环磷酰胺及其代谢产物作用于卵巢癌细胞SKOV3后对PTEN基因的影响

目的 探讨环磷酰胺(CP)及其代谢产物丙烯醛(ACR)作用卵巢癌细胞SKOV3后对人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)的影响.方法 选择不同浓度CP及其代谢产物ACR作用重组PTEN蛋白,采用硝基苯磷酸二钠(PNPP)检测PTEN的磷酸化活性,Western blot技术检测蛋白表达,通过生物素与蛋白结合检测药物与蛋白的结合方式;同时分析PTEN基因通路P53/TP53的表达改变;不同药物浓度作用细胞后通过免疫沉淀(IP)方法得到目的蛋白,通过离效液相色谱(HPLC)检测其蛋白磷酸化活性.结果 药物代谢产物作用重组PTEN蛋白后其磷酸化活性随着药物浓度的增高而降低,ACR抗体作用表达随着药物浓度增高表达增多,不同实验组蛋白与生物素表达随药物浓度增高而增多,在细胞中随着药物浓度增高PTEN磷酸化活性降低,TP53蛋白表达随着药物浓度增加而减少.结论 CP代谢产物ACR可通过抑制PTEN蛋白磷酸化活性引起细胞毒性.     

PTEN在原发性乳腺癌中的表达和临床意义

目的 :研究抑癌基因PTEN在原发性乳腺癌组织中的表达及意义。方法 :应用免疫组织化学S -P法 ,检测了 5例正常乳腺组织、14例乳腺增生病 (不伴非典型增生 )组织和 40例乳腺癌中PTEN蛋白的表达。结果 :5例正常乳腺组织、14例乳腺增生病组织中均有PTEN蛋白的表达。 40例乳腺癌组织中 ,PTEN蛋白阳性表达 2 8例 ( 70 % ) ,表达强度与乳腺癌分化程度有关 (P <0 .0 0 1)。分化越差 ,PTEN蛋白表达越弱。结论 :乳腺癌组织中有抑癌基因PTEN的表达缺失 ,其异常表达可能与乳腺癌的发生、发展及预后有关     

PTEN在膀胱移行细胞癌中的表达缺失和意义

目的 探讨PTEN基因在膀胱移行细胞癌中的表达缺失及其临床意义.方法 用免疫组织化学SP法检测62例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱组织中PTEN蛋白的表达.结果 PTEN蛋白在正常膀胱组织均为阳性,在膀胱移行细胞癌中阳性表达率为46.77%(29/62).随肿瘤恶性程度的增高,PTEN蛋白表达减少,Ⅰ级与Ⅲ级比较,差异有统计学意义(P<0.01);随临床分期的增高,PTEN蛋白表达减少,但差异无统计学意义(P0.05).结论 PTEN基因与膀胱移行细胞癌病理分级、临床分期密切相关,PTEN蛋白异常表达可作为膀胱移行细胞癌肿瘤标志物.     

抑癌基因PTEN与乳腺癌的研究进展

抑癌基因PTEN／MMAC1／TEP。的表达异常较多见于乳腺癌，PTEN基因失活与乳腺癌的发病机理，浸润转移，恶性转化，无限制生长及临床预后有一定关系。PTEN蛋白的表达随乳腺癌病情的进展而降低．PTEN蛋白的低表达与乳腺癌的不良预后有关。本文综述了PTEN的结构、功能、突变与乳腺癌的关系的最新研究进展。     

PTEN、Rb基因蛋白在乳腺癌中的表达及其意义

目的:探讨张力蛋白同源物磷酸酯酶(PTEN)、视网膜母细胞瘤(Rb)基因蛋白异常表达在乳腺癌发生、发展中的作用及其意义。方法:应用免疫组织化学S-P法检测PTEN、Rb基因蛋白在150例乳腺癌标本及30例乳腺良性增生性病变中的表达,并分析其异常表达与乳腺癌若干临床病理参数的关系。结果:PTEN、Rb基因蛋白在乳腺癌组与乳腺良性病变组异常表达差异均有统计学意义(P<0.005)。PTEN基因蛋白的失表达与乳腺癌淋巴结转移、雌激素受体(ER)失表达有一定关系(P<0.05)。Rb基因蛋白的失表达与各临床病理参数均无关,只是在乳腺癌Ⅲ级中失表达率较高。ER的表达与Rb蛋白的表达具有相关性(P<0.05)。结论:PTEN、Rb基因蛋白在乳腺良性病变中有很高的表达率,在乳腺癌中表达率下降,表明其肿瘤抑制功能丧失,促进细胞的肿瘤性转化。PTEN蛋白的表达与淋巴结转移、ER失表达相关,对乳腺癌的预后判断有参考价值。     

乳腺癌组织抑癌基因PTEN的表达及其意义

目的研究抑癌基因PTEN在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化技术（S-P）检测72例乳腺癌中PTEN的表达情况。结果PTEN总的表达缺失率为62.5%（45/72）。PTEN表达缺失率与乳腺癌的组织学分级,TNM临床分期,腋窝淋巴结转移和生存时间有关（P〈0.05）,而与肿瘤的大小和ER、PR状况无关。结论检测乳腺癌PTEN在蛋白水平的表达缺失状况可能有助于对其预后的判断。     

抑癌基因PTEN对乳腺癌细胞生长增殖的影响

目的研究PTEN基因表达对乳腺癌细胞生长增殖的影响。方法将分别携带有野生型、突变型PTEN基因的真核表达载体pBP—wt—PTEN以及pBP—G129R—PTEN,以脂质体介导法转人人PTEN表达缺失的乳腺癌细胞ZR-75—1中,嘌呤霉素筛选获得稳定表达PTEN基因的转染细胞,通过细胞活力实验、流式细胞术观察PTEN基因对ZR-75—1细胞生长增殖的影响。结果稳定转染PTEN基因的ZR-75—1细胞中不仅PTEN蛋白稳定表达,而且其生长速度较对照组明显减慢。流式细胞术显示,细胞周期发生G1期阻滞。结论外源性PTEN基因导入ZR-75—1细胞后,可引起ZR-75—1细胞生长阻滞,抑制肿瘤细胞增殖。     

原发性乳腺癌中PTEN、ER、PR的检测及临床意义

目的:研究PTEN、ER、PR在原发性乳腺癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学S-P法,检测了5例正常乳腺组织、14例乳腺增生病(不伴非典型增生)组织和40例乳腺癌中PTEN蛋白的表达;EnVision法检测乳腺癌组织中ER、PR的表达。结果:5例正常乳腺组织、14例乳腺增生病组织中均有PTEN蛋白的表达。40例乳腺癌组织中,PTEN蛋白阳性表达率70％(28/40),表达强度与乳腺癌分化程度有关(P<0.001)。分化越差,PTEN蛋白表达越弱。此外,PTEN蛋白阴性表达的乳腺癌,25％(3/12)为ER/PR阳性;而PTEN蛋白表达较强的乳腺癌中,60.7％为ER/PR阳性。两者差异有显著性(P<0.05)。结论:乳腺癌组织中有抑癌基因PTEN的表达缺失,其异常表达可能与乳腺癌的发生、发展及预后有关。     

乳腺癌中PTEN、基质金属蛋白酶-2基因蛋白的表达及临床意义

目的:探讨PTEN、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)基因蛋白在乳腺癌中的表达及与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、c-erbB-2蛋白表达以及临床病理特征的相关性。方法:采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶法(S-P法)检测PTEN、MMP-2、ER、PR及c-erbB-2蛋白在68例乳腺浸润性导管癌组织中的表达。结果:68例乳腺癌组织中PTEN、MMP-2基因蛋白的阳性率分别为42.6%和54.4%。PTEN在分化较好的乳腺癌(I-Ⅱ级)及分期较早的乳腺癌(TNM分期为I～Ⅱ期)中的表达率较高(P<0.01)。PTEN表达与ER、PR表达呈正相关(P<0.01),与c-erbB-2表达呈负相关(P< 0.01)。MMP-2表达与c—erbB-2表达呈正相关(P<0.01)。结论:PTEN基因蛋白失表达与乳腺癌组织的差分化及较高的侵袭性、乳腺癌细胞ER、PR蛋白含量降低及癌基因c-erbB-2蛋白含量增加有关:MMP-2蛋白表达可能与癌基因c- erBB-2在乳腺癌的发生和发展过程中具有协同作用。     

PTEN基因在人肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的:研究人原发性肝癌(HCC)PTEN基因的表达及其临床意义.方法:用RT-PCR和免疫组织化学方法分别检测人HCC组织、癌旁组织、正常组织中PTEN-mRNA和人HCC组织、癌旁组织中PTEN蛋白的表达情况.结果:PTEN mRNA在人的正常组织、癌旁组织、HCC组织中的表达依次降低,差异有统计学意义(P＜0.01);PTEN蛋白的表达在人HCC组织显著低于癌旁组织(P=0.038).PTEN基因的表达与临床分期、门脉癌栓、病理分级有密切的关系(P=0.031, P=0.001, P=0.025).临床分期为Ⅰ～Ⅱ期的,其表达较Ⅲ～Ⅳ期的高;无门脉癌栓的较有门脉癌栓的表达高;病理分级为Ⅰ～Ⅱ级的较Ⅲ～Ⅳ级的表达高.结论:HCC的发生中可能存在PTEN 基因的突变或缺失.PTEN基因的表达缺失可能与HCC的恶性程度、疾病的进程及HCC的侵袭转移有密切关系.PTEN基因低表达,HCC病人病程较晚、肝癌的恶性程度较高,较容易发生侵袭转移,预后较差.     

Exogenous PTEN Gene Induces Apoptosis in Breast Carcinoma Cell Line MDA468

The effects and mechanisms of exogenous phosphatase and tensin homolog deleted from chromosome ten (PTEN) gene on phosphatase activity-dependent apoptosis of breast cancer cell line MDA468 were investigated. PTEN gene packaged with lipofectin was transferred into breast cancer cell line MDA468 and parental MDA468 cells served as controls. RT-PCR and Western blot were done to detect the expression of target genes. The expression of phosphospecific protein kinase B (PKB/Akt) and focal adhesion kinase (FAK) protein stimulated by epidermal growth factor (EGF) was also detected. Apoptosis was determined by flow cytometry with a double-staining method using FITC-conjugated annexin V and PI. MDA468 cells transfected with PTEN gene could express PTEN mRNA and protein. PTEN decreased the phosphorylation level of AKT protein and down-regulated FAK protein expression in MDA468 stimulated by EGF. The apoptosis rate was 21.68%. PTEN in-duced breast cancer apoptosis phosphatase activity-dependently. The mechanism is possibly related with phosphoinositide 3-kinase (PI3K)/protein kinase B (PKB)/AKT signaling pathway. Those results may provide new clues on the gene therapy in breast cancer.     

PTEN基因蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 :探讨抑癌基因PTEN蛋白的表达水平对判断乳腺癌生物学行为和预后的临床意义。方法 :采用免疫组织化学S P法 ,检测 42例石蜡包埋乳腺癌组织和 40例乳腺小叶增生组织中PTEN蛋白的表达水平。结果 :PTEN蛋白在乳腺癌组织中的高表达率比乳腺小叶增生低 (P <0 0 1)。PTEN基因蛋白表达与肿瘤大小、组织学分级、临床分期和肿瘤复发无相关性 ,<45岁患者PTEN表达比 >45岁偏低 (P <0 0 5 ) ;PTEN高表达与腋淋巴结转移情况有显著负相关性 (P <0 0 1) ;与ER受体呈正相关性。PTEN基因蛋白高表达与远处转移有负相关性 ;与 5年生存率呈正相关性 (P <0 0 1)。结论 :PTEN蛋白表达异常与乳腺癌发生、发展相关 ,可考虑作为判断乳腺癌生物学行为和预后的指标     

外源性PTEN基因诱导人乳腺癌MDA468细胞凋亡

目的 研究外源性PTEN基因依赖其磷酸酶活性诱导人乳腺癌MDA468细胞凋亡。方法 应用分子克隆技术构建重组质粒pcDNA3．1-PTEN,以脂质体转染法转染人乳腺癌细胞株MDA468,对照组为pcDNA3．1(-)空载体质粒转染组和未转染组。应用RT-PCR、Western印迹法分析目的基因的表达;在表皮生长因子(EGF)的诱导下,采用Western印迹方法检测转染后磷酸化蛋白激酶B(PKB／Akt)的表达及细胞在黏附和失黏附状态下的黏着斑激酶的表达;膜联蛋白V-FITC和P1双染流式细胞术检测细胞凋亡。结果 RT-PCR、Western印迹显示pcDNA3．1-PTEN转染组有PTEN mRNA及PTEN蛋白表达,且在EGF的诱导下,p-Akt及p-FAK蛋白表达下调。流式细胞术则显示其凋亡率达21．68％。结论 外源性PTEN基因依赖其磷酸酶活性可诱导人乳腺癌MDA468细胞凋亡。     

恢复野生型PTEN基因表达对炎性乳腺癌MDA-MB-468体外生物学行为的影响

目的研究野生型PTEN基因转染对人炎性乳腺癌MDA—MB-468细胞体外生物学行为的影响及机制。方法应用基因重组技术构建重组质粒pcDNA3．1-PTEN，用脂质体转染乳腺癌细胞株MDA—MB-468，用RT—PCR、免疫组化及免疫印迹方法分析目的基因及其蛋白表达，并用免疫印迹方法检测转染后，在表皮生长因子的诱导下，磷酸化蛋白激酶B（PKB／Akt）的表达，四甲基唑蓝（MTT）法分析细胞增殖。Annexin V—FITC和PI双染流式细胞术检测细胞凋亡。结果RT—PCR、免疫组化及免疫印迹显示pcDNA3．1-PTEN转染组有PTEN mRNA及其蛋白表达，且显示转染组在表皮生长因子的诱导下，p-Akt蛋白表达下调。MTT检测表明pcDNA3．1-PTEN转染组活细胞数较其它各组均低（P〈0．01），流式细胞分析其凋亡率达21．68％。结论野生型PTEN基因依赖其磷酸酶活性可诱导乳腺癌MDA—MB-468细胞凋亡。     

乳腺癌中PTEN蛋白表达及其与ER和PR表达的相关性

目的探讨乳腺癌中PTEN抑癌基因表达和ER、PR表达之间的关系。方法采用免疫组化S-P法分别检测80例乳腺癌及癌旁组织中PTEN蛋白及ER、PR的表达。结果PTEN蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率显著低于癌旁组织,两者相比差异有显著性(P<0.01)。PTEN蛋白在淋巴结转移组中的阳性表达率明显低于淋巴结无癌转移组(P<0.01)。PTEN蛋白分别和ER、PR在80例乳腺癌中的表达呈正相关(P<0.05;P<0.05)。结论PTEN蛋白的表达缺失与ER、PR表达失衡在乳腺癌的发生、发展中起重要作用。     

核糖核酸酶抑制因子与人乳腺癌细胞恶性增殖的相关性研究

目的:探讨核糖核酸酶抑制因子(ribonuclesae inhibitor,RI)的表达与人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、SKBR-3恶性增殖之间的关系。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期分布,RT-PCR检测RI基因表达水平,细胞免疫化学技术检测RI蛋白表达情况。结果:人乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖速度、S期所占比例均小于人乳腺癌细胞MDA-MB-231、SKBR-3(P<0.05~P<0.01),且MCF-7细胞中RI基因表达水平、蛋白表达水平明显高于MDA-MB-231、SKBR-3细胞(P<0.01)。结论:RI与人乳腺癌细胞恶性增殖生长有一定的相关性。     

非分泌型CXCL16在乳腺癌细胞系中的表达及对其生物学特性的影响

目的 通过检测非分泌型CXCL16在不同侵袭性乳腺癌细胞系(SK-BR-3、MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435S)及正常乳腺上皮细胞MCF-10A的表达,探讨非分泌型CXCL16表达对乳腺癌细胞生物学特性的影响。 方法 采用RT-PCR检测CXCL16 mRNA在MCF-10A、SK-BR-3、MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435S细胞系的表达,将pEGFP-CXCL16真核表达质粒转染到低表达CXCL16的MDA-MB-231细胞,通过实时荧光定量PCR和Western blot验证CXCL16过表达,采用体外迁移、侵袭实验及甲基四唑蓝(MTT)法分别检测过表达CXCL16对MDA-MB-231细胞迁移、侵袭和增殖活性的影响。 结果 CXCL16 mRNA在高侵袭性的MDA-MB-231细胞低表达,在低侵袭性的MCF-7细胞高表达,过表达CXCL16使得MDA-MB-231细胞的迁移、侵袭减弱,而增殖未受到影响。 结论 非分泌型CXCL16表达与乳腺癌细胞系的侵袭性相关,其表达可以抑制乳腺癌细胞的体外迁移、侵袭。     

PTEN基因在乳腺癌中的研究进展

在过去的50年中乳腺癌发病率急速上升,乳腺癌已在女性恶性肿瘤中占首位.其发病原理是由多种癌基因和（或）抑癌基因异常表达所致.抑癌基因PTEN的表达异常在乳腺癌中常见,PTEN基因失活与乳腺癌的发病机理,浸润、转移,恶性转化及无限制生长及临床预后有一定关系.     

PTEN影响宫颈癌Hela细胞对顺铂的化疗敏感性

目的:通过转染PTEN基因表达载体,提高宫颈癌Hela细胞中PTEN的表达水平,观察能否影响Hela细胞对顺铂的敏感性,并探讨其分子学机制.方法:将培养的宫颈癌Hela细胞分为空白对照(未转染质粒的Hela细胞)、质粒对照(转染空质粒的Hela细胞)和PTEN转染(转染PTEN表达载体的Hela细胞)3组.分别用RT-PCR和Western检测各组Hela细胞中PTEN的mRNA和蛋白的表达水平;MTT法检测各组Hela细胞对顺铂的化学敏感性;RT-PCR检测各组Hela细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的表达水平.结果:PTEN转染组Hela细胞中PTEN的表达水平比另2组细胞显著增高(P＜0.01);经顺铂处理后,PTEN转染组Hela细胞生长抑制率比其它2组显著增高(P＜0.01),PTEN转染组Hela细胞中PI3K被显著抑制(P＜0.01).结论:PTEN能增强宫颈癌Hela细胞对顺铂的化疗敏感性,它可能通过下调Hela细胞中PI3K而导致Hela细胞对顺铂耐药性下降.