落新妇苷通过下调caspase-3、-8、-9蛋白的表达来减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤

目的探讨落新妇苷对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法 SD大鼠,分为Sham组(假手术组)、HIRI组(缺血再灌注组)、落新妇苷(低剂量组、中剂量组、高剂量组),建立大鼠肝脏缺血再灌注模型,分别于再灌注4 h、8 h、16 h后取血液及肝脏标本。检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST);光镜下观察肝细胞显微结构变化;免疫印迹试验(Western Blot)分析肝组织中IL-1、caspase-3、-8、-9的表达;流式细胞仪检测肝细胞凋亡率。应用SPSS l5.0统计软件进行分析,计量资料以均数±标准差(±s)表示,对各组大鼠血清ALT、AST,肝组织中IL-1、caspase-3、-8、-9蛋白的表达及细胞凋亡情况进行比较采用单因素方差分析和t检验,以P0.05、P0.01为差异有统计学意义。结果 HIRI组ALT和AST水平升高,而药物组明显降低。光镜结果显示药物组肝细胞损伤明显减轻。Western Blot结果显示,高剂量组IL-1、caspase-3、-8、-9蛋白的表达较HIRI组明显减轻。高剂量组的细胞凋亡率也较HIRI组降低。结论落新妇苷预处理可减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤,其作用机制可能与其抑制caspase-3、-8、-9的表达,从而抑制细胞凋亡有关。     

白术多糖预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤后肝细胞线粒体结构的影响

目的 探讨白术多糖预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤后肝细胞线粒体结构的影响.方法 将54只成年雄性SD大鼠随机分成3组:假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(HIRI组)、白术多糖预处理缺血再灌注组(AMP组),分别于缺血60 min再灌注1h,6h,24h后取材,透射电子显微镜下观察肝细胞的超微结构变化,定量分析线粒体...     

黄芪甲苷对大鼠肝脏缺血再灌注损伤和Caspase途径的影响

目的探讨黄芪甲苷对大鼠肝脏缺血再灌注损伤（HIRI）的保护作用以及相关机制。 方法将75只纯系SD大鼠随机分为Sham组（假手术组）、HIRI组（缺血再灌注组）以及黄芪甲苷低剂量组、中剂量组、高剂量组,建立大鼠HIRI模型,于再灌注4、8、16 h后取下腔静脉血及肝左外叶组织。全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平;光学显微镜下观察肝细胞显微结构变化;Western Blotting及免疫组化染色分析肝组织中Caspase-3、8、9的表达;流式细胞仪检测肝细胞凋亡率。 结果HIRI组的ALT和AST水平升高,而黄芪甲苷组明显降低,且肝细胞损伤明显减轻。高剂量组Caspase-3、8、9蛋白的表达水平以及细胞凋亡率明显低于HIRI组。 结论黄芪甲苷预处理可减轻大鼠HIRI,其作用机制可能与其抑制Caspase-3、8、9的表达,从而抑制细胞凋亡有关。     

依达拉奉对大鼠肝脏缺血再灌注时线粒体膜电位的影响

目的 探讨依达拉奉对大鼠肝脏缺血再灌注时线粒体膜电位的影响.方法 成年健康雄性SD大鼠30只,体重250 ～ 300 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=10):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)及依达拉奉组(E组),I/R组和E组采用肝脏缺血60 min进行再灌注的方法制备70％肝脏缺血再灌注损伤模型.E组于再灌注前15 min静脉注射依达拉奉3 mg/kg,I/R组给予等容量生理盐水.于再灌注2h时采集静脉血样,测定血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的活性;然后处死大鼠,取肝组织,测定肝细胞凋亡情况,计算肝细胞凋亡指数;制备肝组织单细胞悬液,测定线粒体膜电位;光镜下观察肝组织病理学结果.结果 与S组比较,I/R组及E组血清ALT活性、AST活性和肝细胞凋亡指数升高,线粒体膜电位降低(P＜0.05或0.01);与I/R组比较,E组血清ALT活性、AST活性和肝细胞凋亡指数降低,线粒体膜电位升高(P＜0.05).E组肝组织病理学损伤轻于I/R组.结论 依达拉奉可减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤,其机制与升高线粒体膜电位,抑制肝细胞凋亡有关.     

姜黄素对大鼠肝缺血再灌注早期肝组织一氧化氮和内皮素-1水平的影响

目的探讨姜黄素对大鼠肝脏缺血再灌注早期损伤(再灌注1 h)的微循环影响。方法将大鼠随机分为假手术组(A组)、对照组(B组)和实验组(C组)。通过检测再灌注早期1 h血清转氨酶的水平、肝组织中NO和ET-1水平来评价姜黄素对大鼠肝脏缺血再灌注早期损伤(再灌注1h)的微循环影响。结果姜黄素可降低大鼠肝脏缺血再灌注早期损伤血清转氨酶的水平,减少肝组织中NO水平和抑制肝组织中ET-1生成。且肝组织中NO生成与血清ALT存在正相关,肝组织ET-1水平与血清ALT存在正相关。结论姜黄素可通过减少肝组织中NO生成、降低肝组织中ET-1表达来改善肝缺血再灌注早期损伤中微循环的紊乱,从而减少对肝缺血再灌注肝实质细胞的损伤。     

百里醌预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用及机制

目的探讨百里醌(TQ)对大鼠肝脏缺血再灌注损伤(IRI)的保护作用及分子机制。方法建立大鼠肝脏IRI模型,肝脏缺血再灌注前,实验大鼠进行百里醌给药预处理。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平,检测肝脏组织谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)等酶活性;蛋白印迹法(Western blotting)检测肝脏组织凋亡相关蛋白。实验设3组:假手术组(Sham组,n=10)、缺血再灌注组(IRI组,n=10)、百里醌预处理+肝缺血再灌注组(TQ+IRI组,各亚组n=10)。结果与Sham组比较,IRI组大鼠血清ALT、AST水平显著增高,TQ+IRI组ALT、AST较IRI组明显降低(P0.05)。IRI组与Sham组比较,大鼠肝脏组织中GPX、GSH、SOD含量均明显下降(P0.05),而MDA含量显著增高(P0.05);TQ+IRI组与IRI组比较,GPX、GSH、SOD含量均显著上升(P0.05),MDA含量下降(P0.05)。百里醌预处理能下调肝脏IRI的Bax、裂解的胱天蛋白酶(Cleaved-caspase)-3、Cleaved-caspase-9表达,阻断肝细胞凋亡。结论百里醌可能通过调控肝细胞氧化应激诱导的细胞凋亡进而在肝脏IRI中发挥肝脏保护作用。     

落新妇苷对大鼠肝脏缺血再灌注损伤及自噬的影响

目的探讨落新妇苷对大鼠肝脏缺血再灌注损伤（HIRI）的保护作用及自噬的影响。 方法将54只SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（HIRI组）以及落新妇苷组（40 mg·kg^-1·d^-1,连续7 d）,每组18只。建立大鼠HIRI模型,于再灌注4、8、16 h后取下腔静脉血及肝左外叶组织。全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平;光学显微镜下观察肝细胞显微结构变化;Western blotting分析肝组织中自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的表达;电镜下观察肝脏组织内自噬小体数量情况。 结果同检测时间点比较,Sham组和落新妇苷组的血清ALT和AST水平均低于HIRI组（P<0.05）,且肝细胞肿胀、炎性细胞浸润、汇管区结构损伤明显较轻。落新妇苷组LC3-Ⅱ/ LC3-Ⅰ灰度值比值及Beclin-1蛋白灰度值在术后4、8、16 h明显低于HIRI组（P<0.05）。落新妇苷组肝组织的自噬小体数量较HIRI组有所减少（3.68±0.42 vs 7.12±0.60,t=36.382,P<0.01）。 结论落新妇苷预处理可减轻大鼠HIRI,其作用机制可能与其抑制自噬有关。     

落新妇苷减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤的机制研究

目的 探讨落新妇苷对大鼠肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)的保护作用.方法 SD大鼠,分为Sham组(假手术组)、HIRI组(缺血再灌注组)、落新妇苷组(低剂量组、中剂量组、高剂量组),建立大鼠肝脏缺血再灌注模型,分别于再灌注4h、8h、16h后取血液及肝脏标本.检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST);光镜下观察肝细胞显微结构变化;Western blot分析肝组织中HMGB1、TLR4、NF-kB、TNF-α的表达.结果 Sham组4h、8h、16 h的血清ALT为(58.11 ±4.81) U/L、(57.12±5.33) U/L、(57.63±4.54) U/L,HIRI组4h、8h、16 h的血清ALT为与(540.38±21.41) U/L、(831.21±20.11) U/L、(191.95±15.35) U/L,HIRI组与Sham组相比,血清ALT在4h、8h、16h均显著升高(P＜0.01).与HIRI组相比,不同剂量组的血清ALT水平在4h、8h、16h均显著降低,其中高剂量组4h、8h、16 h的ALT为(110.12±9.14) U/L、(168.56±11.52) U/L、(81.12±6.45) U/L,降低最明显(P＜0.01);Sham组4h、8h、16 h的血清AST为(167.16±11.55) U/L、(161.55±10.85) U/L、(168.41±11.26) U/L,HIRI组4h、8h、16h的血清AST为(978.83±19.82) U/L、(1514.36±25.22) U/L、(411.25±31.63) U/L,HIRI组与Sham组相比,血清AST在4h、8h、16 h均显著升高(P＜0.01),与HIRI组相比,不同剂量组的血清ALT水平在4h、8h、16 h均显著降低,其中高剂量组4h、8h、16 h的血清AST为(223.75±10.53) U/L、(412.14±23.59) U/L、(205.25±15.48) U/L,血清AST降低最明显(P＜0.01).光镜结果示药物组肝细胞损伤明显减轻.Western blot结果示:高剂量组HMGB1、TLR4蛋白的表达在4h、8h、16 h均较HIRI组显著下降(P＜0.05).高剂量组NF-kB、TNF-α蛋白的表达在术后8h、16 h较HIRI组显著下降(P＜0.05),但在术后4h与HIRI组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 落新妇苷预处理可减轻大鼠HIRI,其作用机制可能与下调HMGB1/TLR4/NF-kB/TNF-d轴,进而抑制炎症有关.     

川芎嗪对大鼠肝脏缺血-再灌注损伤保护作用的机理研究

目的　研究川芎嗪注射液对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法　96 只SD大鼠被随机均分为假手术组、肝脏缺血再灌注组(I/R组)和肝脏缺血+川芎嗪再灌注组(简称治疗组)3 组,分别于术前及术后30 min、6 h及24 h检测血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及乳酸脱氢酶(LDH),观察每组大鼠1周存活情况及肝脏病理组织学变化,并行肝细胞凋亡指数检测。结果　治疗组术后1 周大鼠存活情况好于I/R组(P<0.05); 治疗组及I/R组血浆ALT、AST及LDH均明显高于假手术组(P<0.05),但治疗组低于I/R组(P<0.05)。光镜下见,缺血再灌注后肝血窦和中央静脉明显瘀血,肝细胞坏死I/R组重于治疗组。肝细胞凋亡指数I/R组高于治疗组(P<0.05)。结论　川芎嗪对大鼠肝脏缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。     

HHI-I对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响

目的:研究活血化瘀注射液I号(HHI-I)对大鼠肝脏缺血再灌注(IR)损伤的影响,并与缺血预处理(IP)比较作用的效果。方法:清洁级健康雄性SD大鼠80只,随机分为4组(Sham组,IR组,IP组,HHI-I组),测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)的水平;取左肝测组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量。结果:IR组、IP组、HHI-I组的ALT、AST、LDH活性均明显高于Sham组(P<0·01),再灌注后SOD值均下降,各组各时间点与Sham组比较均具有统计学差异(P<0·05)。再灌注后MDA值均升高,缺血再灌注后6h升至最高点(P<0·01),且各时间点预处理组均低于IR组(P<0·05),HHI-I组MDA(3h、6h)明显低于IP组(P<0·05)。结论:大鼠肝脏缺血再灌注后造成了明显的肝脏损伤,IP与HHI-I预处理均可改善IR对肝脏造成的损伤,且后者效果优于前者。     

白术多糖对缺血再灌注损伤大鼠肝脏的保护作用

目的：探讨白术多糖对大鼠肝脏缺血再灌注（I/R）损伤的保护作用。
方法：成年雄性SD大鼠随机分成3组：假手术组,I/R组,白术多糖预处理缺血再灌注组（PC组）,分别于成模后1,6,24 h 3个时段分别检测3组大鼠血清谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）水平;检测肝组织中ICAM-1 mRNA含量及IL-1的表达。
结果：PC组及I/R组ALT,AST水平以及ICAM-1 mRNA含量和IL-1表达均高于假手术组（P＜0.05）,但PC组上述4个指标均较I/R组显著降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。
结论：白术多糖可能通过降低ICAM-1的含量而减少炎症因子IL-1的生成,从而对肝脏I/R损伤起保护作用。     

Kallistatin对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护及机制研究

目的:探讨Kallistatin对大鼠肝缺血再灌注后肝损伤的保护作用及机制。方法:建立大鼠肝脏缺血再灌注模型,随机将Wistar大鼠分成假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、空壳腺病毒组(O组)和Kallistatin组(K组)。测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平评价肝功能。HE染色观察肝组织病理学改变。TUNEL法观察肝细胞凋亡情况。Westen-blot法检测肝组织中Caspase-3、Bcl-2、Bax的表达。结果:与S组比较,I/R组AST、ALT水平明显升高(P<0.05),病理损伤严重,Cas-pase-3和Bax表达也相应增加(P<0.05),而Bcl-2表达减少(P<0.05)。与I/R组比较,K组各项指标均明显改善(均为P<0.05)。O组与I/R组间无明显差别(P>0.05)。结论:Kallistatin对大鼠肝脏缺血再灌注后具有明显的保护作用,其机制可能通过促进Bcl-2表达、抑制Bax表达实现。     

S-腺苷蛋氨酸对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的：观察S-腺苷蛋氨酸（思美泰）对SD大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用。方法：将72只SD大鼠随机均分为3组：锻手术组、肝缺血再灌注（IR组）、肝缺血再灌注加S-腺苷蛋氨酸干预组（SAM组）,每组24只。假手术组暴露肝门并游离十二指肠韧带,20min后关腹。IR组和SAM组均以肝脏缺皿20min后再灌注的方式造模。SAM组于术后1h腹腔注射思美泰100mg·kg。·d^-1,假手术组和IR组予以等体积生理盐水。各组分别于术后第1、4、7、10天各处死6只大鼠,测定其血清ALT、AST、总胆红素（TB）含量,同B寸取肝左叶部分组织进行肝脏病理组织学观察。结果：SAM组各个时相点血清ALT、AST、TB水平均明显低于IR组,差异有统计学意义（P〈0．01）,SAM组肝组织病理学损害明显轻于IR组（P〈0．01）。结论：S-腺苷蛋氨酸能够明显刚氐转氨酶、TB,减轻肝病理损伤,保护肝功能。     

雌激素对大鼠肝缺血再灌注损伤中SOD和MDA及细胞凋亡的影响

目的：探讨雌激素对大鼠切除肝缺血再灌注损伤的肝脏超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及细胞凋亡的影响。方法：制作肝切除缺血再灌注损伤动物模型,雄性SD大鼠随机分为3组,即假手术组（Sham组）,肝切除缺血再灌注组（I/R组）和肝切除缺血再灌注＋雌激素组（I/R＋E2组）。分别在缺血再灌注后1、3、6 h于光学显微镜下观察肝组织病理学改变,检测血清ALT的水平、肝组织MDA的含量及SOD的活性,并应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：I/R＋E2组在各时相点血清ALT、肝组织MDA和SOD及肝细胞凋亡率的变化幅度明显低于I/R组。在光学显微镜下观察I,/R组肝小叶结构紊乱,肝窦淤血,肝细胞水肿变性,肝细胞片状坏死。Sham组和I/R＋E2组上述改变明显减轻。结论：雌激素对肝切除缺血再灌注损伤有显著保护作用,其作用机制可能与雌激素减少氧自由基产生、减轻脂质过氧化反应及抑制细胞凋亡有关。     

干细胞来源外泌体对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

[摘 要] 目的 研究大鼠脂肪间充质干细胞来源的外泌体（exosomes,Exo）对肝脏缺血再灌注损伤（hepatic ischemia-reperfusion injury,HIRI）的保护作用。方法 胶原酶法提取SD大鼠原代脂肪间充质干细胞,超速离心法提取干细胞来源的外泌体。SD大鼠随机分为假手术组（Sham）、缺血再灌注损伤组（IR）、缺血再灌注损伤外泌体治疗组（IR+Exo）。Sham组腹部正中切口,离断肝脏周围韧带,不做其他处理;IR组用动脉夹阻断70%肝脏血流60 min;IR+Exo组70%肝脏血流阻断60 min后,尾静脉注射外泌体观察其对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。检测血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）含量。检测肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）与丙二醛（MDA）含量。Western blotting法检测氧化应激指标醌氧化还原酶（NQO-1）、血红素氧合酶1（HO-1）,凋亡相关指标Bcl-2、Bax,HE染色观察肝组织病理变化。结果 相比IR组,IR+Exo组血清中ALT、AST、TNF-α、IL-1β水平显著下降（P<0.05）,SOD活性显著升高（P<0.05）,MDA含量明显下降（P<0.05）。 NQO1、HO-1、Bcl-2表达量显著升高,Bax显著下降（P<0.05）,肝组织病理损伤明显改善。结论 外泌体能够减轻肝脏缺血再灌注损伤,其可能通过缓解氧化应激、抑制炎症反应、抗凋亡而发挥作用。