^60Coγ射线诱发Lewis肺癌细胞Fas基因蛋白表达及其与细胞凋亡的关系

目的：研究^60Coγ射线对Lewis肺癌细胞Fas基因蛋白表达的影响及其诱发细胞凋亡的分子机制，方法：采用免疫电镜技术，对受照Lewis细胞的小鼠移植瘤组织进行Fas基因蛋白的超微结构定位观察。结果：受照Lewis肺癌细胞的小鼠移植瘤组织，癌细胞呈Fas基因蛋白阳性表达，阳性产物分布于细胞膜表面；而未受照射的对照组Lewis细胞的移植组织，癌细胞Fas蛋白全部阴性。结论：γ射线诱发Lewis肺癌细胞发生凋亡主要依赖于Fas蛋白表达的上调及Fas介导的凋亡信号传导途径的激活。     

放射线诱发Lewis肺癌细胞株凋亡的研究

对６０Ｃｏ照射的Ｌｅｗｉｓ细胞及其小鼠移植瘤进行电镜、ＤＮＡ电泳和流式细胞术观察,研究照射Ｌｅｗｉｓ细胞凋亡的时间、剂量效应关系,以及对小鼠移植瘤的影响。发现照射后Ｌｅｗｉｓ细胞出现的凋亡随照射剂量增加和照射后培养时间延长而升高;在移植瘤中持续出现的细胞凋亡与照射后培养时间的长短相关。可以认为放射线诱发Ｌｅｗｉｓ细胞凋亡的模型对肺癌的放疗有一定的参考意义;Ｌｅｗｉｓ细胞凋亡可能存在多种发生机制。     

放射线诱发Lewis肺癌细胞凋亡的分子机制

我们的前期研究工作已经证明 ,在一定的剂量范围内 ,60 Ｃｏγ射线能诱导Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞发生凋亡 ,且与照射剂量和培养时间有密切的关系[1] 。为研究放射线诱发Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞凋亡的分子机制 ,我们对受照射后的Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞的小鼠移植瘤组织进行了免疫组化染色和免疫电镜观察 ,以探讨放射线对Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞凋亡相关基因表达的影响及其与细胞凋亡的关系。1　材料与方法1.1　标本资料Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞株的培养、60 Ｃｏ照射以及小鼠接种方法参照文献[1] 。取 8Ｇｙ剂量照射后、培养 12ｈ的Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞的小鼠移植…     

肺癌组织中Fas、FasL表达与凋亡的关系及其意义

研究表明,肿瘤的发生及发展不但与细胞增殖过度有关,而且与凋亡异常有关 [1]. Fas为细胞膜上的受体,当与其配体 FasL结合时可引导该细胞凋亡 [2]. 文献报道 [3],肿瘤细胞存在 Fas及 FasL的表达异常,但肺癌中 Fas及 FasL的表达异常及其与肺癌细胞凋亡的关系和意义尚不明确.本文检测了 96例手术切除肺癌标本中 Fas、 FasL的表达及细胞凋亡水平,并探讨其与肺癌发生发展之间的关系. 1 材料与方法     

原发性肝癌中Fas表达及其与细胞凋亡的关系

目的：研究Fas蛋白在肝癌组织中的表达和意义，探讨Fas蛋白与细胞凋亡的关系。方法：应用SABC免疫组织化学染色方法和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术，对41例肝癌组织中Fas蛋白、凋亡细胞表达进行原位观察和比较。结果：肝癌中Fas蛋白阳性率为31．71％，癌旁肝硬化Fas阳性率80．00％，癌细胞Fas表达较癌旁显著减少，肝癌组织Fas表达与性别、肿瘤大小、组织分级无关，Fas基因表达与门静脉癌栓发生率呈负相关。Fas表达阳性的肝癌组织细胞凋亡指数明显高于Fas蛋白表达阴性组。结论：Fas／FasL系统在原发性肝癌肿瘤免疫逃避中起重要作用，Fas蛋白在原发性肝癌门静脉癌栓形成中作用值得进一步研究。     

非小细胞肺癌细胞凋亡及Fas/FasL表达的关系

 目的　探讨凋亡相关基因Fas/FasL表达与非小细胞肺癌细胞凋亡和临床病理特征的关系。方法　采用免疫组织化学和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术对45例肺癌和38例癌旁组织中的Fas和Fasl表达及凋亡细胞水平进行检测。结果　与癌旁组织比较,肺癌中FasL表达增加,Fas表达降低,凋亡细胞减少;FasL表达与组织类型有关;肺癌细胞凋亡水平在淋巴结转移和晚期癌组织中明显受抑;Fas表达阳性的凋亡细胞指数明显高于Fas表达阴性组。结论　细胞凋亡调控异常在肺癌发病中可能起重要作用。     

DFMO通过Fas/FasL通路诱导人肺癌细胞凋亡的研究

背景与目的:Fas/FasL系统是细胞凋亡的重要通路。为了解Fas/FasL系统在肿瘤多胺生物合成抑制导致恶性表型逆转中的作用,本研究拟探讨多胺生物合成抑制剂α-二氟甲基鸟氨酸(α-difluoromethylornithine,DFMO)对人肺癌A549细胞生长、凋亡的影响及其与人肺癌相关抗原、rasP21蛋白及Fas/FasL表达的相关性。方法:用MTT法观察细胞生长,流式细胞仪分析细胞周期,DNAladder电泳法观察细胞凋亡,SP免疫组化法及RT-PCR法检测细胞蛋白及基因表达。结果:DFMO可抑制A549细胞生长并诱导凋亡,使G1期细胞增多(61.0±2.08)%,S期细胞减少(21.2±0.88)%,出现DNAladder;同时下调A549细胞人肺癌相关抗原及rasP21蛋白表达,上调Fas基因mRNA及蛋白表达。结论:DFMO通过Fas/FasL通路诱导肺癌A549细胞的凋亡,并可能与人肺癌相关抗原及rasP21蛋白表达调控有关。     

凋亡相关基因Fas、FasL和bcl-2在膀胱移行细胞癌中的表达

目的　研究凋亡相关基因Fas、FasL和bcl-2 ,在膀胱移行细胞癌 (TCC )中的表达情况 ,并探讨其临床意义。方法　采用S -P免疫组化方法 ,检测 67例TCC及 12例正常膀胱组织中Fas、FasL和bcl -2蛋白的表达。结果　在TCC和正常膀胱组织中FasL蛋白阳性率分别为 5 6.7%和 0 ,两者有非常显著性差异 (P <0 .0 1) ,而Fas和bcl -2蛋白在TCC和正常膀胱组织中的表达无显著性差异 (P >0 .0 5 )。Fas和bcl -2蛋白表达阳性率在TCC不同病理分级、分期有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。FasL蛋白表达随着TCC分级、分期的增加 ,呈降低趋势 ,但无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　Fas/FasL系统异常可能是TCC发生发展过程中免疫逃逸的重要因素 ;在TCC发生以及在低分化和浸润性TCC中 ,Fas/FasL基因介导的细胞凋亡可能被bcl -2基因的过度表达所抑制 ;Fas和bcl -2基因表达可作为监测TCC恶性程度的重要指标     

鳞癌与基底细胞癌的Fas/FasL表达及其与细胞凋亡的关系

目的：探讨鳞癌与基底细胞癌的Fas/FasL表达及其与细胞凋亡的关系。方法： 用免疫组化及TUNEL方法检测45例鳞癌与基底细胞癌的Fas/FasL表达及其与细胞凋亡的关系。结果： 鳞癌Fas/FasL表达高于基底细胞癌;Fas/FasL阳性细胞凋亡率高于阴性细胞。　结论： Fas/FasL系统与细胞凋亡密切相关,并在肿瘤侵袭中可能起重要作用。     

非小细胞肺癌细胞凋亡与凋亡相关基因Fas、bcl-2表达的关系

细胞凋亡是恶性肿瘤普遍的自发现象 ,实验证明凋亡受到许多相关基因严密的正负调控。Ｆａｓ和ｂｃｌ-2是作用相反的凋亡相关基因 ,已有研究表明两者间的动态平衡对细胞凋亡起重要的调节作用[1] 。我们采用免疫组织化学方法和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记 (ＴＵＮＥＬ)技术测定非小细胞肺癌及其相应的癌旁组织中Ｆａｓ、ｂｃｌ- 2蛋白的表达和原位凋亡细胞的检测 ,以探讨它们在非小细胞肺癌中的作用 ,有助于为临床抗癌治疗提供新思路。1　材料与方法1 1　材料　 4 5例标本均为本院 1996～ 1998年间外科手术切除标本 ,经病理检查…     

凋亡抑制基因Survivin在非小细胞肺癌中的表达及其与Caspase-3、Bcl一2蛋白表达的关系

目的:探讨Survivin基因的表达在肺癌发生、发展中的作用及其与Caspase-3、Bcl-2蛋白表达的相互关系。方法:对13例正常支气管粘膜上皮、11列不典型增生、54例肺癌及12例淋巴结转移癌石蜡切片组织,应用原位分子杂交法检测Survivin mRNA的表达;用免疫组化S-P法检测Caspase-3、Bcl-2蛋白的表达。结果:肺癌、淋巴结转移癌中Survivin mRNA阳性率分别为74.07%及91.67%,显著高于正常支气管粘膜上皮及不典型增生中的阳性率7.69%及27.27%(P均<0.01);低分化、中分化肺癌中阳性率96%、75%较高分化30.76%显著升高(P<0.01,P<0.05)。TNM分期Ⅲ期病例中,Survivin mRNA表达阳性率92.31%高于Ⅰ Ⅱ期病例的57.14%(P<0.01)。Survivin mRNA表达与Caspase-3蛋白表达呈负相关(P<0.01),与Bcl-2蛋白表达呈正相关(P<0.01)。结论:Survivin基因在非小细胞肺癌中表达上调,提示其通过抑制细胞凋亡,在肺癌癌变发生、发展中起重要作用,可能成为肺癌基因治疗的新靶点;Survivin基因通过与激活的Caspase-3结合,抑制其活性,从而阻止细胞凋亡,其阳性表达亦预示肿瘤有较高的侵袭性和不良预后;Survivin基因与凋亡抑制基因bcl-2的共同表达可能在肺癌中起协同作用。     

凋亡抑制基因Survivin在非小细胞肺癌中的表达及其与Caspase-3、Bcl-2蛋白表达的关系

目的:探讨Survivin基因的表达在肺癌发生、发展中的作用及其与Caspase-3、Bcl-2蛋白表达的相互关系.方法:对13例正常支气管粘膜上皮、11例不典型增生、54例肺癌及12例淋巴结转移癌石蜡切片组织,应用原位分子杂交法检测Survivin mRNA的表达;用免疫组化S-P法检测Caspase-3、Bcl-2蛋白的表达.结果:肺癌、淋巴结转移癌中Survivin mRNA阳性率分别为74.07%及91.67%,显著高于正常支气管粘膜上皮及不典型增生中的阳性率7.69%及27.27%(P均＜0.01);低分化、中分化肺癌中阳性率96%、75%较高分化30.76%显著升高(P＜0.01,P＜0.05).TNM分期Ⅲ期病例中,SurviViB mRNA表达阳性率92.31%高于I+Ⅱ期病例的57.14%(P＜0.01).Survivin mRNA表达与Caspase-3蛋白表达呈负相关(P＜0.01),与Bcl-2蛋白表达呈正相关(P＜0.01).结论:Survivin基因在非小细胞肺癌中表达上调,提示其通过抑制细胞凋亡,在肺癌癌变发生、发展中起重要作用,可能成为肺癌基因治疗的新靶点;Survivin基因通过与激活的Caspase-3结合,抑制其活性,从而阻止细胞凋亡,其阳性表达亦预示肿瘤有较高的侵袭性和不良预后;Survivin基因与凋亡抑制基因bcl-2的共同表达可能在肺癌中起协同作用.     

Fas,Bax表达及细胞凋亡与胃癌浸润及转移的关系

目的 探讨Ｆａｓ、Ｂａｘ蛋白在胃腺癌中的表达及其与细胞凋亡的关系。方法 采用免疫组织化学ＡＢＣ法及细胞凋亡ＴＵＮＥＬ法检测４８例胃腺癌中Ｆａｘ、Ｂａｘ蛋白的表达及细胞凋亡。结果 Ｆａｓ、Ｂａｘ蛋白在高、中分化胃癌中的阳性表达率显著高于低分化胃癌（Ｐ〈０．０５）;Ｆａｓ、Ｂａｘ蛋白在有淋巴结转移癌中的阳性表达率均为２３．８％,显著低于无淋巴结转移癌的５５．８％和５１．９％（Ｐ〈０．０５）,Ｆａｓ蛋白     

人类非小细胞肺癌Fas配体基因转录水平的表达及其临床意义

在肿瘤免疫中人们过去认为ＦａｓＬ Ｆａｓ途径是细胞毒Ｔ淋巴细胞 (ｃｙｔｏｔｏｘｉｃＴｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ,ＣＴＬ)杀伤肿瘤的重要机制之一 ,但最近研究发现人类的某些肿瘤细胞表达Ｆａｓ配体 (ＦａｓＬ)。我们曾报道国人非小细胞肺癌 (ｎｏｎ ｓｍａｌｌｃｅｌｌｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ,ＮＳＣＬＣ)细胞表面ＦａｓＬ蛋白特异性表达[1] ,为进一步研究 ,我们用ＲＴ ＰＣＲ方法检测了 32例手术切除的ＮＳＣＬＣ样本中ＦａｓＬ基因在转录水平的表达情况 ,现报告如下。1　材料与方法1.1　材料　标本取自我科及重庆医科大学第一附属医院胸外科…     

肺癌中凋亡抑制基因bcl—2蛋白产物表达的研究

应用即用型ＳＡＢＣ免疫组化方法观察凋亡抑制基因ｂｃｌ－２蛋白在６３例肺癌组织中的表达情况以探讨该基因与肺癌发生、发展的关系。结果表明，ｂｃｌ－２蛋白在肺癌有较高表达（５０．８％）；在鳞癌和腺癌中ｂｃｌ－２蛋白和阳性率随着分化程度的降低而下降，高分化与低分化鳞癌、腺癌间ｂｃｌ－２阳性率的差异有显著性（Ｐ〈０．０５）；ｂｃｌ－２阳性率的差异有显著性（Ｐ〈０．０５）；ｂｃｌ－２蛋白表达与肿瘤临床病理分期     

bcl-2基因表达与肺癌细胞凋亡的关系

目的：观察体外培养肺瘤细胞bcl-2表达与机体免疫攻击致癌细胞凋亡的关系。方法：把bcl-2表达不同的肺瘤细胞株与从肺瘤组织中分离出来的肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL）共同培养,通过JAM试验观察肺瘤细胞凋亡的情况。结果：体外JAM试验中,随着TIL浓度增加,bcl-2阴性的肺瘤细胞凋亡也增加,但bcl-2阳性者则无变化。结论：bcl-2表达阳性的肺瘤细胞具有抗凋亡特性,能耐受肿瘤浸润淋巴细胞的免疫攻击。     

大肠癌组织中凋亡相关蛋白Fas、FasL和bcl-2的表达及其意义

目的：探讨凋亡相关蛋白Fas、FasL和bcl-2在大肠癌组织中的表达及其意义。方法：应用S－P免疫组化法检测80例大肠癌组织及20例正常大肠黏膜组织中Fas、FasL和bcl-2蛋白的表达情况。结果：大肠癌组织Fas蛋白阳性表达率显著低于正常大肠黏膜组织，淋巴结转移和肝转移者Fas蛋白阳性表达率低于无转移者，Ⅱ、Ⅲ级者低于I级者（P＜0．05），其表达与临床分期、组织学类型及病理分级相关（P＜0．05）。大肠癌组织中FasL、bcl-2蛋白阳性表达率均显著高于正常大肠黏膜组织，其表达与临床分期、组织学类型及病理分级均无关（P＞0．05）。大肠癌组织中Fas、FasL蛋白表达与bcl-2蛋白表达无关（P＞0．05）。结论:细胞凋亡是多因素共同调控的结果，在大肠癌发生、发展中，Fas/FasL系统与bcl-2可能起协调抑制肿瘤细胞凋亡的作用。     

细胞凋亡和相关基因Fas在睾丸肿瘤中表达的研究

目的　探讨细胞凋亡和相关基因Fas蛋白在睾丸肿瘤发生发展中的作用。方法　应用DNA末端标记、流式细胞术和细胞免疫荧光技术检测 5 6例睾丸肿瘤细胞凋亡状态及凋亡相关基因Fas蛋白的表达。结果　凋亡指数与肿瘤病理类型和淋巴结转移密切相关 (P <0 .0 5 )。Fas蛋白的表达与肿瘤病理类型有关 ,但无显著性差异 (P >0 .0 5 )。凋亡指数与Fas蛋白表达呈正相关 (P <0 .0 5 )。结论　细胞凋亡及相关基因Fas蛋白异常表达在睾丸肿瘤发生中有重要作用     

Fas siRNA真核表达载体构建及其抑制Jurkat细胞凋亡的作用

 目的 构建Fas（CD95）特异性siRNA真核表达载体psilencircle-FasSi,转染Fas-FasL凋亡敏感细胞株Jurkat,研究其抗凋亡作用。方法 通过聚合酶链式反应（PCR）制备siRNA表达框架(SECs),转染Jurkat细胞,实时荧光定量PCR检测Fas mRNA抑制率,筛选出高效抑制Fas mRNA表达的siRNA;把筛选出的siRNA序列插入siRNA真核表达质粒psilencircle,构建psilencircle-FasSi;psilecircle FasSi转染Jurkat细胞,实时荧光定量PCR检测Fas mRNA、Western blot检测Fas蛋白;anti-Fas mAb刺激Jurkat细胞凋亡,流式细胞术检测Jurkat细胞凋亡率。结果 酶切、测序证明成功构建了psilecircle-FasSi,实时荧光定量PCR及Western blot表明psilencircle-FasSi可抑制Fas mRNA和蛋白表达,流式细胞术检测证实psilencircle-FasSi可抑制Jurkat凋亡率。结论 我们成功构建了Fas特异性siRNA真核表达载体psilencircle-FasSi,它不仅可以下调Jurkat细胞的Fas表达而且可以显著抑制Fas-FasL途径诱导的凋亡。