肺结核患者外周血白细胞中结核分支杆菌DNA检测及实验评价

目的探讨结核菌检测的新途径及其在肺结核诊断中的价值。方法应用聚合酶链反应技术对７６例肺结核患者（４０例同时留有疾标本），４２例非结核患者外周血标本进行了结核分支杆菌ＤＮＡ检测。结果利用聚合酶链反应检测外用血白细胞中结核菌ＤＮＡ对肺结核诊断的灵敏度为８６％，特异性为 ９０％，准确度达８７％；４０例外周血与疾标本的ＰＣＲ配对检测表明，血标本中的结核菌ＤＮＡ检出率明显高于痰标本。结论外周血白细胞中结核分支杆菌ＤＮＡ检测用于肺结核诊断具有较高的敏感性和准确性，明显优于痰标本，可作为肺结核诊断优良可靠的指标。     

肺结核患儿外周血白细胞中结核分支杆菌DNA的检测

肺结核患儿外周血白细胞中结核分支杆菌ＤＮＡ的检测傅清流黄秋生李庶甘聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术的应用使对结核病快速诊断成为可能。有关痰结核分支杆菌ＤＮＡ（ＴＢ－ＤＮＡ）检测报告较多，而对其外周血白细胞中ＴＢ－ＤＮＡ检测甚少。为解决临床上结核病患儿痰标本...     

聚合酶链反应检测肺结核患者外周血单个核细胞中结核分支杆菌DNA的临床价值

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术配对检测９２例肺结核患者外周血单个核细胞内和痰标本中结核分支杆菌ＤＮＡ，同时检测３０例非结核患者外周血。结果显示：外周血和痰标本ＰＣＲ阳性率分别为７１７％和５５４％，前者明显高于后者（Ｐ＜００５）；各型肺结核外周血和痰标本ＰＣＲ阳性率不尽相同；３０例非结核患者外周血ＰＣＲ阳性３例（１０％）。认为ＰＣＲ检测肺结核患者外周血单个核细胞内结核分支杆菌ＤＮＡ是一种快速、敏感的方法，可用于肺结核早期诊断与鉴别诊断     

聚合酶链反应检测肺结核患者外周血单个核细胞中结核分 …

探讨外周血单个核细胞中结核分支杆菌ＤＮＡ检测在肺结核诊断中的价值。方法采用改良Ｔｒｉｔｏｎ－ｘ－１００法分离，制备单个核细胞中模板，ＤＮＡ，聚合酶链反应扩增结核分支杆菌２４０ｂｐ基因片段，同时分析了影响ＰＣＲ结果的有关因素。结果８９例肺结核患者的血标本，８４例肺结核患者的痰标本中，结核分支杆菌ＤＮＡ阳性率分别为７３％和５７％；８４例肺结核患者外周血，痰标本配对检测总阳性率可达８７％。     

TaqMan聚合酶链反应技术检测结核分支杆菌DNA及其临？…

目的 探讨ＴａｑＭａｎ聚合酶链反应（ＴａｑＭａｎ－ＰＣＲ）技术在肺结构诊断中的价值。方法 对１６８例活动性肺结核、５７例肺癌患者的痰和外周血及３４－例健康对照外周血,同时应用ＴａｑＭａｎ－ＰＣＲ、ＰＣＲ检测,并与痰涂片法、ＢＡＣＴＥＣ法及改良罗氏培养法结果进行比较。结果 ＴａｑＭａｎ－ＰＣＲ检测痰和外周血总的阳性率分别为５３．０％和６１．３％,显著高于ＰＣＲ、痰涂片法、ＢＡＴＣＴＥＣ法及改良罗氏培     

结核病人外周血结核分支杆菌聚合酶链反应检测及临床意义

采用巢式聚合酶链反应 (ＰＣＲ)方法扩增结核病人外周血单核细胞 (ＰＢＭＣ)结核分支杆菌 (ＭＴＢ)ＩＳ6 110部分序列 ,并将其克隆与测序 ,结合临床资料分析探讨其临床意义。材料与方法　①对象 :我院 1999年住院的 77例活动性肺结核病人。另以同期住院的非结核病人 (10例肝炎 ,30例肺炎和慢性阻塞性肺疾病 )作对照。②ＰＣＲ引物 :根据Ｔｈｉｅｒｒｙ等[1] 报道的结核分支杆菌ＩＳ6 110序列 ,采用Ｇｏｌｄｋｅｙ软件 ,在其保守区设计两对套式引物 ,委托上海生工生物工程公司合成。引物序列为 :ＴＢ15′ＣＧＴＧＡＧＧＧＣＡＴＣＧＡＧＧＴ…     

DNA扩增抑制试验在聚合酶链反应检测结核分支杆菌中的作用

ＤＮＡ扩增抑制试验在聚合酶链反应检测结核分支杆菌中的作用张显忠郭爱军曹洪林杨明峰我们建立了ＤＮＡ扩增抑制试验，检测系统中抑制因素所造成聚合酶链反应（ＰＣＲ）试验的假阴性，以使ＰＣＲ技术更加完善。材料与方法：标本来源：病例系本院住院肺结核病患者，根据临...     

聚合酶链反应技术检测咽拭子标本中结核菌DNA的评价

为探讨聚合酶链反应（PCR）检测咽拭子标本中结核菌在诊断肺部疾病的价值。应用PCR法检测肺结核患者50例，非肺结核患者55例及100例正常健康人咽拭子标本中结核菌和咽拭子涂片找抗酸杆菌，并与痰涂片检查作比较。肺结核组、非肺结核组及正常健康人咽拭子PCR阳性率分别为60％、3O．9％及10％，涂片为6％、0％和0％。结核组及非结核组痰PCR阳，牲率为54％和10．9％，涂片为26％和0％。结果表明PCR检测咽拭子标本结核菌DNA是肺结核病早期诊断和鉴别诊断的一种有价值的检测手段。但应注意假阳性或假阴性出现的可能。     

Amplisensor—聚合酶反应定量检测脑脊液中结核分支杆菌DNA的研究

目的 探讨Amplisensor-聚合酶反应（Amplisensor-PCR)定量检测脑脊液中结核分支杆菌DNA（TB－DNA）对结核性脑膜炎的诊断价值。方法 采用Amplisensor-PCR对117例结核性脑膜炎患者及36例非结核性脑膜炎患者的脑脊液标本进行检测,并与PCR（凝胶电泳后,经溴化乙锭染色）、涂片、培养法比较。结果 Amplisensor-PCR的敏感性显著高于涂片及培养,阳性率分别为57．13％、1．7％、6．7％（P＜0．001）。结论 Amplisensor-PCR可以通过标准曲线划定检出下限,并可换算出标本中原始的靶DNA值,同时具有较高的特异性和敏感性,对结核性脑膜炎的诊断有一定的临床意义。     

聚合酶链式反应与DNA探针检测临床标本中结核分支杆菌的评价

本文应用ＰＣＲ联合ＤＮＡ探针快速检测临床标本中结核杆菌ＤＮＡ。对临床３０７例标本同时进行ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交。     

AmpliSensor—聚合酶链反应定量检测肺结核患者外周血结 …

目的 探讨ＡｍｐｌｉＳｅｎｓｏｒ－聚合酶链反应定量检测外周血中结核分支杆菌ＤＮＡ在肺结核的应用价值。方法 采用ＱｌＡａｍｐ和ＡｃｕＰｕｒｅ法提取，制备全血中模板ＴＢ－ＤＮＡ，应用ＡｍｐｌｉＳｅｎｓｏｒ－ＰＣＲ定量检测，并与ＩＳ６１１０－单管巢式聚合酶链反应（ＳＮ－ＰＣＲ）作比较。结果２００例肺结核患者的血液标本中，两种方法测得结核分支杆菌ＤＮＡ的阳性率分别为６０．５％、６３．５％。８５例非结核肺病     

聚合酶链式反应与DNA探针检测临床标本中结核分支杆菌的评价

本文应用ＰＣＲ联合ＤＮＡ探针快速检测临床标本中结核杆菌ＤＮＡ。对临床３０７例标本同时进行ＰＣＲ和Ｓｏｕｅｈｅｒｎ杂交。其中临床确诊为结核病的１０９例，二者的阳性率分别为４９．６％、６０．６％。未确诊结核病的１９８例，二者均为阳性２例、单纯ＰＣＨ阳性３例。结果表明ＤＮＡ探针检测的灵敏性和特异性高于ＰＣＲ。二者联合使用，有助于对疑难电泳图谱的分析和判断，降低假阴性和假阳性率。     

结核病患者外周血结核分支杆菌DNA、HBV-DNA检测及临床意义

编者按近年来，本刊和国内其他一些杂志相继发表了有关应用ＰＣＲ扩增技术于肺结核和肺外结核患者外周血单个核细胞以及血清中高比率检出结核分支杆菌核酸的报告，受到不少读者和有关专家的关注。以往认为，现行的培养法未能证明肺结核患者外周血中广泛存在结核分支杆菌。...     

三种快速检测结核分支杆菌方法的评价

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术、单克隆抗体（ＭｃＡｂ）ＴＢ１５－Ｃ３经酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）及抗酸染色等３种方法，对１０种抗酸杆菌及２种非分支杆菌进行检测。ＰＣＲ仅对结核分杆菌复合体扩增出２４５ｂｐ特异性条带，ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ检测除人型结核分支杆菌外，还与ＢＣＧ、鸟型及瘰疠分支杆菌反应阳性，抗酸染色则所有分支杆菌均呈阳性。用ＰＣＲ、ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ及抗酸染色检测了１２４份监床标本，Ｐ     

应用聚合酶链反应快速检测支气管肺泡灌洗液中的结核分支杆菌

应用聚合酶链反应快速检测支气管肺泡灌洗液中的结核分支杆菌董德琼杨渝浩彭理年肖瑜申茂权凌建华采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中的结核分支杆菌ＤＮＡ，并与涂片和培养法比较，以评价ＰＣＲ检测ＢＡＬＦ中结核分支杆菌在肺结核诊断中...     

应用多重聚合酶链反应法检测并鉴别结核分支杆菌与非结核分支杆菌DNA

OBJECTIVE: To improve the specificity and sensitivity of polymerase chain reaction (PCR) technique for detecting and identification of DNA of M. tuberculosis and M. nontuberculosis. METHOD: Three pairs of oligonucleotide primer were used in triplex-PCR. A 383 bp DNA fragment encoding part of the 65,000 mycobacterial surface antigen, a 123 bp fragment corresponding to a specific M. tuberculosis complex sequence which was the insertion sequence 6110 (IS 6110) and a 268 bp fragment for human beta-globin were amplified by triplex-PCR respectively. RESULT: The sensitivity of the triplex-PCR-electrophoresis for the DNA of mycobacterium was 0.6 pg. The specific bands of 383 bp and 123 bp among the amplified DNA from M. hominis, M. bovis, BCG and M. simiae were present in the agarose gel. By contrast, only a band of 383 bp was found among the M. nontuberculosis which contained M. avium, M. chelonae, M. scrofulaceum, M. xenopi, M. kansasii, M. intracellulare and M. smegmatis. Compared with the standard strains, there was an additional 268 bp band in simulated clinical samples infected by Mycobacterium. The above 3 specific bands were found neither in other 15 bacterial species tested nor in Mycoplasma pneumoniae. 182 clinical samples were examined by culture, smear and triplex-PCR. 72 nontuberculous clinical samples were all negative. In 110 tuberculosis clinical samples, the positive rates were 2.7%, 13.6% and 32.7%, respectively. CONCLUSION: The triplex-PCR possesses a high specificity and sensitivity. This method could detect and identify the DNA of M. tuberculosis and M. nontuberculosis except M. simiae. It is a valuable tool for early diagnosis and differentiation for infection of M. tuberculosis and M. nontuberculosis.     

聚合酶链反应DNA扩增对活动性肺结核的诊断价值

为探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）ＤＮＡ扩增对诊断活动性肺结核的临床价值，本文用ＰＣＲ技术扩增结核杆菌特有的ＭＰＢ６４蛋白基因序列，对１２１例病人临床标本进行检测。发现３４例活动性肺结核中有２８例ＰＣＲ阳性；疑诊为肺结核者３３例中有１８例阳性；非结核肺疾患５４例中有１０例阳性，其中有肺结核既往史者阳性６例，有结核接触史者阳性３例。提示ＰＣＲ阳性并非为活动性肺结核所特有。     

Amplisensor-聚合酶反应定量检测脑脊液中结核分支杆菌DNA的研究

目的　探讨Amplisensor-聚合酶反应 (Amplisensor-PCR)定量检测脑脊液中结核分支杆菌DNA(TB-DNA)对结核性脑膜炎的诊断价值。方法 采用Amplisensor-PCR对117例结核性脑膜炎患者及36例非结核性脑膜炎患者的脑脊液标本进行检测,并与PCR(凝胶电泳后,经溴化乙锭染色)、涂片、培养法比较。结果 Amplisensor-PCR的敏感性显著高于涂片及培养,阳性率分别为57.13%、1.7%、6.7% (P＜0.001)。结论 Amplisensor-PCR可以通过标准曲线划定检出下限,并可换算出标本中原始的靶DNA值,同时具有较高的特异性和敏感性,对结核性脑膜炎的诊断有一定的临床意义。     

结核分支杆菌DNA的单管巢式聚合酶链反应检测

目的探讨单管巢式聚合酶链反应（ＳＮＰＣＲ）检测石蜡包埋组织结核分支杆菌ＤＮＡ的特异性和敏感性。方法应用普通ＰＣＲ（ＧＰＣＲ）、双管巢式ＰＣＲ（ＤＮＰＣＲ）和ＳＮＰＣＲ对结核分支杆菌ＢＣＧ和３０例结核性淋巴结炎石蜡包埋组织进行结核分支杆菌复合群ＩＳ６１１０特异插入序列片段ＤＮＡ检测。结果ＤＮＰＣＲ和ＳＮＰＣＲ检测ＢＣＧＤＮＡ均于１５ｆｇ以上呈现阳性结果，其敏感性明显优于ＧＰＣＲ（４８０ｆｇ）。ＧＰＣＲ、ＤＮＰＣＲ和ＳＮＰＣＲ检测３０例结核性淋巴结炎阳性率分别为４３％、１００％和１００％，抗酸染色阳性率（１０％）与３种ＰＣＲ法相比差异有非常显著意义（均Ｐ＜０．０１）。ＧＰＣＲ阳性率与ＤＮＰＣＲ和ＳＮＰＣＲ相比差异亦具非常显著意义（均Ｐ＜０．０１）。ＳＮＰＣＲ阳性率与ＤＮＰＣＲ相同。结论巢式ＰＣＲ检测淋巴结石蜡包埋组织结核分支杆菌的敏感性显著高于ＧＰＣＲ，其中ＳＮＰＣＲ具有与ＤＮＰＣＲ相同的特异性和敏感性，并具有更大的实用价值。     

荧光定量PCR检测胸腔积液中结核分支杆菌DNA的临床研究

目的评价荧光定量PCR检测胸腔积液中结核分枝杆菌DNA的临床价值。方法随机入选120例胸腔积液患者,确诊为结核性胸腔积液78例,非结核性胸腔积液42例。两组均进行荧光定量PCR检测结核分枝杆菌DNA。结果荧光定量PCR检测胸腔积液结核分枝杆菌DNA诊断结核性胸腔积液的灵敏性、特异性、阳性预测率以及阴性预测率分别为38.5%、95.2%、93.8%、45.5%。结论荧光定量PCR测定胸腔积液中结核分枝杆菌DNA在诊断结核性胸腔积液临床应用中,具有操作简便、时效性强,并且敏感性较高、特异性好的特点,为快速准确诊断结核性胸腔积液提供了有效手段。