用加校正因子的主成分自身对照法测定苯扎贝特中杂质氯苯酪胺的含量

目的：建立加校正因子的主成分自身对照法测定苯扎贝特中杂质氯苯酪胺的含量。方法：通过方法学验证试验，证明所采用的高效液相色谱法外标法测定苯扎贝特中杂质氯苯酪胺的含量方法可行；再利用外标法，分别测定主成分苯扎贝特和杂质氯苯酪胺的保留时间，计算氯苯酪胺相对于苯扎贝特的相对保留时间，分别测定主成分苯扎贝特和杂质氯苯酪胺的线性方程，以斜率计算杂质氯苯酪胺相对于主成分苯扎贝特的校正因子；最终利用相对保留时间确定杂质氯苯酪胺的位置，用校正因子测定杂质氯苯酪胺的含量。结果：测得杂质氯苯酪胺相对于主成分苯扎贝特的相对保留时间为0．90，校正因子为1．2494。结论：用加校正因子的主成分自身对照法测定苯扎贝特中杂质氯苯酪胺的含量，方法可行。     

关于HPLC法测定药品中杂质含量的讨论

2000版《中国药典》二部附录VD高效液相色谱法中给出了利用HPLC法测定杂质含量的五种方法:(1)内标法加校正因子测定供试品中某个杂质的含量;(2)外标法测定供试品中某个杂质的含量;(3)加校正因子的主成分自身对照法;(4)不加校正因子的主成分自身对照法;(5)面积归一化法。其中     

加校正因子的主成分自身对照法测定青霉素V钾片有关物质

目的：建立加校正因子的主成分自身对照法测定青霉素V钾片有关物质的含量。方法：采用XBridge Shield RP-18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），以磷酸盐缓冲液（pH3.5）-甲醇-水为流动相，梯度洗脱；检测波长268nm；测定特定杂质4-羟基苯氧甲基青霉素相对于青霉素V的校正因子，并进行定量分析。结果：4-羟基苯氧甲基青霉素杂质的相对保留时间为0.42，校正因子为1.41；加校正因子的主成分自身对照法与外标法测定的结果无显著性差异。结论：该方法简便快速，可准确测定青霉素V钾片中特定杂质的含量。     

HPLC加校正因子的主成分自身对照法测定呋塞米片中有关物质的含量

目的:建立测定呋塞米片中杂质B(4-氯-5-氨磺酰邻氨苯甲酸)、最大单个杂质和总杂质的方法。方法:采用高效液相色谱(HPLC)-加校正因子的主成分自身对照法进行测定。色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C₁₈(250 mm×4.6 mm, 5μm),以水-四氢呋喃-冰醋酸(70∶30∶1)为流动相,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为272 nm,进样体积为20μL,柱温为30℃。绘制呋塞米和杂质B的线性方程,以斜率计算杂质B相对于呋塞米的校正因子,用相对保留时间确定杂质B的位置,测定6家制药企业共15批呋塞米片中杂质B、最大单个杂质和总杂质的含量,并与杂质对照品外标法测得的结果进行比较。结果:杂质B的相对保留时间为0.31,检测质量浓度线性范围为0.041～12.19μg·mL^-1,校正因子为1.06,检测限为0.40 ng,定量限为0.81 ng。比较采用校正因子的主成分自身对照法和外标法测得的结果,差值为±0.01%,表明2种方法无显著性差异。结论:经方法学验证,本法简便快速,可准确测定呋塞米片中有关...     

加校正因子的主成分自身对照法测定阿托伐他汀钙中杂质D的含量

目的 建立加校正因子的主成分自身对照法测定阿托伐他汀钙中杂质D的含量。方法 采用hplc,色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C₈(4.6 mm×250 mm,5 μm) 和Agilent Eclipse XDB-C₈ (4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相A为乙腈-四氢呋喃-柠檬酸盐溶液(3.9 g·L^-1一水合柠檬酸溶液用氨水调节pH值至5.0)(21∶12∶67);流动相B为乙腈-四氢呋喃-柠檬酸盐溶液(3.9 g·L^-1一水合柠檬酸溶液用氨水调节pH值至5.0)(61∶12∶27),梯度洗脱;检测波长：244 nm;流速为1.5 mL·min^-1,柱温35 ℃;进样量：20 μL。通过测定阿托伐他汀钙和杂质D的线性方程,以斜率计算杂质D相对于阿托伐他汀钙的校正因子。结果 测得杂质D相对于阿托伐他汀钙的保留时间为1.96,相对校正因子为0.94,采用外标法和加校正因子的主成分自身对照法分别测定3批阿托伐他汀钙中杂质 D的含量,2组检测结果无差异。结论 用加校正因子的主成分自身对照法测定阿托伐他汀钙中杂质D的含量,方法可行。     

色谱分析中面积归一化法测定有关物质的弊与利

测定药物中的有关物质,主要有外标法、加校正因子的主成分自身对照法、不加校正因子的主成分自身对照法和面积归一化法等,尽管采用杂质对照品外标的方法越来越普遍,加校正因子的主成分自身对照是我们的倡导,但目前使用最多的还是不加校正因子的主成分自身对照法和面积归一化法.     

布洛芬及其制剂中有关物质的分析

目的:建立高效液相色谱法测定布洛芬及其制剂中的有关物质。方法:采用Kromasil C18色谱柱,以甲醇-乙腈-水-甲酸(50∶9∶41∶0.02)为流动相,流速1.0m·Lmin-1,检测波长为214nm。结果:在选定的条件下,布洛芬与其中的10余种杂质分离良好;布洛芬和杂质4-异丁基苯甲酸、4-异丁基苯乙酮的检测限分别为0.16μg·mL-1、0.093μg·mL-1、0.18μg·mL-1;布洛芬在4～64μg·mL-1,4-异丁基苯甲酸和4-异丁基苯乙酮在0.4～6.4μg·mL-1范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系;以布洛芬为参比,测得以上2种杂质的校正因子分别为1.68和0.77。结论:本法简便、专属、准确,可用于布洛芬及其制剂中有关物质的检查。     

加校正因子的主成分自身对照法测定培哚普利片中有关物质的含量

目的 采用加校正因子的主成分自身对照法测定培哚普利片中有关物质的含量。方法 采用GL Inertsil C8-3色谱柱（4.0 mm×150 mm,5 μm）,以流动相A（用50%高氯酸调节pH至2.5的水溶液）和流动相B（0.03%的高氯酸乙腈溶液）进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为215 nm,进样量为20 μL,柱温60℃,测定培哚普利叔丁胺和杂质B、E、F的线性方程,以斜率计算杂质相对于培哚普利叔丁胺的校正因子,用相对保留时间确定各杂质位置。并进行了方法学验证。用相对校正因子计算培哚普利片中杂质B、E和F的含量,并与杂质对照品法测得的结果进行比较。结果 培哚普利杂质B、E和F的相对保留时间分别为0.68,1.14,1.61;校正因子分别为0.77,1.02,1.24;检出限分别为2.24,0.52,1.02 ng;定量限为6.73,1.57,3.06 ng;采用校正因子的主成分自身对照法和外标法测得的结果无显著性差异。结论 该方法简便快速,可准确测定培哚普利片中杂质B、E和F含量。     

加校正因子的主成分自身对照法测定复方奥美拉唑咀嚼片相关物质含量的分析

目的通过加校正因子的主成分加校正因子的主成分自身对照法测定复方奥美拉唑咀嚼片相关物质含量。方法分别配制浓度为0.2 mg/m L的杂质对照液、浓度为1 g/L的奥美加唑对照品储备液、浓度为0.2 mg/L的供试品溶液、浓度为2 mg/L的对照溶液、浓度为0.2 mg/L的供试品溶液、浓度为0.2 mg/L的系统适用性溶液、浓度为2 mg/L的对照溶液和浓度为0.2 mg/L的阴性对照液,然后根据需要取适量溶液注入仪器中进行检测和计算,测定A、B、C、D、E五种杂质的含量。结果校正因子分别为1.45、0.66、1.21、1.39、0.8测得奥美拉唑的杂质含量分别为0.9、3.4、0.8、0.4,其中杂质D的含量均为0。结论通过加校正因子的主成分加校正因子的主成分自身对照法测定复方奥美拉唑咀嚼片相关物质含量简洁快捷而且准确率高。     

HPLC加校正因子的主成分自身对照法测定埃索美拉唑镁的有关物质

目的建立测定埃索美拉唑镁原料药中有关物质含量的HPLC法。方法采用加校正因子的主成分自身对照法,以埃索美拉唑镁为参照物,分别测定其与有关物质A、B、C、D间的校正因子,并用校正因子对埃索美拉唑镁原料药中的有关物质进行定量分析,并与外标法测定的结果相比较,以验证方法的准确性。结果两种方法测定的结果无显著性差异。结论加校正因子的主成分自身对照法能够准确测定埃索美拉唑镁原料药中四种有关物质及其他未知杂质的含量。     

加校正因子的主成分自身对照法测定盐酸普拉克索的有关物质

目的 建立盐酸普拉克索原料药中有关物质的含量测定方法。方法 采用HPLC建立盐酸普拉克索及其杂质A、B、C、E的线性方程,以斜率计算杂质相对于主成分的校正因子,并用该校正因子测定有关物质的含量。通过方法学考察证明此方法的可行性。结果 盐酸普拉克索杂质A、B、C、E的校正因子分别为0.642,0.999,0.796,0.999;相对保留时间为0.703,1.512,1.733,0.522;方法学考察验证该方法符合要求;3批样品中杂质A、B、E均未检出,杂质C的含量分别为0.013%,0.013%,0.012%。结论 加校正因子的主成分自身对照法能够准确测定盐酸普拉克索原料药中有关物质的含量。     

高效液相色谱法测定HFBA原料药有关物质

目的 建立HFBA中有关物质的高效液相色谱测定法.方法 色谱柱为Thermo BDS Hypersil-C18(150 mm ×4.6 mm,5μm)柱;流动相的有机相为乙腈,水相为体积分数0.5％的冰醋酸水溶液,进行梯度洗脱,流速和柱温分别为1.0 mL·min-1和30℃,检测波长和进样量分别为257 nm和20 ...     

HPLC法检查环戊丙酸雌二醇原料药的有关物质

目的:建立环戊丙酸雌二醇原料药中有关物质的检查方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Kromasil C18,流动相为硝酸铵溶液-乙腈(23∶77,V/V),流速为1.5 ml/min,检测波长为280 nm,进样量为50μl。杂质Ⅰ按不加校正因子的主成分自身对照法计算,杂质Ⅱ采用杂质对照品外标法进行定量。结果:杂质Ⅰ与杂质Ⅱ检测质量浓度线性范围分别为0.3².0、0.52.0、0.5⁴.0μg/ml(r均为0.999 9),校正因子分别为0.970、0.368;杂质Ⅰ、杂质Ⅱ与环戊丙酸雌二醇检测限分别为6.3、1.5、2.3 ng,定量限分别为21.0、5.0、7.7 ng。3批样品中均检出杂质Ⅰ、杂质Ⅱ,但未检出雌二醇。结论:建立的方法准确、灵敏度高,可用于检查环戊丙酸雌二醇原料药中的有关物质。     

加校正因子的主成分自身对照测定头孢克肟颗粒的有关物质#br#

目的 采用自建的方法测定头孢克肟颗粒中杂质A~F相对于头孢克肟的校正因子,以确定最佳的定量方式,提高头孢克肟颗粒有关物质测定结果的准确度。方法 采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱,以0.1%四丁基氢氧化铵溶液(用磷酸调pH至6.0)为流动相A,乙腈为流动相B,等度洗脱。柱温40℃,检测波长254nm。分别对各杂质的校正因子进行测定,并将测定结果和主成分自身对照法及外标法进行对比。结果 头孢克肟与相邻杂质及各已知杂质之间的分离均良好,头孢克肟、杂质A~F在0.5μg/mL浓度范围内线性关系均良好(r＞0.996),杂质A~F的校正因子分别为2.7、1.1、1.1、1.0、1.0和1.1。按加校正因子的自身对照法计算,3批样品杂质A分别为0.46%、0.51%和0.50%,杂质B分别为0.07%、0.06%、0.07%、杂质E均为0.09%、0.10%、0.09%,杂质C、杂质D、杂质F均未检出,其他单个最大杂质均小于0.1%,总杂质分别为0.81%,0.67%和0.65%;按外标法计算,3批样品杂质A分别为0.48%、0.54%和0.52%,杂质B分别为0.07%、0.06%和0.07%,杂质E分别为0.09%、0.10%和0.09%,杂质C、D、F均未检出,其他单个最大杂质均小于0.1%,总杂质分别为0.83%、0.70%和0.67%。两种计算方式无明显区别,杂质的定量方式以加校正因子的主成分自身对照法为宜。结论 通过对各已知杂质校正因子的测定,无需持续提供杂质对照品,即可准确测定头孢克肟颗粒的有关物质,本法操作简单,结果准确可靠,可为该抗生素药物其他剂型有关物质的定量方法改进提供参考。     

阿戈美拉汀不纯品中杂质相对校正因子的测定

目的 测定阿戈美拉汀不纯品中杂质相对校正因子.方法 利用多个未知量联立方程法计算阿戈美拉汀杂质的相对校正因子,并对本法进行对比验证.结果 计算出二氢阿戈美拉汀粗品和四氢阿戈美拉汀粗品的相对校正因子,即f2=0.228,f4=0.065,并利用相对校正因子计算供试品中各组分质量分数,确定杂质的定量方法.结论 该方法可用于检测含多个未知校正因子组分的样品,省去阿戈美拉汀样品提纯的繁琐,为杂质定量方法的确定提供参考.     

An innovative approach to the analysis of 3-[4-(2-methylpropyl)phenyl]propanoic acid as an impurity of ibuprofen on a carbon-coated zirconia stationary phase

3-[4-(2-Methylpropyl)phenyl]propanoic acid has been introduced as impurity F to the European Pharmacopoeia in its Supplement 4.2. In contrast to other impurities, which are evaluated by HPLC, the content of impurity F is determined by gas chromatography after previous derivatization. Thus a novel reversed-phase HPLC method was developed to simplify the evaluation of pharmacopoeial impurity F of ibuprofen. Favourable properties of zirconia stationary phases were employed for this purpose. The HPLC separation was achieved on a Zr-CARB column (150 mm × 4.6 mm i.d., 5 μm) using the mobile phase acetonitrile–phosphate buffer (pH 3.5, 25 mM) (38:62, v/v), temperature 80 °C and the flow rate 1.2 ml min⁻¹. The fluorescence detection was employed to enhance the sensitivity of the method. Optimal detection parameters were chosen on the basis of fluorescence spectra of the analytes. The excitation and emission wavelengths were 220 nm and 285 nm, respectively. The analysis was completed within 25 min. The subsequent validation of the method confirmed the applicability of method for the analytical assay of impurity F.     

GC法检测布洛芬注射液中杂质F

目的建立气相色谱法测定布洛芬注射液中的杂质F。方法采用气相色谱法,色谱柱：DB-WAXetr毛细管柱（25 m×0.53 mm×2μm）,载气为氦气,流速5.0 mL·min-1,检测器为火焰离子化检测器,检测器温度为250℃,进样温度为200℃。结果在选定的条件下布洛芬和杂质完全分离,杂质F的检测限为2.5 mg·L-1,检测方法的精密度、准确度、灵敏度均达到了预定的分析要求。结论建立的方法准确、灵敏,适用于检测布洛芬注射液中的杂质F。     

HPLC标准曲线法测定杂质校正因子的测量不确定度评定

摘要：目的 以对HPLC标准曲线法测定利奈唑胺杂质I校正因子的测量不确定度评定为例,找出对测量不确定度影响大的因素,规范实验操作,提高校正因子测定准确性。方法 分别建立利奈唑胺和杂质I的拟合直线,计算两条直线的斜率之比作为杂质I的校正因子。然后通过建立测量模型,分析不确定度来源,量化各不确定度分量,最后合成得到利奈唑胺杂质I校正因子的不确定度。结果 利奈唑胺杂质I的校正因子均值为0.90,其测量不确定度为0.08,可表示为f=0.90±0.08,其中k=2。由主成分、杂质I斜率和校正因子测量重复性所引入的不确定度分量对于最终不确定度贡献率分别为43.4%,49.0%和7.6%。结论 影响HPLC标准曲线法测定利奈唑胺杂质I校正因子准确性最主要的因素是所用对照品的含量,另外实验过程中尽量减少容量瓶使用的个数和移液次数也可以降低溶液浓度引入的不确定度。     

布洛芬及其正辛酯对映体的手性高效液相色谱法拆分与应用

目的：建立用于测定有机相中脂肪酶促进布洛芬与正辛醇立体选择性酯化反应转化率及对映体过量值的手性高效液相色谱方法。方法：通过变更流动相组成与配比。找到在Chiralcel OD手性柱上拆分外消旋布洛芬及其正辛酯对映体的最佳色谱条件，建立各自对映体峰面积与浓度之间的校正关系。结果：以100％正己烷作流动相，布洛芬正辛酯的一对对映体可以分开，布洛芬则滞留在柱子上；当在正己烷中添加1％冰醋酸后，布洛芬对映体可以分开，但此时酯的对映体分不开。峰面积－浓度校正曲线表明，布洛芬及其正辛酯各对映体响应因子值相等。结论：可以用峰面积代替浓度，按有关公式算出布洛芬立体选择性酯化反应的转化率及对映体过量值。鉴于冰醋酸对柱子有害等原因，实际样品分析中宜跟踪酯。     

HPLC法测定水合羟基化头孢克洛杂质研究

摘要：目的 建立HPLC法测定水合羟基化头孢克洛杂质方法。方法 采用C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱;流动相A为0.78%磷酸二氢钠溶液(取磷酸二氢钠7.8 g,加水溶解并稀释至1000 mL,用磷酸调pH至4.0),流动相B为0.78%磷酸二氢钠溶液(pH 4.0)-乙腈(55:45);流速1.2 mL/min;检测波长220 nm;柱温25℃。结果 水合羟基化头孢克洛杂质在9.108×10-4~3.4×10-2 mg/mL 范围内线性关系良好(r=1.0000),平均回收率为104.03%,RSD为0.82%(n=9),定量限为17.721 ng。在回收率试验中加入的水合羟基化头孢克洛杂质,采用外标法和加校正因子的主成分自身对照法的结果一致,该杂质的相对保留时间约为1.11,校正因子为1.02。结论 该方法操作简便、准确度高、重现性好,可以采用不加校正因子的主成分自身对照法对水合羟基化头孢克洛杂质进行检测。