初发2型糖尿病患者血清LTB4与PAF-AH改变的意义研究

目的探讨初发2型糖尿病患者外周血中白三烯B4(LTB4)与血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)活性变化的临床意义。方法用ELISA法检测55例初发的2型糖尿病患者血清中LTB4含量与PAF-AH活性,与25例健康体检者对照,并比较它们与患者空腹血糖、HbAlc和空腹胰岛素之间的关系。结果2型糖尿病患者血清中LTB4含量(864.69±202.67)ng/L与健康对照组(353.31±120.93)ng/L比较,差异有显著性(P<0.01);而2型糖尿病患者血清PAF-AH活性(9.36±3.14)!mol/min·L与健康对照组(6.11±1.23)!mol/min·L比较有显著性差异(P<0.01)。2型糖尿病空腹血糖FBG(12.54±4.94)mmol/L、HbAlc(10.23±3.13)%和空腹胰岛素FINS(10.9±11.1)mU/L与外周血LTB4含量和PAF-AH活性之间均呈明显的正相关性(P均<0.01),患者外周血LTB4含量与PAF-AH活性之间也呈明显的正相关性(P<0.01)。结论2型糖尿病患者存在炎症反应,血清LTB4与PAF-AH活性明显升高,提示它们可能共同参与了初发2型糖尿病的病理生理过程,可作为初发2型糖尿病患者病情变化的监测指标之一。     

慢性肺源性心脏病患者血浆环氧化酶2改变的意义

目的 了解慢性肺心病患者血浆环氧化酶2(COX-2)活性变化的临床意义.方法 采用ELISA方法动态观察了65例慢性肺心病患者及30例健康对照者血浆COX-2活性.结果 慢性肺心病患者血浆COX-2活性急性加重期(45.23±4.16)IU/L及缓解期(21.40±5.19)IU/L明显高于对照组(7.13±3.26)IU/L(P均<0.01);在急性加重期,患者心功能越差,血浆COX-2活性越高,心功能Ⅳ级者(62.98±8.15)IU/L心功能Ⅲ级者(39.00±6.73)IU/L心功能Ⅱ级者(12.84±5.20)IU/L及对照组(P均<0.01);另外,在急性加重期,患者COX-2活性与PaO2(5.08±2.65)kPa和pH值(7.29±0.31)均呈显著负相关(r分别为-0.65和-0.61,均为P<0.01),而与PaCO2(7.92±2.69)kPa呈显著正相关(r=0.71,P<0.01).结论 提示COX-2可能参与了慢性肺心病的发病过程,测定血浆COX-2活性,对评估慢性肺心病患者的病情变化及严重程度可能有一定的意义.拮抗COX-2的治疗可能有助于缓解患者的病情.     

甘精胰岛素联合那格列奈强化治疗初发2型糖尿病疗效观察

目的 观察对初发2型糖尿病患者联合应用甘精胰岛素、那格列奈治疗的临床效果.方法 选取初发2型糖尿病患者65例,按随机数字表法分组,33例实验组患者联合应用甘精胰岛素、那格列奈治疗,32例对照组患者单纯应用那格列奈治疗,比较2组临床治疗效果.结果 治疗后,实验组空腹血糖、餐后2 h血糖、AUCg、HbA 1c、空腹胰岛素、餐后2 h胰岛素水平分别为(5.92±1.23)mmol/L、(8.55±2.69)mmol/L、(18.92±3.12)、(5.21±1.04)%、(5.78±0.65)mU/L、(29.32±3.21)mU/L,与对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 对初发2型糖尿病患者联合应用甘精胰岛素、那格列奈治疗,效果满意,值得进一步应用.     

1型糖尿病患者Th1/Th2细胞亚群的研究

目的研究Th1/Th2细胞亚群分泌的不同细胞因子,探讨1型糖尿病患者体内Th1/Th2细胞亚群的变化。方法用放射免疫法(RIA)检测了48例1型糖尿病患者(7例合并有下肢血管病变)血清中Th1型细胞亚群分泌的细胞因子IFN-γ、TNF-α和Th2型细胞亚群分泌的细胞因子IL-4、IL-10的水平变化,19例健康志愿者做为对照。结果1型糖尿病患者血清中Th1型细胞因子IFN-γ、TNF-α的水平分别(63.30±14.3)ng/L和(65.03±24.98)Fmol/ml,显著高于正常对照组(29.48±11.98)ng/L和(23.66±13.51)Fmol/ml(P<0.01);Th2型细胞因子IL-4、IL-10的水平分别为(2.21±0.96)ng/L和(24.98±7.31)ng/L,明显低于正常对照组(5.37±1.10)ng/L和(62.87±5.97)ng/L(P<0.01);糖尿病并发下肢血管病患者Th1型细胞因子IFN-γ、TNF-α和Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平分别为(90.03±5.20)ng/L、(109.28±26.74)Fmol/ml和(0.55±0.22)ng/L、(12.12±2.39)ng/L,单纯糖尿病患者组四种细胞因子水平分别为(58.76±9.57)ng/L、(56.98±15.43)Fmol/ml和(2.49±0.72)ng/L、(27.18±5.30)ng/L,两组相比,四种细胞因子水平差异均有显著性(P<0.01)。结论1型糖尿病患者体内Th1/Th2细胞亚群发生了Th2→Th1的漂移改变,并与病情相关,为探讨该病的发病机制及病情监测提供了理论依据。     

动态观察老年慢性肺源性心脏病患者血清IL-18的变化

目的了解老年慢性肺心病患者血清IL-18变化的意义及其与病情的关系。方法采用ELISA方法动态观察了60例老年慢性肺心病患者及20例老年健康对照者血清IL-18含量。结果老年慢性肺心病患者急性加重期及缓解期血清IL-18水平(176.15±30.42)ng/L及(120.33±22.75)ng/L明显高于对照组(64.81±14.33)ng/L,P<0.01);在急性加重期,患者心功能越差,血清IL-18含量越高,心功能Ⅳ级者〔(195.72±37.34)ng/L〕>心功能Ⅲ级者〔(163.32±25.45)ng/L〕>心功能Ⅱ级者〔(104.62±18.89)ng/L〕>对照组(P<0.01)。另外,患者血清IL-18含量与动脉血气中PaO2(5.19±2.73)kPa和pH值(7.28±0.29)均呈显著负相关(r分别为-0.63和-0.58,P<0.01),而与PaCO2(8.32±2.69)kPa呈显著正相关(r=0.73,P<0.01)。结论IL-18可能参与了老年人慢性肺心病的发病过程,测定血清IL-18含量,对评估老年慢性肺心病患者的病情变化及严重程度可能有一定意义,拮抗IL-18的治疗可能有助于缓解患者的病情。     

胰岛素强化治疗对初诊2型糖尿病患者血清氧化应激水平及胰岛素抵抗的影响

目的探讨两种不同胰岛素强化治疗方案对初诊2型糖尿病患者血清氧化应激水平及胰岛素抵抗的影响。方法选择2011年7月至2013年7月武汉市普仁医院收治的2型糖尿病患者64例,采用随机数字表法分为观察组和对照组,各32例。观察组采用持续皮下胰岛素注射(CSII),对照组采用多次皮下注射胰岛素(MSII)。比较两组患者空腹血糖、餐后2 h血糖(2 h PG)、空腹胰岛素(FIN)、糖化血清白蛋白(GA)水平,并记录两组患者治疗前后胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、血清超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(RGSH)、丙二醛水平。结果治疗2周后,观察组空腹血糖、2 h PG、GA显著低于对照组[(5.4±0.7)mmol/L比(6.5±0.9)mmol/L,(8.2±1.4)mmol/L比(10.7±2.1)mmol/L,(20.9±4.8)mmol/L比(23.1±3.6)mmol/L,P<0.05或P<0.01],FIN显著高于对照组[(6.4±1.9)m U/L比(5.3±1.1)m U/L,P<0.01];治疗2周后观察组HOMA-β显著高于对照组,HOMA-IR显著低于对照组[(1.87±0.47)比(1.54±0.31),(0.19±0.07)比(0.24±0.10),P<0.05],观察组治疗后血清丙二醛水平显著低于对照组[(2.5±0.8)mmol/L比(3.1±1.3)mmol/L,P<0.05或P<0.01]。结论初诊2型糖尿病患者早期给予CSII强化治疗,能快速控制患者血糖,减轻氧化应激水平,改善胰岛素抵抗和恢复胰岛β细胞功能。     

血清对氧磷酯酶1活性变化与2型糖尿病外周动脉病变的关系

目的探讨血清对氧磷酯酶1(PARAOXONASE1,PON1)活性变化与2型糖尿病(DM2)外周动脉病变的关系。方法测定51例合并外周动脉病变、55例未合并外周动脉病变的DM患者及49例健康对照者血清PON1活性,同时测定空腹血糖、血脂水平。结果DM2未合并外周动脉病变组PON1活性为(156.93±78.06)IU/L,低于健康对照组(226.45±105.72)IU/L(P<0.01),合并外周动脉病变组PON1活性为(119.37±71.32)IU/L,低于未合并外周动脉病变组(P<0.05)。结论PON1活性在DM2合并或未合并外周动脉病变患者中均降低,在DM2合并外周动脉病变患者中降低更明显,提示PON1活性的降低可能参与了糖尿病外周动脉病变的发生。     

不同糖耐量人群血清HSP70水平及其相关因素分析

目的检测不同糖耐量人群中空腹血清热激蛋白70(HSP70)水平的变化,探讨HSP70在2型糖尿病发生、发展中的可能作用。方法选取2012年9月至12月在南京市第一医院就诊并行口服葡萄糖耐量试验的患者152例,根据世界卫生组织(WHO)1999年糖尿病诊断标准,分为2型糖尿病(T2DM组)67例、糖调节受损(IGR组)32例和正常糖调节(NGR组)53例,检测各组血压、血糖、血脂、空腹胰岛素(FINS)和HSP70等指标,计算体质量指数(BMI)、腰臀比、体内脂肪含量(BF%)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),分析HSP70与相关代谢指标的关系。结果T2DM组血清HSP70水平显著低于IGR组[(535.98±144.69)ng/L vs(623.20±146.99)ng/L,P<0.05)],IGR组血清HSP70水平显著低于NGR组[(623.20±146.99)ng/L vs(722.08±246.24)ng/L,P<0.05];血清HSP70水平与BMI、BF%、腰围、收缩压、舒张压、空腹血糖、口服葡萄糖耐量试验2 h血糖、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素抵抗指数呈负相关(均P<0.01),与高密度脂蛋白胆固醇呈正相关(P<0.01);低密度脂蛋白胆固醇是血清HSP70的独立相关因素。结论血清HSP70水平随着糖耐量水平的升高逐渐降低,且与血压、血脂、体脂等指标相关,提示血清HSP70水平的变化可能与2型糖尿病的发病机制有关。     

罗格列酮对初发2型糖尿病合并肥胖患者炎症状态及胰岛素抵抗的影响

目的 探讨罗格列酮对初发2型糖尿病合并肥胖患者血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及胰岛素抵抗的影响.方法 118例初发2型糖尿病合并肥胖患者随机分为两组:A组口服罗格列酮(4 mg/d)12周,B组予磺脲类降糖药物治疗12周.检测两组患者治疗前后血清中hs-CRP、IL-1β、IL-6、TNF-水平及空腹血糖(FPG)、空腹血浆胰岛素(FINS)浓度,根据HOMA Model公式计算胰岛素抵抗指数.结果 A组患者治疗后血清hs-CRP、IL-1β、IL-6、TNF-α水平及空腹血糖、胰岛索抵抗指数显著低于治疗前(P<0.01);治疗后A组患者空腹血糖较B组患者无明显差异(P>0.05),但血清hs-CRP、IL-1β、IL-6、TNF-α水平及胰岛素抵抗指数显著低于B组患者(P<0.05).结论 罗格列酮降低2型糖尿病合并肥胖患者血糖同时,降低患者机体炎症状态.改善胰岛素抵抗.     

口服补镁对实验性老年2型糖尿病大鼠胰岛素受体表达水平的影响

目的 观察口服补镁对老年2 型糖尿病大鼠胰岛素受体表达水平的影响.方法 将老年2 型糖尿病大鼠模型分为不同剂量的口服补镁组,测定大鼠空腹血糖、血清胰岛素及胰腺和骨骼肌组织胰岛素受体表达水平.结果 高剂量补镁组(2g/kg) 胰腺中胰岛素受体表达水平(MOD 值) 由0.331±0.003 提高至0.342±0.002 ;骨骼肌组织胰岛素受体表达水平由0.345±0.003 提高至0.355±0.002,差异均有统计学意义(P<0.05).同时,高剂量补镁组空腹血糖由(16.85±0.76)mmol/L 降至(15.49±0.57)mmol/L,而血清胰岛素水平由(20.35±0.52)μIU/ml 降至(19.05±0.62)μIU/ml.结论 口服补镁可显著提高老年2 型糖尿病大鼠胰岛素受体表达水平,改善胰岛素敏感性.     

KIR2DS2基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定

目的构建携带KIR2DS2基因短发夹状干扰RNA(short hairin RNA,shRNA)的RNAi慢病毒载体.方法针对已经筛选确定的KIR2DS2基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经HpaⅠ和XhoⅠ酶切后的pSicoR-GFP载体[含U6启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]连接产生LV-shKIR2DS2慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定.用LV-shKIR2DS2及Packaging system质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度.结果PCR和测序证实,成功构建KIR2DS2shRNA的慢病毒载体LV-shKIR2DS2.293T细胞测定病毒滴度为6×108TU/ml.结论成功构建携带KIR2DS2基因短发夹状干扰RNA的RNAi慢病毒载体.     

评价房颤CHADS2评分及其衍生评分对冠心病及其严重程度的预测价值

目的：探讨房颤评分系统CHADS2(欧洲)评分及其衍生评分对冠心病及其严重程度的预测价值。方法纳入2013年1月1日-2013年12月1日就诊于本院心血管内科怀疑冠心病并行冠状动脉造影检查的连续病例429例,根据其造影结果分为对照组(n=51)及冠心病组(n=378)。根据患者的临床资料计算其CHADS2、CHA2DS2-VASc和CHA2DS2-VASc-HSF评分,根据其冠状动脉造影结果计算Gensini积分评价其病变严重程度,并对3种评分的冠心病预测能力进行评价。结果 CHADS2、CHA2DS2-VASc和CHA2DS2-VASc-HSF评分与病变支数(r=0.317,P＜0.01;r=0.332,P＜0.01;r=0.330,P＜0.01)及Gensini积分均有一定相关性(r=0.240,P＜0.01;r=0.274,P＜0.01;r=0.295,P＜0.01)。截断点分析显示, CHA2DS2-VASc-HSF评分≥3对冠心病的预测价值最高,其灵敏度、特异度、曲线下面积分别为0.860、0.804、0.832(95%CI：0.766~0.898)。结论 CHADS2及其衍生评分对冠心病有一定的预测价值,尤其是CHA2DS2-VASc-HSF评分≥3对冠心病有较高的预测价值。     

COX-2与BCL-2的表达与皮肤肿瘤的关系

 【目的】了解常见的皮肤肿瘤组织环氧合酶-2（COX-2）和凋亡相关基因BCL-2表达的情况及其临床意义。初步探讨COX-2与BCL-2在皮肤肿瘤中过表达对肿瘤形成和发展的作用。【方法】免疫组织化学法检测脂溢性角化病（SK）15例，Bowen’s病（BD）15例，基底细胞上皮瘤（BCE）20例，鳞癌（SCC）20例及正常组织5例COX-2和BCL-2蛋白表达。【结果】各标本的肿瘤组织均有COX-2的表达，总体上的阳性率无显著性差异（x^2=0．148，P〉0．05），染色强度有显著性差异（Hc=90．70，P〈0．05），周围正常组织未见COX-2的表达。SCC、BD表达范围弥漫，以SCC表达强度最为显著；细胞分化高的SCC标本其COX-2的表达较细胞分化低者明显。BCE、SK呈灶性表达，强度不一；正常组织仅于表皮基底层有强度很弱的阳性表达。在SCC、BCE、BD。COX-2表达阳性者BCL-2表达的阳性率较COX-2表达阴性者高（P〈0．05）。【结论】皮肤肿瘤存在COX-2的过表达；检测SCC组织COX-2的表达可预测其病变的恶性程度；COX-2表达的模式较阳性与否、表达的强度对病变的提示更有意义。BCL-2的表达与COX-2的过表达有关，COX-2可能是通过激活BCL-2发挥抗凋亡作用而促进皮肤肿瘤形成及发展。     

过氧化氢液对SARS病房空气的消毒效果

1　临床资料　对我院SARS病区 84个病房连续进行了室内消毒前后细菌培养 6 0 0次 .H2 O2 ,QPX - 1 2 8型电动气溶胶喷雾机均由北京鑫四环消毒技术开发中心提供 ;细菌总数采样纸片 (美国 3M)由北京安普生化科技有限公司提供 .病房空气采样 :在无菌净化台内 ,用无菌方法将 1mL无菌生理盐水滴入 3mol·L-1 细菌总数测试制片中 ,盖上上层膜 ,轻轻用压样器压好 ,装入塑料袋中放入 4℃冰箱内 (一袋内最多不能超过 2 0张测试纸片 )备用 .采用自然沉降法 ,将细菌总数测试纸片上层膜轻轻打开 ,此时注意无菌 ,防止污染 ,用消毒后的专用夹子固定 ,…     

pD_2和pA_2的测定

本文采用大鼠肛尾肌分别介绍测定苯肾上腺素ｐＤ＿２和其拮抗剂哌唑嗪ｐＡ＿２的方法。同时讨论了ｐＤ＿２和ｐＡ＿２的意义和推导过程。     

Apg-2对H_2O_2诱导的BaF3-P210细胞损伤的影响

目的 探讨Apg-2对H2O2诱导的Bcr/Abl阳性BaF3-P210细胞损伤的影响.方法 以H2O2诱导的pMIGR1 空载体感染细胞BaF3-MIGR1和稳定表达Bcr/Abl的BaF3-P210细胞为损伤模型,Western blot和RT-PCR检测H2O2损伤后2组细胞Apg-2表达;建立过表达Apg-2的BaF3-MIGR1细胞(BaF3-MIGR1-Apg2)和BaF3-P210细胞(BaF3-P210-Apg2)H2O2诱导的损伤模型,Western blot检测磷酸化组蛋白(γ-H2AX)的表达,免疫荧光法检测γ-H2AX焦点数.结果 H2O2作用后的BaF3-MIGR1和BaF3-P210细胞的Apg-2蛋白和mRNA水平表达均升高(P<0.05).H2O2作用BaF3-MIGR1和BaF3-MIGR1-Apg2细胞后其γ-H2AX蛋白表达升高,γ-H2AX焦点数亦增加;BaF3-P210和BaF3-P210-Apg2细胞H2O2损伤后γ-H2AX蛋白表达和焦点数均无明显变化.结论 Apg-2可减少H2O2诱导的BaF3-P210细胞γ-H2AX表达,从而可能降低其细胞损伤.     

CDX2和MUC2在胃癌组织中的表达

目的探讨CDX2与MUC2在胃癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学方法检测胃癌组织及正常胃粘膜中CDX2与MUC2的表达。结果在正常胃粘膜组织中CDX2和MUC2均无阳性表达。CDX2与MUC2在胃癌组织中阳性表达率分别为51.92%和55.77%。CDX2在肠型胃癌中阳性表达率为65.62%（21/32）,在弥漫型胃癌中阳性表达率为30.0%（6/20）,两型胃癌中CDX2阳性表达率有显著性差异（P〈0.05）。MUC2在肠型胃癌中阳性表达率为68.75%（22/32）,在弥漫型胃癌中阳性表达率为35.0%（7/20）,两型胃癌中MUC2阳性表达率有显著性差异（P〈0.05）。CDX2和MUC2的表达与胃癌分化程度有关（P〈0.05）,与有无淋巴结转移无关（P〉0.05）。CDX2的表达和肿瘤浸润的深度有关（P〈0.01）,MUC2表达与肿瘤浸润的深度也有关（P〈0.05）。结论CDX2与MUC2在胃癌尤其是肠型胃癌中高表达,提示CDX2和MUC2与肠型胃癌的发生更密切。     

FHL2调控Id2功能活性的研究

目的：探讨FHL2对Id2蛋白功能的调控效应。方法：将E47、5xE-Box-Luc、pRL-SV40、Id2以及FHL2表达载体分别共转染MCF-7、293T以及SH-SY5Y细胞,双荧光素酶报告基因方法检测不同转染组细胞中的相对荧光素酶活性。结果：三个细胞系中E47均显著上调了报告基因的表达,Id2抑制了E47的转录激活活性,而FHL2通过与Id2相互作用显著消弱了Id2对FA7功能的抑制效应。结论：通过相互作用FHL2抑制了Id2蛋白的功能活性,FHL2是一个新的Id2蛋白功能抑制子;     

2型糖尿病患者血浆TXA2和PGI2失衡及PLA2活性变化

目的：探讨2型糖尿病（DM）患者血栓素A2（TXA2）和前列环素（PGI2）失衡及PLA2活性变化。方法：以放免法测定血栓素B2和6－酮－前列腺素含量,以改良Zieve法测定血浆PLA2活性,同时观察空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、甘油三酯（TG）等的变化。结果：①2型DM患者存在TXA2和PGI2合成异常,且Ⅱ组（有微血管病变组）较I组（无微血管病变组）更为严重;②2型DM患者组血浆PLA2显著低于正常对照组,但I组与Ⅱ组之间无显著差异;③2型DM患者组TXB2与FBG、TG显著正相关,6－K－PGF1a与FINS显著负相关,TXB2与6－K－PGF1a均与血浆PLA2无显著相关性。结论：①TXA2和PGI2失衡在2型糖尿病及微血管病变的发生发展中起重要作用;②血浆分泌型PLA2活性变化与2型糖尿病密切相关,但在糖尿病患者TXA2和PGI2失衡及微血管病变中可能不起直接作用;③糖脂代谢紊乱以及高胰岛素血症在TXA2和PGI2失衡及DM微血管病变中起重要作用。     

运用酵母双杂交技术筛选LRRK2相互作用蛋白

目的:使用酵母双杂交来筛选LRRK2基因的相互作用蛋白,以研究其功能.方法:使用的诱饵片段包含MAPKKK和ROC功能域的一部分与COR功能域的全长.诱饵片段由聚合酶链式反应(PCR)扩增后连入酵母表达质粒pGBKT7,pGBKT7-bait质粒经测序验证后转化酵母茵株AH109,用免疫印迹来检验该质粒在酵母中的表达,人类胎脑cDNA文库被转化到能稳定表达诱饵蛋白的酵母菌株中,并铺到含有x-a-gal的四缺(SD/-Trp/-ku/-His/-Ade)的培养皿上.分别使用含有pGBKT7或pGBKT7-bait的AH109酵母菌株进行回交检测,进一步确证从初步筛选中获得的阳性克隆,并用生物信息学来分析其中的文库质粒.结果:获得9个真阳性的克隆,经生物信息学分析其中有3个克隆中的序列不在已知基因的开放阅读框内.其余6个克隆中的序列在以下几个已知基因的开放阅读框中:STRBP,BAGS,PTPN23,L3 MBTL3,RALYL,KIAA1783.结论:经酵母双杂交后成功地获得了真阳性克隆.这些相互作用蛋白将为研究LRRK2的功能、帕金森病发病机制和其他神经性疾病提供一些新的线索.