乳腺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋ Treg细胞及Th1/Th2类细胞因子水平测定及意义

目的探讨乳腺癌患者外周血CD4＋CD2＋5调节性T细胞（CD4＋CD2＋5Treg）水平变化在肿瘤发生、发展中的作用及机制。方法流式细胞术检测45例健康人（对照组）、44例乳腺良性增生患者（增生组）、61例乳腺癌患者（乳腺癌组）外周血CD4＋CD2＋5Treg水平,ELISA法检测三组Th1类细胞因子IL-2、IFN-γ、TNF-α和Th2类细胞因子IL-6水平;分析CD4＋CD2＋5Treg与肿瘤临床病理特征及细胞因子的关系。结果乳腺癌组TNM分期Ⅲ、Ⅳ期患者外周血CD4＋CD2＋5Treg细胞水平显著高于0~Ⅱ期患者、对照组和增生组,且术后水平显著低于术前（P均〈0.05）;乳腺癌组TNM分期Ⅲ、Ⅳ期患者血清IL-2、IFN-γ、TNF-α水平明显低于0~Ⅱ期患者、对照组和增生组,IL-6水平则反之（P均〈0.05）;乳腺癌组外周血CD4＋CD2＋5Treg细胞水平与IL-2、IFN-γ、TNF-α水平呈负相关（r=-0.579、-0.607、-0.691）,与IL-6呈正相关（r=0.804）,P均〈0.05。结论外周血CD4＋CD2＋5Treg细胞水平与乳腺癌发生、发展有关,可能机制为通过调节Th1/Th2细胞因子平衡参与机体免疫应答。     

系统性红斑狼疮患者外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞的检测和意义

目的检测系统性红斑狼疮（SEE）患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞（Treg）的百分比，并分析其与疾病活动的相关性。方法采用流式细胞仪检测28例SLE患者（其中活动组18例）及22名正常对照组的外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg的百分比，同时评估SLE疾病活动指数（SLEDAI）及检测血抗dsDNA水平，分析相关性。结果SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的百分比较对照组降低（P〈0．05），以活动组尤为明显，CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg的百分比与SLEDAI呈明显的负相关（P〈0．01），同时显示血抗dsDNA阳性组较阴性组患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg的百分比显著下降（P〈0．01）。结论SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg的百分比在活动期下降为明显，其在SLE的发病机制中可能起到重要的作用。     

HBV感染者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达水平及临床意义

目的比较CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋和CD4^＋CD25^＋CD127^-/low两种设门方法对CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）细胞的界定效果,并探讨HBV感染者外周血中Treg水平的表达及其临床意义。方法选择慢性乙型肝炎患者52例,HBV携带者24例,非活动性HBsAg携带者24例,正常对照者25例,采用CD4^＋CD25^＋CD127^-/low设门方法用流式细胞仪进行检测,其中正常对照组和21例慢性乙型肝炎患者同时采用CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋设门进行检测并分析。结果采用CD4^＋CD25^＋CD127^-/low设门方法检测外周血Treg与CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋设门方法在正常组和患者组均呈正相关（r=0.506,P〈0.05;r=0.556,P〈0.01）。以CD4^＋CD25^＋CD127^-/low设门检测慢性乙型肝炎患者组、HBV携带者组、非活动性HBsAg携带者组和正常对照组外周血Treg的水平分别为（10.65±2.86）%、（8.56±2.01）%、（8.75±3.04）%和（7.33±1.17）%。慢性乙型肝炎患者组明显高于其他三组（P〈0.01）,慢性HBV携带者组明显高于对照组（P〈0.05）,非活动性HBsAg携带者组与对照组之间差异无统计学意义。慢性乙型肝炎患者及慢性HBV携带者Treg表达水平与HBV病毒载量之间均无相关,慢性乙型肝炎患者Treg表达水平与ALT之间无相关,HBeAg阳性患者组和HBeAg阴性患者组的Treg表达水平差异无统计学意义。结论 CD4^＋CD25^＋CD127^-/low设门方法检测外周血Treg与CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋设门方法有较好的相关性,而前者更为简单、实用。Treg在慢性乙型肝炎患者、慢性HBV携带者中明显增高,提示Treg在乙型肝炎慢性化机制中发挥重要作用。     

化疗对B细胞非霍奇金淋巴瘤患者CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞的影响

目的探讨B细胞非霍奇金淋巴瘤（B—NHL）的发病机制及化疗对B-NHL患者机体抗肿瘤免疫状态的影响。方法采用流式细胞术分别检测35例B-NHL患者（观察组）化疗前后及30例健康对照者（对照组）外周血中CD4^＋CD25^＋Treg细胞所占比例,RT—PCR法检测各组外周血中转录因子Foxp3 mRNA的相对表达水平。结果观察组化疗前后外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞的比例、Foxp3 mRNA表达均显著高于对照组,化疗后显著高于化疗前,P均〈0．05。结论机体抗肿瘤免疫功能受抑是B—NHL患者发病原因之一;化疗在杀伤肿瘤细胞的同时亦可进一步削弱患者机体自身的抗肿瘤免疫功能。     

子宫腺肌病患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞的检测及意义

目的观察子宫腺肌病患者外周血CD4^＋CD25^＋毒T细胞（Treg细胞）的频率,探讨Treg细胞在子宫肌腺症发病中的作用。方法采用流式细胞仪检测54例子宫腺肌病患者（实验组）和34例健康人（对照组）外周血CD4^＋CD25^＋未T细胞及CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞。结果实验组CD4^＋CD25^＋T细胞频率为1．72％±0．47％,显著低于对照组的3．05％±0．91％（P〈0．05）;实验组CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞的频率为0．95％±0．23％,显著低于对照组的1．50％±0．38％（P〈0．05）。结论Treg细胞在子宫腺肌病患者外周血中明显降低。Treg细胞在子宫腺肌病中担负着重要的免疫调节作用。     

丹参注射液对哮喘患者的疗效及CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的影响

目的观察丹参注射液治疗支气管哮喘（哮喘）患者的疗效及对CD4＋CD25＋Treg调节性T细胞（CD4＋CD25＋）的影响,探讨丹参注射液治疗哮喘的新机制。方法 62名哮喘患者随机分成对照组和丹参治疗组,记录试验前、后患者的临床症状评分、FEV1、PEF,流式细胞仪检测患者外周血单个核细胞（PBMCs）中CD4＋CD25＋Treg的比例。结果两组患者临床症状评分均较治疗前显著减少,治疗组的减少更为明显,且与对照组相比,差异具有显著性（P〈0.05）;两组患者FEV1、PEF、CD4＋CD25＋Treg的比例均较治疗前显著增加,治疗组的增加更为明显,且与对照组相比,差异具有显著性（P〈0.05）。结论丹参注射液可有效治疗哮喘,其机制可能与促进CD4＋CD25＋Treg的产生有关。     

抗病毒治疗对慢性丙型肝炎CD4^＋CD25^＋调节性T细胞频率和功能的影响

目的研究抗病毒治疗前后慢性丙型肝炎患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）频率和功能的变化。方法筛选HLA—A2阳性慢性丙型肝炎患者31例，给予聚乙二醇化干扰素α-2a（相对分子质量为40000）180μg每周1次皮下注射，联合口服利巴韦林。分别在治疗前和治疗结束随访24周时应用流式细胞仪检测患者CD4^＋CD25^＋ Treg细胞占外周血CD4^＋T细胞的频率，应用液闪计数仪检测其对HCV特异性CD8^＋T细胞增殖的抑制作用，ELISA法检测细胞培养上清γ干扰素（IFN-γ）水平的变化情况。结果治疗结束随访24周，患者外周血CD4^＋CD25^＋ Treg细胞频率为（9．6±3．0）％，明显低于治疗前的（11．0±2．3）％（t=2．028，P〈0．05）；持续病毒学应答（SVR）组CD4^＋CD25^＋ Treg细胞频率为（8．9±2．7）％，明显低于未获得SVR患者组的（10．4±2．3）％（t=3．324，P〈0．01）。抗病毒治疗后CD4^＋CD25^＋ Treg细胞抑制HCV特异性CD8^＋T细胞增殖的作用减弱。治疗后患者IFN-γ水平为（3959±577）pg／ml，明显高于治疗前的（1965±326）pg／ml（t=16．1，P〈0．01）；获得SVR患者组IFN-γ（6824±568）pg／ml，明显高于未获得SVR患者组的（2219±286）pg／ml（t=29．853，P〈0．001）。结论慢性丙型肝炎患者随着HCV RNA水平的下降，CD4^＋CD25^＋Treg细胞频率降低，抑制HCV特异性CD8^＋T细胞增殖的作用减弱。     

儿童AITP治疗前后CD4^＋CD25^High Foxp3^＋Treg细胞与Foxp3基因表达的变化

目的探讨CD4^＋CD25^High Foxp3^＋Treg细胞在儿童急性特发性血小板减少性紫癜（AITP）发病中的作用及对丙种球蛋白、激素治疗的效应关系。方法流式细胞仪检测AITP患儿治疗前后CD4^＋CD25^High Foxp3^＋Treg细胞比例变化，RT—PCR法检测外周血单个核细胞中Foxp3mRNA的表达。结果单用激素或联用激素和丙种球蛋白治疗后AITP患儿CD4^＋CD25^High Foxp3^＋Treg细胞比例和Foxp3基因表达水平较治疗前和正常对照组明显增高（P〈0．01），其中联用丙种球蛋白和激素组的增高水平更为明显（P〈0．01）。结论CD4^＋CD25^High Foxp3^＋Treg细胞比例下降及Foxp3基因表达降低是AITP的发病机制之一，丙种球蛋白和激素可以通过诱导其扩增及活化发挥治疗AITP的作用。     

支气管哮喘大鼠CD4^＋CD25^＋T细胞的变化及地塞米松干预作用的研究

目的研究支气管哮喘（简称哮喘）大鼠模型支气管肺泡灌洗液（BALF）、血液、脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞的变化,及地塞米松对CD4^＋CD25^＋T细胞的影响。方法50只SD大鼠随机分为5组,空白对照（A）组,哮喘（B）组,地塞米松1（C）组、地塞米松2（D）组,地塞米松3（E）组。A组第1天给予腹腔注射生理盐水1ml,第15～21天每天给予生理盐水雾化。B、C、D、E组用卵蛋白建立哮喘大鼠模型,第1天,每只大鼠腹腔注射抗原1ml（卵蛋白1mg＋灭活百日咳杆菌9×10。个＋氢氧化铝干粉100mg）混悬液,第15～21天给予1％的卵蛋白雾化30min,C、D、E组于雾化后分别给予腹腔注射地塞米松0．2mg／kg、1mg／kg、2mg／kg。采用流式细胞仪检测的方法,观察大鼠体内BALF、外周血、脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞的变化及使用不同剂量地塞米松后对其的影响。结果B组BALF、外周血、脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞表达占CD4^＋T细胞的百分比分别是（42．21±5．62）％、（12．69±2．70）％、（11．15±1．05）％,A组结果分别是（18．76±5．85）％、（6．21±1．73）％、（7．85±2．13）％。B组与A组比较,差异均具有统计学意义（P〈0．01,P〈0．01,P〈0．05）;C组、D组、E组BALF中CD4^＋CD25^＋T细胞占CD4^＋T细胞的百分比表达分别是（10．49±4．03）oA、（13．28±5．12）％、（7．51±5．39）％,显著低于A组和B组,（P〈0．05,P〈0．01）;外周血中,C组（6．03±1．43）％、D组（4．88±0．95）％与A组（6．21±1．73）％比较,差异无统计学意义,E组（3．49士0．62）％与C组、A组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。脾脏中,c组（7．25±1．82）%、D组（8．63±3．18）％与A组（7．85±2．13）％比较,差异无统计学意义,E组（3．38±1．37）％与C组、D组、A组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论CD4^＋CD25^＋T细胞在哮喘大鼠体内有明显的优势表达,可能是哮喘发病的机制之一。地塞米松可以抑制CD4^＋CD25^＋T细胞的表达。BALF内CD4^＋CD25^＋T细胞的变化与外周血和脾脏的变化具有一致性,监测外周血或脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞变化可了解肺部情况。     

扩张型心肌病患者外周血CD4＋CD25＋T细胞变化及临床意义

目的探讨扩张型心肌病（DCM）患者外周血CD4＋CD2＋5T细胞变化及临床意义。方法采用流式细胞分析法检测30例DCM患者（DCM组）及20例健康者（对照组）的外周血CD4＋CD2＋5T细胞。结果外周血CD4＋CD2＋5T细胞占CD4＋T细胞的比例DCM组为（8.53±1.64）%,对照组为（11.4±2.17）%,两组比较有统计学差异（P〈0.01）;且DCM患者心功能越差,CD4＋CD2＋5T细胞占CD4＋T细胞的比例越低。结论DCM患者CD4＋CD2＋5T细胞比例减少,可能打破自身免疫耐受,发生针对心肌抗原的免疫反应,参与DCM发病。     

Th1/Th2细胞因子与平阳霉素治疗恶性胸腔积液疗效的相关性

目的探讨胸水及血浆中Th1/Th2细胞因子与平阳霉素（PYM）治疗恶性胸腔积液（MPE）疗效的关系。方法 24例非小细胞肺癌并发MPE患者均行胸腔闭式引流术,并给予胸膜腔内注射PYM24～32mg治疗。应用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法（ELISA）法检测治疗前后胸水及外周血中干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-4（IL-4）的浓度。一个月后根据WHO标准对MPE患者进行疗效评价。然后根据疗效将24例患者分为有效组和无效组,比较各组治疗前后胸水和外周血标本中IFN-γ、TNF-α和IL-4浓度的变化。结果有效组胸水中IFN-γ和TNF-α浓度在注药后24h和72h均显著高于注药前（P〈0.05）,而IL-4浓度在注药后72h较注药前出现下降趋势,有统计学意义（P〈0.05）。无效组胸水中IFN-γ、TNF-α和IL-4浓度在注药前后无显著差异（P〉0.05）。结论 PYM可刺激IFN-γ、TNF-α增多以及IL-4减少,以促进胸膜炎症形成胸膜粘连。胸膜腔内Th1细胞因子升高和Th2细胞因子减少与PYM胸膜固定术疗效有关。     

结核性胸膜炎患者胸液中CD4~+ CD25~+ FoxP3~+调节T细胞抑制抗结核免疫

目的研究结核性胸膜炎患者胸液中CD4+CD25+FoxP3+调节T细胞是否增多,这些调节T细胞是否抑制结核的特异细胞免疫反应。方法使用细胞分离、流式细胞分析及体外细胞培养作细胞增殖及增殖抑制等实验方法,对15例结核性胸膜炎患者及17例健康正常人群胸液及外周血白细胞中CD4+CD25+FoxP3+调节T细胞的量及特征作研究。结果结核性胸膜炎患者胸液中CD4+CD25+FoxP3+调节T细胞明显高于患者及健康人群外周血。在体外,结核性胸膜炎患者胸液中单核细胞对BCG刺激产生γ-干扰素(IFN-γ)的能力明显强于患者及健康人群外周血中单核细胞;把这些调节T细胞从胸液单核细胞中清除,增强了结核患者胸液单核细胞对BCG刺激产生IFN-γ;从结核患者胸液分离的这些调节T细胞能抑制结核患者Th1细胞产生IFN-γ。结论结核性胸膜炎患者胸液CD4+CD25+FoxP3+调节T细胞增多,抑制结核性胸膜炎患者Th1细胞免疫反应,从而参与了结核性胸膜炎的发病。     

Significance of the frequency of CD4+CD25+CD127- T-cells in patients with pulmonary tuberculosis and diabetes mellitus

Background and objective: Pulmonary tuberculosis and diabetes mellitus (DM) are closely associated. The objective of this study was to determine whether the expression of CD4+CD25+CD127? T‐cells (regulatory T‐cells (Treg)) is associated with diabetic pulmonary tuberculosis. Methods: Flow cytometry was used to determine the frequencies of CD4+CD25+ and CD4+CD25+CD127? T‐cells in peripheral blood, bronchoalveolar lavage fluid (BALF) and pleural effusions from 120 patients (30 with pulmonary tuberculosis and DM (TBDM), 30 with pulmonary tuberculosis without DM (TB), 30 with tuberculous pleurisy without DM (TBP) and 30 healthy volunteers). The concentrations of interferon (IFN)‐γ and interleukin (IL)‐10 in BALF and pleural effusions were determined by enzyme‐linked immunosorbent assay. Results: Treg frequencies in peripheral blood were significantly higher in patients with TBDM, TB and TBP than in the control group, with the frequency in TBDM being the highest (P < 0.01 for all). In TBP patients, Treg frequencies were significantly lower in pleural effusions than in peripheral blood. In TB patients, Treg frequencies in BALF and peripheral blood were not significantly different. However, in TBDM patients, Treg frequencies were significantly higher in BALF than in peripheral blood. IL‐10 expression was significantly higher, and IFN‐γ expression was significantly lower in BALF of TBDM patients compared with BALF and pleural effusions of TB patients. Conclusions: In patients with pulmonary tuberculosis and DM, the imbalance between Treg and effector T‐cells at pathological sites may be associated with weakened immunity and clinical manifestations of TB.     

肺癌患者胸腔积液及外周血CD4+CD+25 T细胞、Foxp3基因表达及意义

目的探讨CD+4CD+25T细胞及Foxp3基因在肺癌发生、发展中的作用及机制.方法流式细胞仪检测32例肺癌合并胸腔积液患者外周血、胸腔积液及30例无胸腔积液肺癌患者外周血、胸腔冲洗液中CD+4 CD+25T细胞水平,RT-PCR法检测特异性转录因子Foxp3基因在胸腔积液及外周血中的表达.结果肺癌合并胸腔积液患者胸腔积液中CD+4CD+25T细胞水平显著高于无胸腔积液患者胸腔冲洗液及外周血;Foxp3基因在肺癌患者外周血和胸腔积液中呈高表达.结论肺癌患者外周血和胸腔积液中增高的CD+4CD+25T细胞主要是CD+4CD+25调节性T细胞.CD+4cD+25调节性T细胞可促进肺癌的进一步恶化,其机制可能是抑制肿瘤免疫.     

平阳霉素与高聚金葡素治疗恶性胸腔积液的疗效比较

目的观察平阳霉素与高聚金葡素治疗恶性胸腔积液的疗效。方法40例恶性胸腔积液患者随机分为两组,分别给予平阳霉素、高聚金葡素治疗,治疗结束后按WHO统一标准观察患者胸腔积液的变化,评价有效率。结果平阳霉素组治疗有效率55％,高聚金葡素组治疗有效率为85％,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论平阳霉索与高聚金葡素胸膜腔内注射对恶性胸腔积液治疗都有一定疗效,高聚金葡素的疗效高于平阳霉素。     

单核细胞趋化蛋白-1、癌胚抗原和C-反应蛋白在平阳霉素胸膜固定术中的变化及意义

目的 观察胸膜腔内注射平阳霉素(PYM)后胸腔积液(胸水)中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)-1、癌胚抗原(CEA)和C-反应蛋白(CRP)水平的变化,探讨PYM胸膜固定术的机制.方法 2009年10月至2010年8月对31例恶性胸腔积液患者胸膜腔内注射PYM,检测注药前及注药后6 h、24 h、48 h胸水中MCP...     

结核性和癌性胸腔积液中白细胞介素-16的测定及其意义

目的通过检测结核性和癌性胸腔积液中IL-16水平,探讨其与T淋巴细胞亚群之间的关系。方法收集62例胸腔积液（32例结核性和30例癌性）患者的胸腔积液与静脉血,ELISA测胸腔积液上清液及血清中IL-16水平;流式细胞仪测胸腔积液中T淋巴细胞亚群;行胸腔积液中细胞计数及分类。结果62例胸腔积液者,胸腔积液中IL-16水平高于其血清水平。结核性胸腔积液中IL-16水平高于癌性胸腔积液中IL-16水平。胸腔积液中IL-16水平与淋巴细胞总数、T细胞数及CD4^＋细胞数呈正相关（r分别为0．526、0．638、0．701,P值均小于0．001）。结论与癌性胸腔积液相比,结核性胸腔积液中IL-16水平高,IL-16有可能在CD4^＋ T细胞浸润到胸腔的过程中具有重要的趋化作用。     

结核性与恶性胸腔积液中CD4+CD25+调节性T细胞及相关因子的检测

目的检测结核性胸腔积液及恶性胸腔积液中D₄⁺ CD₂₅⁺调节性T细胞的分布与可溶性白介素-2受体(sIL-2R)及转化生长因子β1(TGF-β1)浓度,并探讨良恶性胸腔积液患者的局部免疫机制。方法47例结核性胸腔积液及34例肺癌并恶性胸腔积液患者于第1次抽液时留取胸腔积液,ELISA法检测sIL-2R及TGF-β1的浓度,Ficoll梯度离心分离单个核细胞,抗体标记后应用流式细胞仪分析D₄⁺ CD₂₅⁺调节性T细胞占淋巴细胞的比例。结果47例结核性胸腔积液与34例肺癌并恶性胸腔积液中D₄⁺ CD₂₅⁺调节性T细胞占淋巴细胞的比例分别为(8.7±0.6)%、(21.1±2.3)%,有显著性差异(P<0.05);结核性胸腔积液与恶性胸腔积液中sIL-2R浓度分别为(563.2±92.61)ng/ml,(390.12±101.12)ng/ml,有显著性差异(P<0.05);恶性胸腔积液中TGF-β1的水平(88.4±16.7mg/L),显著高于结核性胸腔积液组(40.3±3.6mg/L),结核性胸腔积液中sIL-2R、TGF-β1浓度与D₄⁺ CD₂₅⁺调节性T细胞占淋巴细胞的比例均无明显相关关系(P>0.05)。结论D₄⁺ CD₂₅⁺调节性T细胞,sIL-2R及TGF-β1可作为判定结核或恶性胸腔积液的辅助诊断指标。     

CD5+ CD10+ extranodal B-cell lymphoma with tetraploid chromosomal abnormality

An 84-year-old man was admitted with pleural lymphomatous effusion and bone marrow infiltration. The abnormal cells from the effusion showed abundant basophilic cytoplasm, large atypical nuclei, and small nucleoli with frequent mitosis. The abnormal cells were found to be CD5+, CD10+, CD19+, and CD20+ by flow cytometry, and had clonal rearrangements of the IgH-JH gene, indicating the existence of a clonal B-cell population. No bcl-1, bcl-2, bcl-6, or c-myc rearrangement was found. Neither human herpesvirus 8 (HHV-8) nor Epstein-Barr virus was detected in the abnormal cells. Tetraploid chromosomal abnormality was present. After administration of prednisolone, transient disappearance of the effusion was obtained.