魟鱼软骨多糖对Lewis肺癌MMP-9表达的影响

目的:鱼软骨多糖(RCG)对Lewis肺癌基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。方法:建立小鼠Lewis肺癌模型,将动物分为生理盐水组、不同剂量鱼软骨多糖组、环磷酰胺组,观察肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算原发瘤抑制率;采用RT-PCR和Western blot检测瘤组织MMP-9基因和蛋白表达。结果:该多糖各剂量组小鼠的肿瘤生长曲线平缓,小鼠原发瘤抑制率、肺转移数与生理盐水组比较差异有显著性(P<0.05;P<0.01);与生理盐水比较,鱼软骨多糖各剂量组,MMP-9 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:鱼软骨多糖明显抑制小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长和转移,可能与其抑制肿瘤MMP-9基因和蛋白表达有关。     

魟鱼软骨多糖对小鼠Lewis肺癌的作用及分子机制探讨

目的:研究魟鱼软骨多糖(RCG)对小鼠Lew is肺癌的作用,并初步探讨其作用机制。方法:建立小鼠Lew is肺癌模型,将实验分为生理盐水(Saline)组、不同剂量魟鱼软骨多糖(RCG)组、环磷酰胺(CTX)组,计算原发瘤抑制率及肺转移数;采用RT-PCR和W estern b lot检测原发瘤组织VEGF、bFGF mRNA和蛋白表达。结果:应用魟鱼软骨多糖各剂量组,小鼠原发瘤抑制率、肺转移数与生理盐水组比较差异有显著性(P<0.05,P<0.01);与生理盐水比较,魟鱼软骨多糖各剂量组,VEGF、bFGF mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:魟鱼软骨多糖明显抑制小鼠Lew is肺癌原发瘤的生长和转移,可能与其抑制肿瘤VEGF、bFGF mRNA和蛋白表达有关。     

魟鱼软骨多糖的分离纯化及生物活性的研究

目的研究魟鱼软骨多糖(raycartila geglycosam inoglycans,RCG)的提取、分离与纯化方法,并初步探讨其生物活性。方法采用盐酸胍提取、丙酮分级沉淀、膜超滤、Sephadex凝胶柱色谱分离、纯化获得魟鱼软骨多糖,由HPLC确定其相对分子质量和质量分数;建立Lewis肺癌小鼠模型,将实验分为生理盐水(Saline)组、不同剂量(500、250、125mg/kg)鱼软骨多糖组、环磷酰胺(CTX,60mg/kg)组,观察小鼠肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算原发瘤与肺转移灶数抑瘤率,免疫组织化学染色计数肿瘤组织微血管密度(MVD),采用RT-PCR检测瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)基因表达。结果经HPLC检测,该组分为单一多糖,其质量分数达99%以上。生物活性检测结果表明,与生理盐水组比较,该多糖各剂量组小鼠的肿瘤生长曲线平缓,原发瘤抑瘤率、肺转移灶数与生理盐水组比较差异显著(P<0.05、0.01);与生理盐水组比较,鱼软骨多糖各剂量组MVD显著减少、VEGFmRNA表达水平显著降低(P<0.01)。结论鱼软骨多糖明显抑制小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长和转移,并可抑制肿瘤的血管形成。     

魟鱼软骨多糖对小鼠G_(422)胶质瘤血管形成的影响

目的:观察魟鱼软骨多糖对小鼠G422胶质瘤血管形成及瘤组织VEGF mRNA和蛋白表达的影响。方法:建立小鼠G422胶质瘤腋下肿瘤模型,将实验分为生理盐水(Saline)组、不同剂量魟鱼软骨多糖(RCG)组、环磷酰胺(CTX)组,观察肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线,CD31免疫组织化学染色计数肿瘤组织微血管密度(M icrovessel density,MVD),采用RT-PCR和W estern b lot技术检测瘤组织血管内皮生长因子(Vascu lar endothelial growth factor,VEGF)mRNA和蛋白表达。结果:魟鱼软骨多糖各剂量组小鼠的肿瘤生长曲线平缓,MVD显著减少,VEGF mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:魟鱼软骨多糖明显抑制小鼠G422胶质瘤的生长,抑制肿瘤的血管形成,可能与其下调肿瘤VEGF mRNA和蛋白表达有关。     

中肺合剂抗小鼠Lewis肺癌肺转移作用及相关机制的实验研究

 目的 观察中肺合剂对小鼠Lewis肺癌抗肿瘤肺转移的作用,并探索其相关机制。方法 采用Lewis肺癌移植瘤C57BL/6小鼠模型观察中肺合剂抗肿瘤肺转移作用,并采用荧光定量QRT-PCR法测定中肺合剂对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织基质金属蛋白酶（MMP）-9表达的影响,采用EnVision法检测肿瘤组织血管内皮细胞生长因子（VEGF）和CD34蛋白的表达情况,并计数微血管密度(MVD)。结果 中肺合剂低、中、高剂量组（12.7,25.4,50.8 g·kg-1）和环磷酰胺（CTX）阳性对照组对移植性Lewis肺癌小鼠的肺转移抑制率为16.7%、45.8%、19.4%和80.6%,以中剂量组肺转移抑制作用最佳。中肺合剂能下调Lewis肺癌小鼠肿瘤组织MMP-9、VEGF蛋白的表达水平,并降低肿瘤组织MVD。MMP-9、VEGF表达和MVD之间呈正相关。结论 中肺合剂对小鼠Lewis肺癌具有显著的抗肿瘤肺转移作用,以中剂量组最佳。其作用机制可能与该药能降低肿瘤组织MMP-9、VEGF蛋白的表达水平,并降低肿瘤组织MVD有关。     

应用魟鱼软骨多糖滴眼液抗大鼠角膜新生血管形成的实验研究

目的:探讨魟鱼软骨多糖(Ray Cartilage Glycosaminoglycans,RCG)滴眼液对大鼠角膜新生血管(Corneal neo-vascularization,CNV)的作用。方法:制备魟鱼软骨多糖滴眼液,缝线诱导大鼠角膜新生血管,将实验分为生理盐水(Sa-line)组、不同剂量魟鱼软骨多糖(RCG)组、肝素+可的松(Heparin+corlin)组,通过计算新生血管面积、病理组织学观察、免疫组化检测评价应用魟鱼软骨多糖滴眼液对大鼠角膜新生血管的作用。结果:与生理盐水组比较,应用魟鱼软骨多糖滴眼液各组新生血管面积明显减少,有显著性差异(P<0.01),同时角膜组织炎性细胞数和VEGF表达也明显减少。结论:应用魟鱼软骨多糖滴眼液抑制了大鼠角膜新生血管形成,可能与魟鱼软骨多糖能够缓解缝线刺激炎症,减少VEGF表达有关。     

十全大补汤对Lewis肺癌小鼠MMP-9基因表达的影响

目的:探讨十全大补汤对Lewis肺癌组织中MMP-9基因表达的影响。方法:50只小鼠采用细胞株接种的方法复制Lewis肺癌转移模型,造模成功后,将小鼠分为模型组,CTX组,十全大补汤低、中、高剂量组。采用RT-PCR方法检测十全大补汤对Lewis肺癌组织中MMP-9基因表达的影响。结果:十全大补汤中、高剂量组的肿瘤转移抑制率为43.20%、29.59%,两组中MMP-9的表达下降,与模型组比较有统计学意义(P<0.01)。结论:十全大补汤下调MMP-9基因表达是其抑制肺癌转移的分子机制之一。     

鲨鱼软骨素对Lewis肺癌转移的影响

目的：探讨鲨鱼软骨素（SCP）对Lewis肺癌转移的影响。方法：建立Lewis肺癌模型，实验分为环磷酰胺（CTX）组、生理盐水（Saline）组和高、低剂量鲨鱼软骨素组；给药25天后取出双肺，计数肺表面形成的转移瘤灶数目：采用免疫组化法检测瘤组织中血管内皮细胞CD31的表达情况并计数微血管密度（MVD）；采用Western blot法检测瘤组织中E-钙黏蛋白（E-cadherin）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）的蛋白表达。结果：鲨鱼软骨素各剂量组的肺转移瘤灶数目明显低于生理盐水组P〈0．01；瘤组织内MVD计数结果表明，鲨鱼软骨素各剂量组明显低于生理盐水组P〈0．01；与生理盐水组比较，鲨鱼软骨素各荆量组的MMP-9蛋白表达水平显著降低P〈0．01，E—cadherin蛋白表达水平显著升高P〈0．01。结论：鲨鱼软骨素对Lewis肺癌的转移有抑制作用，其作用机制可能是：减少肿瘤组织内微血管生成、抑制MMP-9蛋白表达和促进E—cadhefin蛋白表达等等。     

苦参碱对小鼠Lewis肺癌的影响

目的 研究苦参碱对小鼠Lewis肺癌的作用,并初步探讨其作用机制.方法 建立小鼠Lewis肺癌模型,实验分为模型组、不同剂量苦参碱组、环磷酰胺组,计算原发瘤抑制率及肺转移灶数;采用Western blotting检测原发瘤组织基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)蛋白表达.结果 苦参碱各剂量组小鼠原发瘤抑制率、肺转移灶数与模型组比较差异显著(P<0.05、0.01);与模型组比较,苦参碱各剂量组MMP-2、MMP-9蛋白表达水平显著降低(P<0.01).结论 苦参碱明显抑制小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长和转移,可能与其抑制肿瘤组织MMP-2和MMP-9蛋白表达有关.     

魟鱼软骨多糖对小鼠恶性黑色素移植瘤血管生成拟态及PI3K表达的影响

目的:探讨魟鱼软骨多糖(Ray cartilage glycosaminoglycans,RCG)对小鼠恶性黑色素瘤模型中肿瘤和血管生成拟态的抑制作用及对肿瘤组织中磷脂酰肌醇3-激酶蛋白(PI3K)表达水平的影响。方法:将体外培养的B16小鼠黑色素瘤细胞接种于C57BL/6小鼠右腋下部复制肿瘤模型,将40只SPF级小鼠随机分为空白对照组(生理盐水)、环磷酰胺(CTX,60 mg/kg)组与魟鱼软骨多糖(600、300、150 mg/kg)组,观察肿瘤生长情况,计算抑瘤率;采用CD31/PAS双重染色检测魟鱼软骨多糖对肿瘤血管生成拟态计数的影响,Western Blot法测定PI3K表达变化,RT-PCR法测定PI3K基因的表达变化。结果:与空白对照组相比较,魟鱼软骨多糖的不同剂量组都对小鼠黑色素瘤的瘤重具有一定的抑制作用,且600mg/kg剂量的魟鱼软骨多糖最明显,CD31/PAS双重染色结果显示600mg/kg魟鱼软骨多糖组对血管生成生成拟态有较强的的抑制作用,Western Blot和RT-PCR结果表明随着魟鱼软骨多糖药物浓度的升高,PI3K蛋白表达水平逐渐明显降低,基因表达水平逐步明显降低,其中600mg/kg魟鱼软骨多糖组抑制作用最强。结论:魟鱼软骨多糖具有影响小鼠黑色素移植瘤和血管生成拟态生成的作用,并且可能与降低PI3K蛋白的表达有关。     

益气养阴方抗C57小鼠Lewis肺癌转移作用与调节MMP-9、TIMP-1蛋白表达的实验研究

目的免疫组化法观察益气养阴方对C57BL／6小鼠Lewis肺癌瘤体MMP-9、TIMP-1蛋白表达的影响以及抗肺转移作用,探讨该方抗转移作用的机理。方法24只C57BL／6小鼠随机分为3组,每组8只,接种Lewis肺癌瘤株,造模后第2天按如下方案进行干预：荷瘤对照组：0.9％NaCl溶液灌服;中药组：益气养阴方煎汤灌服;顺铂组：顺铂溶液腹腔内注射。第20天处死全部小鼠,称瘤重计算抑瘤率,计数肺转移数,计算抑制肺转移率,免疫组化Envision二步法测定瘤体MMP-9、TIMP-1蛋白表达情况。结果中药组和顺铂组的抑瘤率分别为35.02％和41.18％,具有统计学意义（P〈0.05）。中药组和顺铂组的抑制肺转移率分别为54.20％和39.02％,差异无统计学意义。瘤重与肺转移数之间存在正相关。荷瘤对照组MMP-9和TIMP-1阳性率均为100％,中药组MMP-9阳性率显著低于对照组,TIMP-1阳性表达与对照组比较差异无统计学意义,但中度及强阳性率明显低于对照组。MMP-9和TIMP-1的表达与肺转移数成正相关,两者之间亦存在正相关。结论益气养阴方具有较好的抑瘤作用和抑制肺转移的作用;肺癌均表达MMP-9和TIMP-1蛋白,是促进转移的重要机理和判断指标;益气养阴方能够显著下调肺癌MMP-9的表达,影响TIMP-1的表达,这是其抑制肺癌转移的机理之一。     

结直肠癌转移模型裸鼠血管因子变化及健脾消癌方干预作用

目的:探讨结直肠癌裸鼠转移模型组织中血管内皮生长因子(VEGF),内皮抑素(ES),血管生成素(ANG),血管抑素(AS),基质金属蛋白酶-9(MMP-9),组织金属蛋白酶抑制物(TIMP)变化及健脾消癌方干预的机制。方法:在BALB/C-nu裸鼠盲肠内注射HCT116细胞50μL,造裸鼠结直肠癌转移模型。将模型裸鼠分为模型组、健脾消癌方组(40 g·kg-1),另设空白组。所有动物灌胃给予相应药物4周后,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定裸鼠结肠、肝、肺及盲肠肿瘤组织中相关血管因子蛋白表达。结果:HCT116结直肠癌模型裸鼠的结肠、肝、肺与肿瘤组织的VEGF,MMP-9,TIMP明显升高(P0.05,P0.01);ANG在结肠、肝与肿瘤组织也明显升高(P0.05,P0.01);ES在结肠、肺与肿瘤组织显著降低,AS在肝、肺及肿瘤组织显著降低(P0.05)。健脾消癌方组的结肠MMP-9,肿瘤TIMP,肝组织ANG,MMP-9及肺组织VEGF明显降低,肺组织AS明显升高(P0.05)。结论:HCT116结直肠癌模型裸鼠VEGF,ANG,MMP-9在结肠、肝、肺及肿瘤组织中蛋白表达升高,ES,AS降低,TIMP升高;健脾消癌方能比较全面地改善机体抗肿瘤血管生成的能力。     

益肺消癌汤联合化疗对中晚期非小细胞肺癌患者VEGF、MMP-2及MMP-9的影响

目的 探讨益肺消癌汤联合化疗对中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法 选择中晚期NSCLC患者80例,随机分为观察组和对照组,各40例.对照组采用紫杉醇联合顺铂化疗,观察组在对照组的基础上采用益肺消艾汤治疗.比较2...     

扶正散结汤拆方配伍中药对Lewis肺癌转移及血管生成影响的研究

目的:研究扶正散结汤拆方配伍中药对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤转移及血管生成机制影响的差异及其协同作用。方法:80只C57小鼠,随机均分为空白组、模型组、顺铂组、扶正组、化痰组、活血组、解毒组、联合组,除空白组外其余小鼠右腋皮下接种Lewis瘤细胞建立肺癌模型,从接种后的第2天开始分别给予相应药物灌胃或腹腔注射,连续14 d后处死,将瘤体剥离常规固定、脱水、包埋切片,免疫组化SP法检测肿瘤组织中VEGF、ES、MMP-2。结果:各给药组肺转移结节数量均低于模型组(P<0.05),以顺铂组和联用组为最少、也最接近,其次依次为扶正组、解毒组和活血组,各组与顺铂组相比,除化痰组外,无显著性差异。顺铂及各配伍组分组均较模型组VEGF、MMP-2表达量降低、ES表达量升高,其中解毒组VEGF表达最低(P<0.05)、联用组ES表达量最高(P<0.05 or P<0.01)、MMP-2表达量最低(P<0.05),而顺铂组不具任何优势。结论:扶正散结汤拆方配伍四法联用具有更好抗肿瘤转移效果,与顺铂相当;在抗肿瘤微血管生成机制方面,各配伍组分作用各有特点,但四法联用具有更优的效果。     

复方中药牛黄天龙胶囊对小鼠宫颈癌U_(14) VEGF、MMP-9表达的影响

目的探讨复方中药牛黄天龙胶囊对实体型小鼠宫颈癌U14血管内皮生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法 40只昆明种小鼠右腋皮下接种制作小鼠宫颈癌U14实体瘤模型,并随机分为4组,分别给予高、中、低浓度复方中药牛黄天龙胶囊混悬液和生理盐水连续灌胃12 d,取肿瘤组织,应用免疫组化法观察肿瘤组织中VEGF及MMP-9表达情况。结果从阴性对照组→低剂量组→中剂量组→高剂量组,VEGF、MMP-9阳性表达率呈逐级降低趋势。结论牛黄天龙胶囊可通过抑制肿瘤组织中VEGF、MMP-9的表达来发挥抗肿瘤作用。