酸-甲醇梯度洗脱;流速:0.3 ml/min;进样量:1μl。采用电化学喷雾离子源正离子模式电离,多反应监测模式检测,定量分析离子对分别为质核比(m/z)307.1→220.0(氟康唑),m/z 180.1→110.0(非那西丁)。结果该方法氟康唑在0.1001～60.0600μg/ml范围内有良好线性关系,定量下限为0.01μg/ml,准确度为82.5%～101.2%,提取回收率为85.0%～109.0%。结论该方法操作简便、快速、准确、灵敏度高,适用于新生儿血浆中氟康唑浓度的测定。     

超快速液相色谱—质谱/质谱联用法测定氯丙嗪制剂中氯丙嗪含量

目的建立简单超快速液相色谱—质谱/质谱联用法测定氯丙嗪制剂中氯丙嗪的含量。方法样品以乙醇提取、微孔滤膜滤过、离心后,通过电喷雾离子化(ESI),采用多反应检测方式进行正离子检测,用于定量分析的检测离子为质荷比319.0→85.8。采用Shim-pack XR-ODS(3.0 mm×75 mm,2.0μm)柱分离,以乙腈—水—甲酸(90∶10∶0.02,V/V/V)为流动相,流速为0.40 m L/min,在3 min内完成氯丙嗪定量分析。结果线性范围为1~256 ng/m L,最低检测限为1 ng/m L;日内、日间测定的相对标准偏差分别小于1.34%、1.89%。结论本方法重复性好,灵敏度高,分析速度快,操作简单,可作为氯丙嗪制剂中氯丙嗪质量控制方法。     

LC-MS和HPLC法测定人血浆中格列本脲和二甲双胍方法的建立

目的建立人血浆中盐酸二甲双胍的高效液相色谱和格列本脲的液相色谱-质谱测定方法.方法二甲双胍血浆样品经乙腈直接沉淀蛋白进样.分析柱:EC 250/4.6 NUCLEOSIL 100-5(4.6mm×250mm,5μm);流动相:0.03 mol/L(NH4)H2P04:乙腈(75:25,pH 7.0),流速1.0 ml/min;检测波长240 nm.格列本脲血浆中加入格列吡嗪为内标,经乙酸乙酯提取,进行LC-MS测定.色谱柱为ORBAX SB300C18柱(2.1 mm×150 mm,5 μm),流动相为乙腈:0.1%乙酸铵(55:45),流速为0.2 ml/min;ESI选择性正离子检测.结果格列本脲浓度为2～200 ng/ml线性关系良好(r=0.999 8),盐酸二甲双胍浓度为6.25～4 000 ng/ml线性关系良好(r=0.999 9).二甲双胍和格列本脲方法的日内和日间RSD＜5%.结论所建立的人血浆中格列本脲的HPLC-MS测定方法和二甲双胍的HPLC测定方法灵敏、准确、简便,可用于格列本脲、二甲双胍的人体药代动力学研究.     

兔血浆中顺式阿曲库铵的HPLC-荧光法测定

目的:建立以反相高效液相色谱-荧光法测定兔血浆中顺式阿曲库铵(Cisatracurium)浓度的方法.方法:色谱柱为Agilent Hypersil ODS-C18柱(5μm,4.0mm×125mm),流动相为50mmol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH3.0)-乙腈(50:50),荧光检测的激发波长200nm、发射波长320nm.结果:顺式阿曲库铵检测浓度在25～2 000ng/ml线性关系良好,r=0.999 2.最低检测限为25ng/ml,日内精密度RSD≤2/56%,日间精密度RSD≤3.68%;提取回收率为85.2%～86.1%(n=5),加样回收率为93.4%～98.8%.结论:本方法简便,灵敏度高,重现性好,可满足药代动力学研究的需要.     

检测中药及保健食品中掺入违禁降压药品的方法研究(Ⅰ)

目的建立液相-质谱联用技术测定中药及保健食品中非法掺入化学降压药物(钙拮抗剂类)的方法。方法Waters X-terra C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相,A:0.01 mol/L醋酸铵缓冲液;B:乙腈;梯度洗脱;流速0.5 mL/min;柱温,室温;检测波长,237 nm;进样量,5μL;电喷雾离子化检测模式。结果在液相色谱条件下,钙拮抗剂类的8种常用药物有良好的分离,最小检出量为1~2 ng;液质条件下,7组分均能得到分子离子峰及加和离子峰,可作为进一步判断的有力依据。结论该方法简便准确,重现性好,可作为降压药物的检测方法。     

高效液相色谱质谱联用法测定泪液葡萄糖浓度

目的:建立以高效液相色谱质谱联用(HPLC-MS)法测定人泪液中葡萄糖浓度的方法.方法:色谱柱为Waters Xbridge Amind柱(2.1 mm×100 mm,3.5 μm),以0.1%甲酸水-乙腈(15 ∶85)为流动相,6,6-脱氧D-葡萄糖为内标,流速0.2 ml·min-1,柱温20 ℃.电喷雾离子化(...     

液质联用法检测中成药和保健食品中的6种肾上腺皮质激素

目的 建立中成药或保健食品中非法添加的6种肾上腺皮质激素的检验方法.方法 样品经溶剂提取分离后,采用高效液相色谱-串联质谱法测定.色谱条件:色谱柱为C18柱,流动相为乙腈-水(体积比40∶60),检测波长240 nm,柱温30℃,流速1.0 mL/min,进样量10μL;质谱条件:以ESI电喷雾电离源正离子模式进行质谱...     

HPLC-MS法测定人体血浆中的奥美沙坦

目的 建立测定人体内血浆中奥美沙坦浓度的HPLC-MS方法.方法 采用三氟乙酸沉淀法处理血浆,HyPurity C18柱(150 mm 2.1 mm,5μm),柱温40℃,流动相为水-甲醇-乙腈(14:60:26),流速为0.22 mL·min-1,质谱条件采用正离子检测的电喷雾电离方式,喷雾电压4.5 kV,正离子模式,用于定量分析的离子(m/z)分别为447(奥美沙坦),376(内标,加替沙星).结果 奥美沙坦检测下限为25 μg·L-1,线性范围25～3200 μg·L-1(r=0.9998),日内和日间RSD均低于15%.结论 该方法灵敏度高、快速、简便、无杂质干扰,适合于奥美沙坦的药代动力学及生物等效性研究.     

UFLC-MS/MS测定大鼠皮下及血液微透析样品中鬼臼毒素浓度

目的 建立和验证一个测定大鼠皮肤下及血液微透析样品中鬼臼毒素浓度的超高速液相色谱-质谱联用(UFLC-MS/MS)方法.方法 微透析样品中加入依托泊苷为内标,经乙酸乙酯液,液提取后进行UFLC-MS/MS测定.采用Agilent ZORBAX XDB-C18色谱柱(2.1 mmx50mm,3.5μm),柱温为室温,以乙腈-10mmol/L乙酸铵(40:60,V/V)为流动相,流速0.3ml/min;质谱采用正离子模式和多反应离子监测方式进行检测.结果 用于定量分析的离子对分别为m/z432.7→397.3(鬼臼毒素)和589.5→229.5(依托泊苷,内标),鬼臼毒素标准曲线线性范嗣为2.0～1000ng/ml.最低定量下限及最低检测限分别为2.0nedml和0.7 ng/ml.日内和日问精密度及准确度均小于15%.结论 该方法灵敏度高、专属性强,可用于测定大鼠皮肤下及血液微透析样品中鬼臼毒素含量.     

丝裂霉素C聚氰基丙烯酸正丁酯磁性纳米球血药浓度的测定

目的建立高效液相色谱法测定小鼠血浆中丝裂霉素C聚氰基丙烯酸正丁酯磁性纳米球浓度的方法。方法血浆样品经乙酸乙酯提取后,以乙腈∶醋酸钠缓冲液pH(15∶85)为流动相,使用LiChroCARTLiChrospherRP-18(250mm×4mm,5 μm)色谱柱分离;流速为1.0ml/min;检测波长为365nm。结果血浆中丝裂霉素C测定的线性范围为0.04~1.00 μg/ml,线性方程为:Y=16388X-17.17, r=0.9998。结论该方法简单实用,结果准确,适用于丝裂霉素C-聚氰基丙烯酸正丁酯磁性纳米制剂临床前药代动力学研究。     

高效液相色谱-电喷雾串联质谱法测定肿节风中异秦皮啶的含量

目的建立异秦皮啶的高效液相色谱-电喷雾串联质谱含量测定方法。方法肿节风药材及清热消炎宁胶囊中异秦皮啶分别用乙酸乙酯和氯仿萃取,以高效液相色谱-电喷雾串联质谱进行分析,多反应监测扫描,母/子离子对为223/162。结果异秦皮啶保留时间为6.60min,标准曲线在484-9680ng/ml范围内线性关系良好(r=0.9996),回收率96.7%,RSD4.49%,最低检测限1ng/ml。结论该方法快速、准确、选择性好,灵敏度高,可为异秦皮啶的含量测定提供参考。     

LC-MS/MS法测定大鼠脑微透析液中7-乙基-10-羟基喜树碱的浓度

目的:建立一种能够测定大鼠脑微透析液中7-乙基-10-羟基喜树碱(7-Ethyl-10-Hydroxycamptothecin,SN-38)浓度的分析方法。方法:采用LC-MS/MS法,色谱柱为Agilent EclipsePlus C18反相柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;流速为0.3 ml/min;柱温为35℃。采用电喷雾离子化,多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)测定大鼠脑微透析液中SN-38(m/z 393.1→349.1)的浓度。结果:空白透析液无干扰;SN-38在0.1015～1015 ng/ml范围内线性关系良好(r=0.9995),定量下限为0.1015 ng/ml;回收率为97.54%～100.60%;精密度和稳定性均良好;脑微透析液中SN-38的浓度呈明显药动学过程,给药220 min后达到顶峰。结论:本实验所建立的LC-MS/MS分析方法专属性强、灵敏度高,可用于分析大鼠脑微透析液中SN-38的浓度。     

LC－MS/MS法测定升麻葛根汤颗粒在犬体内的药代动力学研究

[目的]建立液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)的方法测定犬灌胃给药升麻葛根汤颗粒后葛根素、芍药苷、异阿魏酸的药代动力学。[方法]采用Waters ACQUITY UPLCBEH C18柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相:0.05%甲酸水(A)-乙腈(B)梯度洗脱;流速:0.2 mL/min;柱温:25℃;进样量:5μL。以甲苯磺丁脲为内标,采用电喷雾离子源(ESI离子源),在负离子检测方式下进行多反应离子检测(MRM),检测离子对分别为m/z 415.2→294.9(葛根素)、m/z 525.0→449.0(芍药苷)、m/z 193.05→133.9(异阿魏酸)、m/z 269.09→169.9(甲苯磺丁脲,内标)。[结果]葛根素、芍药苷、异阿魏酸在10～4 000 ng/mL范围内线性关系良好。血浆中内源性物质不干扰测定,方法回收率、基质效应、精密度、准确度和稳定性均符合生物样品的测定要求。[结论]该方法准确度强,专属性好,灵敏度高,可用于检测葛根素、芍药苷、异阿魏酸的药代动力学。     

HPLC-MS/MS法测定超声提取刺五加果实中刺五加苷B、E和异嗪皮啶的含量

目的:建立一个高效液相-质谱联用(HPLC-MS/MS)测定刺五加果实中刺五加苷B、E和异嗪皮啶含量的方法。方法:建立HPLC-MS/MS方法,进行色谱和质谱方法的考察,得到最优的分析条件,即流动相为乙腈-0.05%的甲酸溶液(20∶80,V/V),流速为0.5 ml/min。采用电喷雾离子源(ESI)进行电离,多离子反应监测(MRM)模式进行信号采集,采用外标法进行定量;采用HPLC-MS/MS方法同时测定刺五加果实中刺五加苷B、E和异嗪皮啶的含量。结果:刺五加苷B、刺五加苷E和异嗪皮啶分别在0.7~30 000 ng/ml、0.4~10 000 ng/ml和0.3~16 000 ng/ml浓度范围内呈良好的线性关系(r0.999 7),检出限(LOD)分别为0.17 ng/ml、0.12 ng/ml和0.09 ng/ml,定量限(LOQ)分别为0.7 ng/ml、0.4 ng/ml和0.3 ng/ml,不同浓度下的平均加标回收率为98.10%、98.19%和98.21%;在最优提取条件下刺五加果实中刺五加苷B的含量为(1.935 0±0.001 5)mg/g,刺五加苷E的含量为(0.273 0±0.003 5)mg/g,异嗪皮啶的含量为(0.013 0±0.001 2)mg/g。结论:HPLC-MS/MS法灵敏度高、选择性好、分析时间短,可对刺五加果实中刺五加苷B、刺五加苷E和异嗪皮啶进行准确的定量分析。