BKcaα1基因在DI大鼠膀胱中的表达

目的 研究逼尿肌不稳定(Detrusor instability,DI)大鼠膀胱中大电导钙激活钾α1通道(Big conductance calcium activated potassium channelα1,BKcaα1)基因的表达,探讨BKcaα1通道在逼尿肌不稳定发生中的作用.方法 建立Wistar大鼠DI模型,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组织化学染色技术,检测BKcaα1基因在DI大鼠膀胱中的表达.结果 BKcaα1基因在DI大鼠膀胱中的表达降低.结论 BKcaα1通道反馈调节逼尿肌的收缩,可能与DI的发生有关.     

肿瘤坏死因子—α激活ECV304钙激活钾主G蛋白的增强效应

目的　观察肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)对人脐静脉内皮细胞株 ECV30 4钙激活钾通道 (BKca)的影响以及 G蛋白是否在此过程中起作用。方法　细胞贴附式膜片箝技术。结果　发现 ECV30 4细胞膜上存在大电导钙激活钾通道 (BKca) ,它的电导是 (2 0 2 .5 4± 16 .6 2 ) p S,其活动可被 2 0 0 U / m l TNF-α增强 ,G蛋白在此过程中起介导作用。结论　 TNF-α作用于内皮细胞 ,快速激活 BKca,促进钾离子大量外流 ,使细胞膜发生超极化 ,增大静息钙离子内流的电化学驱动力 ,开放静息钙通道升高静息胞内钙离子浓度。G蛋白可增强此激活效应。     

关于人类绒毛膜促性腺激素

人类绒毛膜促性腺激素(HCG),虽然早在1927年便在孕妇尿中证实其存在,但它的化学本质和生理作用直到近年才逐步搞清。 HCG是胎盘合胞滋养层细胞分泌的一种糖蛋白激素,含糖量约占分子重量的30％。HCG分子由两个亚单位组成:α-亚单位(分子量约18,000)和β-亚单位(分子量约2,8000)。HCG的α-亚单位和其他二种糖蛋白激素FSH、LH的α-亚单位是相同的,     

慢性多重应激大鼠心房肌L-型钙通道α1c亚单位表达变化研究

目的研究慢性多重应激大鼠心房肌L-型钙通道α1c亚单位表达变化及L-型钙通道阻滞剂维拉帕米的拮抗作用。方法建立大鼠慢性多重应激心律失常模型,以维拉帕米作为干预,试验结束后取心房组织,用实时荧光定量反转录聚合酶链反应（real-time PCR）方法测定L-型钙通道α1c亚单位mRNA的表达水平,以Western blot方法检测L-型钙通道α1c亚单位蛋白的表达水平。结果应激大鼠出现了房性心律失常,应激＋维拉帕米组房性心律失常出现时间和发生次数低于应激组（P〈0.01）;应激组和应激＋维拉帕米组大鼠心房肌L-型钙通道α1c亚单位mRNA和蛋白表达水平明显低于对照组（P〈0.01）;应激组大鼠心房肌L-型钙通道α1c亚单位蛋白表达水平低于应激＋维拉帕米组（P〈0.01）。结论慢性多重应激导致大鼠心房肌L-型钙通道α1c亚单位mRNA和蛋白表达水平下调。维拉帕米对慢性多重应激诱导的大鼠心房肌L-型钙通道α1c亚单位表达下调有拮抗作用,可抑制慢性多重应激诱导的房性心律紊乱。     

整合素和去整合素在病变眼组织中的作用

整合素广泛表达于多种细胞表面,在体内生理和病理过程中发挥重要作用。去整合素和整合素受体特异结合而抑制细胞的黏附,在血小板的聚集、肿瘤的侵袭与转移方面研究较多,在眼组织的研究较少。现就二者在病变眼组织中的作用综述如下。1　整合素的结构和生物学功能1 1　整合索的结构　整合素为黏附分子中由α亚单位和β亚单位以非共价键连接而成的异二聚体的跨膜蛋白,其中α亚单位分子量介于12 0ku和180ku之间;β亚单位介于90ku至110ku。α亚单位胞内区域较短,而胞外区域较长,含钙离子结合区;而β亚单位胞内区域较长,胞外区域含有胱氨酸重复序…     

天参益智复方对β淀粉样蛋白引起的神经细胞中尼古丁受体表达降低及细胞毒性损害的拮抗作用

目的:探讨天参益智复方对β淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)引起的神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞尼古丁受体(nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)亚单位在蛋白质和mRNA水平降低、细胞损伤及脂质过氧化的拮抗作用。方法:选取一定浓度的天参益智复方制剂预处理SH-SY5Y细胞后,再加入Aβ蛋白处理,比色法测定细胞甲基噻唑基四唑还原率,从细胞整体水平了解此复方制剂对细胞活性的影响。蛋白质印迹法和逆转录聚合酶链法分别从蛋白质水平和mRNA水平测定nAChR亚单位α3、α7表达的变化。硫代巴比妥酸比色法测定脂质过氧化产物丙二醛的水平,以了解该复方制剂的抗氧化能力。结果:安全浓度的天参益智复方对α7的蛋白质表达水平有上调作用;能对抗Aβ引起的α3和α7 nAChR亚单位蛋白质水平降低及α7亚单位mRNA表达低下,但对α3亚单位mRNA水平无明显影响;能减弱Aβ引起的细胞损伤和脂质过氧化水平升高。结论:天参益智复方制剂能在蛋白质水平上调尼古丁受体α7亚单位,对抗Aβ引起的nAChR表达降低及神经毒性作用,在阿尔茨海默病的治疗中可能起到一定作用。     

哇巴因与地高辛对大鼠心肌钠泵α亚单位基因表达影响的对比研究

目的　对比研究哇巴因与地高辛对大鼠心肌钠泵 (Na ,K ATP酶 )亚单位基因表达的影响 ,探讨内源性哇巴因(EO)的生物学效应以及洋地黄类药物药理作用的分子机制。方法　每天给予大鼠注射小剂量哇巴因 (2 0 μg·kg 1·d 1)与地高辛 (32 μg·kg 1·d 1) ,每周测量一次大鼠血压 ;6周后处死动物 ,应用RT PCR技术在mRNA水平探讨大鼠心肌钠泵α1、α2 及α3亚单位基因表达的改变。结果　给予大鼠注射哇巴因 6周后血压明显升高 (132 6± 9 0mmHgvs 115 7± 8 2mmHg ,P <0 0 1) ,而地高辛组大鼠血压与对照组比较无明显差异。哇巴因与地高辛均可导致大鼠心肌钠泵α亚单位基因表达的改变 :两者均可引起钠泵α3亚单位表达增强 ,而对α2 亚单位表达无影响 ;哇巴因组大鼠心肌钠泵α1亚单位表达减弱 ,而地高辛组α1亚单位表达无改变。结论　哇巴因与地高辛可导致不同的钠泵基因表达改变 ,这可能是内源性哇巴因发挥生理作用的分子机制之一 ,并且可能是哇巴因与地高辛药理及毒理作用 (包括两者对血压的调节 )不同的重要原因。     

动脉粥样硬化兔血管平滑肌大电导钙激活钾通道KCMB1基因的mRNA表达量的变化研究

目的 研究动脉粥样硬化(atheresderosis,AS)时动脉血管平滑肌细胞大电导的钙激活钾通道(Large-coeduc-tanee Ca2 -activated K channel,BKca)β1亚单位(KCMB1)基因mRNA定量表达,探讨KCMB1基因在AS发生中的作用.方法 建立兔AS模型,应用逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR),检测AS时胸主动脉KCMB1基因的mRNA表达变化.结果 大电导的钙激活钾通道KCMB1基因在动脉粥样硬化组胸主动脉中表达明显减少.结论 大电导的钙激活钾通道β1亚单位调节血管平滑肌细胞的收缩,可能与AS的发生有一定的关系.     

血小板衍生生长因子在瘢退疙瘩的表达

目的 探讨血小板衍生生长因子（Ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ＰＤＧＦ）在瘢痕疙瘩形成中的作用。方法 采用免疫组织化学方法检测了８例瘢痕疙瘩和９例正常人皮肤对照中ＰＤＧＦ受体α、β亚单位的表达。结果 ９例正常人皮肤对照中仅２例有α亚单位的微弱表达;３例有β亚单位的微弱表达。８例瘢痕疙瘩皮损的ＰＤＧＦ受体α、β亚单位全部染色阳性,并且染色强度和阳性染百分数都明显高于正常     

精神分裂症患者大脑皮质尼古丁受体亚单位蛋白质水平的改变

目的：研究精神分裂症与尼古丁受体的关系。方法：用WesternBlotting方法测定患者大脑皮质组织中主要的尼古丁受体亚单位蛋白质水平，并与同龄对照组相比较。结果：精神分裂症患者大脑皮质前叶组织中α7亚单位蛋白质含量较对照组减少，但在大脑皮质顶叶组织中未见明显变化。在精神分裂症患者与同龄对照组之间没有发现尼古丁受体α3,α4和β2亚单位蛋白质表达有明显区别。结论：α7尼古丁受体亚型在精神分裂症发病机制中具有特殊意义和重要作用。     

钠离子和钾离子的主动转运

一、Na~ -K~ -ATP酶的结构: 已从几种组织中提纯出Na~ -K~ -ATP酶。并且发现,在所有情况下,它都含有二种不同的蛋白质亚单位。大的亚单位称为α亚单位,其分子量接近95,000道尔顿。通过用放射性标记ATP分子的末端磷酸基团证明,这个亚单位具有使ATP水解的活性位点。大的亚单位还具有和哇巴因相结合的位点。由于ATP和哇巴因作用于膜的两侧,因此,人们可以得出“α亚单位横贯整个膜”这样一个结论。小的亚单位称为β亚单位,其分子量约40,000道尔顿,它是一种精蛋白,针对α或β亚单位的抗体是可能产生的,这种抗体将会抑制酶的活性。但β亚单位的生物化学功能还不清楚,至今还没有人能成功地在     

绒毛膜促性腺激素(HCG)在滋养细胞疾病的研究概况

20世纪 80年代 ,学者们对HCG的生理、生化特性有了一定的认识 ,认为HCG是一种糖蛋白激素 ,其相关分子组成了HCG分子家族 (含α、β和整分子HCG)。HCG是由胎盘绒毛膜合成滋养层细胞合成 ,分子量约 4 60 0 0。由 2 37个氨基酸残基和糖组成。有 2个非共价键结合的糖蛋白亚单位 ,即α和 β亚单位。α亚单位氨基排列顺序和LH ,FSH ,TSH和α亚单位大体相同 ,HCG抗体可与这些激素起交叉免疫反应 ,而 β亚单位则结构特异 ,故可作为测定正常妊娠和妊娠滋养细胞疾病特异标志物〔1〕。1　概述进入 2 0世纪 90年代以后 ,人们逐渐发现了更多的…     

“一肾一夹”高血压大鼠心肌钠泵α亚单位的基因表达

探讨“一肾一夹”高血压大鼠心肌钠泵α亚单位各异构体基因表达的改变,为高血压发病机制的深入研究提供理论及实验依据。方法：分别应用分子生物学RT－PCR及免疫组化技术,探讨IKIC高血压大鼠心肌钠泵α1、α2及α3亚单位mRNA及蛋白水平及基因表达的改变。结果：在mRNA水平,1K1C高血压大鼠心肌钠泵α2亚单位表达减弱,α3亚单位表达增强,而蛋白水平表现为α2亚单位表达增强。结：1K1C高血压大鼠心肌钠泵α亚单位基因表达发生改变,这种改变可能与肾血管性高血压的发病有关。     

尼古丁暴露和饮酒行为对大鼠腹侧被盖区烟碱型乙酰胆碱受体表达的影响

目的 探讨尼古丁暴露和饮酒行为对大鼠腹侧被盖区(VTA)烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)部分亚单位mRNA表达的影响.方法 39只出生35 d的雄性Wistar大鼠随机分为实验组(N组,n=20),和对照组(C组,n=19),N组大鼠进行为期10d的尼古丁(1.0mg·kg-1·d-1)皮下注射,C组大鼠以生理盐水对照处理10d.其后,在N组和C组大鼠中各随机抽取6只(分别为NE组,n=6,和CE组,n=6)大鼠断头取脑分离VTA区提取mRNA,实时定量检测nACh受体α4、α5、α7和β2亚单位表达.N组和C组其余大鼠(分别为NA组n=14,CA组n=13)在出生后60d以Samson糖水递减程序诱导建立双瓶自由选择饮酒行为模型,共计69d,之后以相同程序定量检测VTA区标本相同指标.结果 ①因素分析显示:两因素(尼古丁暴露、饮酒行为)对VTA区nAChRα4、α5亚单位表达水平均有调节作用(F值分别为6.13,5.407,5.186,7.132,P＜0.05);饮酒行为因素对β2亚单位表达水平有调节作用(F=5.896,P＜0.05);两因素对α7亚单位表达有极强的交互作用(F=13.894,P＜0.001),对α5、β2亚单位表达有交互作用(F值分别为6.149,4.222,P＜0.05).②NA组α4、α5、α7和β2亚单位mRNA表达不同程度的显著高于CA组(F值分别为7.941,13.517,17.438,9.272,分别P＜0.05、P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01),NA组的α4、α5、α7、β2亚单位表达水平显著高于NE组(F值分别为5.293,8.500,6.149,4.837,P＜0.05);CA组α7亚单位表达水平显著低于CE组(F=12.750,P＜0.01).结论 尼古丁和乙醇共同作用于VTA区包含有α4、α5、α7、β2亚单位的nAChR亚型.     

HCG—β亚单位单价抗血清的制备

人绒毛膜促性腺激素(HCG)是由垂体和胎盘分泌的具有刺激性腺活动和维持早期妊娠功能的一种糖蛋白激素。主要用于诊断早孕,病理妊娠,滋养层细胞肿瘤。HCG是由分子量分别为18,000和30,000的α、β两个亚单位组成的一条多肽链。其中α亚单位与LH有相同的分子结构,而β亚单位C末端33个氨基酸是其本身所特有的,因而HCG-β亚单位抗血清是检测HCG的重要手段,应用HCG-β     

AMPA受体与癫痫的关系

癫痫是一种常见的神经系统疾病,严重危害人类健康。α-氨基羟甲基恶唑丙酸(AM-PA)受体是一种游离型兴奋性谷氨酸受体,由GluR1~GluR4 4个亚单位组成,GluR2亚单位对Ca2+不通透。由于GluR2亚单位的表达天然AMPA受体通道对Ca2+不通透。在AMPA受体激活时,大量Ca2+内流导致神经损伤。AMPA受体对于癫痫发病机制的研究和治疗均有重要作用。     

L-型钙通道α1亚单位在成年鼠海马神经元上的差异性表达

目的 观察L-型钙通道不同的α1亚单位在成年鼠海马不同亚区神经元中表达的变化。方法 运用免疫组织化学染色方法特异性地标记脑型L-型L-型钙通道不同的α1亚单位CaV1.2α1C和CaV1.3α1D。结果 CaV1.2α1C主要分布在CA1区锥体细胞突起部分及CA3区锥体细胞的胞体区、基树突和远端顶树突;CaV1.3α1D则主要集中分布在海马各亚区的胞体区和近端突起;此外,CaV1.2α1C和CaV1.3α1D在细胞局部的分布特性上亦明显不同,前者主要呈现簇状分布,而后者则呈均匀分布。结论 L-型钙通道CaV1.2α1C和CaV1.3α1D亚单位在成年鼠海马不同亚区神经元中呈现差异性表达。     

关于血清HCG假阳性的探讨

人绒毛膜促性腺激素 (Humanchorionicgonadotropin ,HCG) ,主要由胎盘分泌 ,代表滋养层细胞增生程度的标志物之一。HCG是一种糖蛋白 ,由两个以非共价键结合的亚单位 :α亚单位和 β亚单位组成。α亚单位和黄体生成素 (Luteinizinghor mone,LH)、卵泡刺激素 (follicle stimulatinghormone ,FSH)及甲状腺刺激素 (thyroid stimulatinghormone,TSH)的结构接近 ,而 β亚单位不同于其他垂体糖蛋白激素 ,具有独特的生化特性和免疫特性。因此HCG定性、定量试剂盒均采用针对 β亚单位的免疫方法进行检测。而临床检测 β HCG也正是为了强调总…     

电压门控性钠通道亚单位可塑性与神经性疼痛

电压门控性钠通道包括多个α亚单位和β亚单位。大量研究表明,神经元的异常兴奋是神经性疼痛产生的主要原因之一,并且这种异常兴奋与钠离子通道亚单位的可塑性有关。本文就目前研究较多的几种钠通道亚单位的可塑性与神经性疼痛的关系作一综述。     

α3、α7-nAChRs缺损AD模型的建立及茶多酚的干预

目的 建立β-Amyloidpepfides(Aβ)诱导α3、α7-烟碱型胆碱能受体nAChRs受体亚型缺失AD病理模型，探讨Aβ的毒性作用机理，并观察茶多酚(EGCG)的可能干预。方法 纳摩尔Aβ慢性处理PC12细胞建立ct3、唧亚单位缺失细胞模型。用MTT比色法、Annexin V-FITC、配体结合实验、Western Blot、RPA法深入探讨Aβ损伤α3、α7 nAChRs亚型的机制以及EGCG的保护作用。结果 用纳摩尔浓度Aβ1-40和Aβ25-35能明显降低PC12细胞[^125I]α—Bungarotoxin和[^3H]Epibatidine结合位点数量，α3、α7亚单位蛋白和mRNA水平，但不诱导凋亡，却明显抑制MTT。而预先加入10μM EGCG几乎完全抑制Aβ对[^3H]epibatidine和[^125I]α-BTX的结合力的影响，可显著抑制Aβ对α3、α7 nAChRs受体亚单位蛋白的损伤。结论 Aβ诱导nAChRs缺损神经细胞模型，是目前较理想研究AD的细胞模型；EGCG可干预Aβ对nAChRs的神经毒性作用。