萱藻多糖的制备及抗凝血抗血栓活性研究

目的制备萱藻多糖并对家兔体外凝血及小鼠体内血栓形成的抑制作用进行研究。方法采用热水浸提-乙醇沉淀法制备萱藻多糖;检测家兔心脏动脉血活化部分凝血酶时间(APTT),凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT)。以角叉菜胶诱导小鼠尾部血栓模型,检测萱藻多糖体内抗血栓作用。结果萱藻多糖可显著延长家兔血浆APTT、PT和TT;对角叉菜胶诱导的小鼠尾部血栓具有显著的抑制作用(P<0.01)。结论萱藻多糖具有抗凝和抑制实验性血栓形成的作用。     

竹叶提取物的抗血栓作用

目的从抗血小板聚集,抗凝血,及纤溶3个方面研究竹叶提取物的抗血栓作用。方法采用小鼠肺血栓模型、家兔颈总动脉血栓模型,测定家兔体外血浆凝血酶时间、凝血酶原时间、部分凝血活酶时间、血浆复钙时间和小鼠优球蛋白溶解时间及小鼠全血凝块质量等指标,考察竹叶提取物的抗血栓作用。结果竹叶提取物静脉给药可显著提高胶原蛋白肾上腺素混合诱导剂所致肺血栓小鼠的存活率;明显抑制家兔颈总动脉血栓形成;显著降低小鼠优球蛋白溶解时间,减轻小鼠全血凝块重量;其体外给药能显著延长家兔凝血酶、凝血酶原、部分凝血活酶时间,延长血浆复钙时间。结论竹叶提取物具有明显的抗血栓形成作用。     

荭草苷的抗血栓作用研究

目的:研究荭草苷的抗血栓作用。方法:观察预防给予荭草苷后对小鼠体外凝血时间、小鼠全血凝块溶解作用、家兔血浆凝血酶原时间(PT)、家兔血浆白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)、家兔血浆凝血酶时间(TT)、二磷酸腺苷二钠(ADP)诱导的家兔血小板聚集作用、家兔优球蛋白溶解时间(ELT)的影响。结果:与生理盐水组比较,荭草苷(1、2、4mg/kg)组能显著延长小鼠体外凝血时间,对小鼠全血凝块溶解作用无明显影响;荭草苷(0·625、1·25、2·5mg/kg)组能明显延长家兔PT、KPTT及TT,并能显著抑制ADP引起的血小板聚集,对家兔ELT无明显影响。结论:荭草苷具有明显的抗血栓形成作用。     

光裸星虫提取物对血栓形成的影响

目的通过对家兔体外血浆血小板聚集和凝血功能的影响、对大鼠动-静脉血流旁路血栓形成的影响、对DPPH自由基的清除作用及对纤维蛋白的溶解作用,综合评价星虫提取物对血栓形成的影响。方法以二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集,采用比浊法观察星虫提取物对家兔体外血浆血小板6min聚集率和最大聚集率的影响; 采用凝固法来评价星虫提取物对家兔体外血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血激酶时间(APTT)及凝血酶时间(TT)的影响; 采用动静脉旁路模型,来研究星虫提取物对大鼠动静脉旁路血栓形成的影响; 采用2,2-二苯基-1-苦肼基(DPPH)自由基清除率法,来评价星虫提取物清除OH自由基的作用; 通过纤维蛋白平板实验研究星虫提取物的纤溶活性。结果星虫提取物能明显抑制ADP诱导的家兔体外血小板6min聚集率和最大聚集率,能明显延长家兔PT、APTT和TT,明显抑制大鼠动静脉旁路血栓形成,减轻血栓湿重和干重; 具有清除OH自由基的作用以及不同程度地溶解纤维蛋白的作用。结论星虫提取物具有很好的抗血栓形成的作用。     

川芎嗪体内抗血栓活性及机制探究

目的:研究川芎嗪抗血栓作用及机制。方法:观察大鼠灌胃给予川芎嗪(20、40和80mg/kg)后对下腔静脉结扎和电刺激致血栓形成的影响,同时测定家兔灌胃给予的川芎嗪(10、20和40mg/kg)后对凝血酶、二磷酸腺苷(ADP)、胶原诱导的血小板聚集率、非闭塞性静脉血栓形成、凝血酶抑制率和对血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)的影响。结果:川芎嗪对凝血酶、ADP诱导的血小板聚集均有抑制作用,但对胶原诱导的抑制能力较弱。川芎嗪有效地减少实验动物动静脉血栓的形成,在体内与凝血酶也有一定的亲和力,且能较好地延长PT。结论:川芎嗪具有一定的抗血栓作用,其机制可能与保护内皮与抑制血小板聚集有关。     

刺五加总皂苷对家兔血小板、凝血功能及血液流变性的影响

目的:刺五加总皂苷对家兔血小板、凝血功能及血液流变性的影响.方法:采用TYXN-96多功能智能血液凝聚仪和LBY-N6B型自清洗旋转式黏度计测定刺五加总皂苷对家兔血小板数和血小板聚集功能、部分凝血活酶时间(APTT)、凝血活酶时间(PT)、凝血酶时间(TT)及全血黏度、血浆黏度、红细胞压积的影响.结果:家兔静脉注射刺五加总皂苷0.5 mg/kg、1 ms/kg和2 mg/kg对ADP诱导的家兔血小板最大聚集率具有抑制作用,可显著降低家兔全血黏度(P＜0.01);对家兔血液APTT、PT、TT均无显著影响.结论:刺五加总皂苷具有改善家兔血液流变性、抑制血栓形成作用,而此作用是通过解聚红细胞聚集性、降低全血黏度完成的.     

莲心碱对血小板聚集、凝血功能和血栓形成的影响

目的探讨莲心碱对大鼠体内血小板聚集和凝血功能的影响,同时评价其抗血栓作用。方法以二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集,采用比浊法观察莲心碱对大鼠体内血小板1、5min聚集率和最大聚集率的影响;通过毛细管法和减尾法分别研究莲心碱对小鼠凝血时间和尾出血时间的影响,同时评价莲心碱对大鼠凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血激酶时间(APTT)及凝血酶时间(TT)的影响;采用Chandler法及动静脉旁路模型研究莲心碱对大鼠体外血栓和动静脉旁路血栓形成的影响。结果莲心碱5mg·L-1和10mg·L-1均能明显抑制ADP诱导的大鼠体内血小板1、5min聚集率和最大聚集率;明显延长大鼠PT、APTT和TT;明显延长小鼠凝血时间及尾出血时间;不同程度抑制大鼠体外血栓和动静脉旁路血栓形成,减轻血栓湿重和干重。结论莲心碱可明显对抗血栓形成,并具有对抗血小板聚集和凝血作用。     

补体旁路过度激活影响体内凝血功能

目的研究补体旁路的过度激活对体内纤溶、凝血及血小板的影响。方法采用尾静脉注射眼镜蛇毒因子(CVF)造成大鼠体内补体旁路的过度激活。检测大鼠给药前和给药后多个时间点血样的补体活性、t-PA、PAI-1、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)、P-selectin、PF-4、β-TG、血小板数量及聚集活性的变化,并检测小鼠静脉给予CVF后其尾部出血时间的变化。结果大鼠注射CVF后,血清补体活性在1h内基本消失。t-PA和PAI-1含量在1h内有明显增加,在48 h时间点t-PA/PAI-1比值有明显下降(P<0.01);PT、APTT、TT均略有变化,而血浆FIB含量明显下降;补体旁路的过度激活导致血中P-selectin、PF-4、β-TG明显上调,血小板数量明显减少,凝血酶和花生四烯酸诱导的血小板聚集被明显抑制,而ADP诱导的血小板聚集只受到轻微影响。小鼠尾部出血时间在1 h时明显缩短。结论补体旁路的过度激活能明显影响体内凝血功能,导致血液的高凝状态。     

少棘蜈蚣纤溶活性蛋白的抗血栓作用

目的研究少棘蜈蚣(Scolopendra subspinipes mutilans L.Koch)纤溶活性蛋白的抗血栓作用。方法采用离子交换层析和分子筛等制备法从少棘蜈蚣中纯化到蜈蚣纤溶酶(Scolopendra subspinipes mutilans L.Koch fibrinolyti cenzyme,SSFE),用纤维蛋白平板检测酶活力,常规方法检测了SSFE溶血性和出血性,进行了SSFE体外溶栓和体内溶栓实验,并检测了凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)和凝血酶时间(TT)3个标准化指标。结果PAGE显示SSFE为单一组分,具有纤溶活性;证明SSFE无致出血性且无致溶血活性,低、中、高剂量SSFE使小鼠APTT和TT均明显延长,中剂量SSFE对PT有延长作用,而高剂量作用不明显。结论蜈蚣纤溶酶具有抗血栓作用。     

异莲心碱抗血小板聚集和抗凝血作用

目的:探讨异莲心碱(isoliensinineI,L)对大鼠体内血小板聚集和凝血功能的影响。方法:以二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集,采用比浊法观察IL对兔体内外血小板13,5,min聚集率和最大聚集率的影响,同时评价IL对大鼠凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血激酶时间(APTT)及凝血酶时间(TT)的影响。结果:IL 4 mg.L-1和8 mg.L-1能显著抑制ADP诱导的兔体外血小板13,5,min聚集率和最大聚集率,其抑制率为14.4%和27.9%;IL 5 mg.kg-1和10 mg.kg-1能显著抑制ADP诱导的兔体内血小板1,35,min聚集率和最大聚集率,其抑制率为20.0%和32.6%;IL能显著延长大鼠PT、APTT和TT。结论:IL具有对抗血小板聚集和凝血作用。     

Antiplatelet and antithrombotic activities of Korean Red Ginseng

The antiplatelet and antithrombotic activities of Korean Red Ginseng (KRG) were examined on rat carotid artery thrombosis in vivo, and platelet aggregation in vitro and ex vivo. Administration of KRG to rats not only prevented carotid artery thrombosis in vivo in a dose-dependent manner, but also significantly inhibited ADP- and collagen-induced platelet aggregation ex vivo, while failed to prolong coagulation times such as activated partial thromboplastin time (APTT) and prothrombin time (PT), indicating the antithrombotic effect of KRG might be due to its antiplatelet aggregation rather than anticoagulation effect. In line with the above observations, KRG inhibited U46619-, arachidonic acid-, collagen- and thrombin-induced rabbit platelet aggregation in vitro in a concentration-dependent manner, with IC50 values of 620 +/- 12, 823 +/- 22, 722 + 21 and 650 +/- 14 microg/mL, respectively. Accordingly, KRG also inhibited various agonists-induced platelet serotonin secretions as it suppressed platelet aggregation. These results suggest that KRG has a potent antithrombotic effect in vivo, which may be due to antiplatelet rather than anticoagulation activity, and KRG intake may be beneficial to the individuals with high risks of thrombotic and cardiovascular diseases.     

香草酸抗血小板聚集作用的体内外研究

目的香草酸是一种酚酸类化合物,具有抗氧化、抗炎等药理作用,其抗血栓作用尚未有报道。本实验室前期通过筛选发现香草酸具有良好的抗血小板聚集作用,因此本研究通过体内外实验对香草酸抗血小板聚集的作用进行系统评价。方法采用花生四烯酸(arachidonic acid,AA)、二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)、凝血酶(thrombin,THR)诱导体内外血小板聚集模型,结合凝血四项检测评价香草酸抗血小板聚集及抗血栓的作用。结果体外实验中,香草酸对ADP和AA诱导的血小板聚集具有显著抑制作用,并剂量依赖性抑制ADP诱导的血小板聚集;体内试验中,香草酸(10、30和100 mg/kg)能够剂量依赖性抑制ADP和AA诱导的血小板聚集;同时,香草酸(100 mg/kg)能显著降低纤维蛋白原、增加凝血酶原时间,对活化部分凝血活酶时间和血浆凝血酶时间无明显影响。结论本研究首次发现香草酸对ADP和AA诱导的血小板聚集具有抑制作用,为研发具有自主知识产权的抗血小板聚集药物提供了实验依据。     

舒脑欣滴丸对寒凝气滞血瘀证大鼠血小板聚集和血液流变学指标的影响

目的探讨舒脑欣滴丸对急性血瘀模型大鼠血小板聚集和血液流变学指标的影响。方法选取70只Wistar大鼠,随机分为对照组,模型组,舒脑欣滴丸13、26、52 mg/kg组,阳性药脑心通胶囊(15 mg/kg)、阿司匹林肠溶片(15 mg/kg)和藻酸双脂钠片(90 mg/kg)组,连续ig给药7 d,1次/d,末次给药后1 h,采用sc 0.1%肾上腺素加在冰水中游泳的方法,制备大鼠急性血瘀模型,观察舒脑欣滴丸对不同血小板聚集诱导剂二磷酸腺苷(ADP)、花生四烯酸(AA)和胶原(CG)引起的大鼠血小板聚集影响;通过检测血液流变学指标、凝血功能评价舒脑欣滴丸对血瘀模型大鼠的作用。结果舒脑欣滴丸对3种不同血小板聚集诱导剂引起的血小板聚集均有不同程度的抑制作用,可显著降低全血黏度,延长血瘀模型大鼠凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)。结论舒脑欣滴丸13、26、52 mg/kg具有明显活血化瘀作用,能降低血液黏度,抑制多种诱导剂引起的血小板聚集,具有一定抗凝活性。     

注射用血塞通(冻干)对家兔下腔静脉血栓的抑制作用研究

目的 观察注射用血塞通（冻干）对电刺激所致家兔下腔静脉血栓形成的影响,并对其作用机制进行探讨。方法 使用电刺激伴狭窄法制备家兔下腔静脉血栓模型,造模1 h后,连续5天iv给予5、10、20 mg/kg的注射用血塞通（冻干）、sc给予100 U/kg的低分子肝素钠注射液,最后一次给药1 h后测定家兔出血时间和出血量,颈动脉取血分离血浆,试剂盒法检测活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）以及纤维蛋白原（FIa）水平,ELISA试剂盒法检测血浆内凝血因子FIIa、FXa、FXIa、抗凝血酶III（ATIII）、凝血因子TAT、活化蛋白C（APC）、组织性纤维溶酶激活剂（t-PA）、纤溶酶原（PLG）、尿激酶原（PROUK）、胰蛋白酶（Trypsin）、6-酮前列腺素F1a（6-keto-PGF1a）和血栓素B₂（TXB₂）水平;取血栓,测定血栓湿质量、干质量以及基质量。在血小板聚集实验中,制备家兔贫、富血小板血浆,分别以胶原（CG）、二磷酸腺苷二钠盐（ADP）和花生四烯酸钠（AA）为诱导剂,比浊法测定不同浓度血塞通对血小板聚集的影响。结果 家兔iv注射用血塞通（冻干）后,与模型组比较,血栓湿质量、干质量及基质量均显著降低,并具有一定的剂量依赖性;出血时间和出血量未出现明显增加,APTT、PT和TT也未出现明显变化;血浆内t-PA和6-keto-PGF1a水平显著增加,TXB₂水平显著降低,其他指标没有明显变化。在血小板聚集实验中,血塞通可以剂量依赖性地抑制由AA诱导的血小板聚集。结论 注射用血塞通（冻干）具有良好的抑制下腔静脉血栓作用,且无明显出血副作用,作用机制与增强纤溶活性、抑制血小板聚集和血管收缩有关。     

Effects of proteins from hen egg yolk on human platelet aggregation and blood coagulation

We studied the effect on both platelet aggregation and blood coagulation, known to be major risk factors in thrombogenesis, of proteins from hen egg yolk (EP). EP potently inhibited collagen-induced human platelet aggregation in a dose-dependent manner. Furthermore, EP has a synergistic effect on the inhibition of human platelet aggregation with both molsidomine, an inhibitor of cGMP-specific phosphodiesterase, and theophylline, an inhibitor of cAMP-specific phosphodiesterase. These results indicate that the active mode of EP might be involved in elevation of the levels of both cGMP and cAMP. Prothrombin time and activated partial thromboplastin time were potently prolonged by EP. These data suggest that EP prolongs the time interval between the conversion of fibrinogen to fibrin. Accordingly, these findings demonstrate that EP might have antithrombotic effects by inhibiting platelet aggregation and fibrin formation.     

In vitro bioactivity of a synthesized prostaglandin E1-heparin conjugate

A covalently bound conjugate of commercial grade heparin and prostaglandin E1 (PGE1) was synthesized to provide the dual pharmacological role of decreasing the extent of platelet aggregation and inhibiting fibrin formation during thrombogenesis. The compound was synthesized using a modified mixed carbonic anhydride method of amide bond formation between the carboxylic acid moiety of PGE1 and a primary amine group on heparin. Quantitation of coupling was measured spectrophotometrically by monitoring a degradation product of the prostaglandin E1-heparin conjugate (prostaglandin B1-heparin conjugate). Bioactivity tests on the conjugates (activated partial thromboplastin time and platelet aggregation) confirmed that both the anticoagulant activity of heparin and the inhibitory effect of PGE1 on platelet aggregation were maintained.     

迷迭香酸抗血栓和抗血小板聚集作用

迷迭香酸是丹参水溶性成分之一。大鼠体内实验(iv)表明,它能抑制静脉血栓形成。阻抑胶原诱导的血小板聚集,促进纤维蛋白溶解活性。当剂量为50及100 mg/kg时,血栓形成的抑制率分别为41.9和54.8%(P<0.vv05)。当剂量为100及150mg/kg时,血小板聚集的抑制率分别为30.4%(P<0.05)和46.4%(P<0.01),血浆优球蛋白溶解时间缩短(P<0.05)。纤维蛋白原含量无明显变化。以上结果说明,迷迭香酸有温和的抗血栓作用。其机理可能与抗血小板聚集和增强纤维蛋白溶解活性有关。