水飞蓟素对肾小管间质纤维化大鼠血管紧张素Ⅱ表达的影响

目的 探讨水飞蓟素对肾间质纤维化大鼠血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)表达的影响.方法 56只雄性SD大鼠完全随机分为假手术组8只,梗阻组24只,治疗组24只.梗阻组和治疗组大鼠利用单侧输尿管结扎法诱导肾小管间质纤维化模型,治疗组于治疗前30 min开始给予水飞蓟素30 mg/(kg·d)灌胃,梗阻组和假手术组同期给予生理盐水灌胃.梗阻组和治疗组分别于实验第7、14、21天各处死大鼠8只,假手术组于第21天处死全部大鼠,术侧肾组织观察病理变化并应用免疫组织化学方法检测肾组织AngⅡ的表达.结果 假手术组、梗阻组与治疗组第21天时肾小管间质评分为(0.14±0.09)、(2.49±0.26)、(1.89±0.24)分;AngⅡ的表达分别为(0.24±0.07)%、(12.26±0.18)%、(8.48±0.44)%;梗阻组与治疗组各指标明显高于假手术组,治疗组低于梗阻组.结论 水飞蓟素可能是通过下调AngⅡ表达而抑制纤维化的发生,从而起到对肾脏的保护作用.

Abstract：

Objective To investigate the effects of silymarin on the expression of Angiotensin Ⅱ in the kidneys of rats ith unilateral ureteral obstruction(UUO) -induced renal fibrosis. Methods Fifty-six rats were randomly assigned to shame peration group,operation group and silymarin[30 mg/(kg·d)] treatment group after unilateral ureteral obstruction. Tubulointerstitial fibrosis model was established via unilateral ureteral obstruction(UUO).Renal tissues were examined by light microscopy 7,14,21 days after operation. Immunhistochemistry was applied to measure the expression of Angiotensin Ⅱ in the renal interstitium. Results Silymarin may significantly ameliorate pathological change of nephridial tissue after unilateral ureteral obstruction. Silymarin may down-regulate the expression of Angiotensin Ⅱ in renal tissue. Conclusion Silymarin may inhibit renal fibrosis by down-regulating Angiotensin Ⅱ expression,which may play a key role in protection against renal fibrosis.     

水飞蓟素对肾间质纤维化大鼠AngⅡ、NF-κB表达的影响

目的:探讨水飞蓟素对肾小管间质纤维化大鼠AngⅡ、NF-κB表达的影响.方法:随机将13周龄SD大鼠56只分为假手术组8只、梗阻组24只和水飞蓟素治疗组24只.采用左侧输尿管结扎术造成肾间质纤维化模型,分为梗阻组和治疗组,分别于实验d7、d14、d21对梗阻组和治疗组各处死大鼠8只,假手术组于d21处死全部大鼠,观察术侧肾组织病理变化并应用免疫组织化学方法检测肾组织AngⅡ及NF-κBp65的表达.结果:肾小管间质评分显示水飞蓟素在各观察时间点能显著改善肾组织纤维化,降低肾间质评分;免疫组化提示水飞蓟素显著下调AngⅡ及NF-κBp65各时间点的表达.结论:水飞蓟素可能是通过下调AngⅡ、NF-κBp65的表达从而起到对肾脏的保护作用.     

红景天在肾间质纤维化大鼠模型中的作用及对CTGF、PDGF-B表达的影响

目的:探讨红景天提取物(rhodiola)在肾间质纤维化中的保护作用及其机制。方法:采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型。将大鼠随机分成4组:假手术组、模型组、依那普利组、红景天组。术后第10天处死各组大鼠,经Western蛋白印迹分析方法检测各组结缔组织生长因子(CTGF)、血小板源性生长因子B(PDGF-B)的蛋白表达水平。用免疫组化半定量检测各组肾间质的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,Masson染色评定各组肾小管间质损害程度。结果:模型组CTGF、PDGF-B、α-SMA的表达及肾小管间质损伤指数明显高于假手术组(P<0.01),红景天及依那普利治疗组明显低于模型组(P<0.01)。组间比较,CTGF、PDGF-B差异有极显著性(P<0.01),α-SMA、肾小管间质损伤指数无显著性差异(P>0.05)。各项指标作相关分析,CTGF与PDGF-B,α-SMA的表达及肾小管间质损伤指数为正相关关系。结论:红景天可抑制肾间质纤维化,其作用可能与下调CTGF、PDGF-B的表达有关。     

水飞蓟素对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的保护作用

<正>水飞蓟植物被作为一种传统药物预防肝脏纤维化广泛用于临床。肝纤维化的发生机制主要为肝脏中细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)合成与降解失衡,导致细胞外基     

γ-氨基丁酸对慢性肾衰竭大鼠 肾小管间质纤维化的抑制作用

［摘要］目的建立大鼠慢性肾衰竭模型,观察γ 氨基丁酸（GABA）对慢性肾衰竭大鼠肾小管间质纤维化的抑制作用并对其机制进行研究。方法5/6肾切除法建立慢性肾衰竭大鼠模型,大鼠随机分为3组：对照组,慢性肾衰竭组（模型组）,慢性肾衰竭GABA给药组（治疗组）。手术后60 d处死各组大鼠,测定各组大鼠血清尿素氮和肌酐水平,观察第60天肾脏组织病理改变,免疫组化法检测肾组织转化生长因子 β1（TGF β1）、基质金属蛋白酶抑制物 1（TIMP 1）的表达,应用逆转录 聚合酶链反应（RT PCR）方法检测肾组织TIMP 1 mRNA的表达水平。结果与模型组比较,治疗组大鼠肾功能改善,残肾组织肾小管萎缩及肾小管间质纤维化减轻,而肾小球硬化改变不明显。 结论GABA可以通过抑制肾小管间质纤维化和肾小管萎缩,改善5/6肾切除肾衰竭大鼠的肾功能。     

Rofecoxib对肾间质纤维化大鼠TGF-及肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨Rofecoxib对肾间质纤维化大鼠的肾脏保护机制。方法以UUO建立肾间质纤维化大鼠模型,随机分为假手术组、UUO组及Rofecoxib干预组,检测不同时间点肾脏COX-2、TGF-1及肾小管上皮细胞凋亡的表达。结果与假手术组相比,UUO组随着模型时间延长,TGF-β、COX-2蛋白表达明显增加,可检测到较多的凋亡细胞（P〈0．01）,用药组与UUO组平行相比TGF-β,、COX-2蛋白表达明显减少（P〈0．01）,凋亡细胞明显减少（P〈0．01）。结论特异性COX-2抑制剂Rofecoxib可能通过阻断UUO大鼠肾组织COX-2活性,下调TGF-的蛋白合成,减少肾小管细胞的过度凋亡,起到肾脏保护的作用。     

红花黄色素对实验性肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的观察红花黄色素注射液对肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞凋亡的的影响,探讨其肾脏保护机制。方法45只雄性SD大鼠,随机分为假手术组（A组）、单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction;UUO）组（B组）、UUO联合红花黄色素治疗组（C组）,各15只。C组红花黄色素5mg/（kg·d）,造模术前1d开始腹腔注射给药,各组术后10d处死大鼠,处死后取术侧肾组织行HE、Masson染色,TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡。结果B组、C组可见明显肾间质纤维化的病理改变,可检测到凋亡细胞。C组与B组相比,肾间质纤维化病变程度较轻,凋亡细胞明显减少（P〈0.01）。结论注射用红花黄色素对大鼠肾间质纤维化有保护作用,这种作用可能通过抑制肾小管细胞过度凋亡实现。     

温阳活血方对UUO大鼠肾组织CTGF表达的影响

目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)在肾间质纤维化中的表达及温阳活血方的干预作用。方法采用单侧输尿管结扎(UUO)肾间质纤维化模型。将大鼠随机分为4组,即:假手术组、模型组、温阳活血治疗组、蒙诺组。药物治疗14天后,收集尿液,检测尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG),处死大鼠,腹主动脉采血观察肾功能,取肾组织观察其病理改变,并应用免疫组织化学方法检测肾组织CTGF的表达。结果模型组大鼠尿NAG,血尿素氮(BUN)较假手术组显著升高,温阳活血方组尿NAG和血BUN较模型组显著降低;模型组肾组织表现为纤维化病理改变,假手术组肾小管上皮细胞、肾间质细胞胞浆CTGF有较弱的表达;模型组呈强阳性表达;温阳活血组病理改变较模型组纤维化程度减轻,且CTGF的阳性表达较模型组显著减弱,差异有统计学意义(P<0.05),与蒙诺组比差异无统计学意义。结论温阳活血方可降低UUO大鼠尿NAG和血BUN,而具有保护肾小管功能和改善肾功能作用,可能与其能抑制肾组织CTGF过度表达而减缓肾纤维化病程进展。     

CTGF siRNA质粒对UUO小鼠肾脏间质纤维化的影响

目的利用单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾纤维化模型,采用尾静脉注射的方法整体转染CTGF-siRNA质粒抑制肾脏结缔组织生长因子(CTGF)的表达,观察敲低CTGF表达对肾脏间质纤维化的影响。方法制备UUO模型及活体CTGF基因转染;应用免疫组织化学染色法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;Western blot检测CTGF及α-SMA蛋白的表达;半定量RT-PCR检测α-SMA mRNA的表达。结果转染CTGF-siRNA质粒的UUO小鼠CTGF及α-SMA的基因表达明显下降(P<0.05)。结论经小鼠尾静脉注射CTGF siRNA质粒能显著抑制小鼠肾CTGF和α-SMA基因表达并能有效抑制小鼠肾脏间质纤维化,提示CTGF siRNA有潜力成为防治肾脏间质纤维化的一种新策略。     

百令胶囊对肾小管间质纤维化大鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白表达的影响及意义

目的观察百令胶囊对肾小管间质纤维化大鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscleactin,α-SMA）表达的影响,探讨百令胶囊肾脏保护作用的可能机制。方法雄性3个月龄SD大鼠90只,随机分为：对照组（30只）,模型组（30只）,预防组（30只）,以腺嘌呤灌胃法建立大鼠肾小管间质纤维化模型,预防组加以1.5 g/（kg.d）百令胶囊溶于生理盐水灌胃以预防肾小管间质纤维化;对照组以等体积的2%淀粉溶液和生理盐水灌胃。分别于实验第7、12、17周时随机处死10只大鼠,进行血肌酐（creatinine,Cr）、尿素氮（blood urea nitrogen BUN）,24 h尿蛋白定量和尿N乙-酰-β-D氨-基葡萄糖苷（N-a-cetylβ--D-glucosam inidase,NAG）酶检测,光镜下观察肾组织的病理变化及免疫组织化学法检测肾脏转化生长因子-β1（transform ing growth factor-beta1,TGFβ-1）、α-SMA的表达情况。结果①功能学变化：与对照组比较,各时相点模型组、预防组大鼠尿蛋白、尿NAG酶、血Cr及血BUN均升高（P〈0.01）,但预防组低于模型组（P〈0.01）;模型组、预防组自身对照各指标均较前一时相点升高（P〈0.01）。②病理学变化：7周时模型组、预防组即有肾小管间质损害;模型组、预防组自身对照肾小管间质损害均较前一时相点加重（P〈0.01）,但7、12周时预防组肾小管间质损害均较模型组为轻（P〈0.01）,17周时两组间差异无统计学意义（P=0.670）。③免疫组化：各时相点模型组、预防组大鼠肾脏TGFβ-1、α-SMA的表达均高于对照组（P〈0.01）,但预防组均低于模型组（P〈0.01）,模型组、预防组自身对照均较前一时相点升高（P〈0.01）,17周时表达量最高。结论百令胶囊可能通过抑制α-SMA,在肾小管间质纤维化早期应用时起到保护作用。     

洛伐他汀联合厄贝沙坦对梗阻性肾病大鼠骨桥蛋白及肾间质纤维化的影响

目的探讨洛伐他汀联合厄贝沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠骨桥蛋白（OPN）表达及肾间质纤维化的影响。方法将试验用SD大鼠随机分为4组（n=10）：假手术对照组、单侧输尿管结扎组（UUO组）、厄贝沙坦组（60mg/L）、联合治疗组（洛伐他汀20mg/L联合厄贝沙坦60mg/L）。对照组及模型组仅予等量生理盐水灌胃。观察各组大鼠第6周肾功能、24h尿蛋白和肾组织病理学改变,并检测肾组织骨桥蛋白的表达。结果与模型组比较,厄贝沙坦治疗能使OPN的表达降低（P〈0.05）,使24h尿蛋白及血清肌酐（Scr）降低（P〈0.05）,肾组织病理损害减轻,肾小管间质面积较模型组显著减少（P〈0.01）;而洛伐他汀联合厄贝沙坦治疗后,OPN的表达降低更为显著,肾功能及肾组织病理损害改善更为明显。结论洛伐他汀联合厄贝沙坦可明显降低单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质OPN的表达,减轻肾小管间质纤维化而发挥肾脏保护作用。     

姜黄素对肺纤维化大鼠结缔组织生长因子表达的影响

目的研究姜黄素对博来霉素诱导肺纤维化大鼠结缔组织生长因子表达的影响。方法SD雄性大鼠72只,分为对照组、模型组、姜黄素治疗组,每组24只。对照组大鼠气管内一次性滴注等体积的生理盐水,其余各组大鼠气管内一次性滴注盐酸博来霉素。造模后第1天姜黄素治疗组开始给药为200mg.kg-1.d-1,持续到处死动物的前1d。对照组、模型组分别灌服等体积的生理盐水。各组动物于7、14、28d随机处死8只,取肺组织进行HE、Mallory染色,同时进行免疫组织化学染色,结合图像分析来检测各组肺组织中结缔组织生长因子蛋白的表达水平。结果模型组大鼠结缔组织生长因子表达水平与对照组比较显著增高(P<0.01);姜黄素治疗组大鼠结缔组织生长因子表达水平与对照组和模型组比较差异有统计学意义(均为P<0.05)。结论姜黄素具有抗肺纤维化形成的作用,可能与其抑制结缔组织生长因子在肺组织中的表达有关。     

辛伐他汀抑制大鼠炎症性肠病结肠纤维化结缔组织生长因子的表达

目的探讨大鼠炎症性肠病(IBD)结肠纤维化结缔组织生长因子(CTGF)的表达及辛伐他汀对其影响。方法 32只SD大鼠均分为对照组、IBD模型对照组、辛伐他汀低剂量(5mg/kg)和高剂量(20mg/kg)干预组。21d后观察结肠病理组织学变化;RT-PCR和Western blot检测结肠Ⅰ型胶原、CTGF mRNA和蛋白表达。结果与对照组相比,模型组结肠黏膜及黏膜下层见大量炎症细胞浸润,纤维组织增生,Ⅰ型胶原和CTGF表达增多(P<0.01)。辛伐他汀干预后,病理组织学较模型组改善,Ⅰ型胶原和CTGF表达明显下降(P<0.05)。结论 CTGF参与结肠炎大鼠肠纤维化形成,辛伐他汀可能通过抑制CTGF的表达减轻IBD肠纤维化进展。     

海昆肾喜对慢性肾衰竭大鼠肾脏保护作用及其机制探讨

目的：观察海昆肾喜对慢性肾衰竭模型大鼠的肾脏保护作用,并初步探讨其机制。方法：将Wistar雄性大鼠随机分为3组,即：（1）正常对照组（n=15）;（2）CRF模型组（n=15）,给予腺嘌呤200 mg.kg-1.d-1;（3）海昆治疗组（n=15）,给予腺嘌呤200 mg.kg-1.d-1同时给予海昆200 mg.kg-1.d-1,持续喂养4周,于每周末称重、收集大鼠尿标本,测定24 h尿蛋白;第4周末取血,仪器法检测血肌酐、尿素氮,并留取肾组织,切片HE染色,免疫组化方法半定量分析肾组织中结缔组织生长因子（CTGF）的表达。结果：海昆治疗组大鼠各时间段24 h尿蛋白均明显低于模型组（P〈0.05）,血肌酐、尿素氮水平明显低于模型组（P〈0.05）。海昆治疗组大鼠肾组织CTGF蛋白表达明显低于模型组（P〈0.05）。结论：应用海昆肾喜治疗可以减少腺嘌呤致肾衰竭大鼠的尿蛋白排泄,降低血肌酐、尿素氮,减轻肾纤维化程度,其肾脏保护作用机制可能与抑制CTGF蛋白表达有关。     

肝细胞生长因子对心肌成纤维细胞结缔组织生长因子表达的影响

目的通过体外培养的新生大鼠心肌成纤维细胞研究肝细胞生长因子(HGF)对结缔组织生长因子表达(CTGF)的影响。方法差速贴壁法分离新生SD大鼠心肌成纤维细胞(CFs)及免疫组化法对其进行鉴定,选AngⅡ(10~(-6)mol/L)作诱导浓度,与HGF100ng/ml孵育48h,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定CFsCTGFmRNA的表达,WesternBlot法测定CTGF蛋白的表达。结果肝细胞生长因子能够在mRNA及蛋白水平上大部分抑制AngⅡ对CTGF表达的诱导。结论初步证实在心肌纤维化的过程中,HGF与CTGF是一对拮抗生长因子,HGF可能通过抑制CTGF表达的途径逆转心肌纤维化。     

ADAMTS-1对博莱霉素所致肺成纤维细胞纤维化的影响

目的：探讨Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶（ADAMTS-1）对博莱霉素诱导的大鼠肺成纤维细胞纤维化的影响及其机制。方法实验分为六组,博莱霉素组（Ⅱ组）在大鼠肺成纤维细胞中加入博莱霉素建立肺纤维化模型,在加入博莱霉素的同时分别加1、2、4μg ADAMTS-1（Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组）,并与只加4μg ADAMTS-1（Ⅵ组）和正常大鼠肺成纤维细胞（Ⅰ组）进行对照。加入博莱霉素及ADAMTS-1处理24 h后,运用实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测结缔组织生长因子（CTGF）、Ⅰ型胶原（COLⅠ）mRNA表达量,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养上清液中CTGF、COLⅠ质量浓度。结果Ⅱ组CTGF、COLⅠmRNA表达量及细胞培养上清液中质量浓度明显高于其他各组,而Ⅲ~Ⅵ组与Ⅱ组比较,不但CTGF、COLⅠmRNA表达降低,而且细胞培养上清液中质量浓度也明显下降,以Ⅵ组最低,差异有统计学意义（P＆lt;0.05）。结论 ADAMTS-1在一定程度上呈剂量依赖性抑制博莱霉素诱导的大鼠成纤维细胞纤维化。     

血清TGF-β1和CTGF水平与急性冠脉综合征的关系

目的:探讨急性冠脉综合征(ACS)患者血清转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)浓度与冠状动脉病变支数和狭窄程度的关系.方法:选择因胸痛入院的患者90例分为ACS 组和正常对照组,入院择日行选择性冠状动脉造影术,以病变支数及Gensini积分评价冠脉病变程度,采用酶联免疫吸附法检测所有患者血清TGF-β1和CTGF水平.结果:ACS组的TGF-β1水平显著低于对照组(P<0.01),ACS组的CTGF水平显著高于对照组(P<0.05);不同冠脉病变支数与TGF-β1水平间差异有统计学意义,3支病变组和2支病变组均低于1支病变组(均P<0.05);不同冠脉病变支数与血清CTGF水平间差异有统计学意义,3支病变组和2支病变组均高于1支病变组(均P<0.05);血清TGF-β1浓度与Gensini评分间呈负相关(r=-0.096,P<0.05),血清CTGF浓度与Gensini评分呈正相关(r=0.139,P<0.05).结论:TGF-β1是ACS的保护因子,能够增加斑块稳定性和抑制斑块狭窄,CTGF与病变程度相关,能够参与冠脉狭窄形成和加重斑块的不稳定性.