益胃汤对初老雌性大鼠卵巢细胞凋亡线粒体通路的影响

目的 探讨益胃汤延缓初老雌性大鼠卵巢机能衰老的机理.方法 4~6月龄雌性SD大鼠为正常对照组;10~12月龄、阴道细胞学表现动情期延长的雌性SD大鼠作为初老大鼠模型,随机分为益胃汤高剂量组、益胃汤中剂量组、益胃汤低剂量组、己烯雌酚组、模型对照组.灌药4周后,取左侧卵巢用于检测卵巢Bcl-2、Bax、Caspase3、细胞色素C.结果 与模型对照组比较,益胃汤可使卵巢Bcl-2表达增强,Bax表达减弱,Bcl-2/Bax比例增加(P<0.05),Caspase表达减少,细胞色素C减少,卵巢细胞凋亡减少,但达不到正常对照组水平(P＞0.05),且益胃汤高、中、低剂量组在实验中呈现一定的量效关系.结论 益胃汤通过抑制线粒体通路引起的级联反应抑制初老雌性大鼠卵巢细胞凋亡,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机理之一.     

补益阳明津气对初老雌性大鼠卵巢细胞色素C表达的影响

目的：探讨“补益阳明津气”延缓初老雌性大鼠卵巢机能衰老的机理。方法：4～6月龄雌性大鼠为正常对照组；10～12月龄，阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型。模型动物随机分为：益胃汤高剂量组、益胃汤中剂量组、益胃汤低剂量组、己烯雌酚组、模型对照组。灌药4周后检测卵巢细胞色素C。结果：与模型对照组比较，使卵巢细胞色素C表达减少。结论：提示益胃汤具有抑制卵巢细胞凋亡的作用，这可能是其延缓卵巢机能衰老的机理之一。     

补益阳明津气对初老雌性大鼠卵巢流式细胞双标百分比的影响

目的:探讨"补益阳明津气"延缓初老雌性大鼠卵巢机能衰老的机理.为促进绝经前期妇女健康,延缓绝经前期卵巢机能衰老,防治相关病证,提供一种新的研究与论治思路,并为研制相关方药提供药效学依据.方法:4～6月龄雌性大鼠为正常对照组;10～12月龄,阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型.模型动物随机分为益胃汤高剂量组、益胃汤中剂量组、益胃汤低剂量组、己烯雌酚组、模型对照组、六味地黄丸组;灌药4周后,断头处死,取左侧卵巢检测卵巢流式细胞双标百分比.结果:与模型对照组比较,益胃汤可使卵巢流式细胞双标百分比降低.结论:实验研究提示,益胃汤具有抑制卵巢细胞凋亡的作用,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机理之一.     

补益阳明津气对初老雌性大鼠卵巢Caspase3表达影响的实验研究

目的:探讨"补益阳明津气"延缓初老雌性大鼠卵巢机能衰老的机理,并以此佐证中医传统经典理论"五七,阳明脉衰"在绝经前期生殖轴机能衰老中的重要影响。为促进绝经前期妇女健康,延缓绝经前期卵巢机能衰老,防治相关病症,提供一种新的研究与论治思路,并为研制相关方药提供药效学依据。方法:4~6个月龄雌性大鼠为正常对照组;10~12个月龄,阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型。模型动物随机分为:(1)益胃汤高剂量组;(2)益胃汤中剂量组;(3)益胃汤低剂量组;(4)己烯雌酚组;(5)模型对照组;(6)六味地黄丸组。灌药4周后,断头处死,取左侧卵巢用于检测卵巢Caspase3。结果:与模型对照组比较,使卵巢Caspase3表达减少。结论:实验研究提示益胃汤具有抑制卵巢细胞凋亡的作用,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机理之一。     

补益阳明津气对初老雌性大鼠卵巢门血管影响的实验研究

目的探讨“补益阳明津气”对初老雌性大鼠卵巢门血管的影响,并以此佐证中医传统经典理论“五七,阳明脉衰”在绝经前期生殖轴机能衰老中的重要影响。为促进绝经前期妇女健康、延缓绝经前期卵巢机能衰老、防治相关病症提供一种新的研究与论治思路,并为研制相关方药提供药效学依据。方法4-6月龄雌性大鼠为正常对照组;10—12月龄,阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型。模型动物随机分为益胃汤高剂量组、益胃汤中剂量组、益胃汤低剂量组、己烯雌酚组、模型对照组和六味地黄丸组。灌药4周后,断头处死,取左侧卵巢用于检测卵巢门血管。结果与模型对照组比较,益胃汤高、中剂量组卵巢门血管壁变薄,管腔扩大,卵巢血供增加。结论实验研究提示益胃汤具有改善卵巢局部血供的作用,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机制之一。     

补益阳明津气对初老雌性大鼠卵巢微血管密度的影响

目的:探讨"补益阳明津气"延缓初老雌性大鼠卵巢机能衰老的机理,并以此佐证中医传统经典理论"五七,阳明脉衰"在绝经前期生殖轴机能衰老中的重要影响,为促进绝经前期妇女健康、延缓绝经前期卵巢机能衰老、防治相关病症提供一种新的研究与论治思路,并为研制相关方药提供药效学依据.方法:4～6个月龄雌性大鼠为正常对照组,10～12个月龄、阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型.模型动物随机分为益胃汤高剂量组、益胃汤中剂量组、益胃汤低剂量组、己烯雌酚组、模型对照组、六味地黄丸组.灌药4周后,断头处死,取左侧卵巢用于检测卵巢血管.结果:与模型对照组比较,补益阳明津气可使卵巢内微血管数目增加,改善卵巢局部微循环,增加卵巢血供.结论:益胃汤具有改善卵巢局部血供的作用,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机理之一.     

补益阳明津气方药对雌性初老大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响

目的:经实验研究探讨“补益阳明津气”方药对雌性初老大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响。方法:4月龄～6月龄雌性大鼠为正常对照组;10月龄～12月龄,阴道细胞学表现动情期延长的雌性犬鼠作为初老大鼠模型。模型动物随机分为:(1)益胃汤高剂量组、(2)益胃汤中剂量组、(3)益胃汤低剂量组、(4)己烯雌酚组、(5)模型对照组。各模型组灌药4周后,下丘脑制成匀浆,荧光分光分析法测定5-HT、NE、DA。结果:与模型对照组比较,“补益阳明津气”方药益胃汤能明显升高下丘脑5-HT水平及5-HT/NE比值,降低下丘脑DA水平及DA/NE比值。结论:“补益阳明津气”方药益胃汤能调节雌性初老大鼠下丘脑神经递质的紊乱,进而起到延缓生殖轴机能衰老的作用。     

更年宁神汤对围绝经大鼠卵巢颗粒细胞caspase-3蛋白的影响

目的探讨更年宁神汤对围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞caspase-3蛋白的影响。方法选用雌性wister大鼠40只,月龄13~15月,随机分为4组:模型组、更年宁神汤高剂量组、更年宁神汤低剂量组、西药利维爱组,每组各10只。另选5月龄、体质量(180±20)g的雌性wister大鼠10只作为青年对照组。中药高剂量组灌服更年宁神汤5.68 g/(kg.d),中药低剂量组更年宁神汤1.42 g/(kg.d),围绝经期模型组灌服等量生理盐水,西药对照组每日灌服3mL西药利维爱溶液0.26 mg/(kg.d),连续治疗4周。采用免疫组织化学法及Westernblot方法检验各组大鼠卵巢颗粒细胞caspase-3蛋白的表达。结果模型组大鼠卵巢中caspase-3蛋白表达高于青年对照组,治疗组caspase-3蛋白表达水平较模型组降低,更年宁神汤高剂量组、利维爱组大鼠卵巢中caspase-3蛋白表达低于模型组差异显著;中药高剂量组与中药低剂量组比较有统计学意义;中药高剂量组与利维爱组比较比较,差异无统计学意义。结论更年宁神汤治疗围绝经期综合征的机制可能是通过抑制卵巢颗粒细胞分泌caspase-3凋亡因子,延缓卵巢衰老,疗效与利维爱相当。     

清心滋肾汤对围绝经期大鼠卵巢Caspase-3 Caspase-9及Apaf-1的影响

目的:研究中药清心滋肾汤对围绝经期大鼠卵巢Caspase-3、Caspase-9、Apaf-1的影响,探讨清心滋肾汤治疗绝经综合征的作用机制。方法:选用自然衰老的围绝经期雌性SD大鼠40只,月龄12月,随机分为4组(n=10):围绝经期模型组、清心滋肾汤低剂量组、清心滋肾汤中剂量组、清心滋肾汤高剂量组。另选4月龄的雌性SD大鼠10只作为青年对照组。连续灌胃4周后,采用Western blot(蛋白免疫印迹杂交)方法检测各组大鼠卵巢Caspase-3、Caspase-9、Apaf-1蛋白的表达,采用RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)检测大鼠卵巢Caspase-3、Caspase-9、Apaf-1 mRNA表达。结果:模型组大鼠卵巢Caspase-3、Caspase-9、Apaf-1蛋白及mRNA表达普遍高于青年组,清心滋肾汤各剂量组Caspase-3、Caspase-9、Apaf-1蛋白及mRNA表达呈不同程度的下降。结论:清心滋肾汤能下调卵巢Caspase-3、Caspase-9、Apaf-1凋亡因子的表达水平,延缓卵巢衰老,治疗绝经综合征。     

滋肾清心汤对围绝经期大鼠卵巢bcl-2和bax表达影响的实验研究

目的:研究中药滋肾清心汤对围绝经期大鼠卵巢bcl-2和bax蛋白表达的影响,探讨滋肾清心汤治疗围绝经期综合征可能的作用机制。方法:选用自然衰老的围绝经期雌性大鼠,随机分为4组(每组10只):更年期大鼠模型组(模型组)和滋肾清心汤高、中、低剂量组,另选10只青年雌性大鼠作为青年对照组。连续灌胃处理4周后,采用蛋白印迹(Western blot)及RT-PCR检测大鼠卵巢中Bcl-2和Bax蛋白及基因的表达。结果:与模型组相比,滋肾清心汤高剂量能显著降低卵巢组织中Bax蛋白的表达,显著上调Bcl-2/Bax的比值;滋肾清心汤各剂量均能明显降低卵巢组织中Bax基因表达,明显升高Bcl-2基因表达,从而显著上调Bcl-2/Bax比值,延缓卵巢颗粒细胞的凋亡。结论:滋肾清心汤通过调节围绝经期大鼠卵巢中凋亡相关基因bcl-2和bax蛋白及基因的表达,上调Bcl-2/Bax蛋白及基因的比值,从而延缓卵巢衰老,这可能是其治疗围绝经期综合征的分子机制之一。     

益胃汤对女性绝经前期慢性疲劳综合征动物模型T淋巴细胞的影响

目的:研究益胃法对慢性疲劳综合征初老雌性大鼠血浆中CD4、CD8水平的影响,并初步探讨其机理.方法:10～12月龄,阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型.入选动物随机分为6组:正常空白组、模型组、益胃汤高剂量组、益胃汤中剂量组、益胃汤低剂量组、氟西汀组.灌胃加造模30天后,取股静脉血用于检测CD4、CD8值.结果:益胃汤高剂量组、氟西汀组与模型组比较CD4明显增高,有统计学差异;益胃汤低剂量组CD4值明显低于高剂量组及氟西汀组;益胃汤高、中、低剂量组CD8值较模型组有降低趋势,益胃汤高剂量组CD4/CD8值较模型组显著性增高,较低剂量组亦明显增高.结论:益胃汤可能通过提高CD4含量,调节CD4/CD8值来达到缓解"慢性疲劳"大鼠躯体及心理的应激状态,从而促进疲劳状态的恢复.     

补肾复方对初老大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白Bcl-2 Bax表达的影响

目的:研究补肾复方对初老雌性大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax表达的影响.方法:采用12月龄的Wistar雌性大鼠,随机分为模型对照组,补肾复方高、中、低剂量组,阳性对照组,另设4月龄青年对照组和18月龄老年对照组.采用免疫组织化学链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)方法研究各组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2,Bax蛋白表达的影响.结果:与青年组比较,初老组、老年组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2表达明显降低(P＜0.05),Bax表达明显增高(P＜0.05).Bcl-2/Bax比例降低;经药物干预后,补肾复方高、中、低剂量组及阳性对照组,均能上调Bcl-2表达(P＜0.05),下调Bax表达(P＜0.05).使Bcl-2/Bax比例增高;其中高剂量组的Bcl-2,Bax变化表达明显,达到青年组水平(P＞0.05).结论:上调初老雌性大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2表达,下调Bax表达,可能是补肾复方延缓卵巢衰老的机制之一.     

益胃法对初老雌性大鼠CFS模型中枢单胺类神经递质代谢影响的实验研究

目的：观察“益胃法”对初老雌性大鼠CFS模型动物中枢单胺类神经递质代谢影响。方法：4-6月龄雌性大鼠为正常对照组;10～12月龄,阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型,采用复合刺激法造模。模型动物随机分为：（1）空白对造组、（2）益胃汤高剂量组、（3）益胃汤中剂量组、（4）益胃汤低剂量组、（5）氟西汀组。灌药4周后,断头处死,取脑组织进行检测。结果：益胃汤通过调节单胺类递质降解的主要酶MAO的含量,使MAO含量减低,使NE、5-HT含量升高;DA含量呈降低趋势。结论：益胃汤可能通过改善中枢神经递质代谢从而促进疲劳状态的恢复,提高学习记忆的作用。     

养肝和血方对雌性初老大鼠血清抑制素B的影响

目的探讨养肝和血方对雌性初老大鼠血清抑制素的影响。方法通过阴道细胞学观察，选择10～12月龄的自然衰老雌性大鼠30只，随机分为模型对照组、六味地黄汤对照组、养肝和血方组，另选4月龄的雌性大鼠10只为青年空白对照组。灌胃三周后，用酶联免疫吸附法（ELISA）测量血清抑制素B（INHB）的含量。结果养肝和血方组中血清INHB含量提高，与模型对照组、六味地黄汤对照组比较差异有显著性（P〈0．05）。结论养肝和血方能提高雌性初老大鼠血清INHB含量，能改善卵巢INHB的生成与分泌，从而达到延缓卵巢衰老的目的。     

涤痰汤对老年轻度认知障碍大鼠海马NMDA受体亚基表达的影响

目的:观察涤痰汤对老年轻度认知障碍大鼠认知功能及海马区NMDA受体含量的影响。方法:将60只13月龄SD大鼠随机分为5组,即空白组、模型组、涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组、西药组,另设12只青年大鼠作为青年对照组。以注射D-半乳糖促衰老并结合半高脂饮食建立老年轻度认知障碍动物模型。采用穿梭箱对大鼠进行行为学检测,以Real Time PT-PCR检测大鼠海马区NMDA受体亚基NR2A、NR2B的基因表达。结果:与模型组相比,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组大鼠的电击次数均明显减少(P0.05),主动逃避潜伏时间明显缩短(P0.05),涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组NR2A、NR2B基因表达量均明显上调(P0.05),其中,涤痰汤高剂量组NR2A基因表达量明显高于西药组(P0.05)。结论:涤痰汤能通过上调NR2A、NR2B基因表达量改善老年轻度认知障碍大鼠的学习记忆功能。     

补肾复方对初老大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白Bcl-2Bax表达的影响

目的：研究补肾复方对初老雌性大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白Bcl-2，Bax表达的影响。方法：采用12月龄的Wistar雌性大鼠，随机分为模型对照组，补肾复方高、中、低剂量组，阳性对照组,另设4月龄青年对照组和18月龄老年对照组。采用免疫组织化学链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物（SABC）方法研究各组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2，Bax蛋白表达的影响。结果：与青年组比较。初老组、老年组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2表达明显降低（P〈0．05），Bax表达明显增高（P〈0．05）。Bcl—2／Bax比例降低：经药物干预后，补肾复方高、中、低剂量组及阳性对照组，均能上调Bcl-2表达（P〈0．05）。下调Bax表达（P〈0．05）。使Bcl-2／Bax比例增高；其中高剂量组的Bcl-2，Bax变化表达明显，达到青年组水平（P〉0．05）。结论：上调初老雌性大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2表达，下调Bax表达，可能是补肾复方延缓卵巢衰老的机制之     

健脾益胃汤对慢性萎缩性胃炎模型大鼠血清胃泌素和血浆胃动素的影响

目的:探讨健脾益胃汤对慢性萎缩性胃炎大鼠的治疗机制。方法:将大鼠随机分为正常对照组、模型组、健脾益胃汤低剂量组(JPYW-L)、健脾益胃汤中剂量组(JPYW-M)、健脾益胃汤高剂量组(JPYW-H)和阳性药物(维酶素)对照组。除正常对照组外,其余各组大鼠均采用水杨酸钠法制作慢性萎缩性胃炎模型。造模成功后分别灌服蒸馏水或相应药物,连续8周。观察大鼠胃黏膜的组织病理学改变,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清胃泌素(GAS)和血浆胃动素(MTL)。结果:健脾益胃汤高、中剂量组与模型组相比,大鼠胃黏膜损伤均有不同程度的改善;健脾益胃汤中、低剂量组与模型组相比,血清GAS含量均明显升高,血浆MTL含量均明显降低。结论:健脾益胃汤能改善大鼠胃黏膜的病变,其可能的作用机制为对血清GAS、血浆MTL水平的调整。     

升阳益胃汤对胃癌前病变模型大鼠NF-κB表达及微血管密度的影响

目的:检测升阳益胃汤对胃癌前病变(precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)模型大鼠NF-κB表达、微血管密度表达的影响,探讨升阳益胃汤干预PLGC进展的作用机制。方法:将96只SPF级的Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、维酶素组和升阳益胃汤高、中、低剂量组6组。除正常对照组外,其余各组大鼠均采用MNNG为基础的复合造模法,连续12周,成功复制PLGC模型。造模成功后以相对应剂量的药物干预45 d。以SP免疫组化法与实时荧光定量PCR法检测大鼠NF-κB基因与蛋白表达水平的改变;以CD34为标记物的,采用免疫组化法检测CD34表达水平以检测微血管密度(MVD)的变化。结果:与正常对照组对比,模型对照组大鼠NF-κB mRNA及蛋白的表达水平升高,MVD值降低,差别有统计学意义(P0.05)。与模型对照组对比,除升阳益胃汤低剂量组外,其余各药物组大鼠NF-κB mRNA及蛋白的表达水平降低,差别有统计学意义(P0.05);各药物组大鼠MVD值升高,差别有统计学意义(P0.05)。结论:升阳益胃汤可能是通过降低NF-κB的表达水平、改善胃黏膜局部血液循环状态从而达到干预PLGC进展的目的。     

二仙汤加味对去卵巢大鼠心肌NF-κBp50、IκBα的影响

目的探寻二仙汤加味对去卵巢大鼠心肌保护作用的机制。方法采用5月龄雌性大鼠建立去卵巢模型,随机分为空白对照组、模型组、加味二仙汤高、中、低剂量组、替勃龙组,每组8只。二仙汤组分别用二仙汤30、15、7.5g/kg生药剂量给药,替勃龙组用0.25mg/kg给药,其余两组给予3mL生理盐水灌胃,各组持续灌胃60d。采用免疫组化法分析心肌NF-κBp50、IκBα的表达。结果模型组与各治疗组、空白组比较,NF-κBp50、IκBα的表达均显著增高。二仙汤各剂量组与模型组比较,NF-κBp50、IκBα表达明显降低。二仙汤组对心肌NF-κBp50、IκBα改善优于替勃龙组。结论去卵巢大鼠心肌中存在NF-κBp50、IκBα的激活,加味二仙汤对其有一定抑制作用,可能是二仙汤心肌保护作用机制之一。     

当归补血汤对维甲酸致骨质疏松模型大鼠卵巢CYP24A1和ERα表达的影响

目的研究当归补血汤对维甲酸致骨质疏松症(osteoporosis,OP)模型大鼠血清促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、抗缪勒管激素(anti-mullerian hormone,AMH)水平,卵巢维生素D限速酶CYP24A1、雌激素受体(estrogen receptor,ER)αmRNA及蛋白表达的影响。方法将48只大鼠随机分为对照组,模型组,维生素D组,当归补血汤高、中、低剂量组。除对照组外,各组连续2周灌胃维甲酸100 mg·kg~(-1)建立OP模型。造模成功后,连续6周灌胃各组药物进行治疗。HE染色法观察大鼠卵巢组织病理学变化,ELISA法测定大鼠血清LH、AMH水平,Real-Time qPCR、Western Blot法测定大鼠卵巢CYP24A1、ERαmRNA及蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠HE染色光镜下可见卵巢体积缩小,各级卵泡及黄体数量明显减少,部分颗粒细胞层次排列紊乱,血清LH水平明显上升(P0.01),AMH水平明显下降(P0.01),卵巢CYP24A1mRNA及蛋白表达明显上升(P0.01),卵巢ERαmRNA及蛋白表达明显下降(P0.01)。与模型组比较,维生素D组及当归补血汤高、中剂量组HE染色光镜下可见各级卵泡及黄体数量增加,颗粒细胞层次排列较有序;维生素D组及当归补血汤高剂量组LH水平下降(P0.05,P0.01);维生素D组及当归补血汤高、中、低剂量组AMH水平上升(P0.05,P0.01),卵巢CYP24A1 mRNA表达明显下降(P0.01);维生素D组及当归补血汤高、中剂量组卵巢ERαmRNA及蛋白表达上升(P0.05,P0.01),卵巢CYP24A1蛋白表达下降(P0.05,P0.01)。结论当归补血汤可能是通过调节卵巢内维生素D限速酶CYP24A1的表达,从而影响ERα、LH、AMH水平,达到对维甲酸致骨质疏松症模型大鼠卵巢损伤的治疗作用。