胃癌细胞中线粒体DNA D-环区的突变

目的 研究线粒体DNA D-环区在胃癌细胞中的突变情况。方法 选择胃癌手术20例患者胃癌组织及其邻近的正常组织,用PCR方法将线粒体DNA D-环区扩增测序。结果 在20例胃癌组织中有7例存在线粒体DNA D-环区突变,突变率为35％,突变位点17个,其中4个属微卫星不稳定。20例肿瘤中有9个基因库未记载的新的多态性变化。结论 线粒体DNA D-环区是一个具有高度多态性和突变性的区域,在胃癌中突变率较高。     

线粒体DNA与线粒体DNA突变

线粒体是真核生物细咆内的能量转换体系和供能中心。它含有自己的 DNA。就人体来说,线粒体 DNA(mtDNA)是细胞内唯一的核外遗传物质。1988年,Holt 和 Wallace 分别在线粒体脑肌病和 Leber 氏遗传性视神经病患者中发现了 mtDNA 的突变,从而开辟了研究 mtDNA 突变与人类疾病的新领域。     

尼可地尔对豚鼠心肌细胞膜及线粒体膜电位的影响

研究KATP通道开放剂尼可地尔 (Nic)对豚鼠心肌细胞膜和线粒体膜电位的影响 .用激光共聚焦显微镜和特异性荧光探针 ,观察不同剂量的Nic及KATP通道阻滞剂格列本脲 (Gli)引起急性分离的豚鼠心肌细胞膜电位 ,线粒体膜电位荧光值的变化 .Nic1mmol·L- 1引起细胞膜电位在 1min内迅速超极化〔膜电位荧光值减少 ( 75± 12 ) %〕 ,Gli 3μmol·L- 1可阻断其变化 ;0 .1和 1mmol·L- 1Nic可使线粒体膜电位去极化和膜电位荧光值在 1,2 ,5min分别增加( 12± 3) %和 ( 32± 8) % ,( 2 5± 6) %和 ( 39± 9) % ,( 34± 6) %和 ( 4 5± 12 ) % ;3μmol·L- 1Gli可抑制其变化 .结果说明低浓度Nic只引起线粒体膜电位去极化 ,高浓度Nic还可使细胞膜电位发生超极化 ,引起KATP通道开放     

吗丙嗪对细胞膜钙调蛋白和对细胞膜保护作用的研究

比较吗丙嗪与西亚胺对小鼠血液中血红蛋白含量、兔红细胞膜抗低渗能力及细胞膜钙调蛋白的影响。发现二者对小鼠血红蛋白的影响相近；对兔红细胞膜抗低渗破裂的作用，吗丙嗪强于西亚胺；吗丙嗪还具有抑制细胞膜钙调蛋白的作用。     

线粒体DNA与衰老和长寿

线粒体DNA（mtDNA）是细胞中独立存在于核DNA（nDNA）之外的呈闭合环状的DNA分子．研究表明mtDNA有半自主复制．高突变性、母系遗传、异质性等特点。它包含37个基因．其中的2个编码rRNA、22个编码tRNA．另外13个基因编码与线粒体氧化磷酸化有关的蛋白质。这些蛋白质与其他nDNA编码的蛋白质一起．组成了完整的电子传递链，完成细胞呼吸功能，为细胞提供能量。当线粒体功能出现异常的时候．细胞往往因能量供应不足而丧失活力，进而出现衰老。另外因为mtDNA特殊的结构积累了大量的突变，最终加速衰老的发生发展。众多研究表明线粒体与衰老和长寿有着密切联系．使得线粒体成为衰老和长寿机制研究的重要热点．本文就此作一综述.     

甲醛和甲酸对人和动物细胞膜流动性的作用

在体外实验中,甲醛致兔红细胞膜流动性明显降低,最低作用浓度为0.05mM/L。甲酸亦有相似作用,最低作用浓度为0. 01mM/L,并存在一定的剂量-效应关系。体内给予甲醛3mg/kg即见红细胞膜流动性下降,与人红细胞体外实验结果一致。甲醛接触工人(空气浓度3mg/m~3)细胞膜流动性明显降低。     

半枝莲总黄酮对红细胞膜脂质过氧化损伤的保护作用

目的:研究半枝莲总黄酮对细胞膜脂质过氧化损伤的影响.方法:以3种自由基生成体系诱导的红细胞膜脂质过氧化为模型,测定半枝莲总黄酮对脂质过氧化的抑制作用.结果:总黄酮对黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统、H2O2及UV照射3种方法引起的细胞膜脂质过氧化均有抑制作用,其作用呈剂量依赖性,IC50分别为20.59、9.41和19.61lμg·m-1.结论:提示半枝莲总黄酮对自由基引起的细胞膜脂质过氧化损伤有保护作用.     

莲心碱对氧自由基引发红细胞膜损伤的保护作用

目的研究莲心碱对超氧阴离子自由基(O2.)引发的红细胞膜氧化损伤的影响。方法采用邻苯三酚自氧化产生的超氧阴离子自由基O2.致红细胞膜损伤,以此为膜过氧化损伤实验模型,以脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、细胞膜封闭能力、细胞膜自氧化速率、膜脂流动性(MFU)为指标,观察莲心碱对红细胞膜氧化损伤的保护作用。结果O2.能引起红细胞膜脂质过氧化,丙二醛(MDA)含量、自氧化速率增加、膜流动性以及膜封闭度下降。而红细胞膜经过一定量的莲心碱(80,100,120mg.L-1)预先处理后,膜MDA含量明显减少,自氧化速率明显降低,膜流动性和膜封闭度提高。结论莲心碱对氧自由基引发的红细胞膜损伤具有一定的保护作用。     

羧甲基壳聚糖对阿霉素所致红细胞膜损伤的保护作用

目的研究羧甲基壳聚糖(CM-COS)对阿霉素所致红细胞膜损伤的影响。方法用阿霉素作用红细胞膜,建立膜损伤实验模型。以红细胞形态学、细胞溶血率、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量、细胞膜流动性、封闭能力等为指标,观察羧甲基壳聚糖对红细胞膜损伤的保护作用。结果阿霉素能引起红细胞溶血率和MDA含量增加,SOD活性降低、膜流动性以及膜封闭度下降。而经过一定量的羧甲基壳聚糖(400,600,800μg·mL-1)预处理后红细胞溶血率和MDA含量明显减少,SOD活性、膜流动性和膜封闭度提高。结论羧甲基壳聚糖对阿霉素引发的红细胞膜损伤具有一定的保护作用。     

猪苓多糖和水飞蓟宾对CCl4中毒肝细胞膜超微结构的保护作用

目的 应用人胎肝细胞CCl4中毒模型，研究保肝药物猪苓多糖和水飞蓟宾对人胎肝细胞超微结构的保护作用。方法 肝细胞来源于5-7月龄水囊引产胎儿，通过胶原酶消化分离及培养，分别与猪苓多糖和水飞蓟宾作用不同时间后，再进行CCl4中毒。通过检测培养上清中转氨酶和SOD的变化和观察扫描电镜及透射电镜镜下肝细胞形态及超微结构的改变来判断药物对肝细胞的作用。结果 经与猪苓多糖和水飞蓟宾作用后的肝细胞，CCl4中毒后其培养上清中ALT和AST水平明显较对照组减低，SOD水平增高。扫描电镜和透射电镜均表明，猪苓多糖和水飞蓟宾组肝细胞损伤明显减轻。在相同剂量下，前对培养上清中ALT、AST的降低及细胞膜表面超微结构的，呆护作用优干后。结论 猪苓多糖和水飞蓟宾对肝细胞膜表面超微结构均有一定的保护作用可能通过清除氧自由基而实现的。     

人参皂苷Rb3 对脑缺血大鼠脑线粒体损伤的保护作用

目的研究人参皂苷Rb3对脑缺血大鼠脑线粒体损伤的保护作用,探讨人参皂苷Rb3抗缺血性脑中风的机制.方法用栓线法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,测定线粒体肿胀度、膜流动性、膜磷脂含量、呼吸功能、线粒体呼吸酶、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和Ca2+等.结果大鼠MCAO后24 h,脑线粒体损伤明显,表现为肿胀、膜流动性降低,膜磷脂降解、呼吸功能衰减,呼吸酶和SOD活性降低,Ca2+和MDA含量升高;静脉注射人参皂苷Rb3(5,10 mg·kg-1)能明显抑制缺血脑线粒体膜流动性的降低和膜磷脂的降解,减少脑缺血引起的线粒体肿胀,抑制NADH脱氢酶、琥珀酸脱氢酶和细胞色素C氧化酶活性的降低,改善线粒体呼吸功能;明显降低脑缺血大鼠脑神经细胞线粒体MDA含量,升高SOD活性,抑制Ca2+过多摄入.结论人参皂苷Rb3对缺血脑神经细胞线粒体的损伤有明显的保护作用,该作用可能与清除氧自由基、抑制脂质过氧化、拮抗Ca2+有关.     

线粒体DNA与肿瘤研究进展

近年来研究发现线粒体脱氧核糖核酸(mtDNA)与肿瘤的发生有密切关系。但是过去的研究主要集中在肿瘤细胞线粒体的形态和能量代谢改变等方面,在人类mtDNA全序列测定以后,mtDNA突变与肿瘤相关性的研究越来越多。1mtDNA的结构及功能线粒体有自己的遗传系统和自己的蛋白质翻译系统,与细     

线粒体醛脱氢酶对心脏保护作用的研究进展

线粒体醛脱氢酶(ALDH2)是醛脱氢酶的亚型之一,具有脱氢酶和酯酶等多种酶功能。体内乙醇、氨基酸、生物胺、维生素、类固醇及脂质的代谢过程中会产生众多醛类物质。ALDH2在辅助因子NAD(P)+的参与下将醛类物质脱氢成为相应的羧酸,对减轻醛类物质对机体的毒性作用具有重要意义。ALDH2发挥酯酶功能则不需要辅助因子,可将羧酸酯或者其他酸转化为相应的羧酸和醇。近年的研究表明,ALDH2酶活性的下降将加重酒精、缺血等多种因素引起的心肌损伤和促进硝酸甘油耐受的发生,因此针对ALDH2开发和研制特异性激动剂,将为心脏疾病的药物防治提供新思路。     

川芎嗪对大鼠心肌线粒体损伤的保护作用

目的 :观察川芎嗪对大鼠缺血再灌注心肌线粒体损伤的影响及其机制。方法 :结扎大鼠冠状动脉30min后灌注20min ,复制缺血再灌注模型。测定心肌线粒体中琥珀酸脱氢酶 (SDH)、细胞色素氧化酶 (CCO)、Ca2 + ·Mg2 + -ATP酶、Ca2 + -ATP酶、超氧化物歧化酶 (SOD)、谷光甘肽过氧化物酶 (GSH -PX)活力及细胞色素和丙二醛 (MDA)含量。结果 :川芎嗪保护组的SDH、CCO、Ca2 + -ATP酶、Ca2 + ·Mg2 + -ATP酶、SOD和GSH -PX活力显著高于缺血再灌注组 (P<0 05) ,其细胞色素aa3、细胞色素C和膜磷脂含量也显著高于缺血再灌注组 ,而MDA含量则显著性降低。结论 :川芎嗪对缺血再灌注时心肌线粒体膜酶活性变化及膜成分降解有较强的拮抗作用 ,其机理可能是通过提高对氧自由基的清除和抑制脂质过氧化。     

三氧化二砷对小鼠卵母细胞线粒体DNA氧化损伤作用及其机制

目的研究三氧化二砷(As2O3)对小鼠卵母细胞线粒体DNA(mt DNA)的氧化损伤作用及其作用机制。方法 1体外实验挤压正常小鼠卵巢获取卵母细胞,培养成熟后,分为As2O31和2μmol·L-1单独处理组、N-乙酰半胱氨酸(NAC)5 mmol·L-1处理组、2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧基(Tempo)1 mmol·L-1处理组、As2O31或2μmol·L-1+NAC 5 mmol·L-1共处理组、As2O31或2μmol·L-1+Tempo 1 mmol·L-1共处理组,培养20 h后,收集成熟卵母细胞进行后续实验指标测定。2体内实验雌性昆明小鼠ip给药,分为As2O31和2 mg·kg-1染毒组、As2O31或2 mg·kg-1+NAC 200 mg·kg-1组,每日1次,连续60 d,椎脱臼处死取卵母细胞。2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐荧光染色检测细胞内活性氧(ROS)水平;8-羟基脱氧鸟苷酶(8-OHd G)联免疫反应检测提取mt DNA中8-OHd G含量;Western蛋白印迹法检测DNA聚合酶γ(Polγ)和线粒体转录因子A(mt TFA)的蛋白表达;β-半乳糖苷酶(β-Gal)报告基因检测试剂盒检测溶酶体活力。结果 1体外实验As2O3单独处理组小鼠卵母细胞中ROS和8-OHd G含量升高,Polγ和mt TFA蛋白表达水平降低(P<0.05);而As2O3与NAC或Tempo共处理组卵母细胞中ROS含量减少,8-OHd G水平降低,Polγ和mt TFA蛋白表达水平显著上调(P<0.05)。2体内实验As2O3单独处理组小鼠卵母细胞中ROS和8-OHd G含量升高,Polγ和mt TFA蛋白表达水平降低(P<0.05);As2O3与NAC共处理组小鼠卵母细胞中ROS含量减少,8-OHd G水平降低,Polγ和mt TFA蛋白表达水平提高(P<0.05)。As2O3单独处理组体外培养的卵母细胞,β-Gal活力显著提高(P<0.05),而As2O3与NAC或Tempo共处理组β-Gal活力显著下降(P<0.05)。体内实验各处理组β-Gal活力无显著差异。结论砷暴露可诱导小鼠卵母细胞大量生成ROS,抑制线粒体基因组修复与复制相关因子Polγ及mt TFA的表达,同时改变溶酶体活力,最终诱发mt DNA氧化损伤。     

五味子酚对氧自由基引起大鼠脑突触体和线粒体损伤的保护作用

以Fe²⁺-半胱氨酸(Cys)为氧自由基生成系统,在体外模仿脑出血或脑外伤引起的氧自由基损伤的模型,观察五味子酚是否对Fe²⁺-Cys引起的大鼠脑突触体和线粒体损伤有保护作用,以探讨Sal用于延缓衰老、防治某些神经系统疾病的可能性。结果显示,与Fe²⁺-Cys共温孵可使脑突触体和线粒体MDA生成量显著增加,线粒体ATPase活性下降。而预先加入Sal(10^{-6mol·L-1)可抑制MDA生成,防止线粒体ATPase活性降低。Sal对Fe2+-Cys引起的线粒体肿胀和膜流动性降低也有明显的保护作用,并能防止Fe2+-Cys所致线粒体和突触体形态的病理性损伤。结果提示,Sal对氧自由基引起的大鼠脑突触体和线粒体损伤有明显保护作用。}     

磺化铝酞菁对小鼠肿瘤和细胞膜的光动力作用

磺化铝酞菁(AlSPC)合并铜激光泵浦染料激光器激光或红光照射,对小鼠S180肿瘤有显著光动力治疗作用,抑瘤率分别为62.7％和66.8％,AlSPC合并照光10 min,红细胞溶血度显著增加,AlSPC和20μg·ml~1合并照光10 min,使红细胞膜脂质过氧化大大加强,红细胞膜乙酰胆碱酯酶活力明显减低,使鼠肝线粒体ATP酶和微粒体葡糖-6-磷酸酶活力明显受抑,AlSPC对小鼠皮肤光敏反应持续时间短,用药后5d皮肤光敏反应消失