P21WAF1／CIP1和P53基因表达及膀胱癌生物学行为的关系

目的：探讨膀胱癌P21WAF1／CIP1、P53基因的表达、相互间的调控及其与生物学行为的关系。方法：采用免疫组织化学ABC方法检测122例有随访结果的膀胱癌患者的P21WAF1／CIP1、P53基因表达,并采用双变量相关分析、Logistic回归分析和Kaplan-Meier法分析。结果：P53野生型肿瘤中P21WAF1／CIP1阳性表达率明显高于P53突变型肿瘤,P53突变型肿瘤中保持P21WAF1／CIP1阳性表达者具有与P53野生型肿瘤同样低的复发率和较长的生存期。结论：维持P21WAF1／CIP1的表达可清除P53突变蛋白的有害作用;根据P21WAF1／CIP1表达状况,结合临床分期可对膀胱癌的恶性程度及预后作出更准确的评估,对拟定治疗方案有 重要的指导意义。     

P27KIP1和P53及P21WAF1/CIP1表达与胃癌临床病理及预后的关系

目的研究P27KIP1、P53、P21WAF1/CIP1蛋白表达与胃癌临床病理及预后的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测90例胃癌组织中P27KIP1、P53、P21WAF1/CIP1的表达。结果90例胃癌组织中P27KIP1、P53、P21WAF1/CIP1阳性表达率分别为48.9%、56.7%、51.1%;随肿瘤分化程度降低、浸润深度加深、恶性程度增加,P27KIP1、P21WAF1/CIP1阳性表达率逐渐降低(P<0.05),P53阳性表达则相反;P27KIP1与P53、P21WAF1/CIP1表达显著相关(P<0.05);P27KIP1、P21WAF1/CIP1表达与胃癌预后密切相关(P<0.05),P53表达与患者术后生存无显著相关(P>0.05)。结论P27KIP1、P53、P21WAF1/CIP1异常表达可加速细胞周期转化,促进胃癌的发生,其蛋白检测尤其是P27KIP1、P21WAF1/CIP1蛋白检测可作为判断胃癌恶性程度、预测肿瘤转移和预后的重要参考指标。     

膀胱癌复发与p53、p21WAF1/CIP1和细胞周期素E基因表达的相关性研究

目的：探讨膀胱癌p53、p21^WAF1/CIP1和细胞周期素E(CyclinE)基因的表达、相互间的调控及其与膀胱肿瘤复发生为的关系。方法：采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶法（SP）检测64例有随访资料的膀胱癌患者p53、p21^WAF1/CIP1、CyclinE基因和Ki-67抗原表达，并用双变量相关分析、Kaplan-Meier分析及Cox regression多因素分析。结果：p53与p21WAF1/CIP1之间有明显相关（rs=-0.630，P=0.000）。p21^WAF1/CIP1与CylinE之间无明显相关（rs=-0.160，P=0.206），p53、Ki-67阳性表达患者有较高的肿瘤复发率。结论：肿瘤的临床病理特征、p53、Ki-67可作为评估膀胱肿瘤恶性程度及预后的指标。     

大肠肿瘤P21WAF1、P53表达及其意义

目的:探讨P21WAF1蛋白和P53蛋白在大肠癌发生发展中的作用及其临床意义.方法:应用免疫组织化学S-P法,对41例大肠腺癌标本及10例正常大肠粘膜的细胞周期调控因子P21WAF1蛋白和突变型P53蛋白进行了检测,应用流式细胞术检测了对应的大肠癌和正常大肠粘膜新鲜标本的DNA含量.结果:P21WAF1与P53阳性表达率呈负相关;在正常大肠粘膜、高分化腺癌、中分化腺癌、低分化腺癌中P53阳性表达率逐渐增高,P21WAF1阳性表达率逐渐降低,SPF值逐渐升高;Dukes分期越晚,P21WAF1表达率越低,P53表达率越高,SPF越高.结论: P21WAF1和P53表达在肿瘤发生发展中起着调控点的作用;P21WAF1、P53蛋白表达和DNA含量可以作为判断大肠癌预后的指标.     

P_(53)、p21~(WAF1/CIP1)蛋白在宫颈鳞癌中的表达

P53野生型蛋白质分子具有抑制肿瘤细胞的作用 ,但其突变型的等位基因却具有癌基因的作用特点 ,可使体外培养的细胞发生恶变 [1] 。近年来 P53与肿瘤的发生机制研究较多 ,认为P53通过两种途径 :一是下调 p2 1 WAF1/ CIP1,一是非 p2 1依赖型。本研究探讨 P53、p2 1 WAF1/ CIP1表达与宫颈鳞癌的组织学分级及相关性。一、材料与方法1 .标本 :选自 1 998年 1 0月至 2 0 0 1年 1 0月甘肃省妇幼保健院手术切除及活检的宫颈组织 ,其中正常对照组 1 0例、重度不典型增生 1 2例、原位癌 1 8例及宫颈鳞癌 I级 1 3例、II级 1 6例、III级 1 2例…     

p53, p21/WAF1, pRb的表达与T1G3膀胱癌预后的关系

目的　探讨p5 3,p2 1/WAF1和pRb的异常表达在T1G3 膀胱癌预后判断中的价值。　方法　对 4 7例T1G3 膀胱癌患者进行术后随访 ,采用p5 3,p2 1/WAF1和pRb单克隆抗体对手术标本行免疫组化染色。将肿瘤进展情况与染色结果和与预后相关的临床指标进行分析。　结果　 39例手术保留膀胱的患者总进展率为 5 9% ,其中 9例发生远处转移。 8例行膀胱全切术的患者 1例于术后 2年发现肺转移。肿瘤细胞核p5 3,p2 1/WAF1和pRb蛋白的异常表达率分别为 6 6 .7%、5 1.4 %和 71.8%。多因素分析显示 ,p5 3、pRb同时异常表达 (P <0 .0 5 )和p5 3、p2 1/WAF1、pRb三者同时异常表达(P <0 .0 1)与肿瘤进展显著相关。　结论　p5 3,p2 1/WAF1和pRb的表达与T1G3 膀胱癌患者的预后密切相关     

膀胱癌中Livin的表达及其与突变型P53的关系

目的探讨Livin在膀胱癌中的表达及意义，及其与突变型P53表达的相关性。方法采用34例膀胱癌石蜡标本及10例正常膀胱组织标本，通过免疫组化SP法检测Livin与突变型P53的表达。结果Livin在10例正常膀胱组织中不表达，而34例膀胱癌组织标本中有30例Livin阳性表达（P〈0．01）。在膀胱癌中Livin蛋白的阳性表达率和膀胱移行细胞癌的病理分级、临床分期、复发性无明显的相关性（P〉0．05）；突变型P53在正常膀胱组织中不表达，而34例膀胱癌组织标本中有18例突变型P53阳性表达（P〈0．01）；膀胱癌中Livin的表达率与突变型P53无相关性（P〉0．05）。结论Livin蛋白与突变型P53蛋白可作为诊断膀胱癌的特异性指标，亦为抗肿瘤基因治疗提供了新的靶点。     

细胞周期蛋白D1和P21WAF1在胃癌中的表达及其与化疗药物敏感性的关系

目的检测细胞周期蛋白（cyclin）D1、P21WAF1在胃癌组织中的表达,并探讨其与化疗药物敏感性的关系。方法采用MTT比色法观察80例胃癌原代培养细胞在体外对化疗药物羟基喜树碱（HCPT）、顺铂（DDP）、阿霉素（ADM）、氟尿嘧啶（5-Fu）及丝裂霉素（MMC）的敏感性;免疫组织化学染色检测cyclin D1和P21WAF1蛋白在胃癌组织中的表达情况。结果胃癌细胞对不同化疗药物敏感性不同：5-FU、MMC和DDP对胃癌细胞的抑制率显著高于ADM和HCPT（P〈0．05）。胃癌组织中cvclin D1和P21WAF1蛋白的阳性率分别为70．0％和47．5％。cyclin D1阳性表达者对5-Fu和HCPT的敏感性显著高于阴性表达者（P〈0．05）,而P21WAF1阴性表达者对MMC、5-FU和DDP的敏感性显著高于阳性表达者（P〈0．05）。结论cyclin D1和P21WAF1蛋白与胃癌对化疗药物敏感性有关．检测其表达对于化疗药物的选择具有一定的参考价值。     

VEGF,p53,P21WAF/CIP1和C-myc蛋白表达与肝细胞癌预后关系的研究

目的：探讨肝细胞癌（HCC）中VEGF,p53,p21WAF/CIP1和C-myc蛋白表达的情况及其与肝癌预后的关系。方法：用MaxvisionTM免疫组化法,检测61例HCC组织及其中52例癌旁组织VEGF,突变型p53,p21WAF/CIP1和C-myc蛋白的表达,观察相应的临床病理指标并进行统计学分析。结果：61例肝癌标本中,VEGF,p53,p21WAF/CIP1和C-myc蛋白阳性表达率分别为60.7%(37/61),39.3%(24/61),21.3%(13/61)和39.3%（24/61）;52例癌旁组织中上述4种蛋白阳性表达率依次为：38.5%(20/52),0%(0/52),5.8%(3/52)和59.6%（31/52）。两种组织中4种蛋白阳性表达率差异均有显著性(P<0.05)。肝癌组织中VEGF,p53蛋白表达与肿瘤门静脉癌栓的发生存在明显相关(P<0.05);Kaplan—Meier法生存分析发现VEGF,p53蛋白阳性表达患者肿瘤术后复发时间明显早于阴性表达者;多因素分析显示,肿瘤细胞分化、癌栓形成、VEGF及p53蛋白表达是HCC术后复发的风险因素。结论：肝癌组织中VEGF和p53蛋白的异常表达与肝癌的预后密切相关,可作为肝癌预后判断的参考指标。     

HDAC6、p21~(WAF1/CIP1)和CyclinD1在皮肤鳞状细胞癌中的表达

目的:检测皮肤鳞状细胞癌(SCC)组织中HDAC6、p21WAF1/CIP1及Cyclin D1的表达。方法:采用免疫组织化学SP法检测40例SCC及15例正常皮肤组织中HDAC6、p21WAF1/CIP1及Cyclin D1的表达。结果:SCC组织中HDAC6及Cyclin D1阳性表达率(70.0%、72.5%)均高于正常皮肤组织(33.3%、40.0%),p21WAF1/CIP1阳性表达率(32.5%)低于正常皮肤组织(66.7%),差异均有统计学意义(P0.05)。SCC组织中HDAC6与p21WAF1/CIP1表达呈负相关(r=-0.594,P=0.000),HDAC6与Cyclin D1表达呈正相关(r=0.330,P=0.038)。结论:HDAC6在SCC中可能通过影响p21WAF1/CIP1及Cyclin D1对肿瘤细胞的增殖分化产生影响,为HDAC6抑制剂应用于SCC的治疗提供理论依据。     

Evaluation of p21WAF1/CIP1 and cyclin D1 expression in the progression of superficial bladder cancer

Immunoreactivity of p21^WAF1/CIP1 and cyclin D₁ proteins was assessed in a cohort of 207 patients with superficial (pTa-pT₁) bladder cancer followed up for a mean of 4.9 years. The results of the immunostainings were compared with T category, WHO grade, tumor cell proliferation rate (MIB-1 score), the expressions of p53 and bcl-2 as well as survival. Sixty-eight percent and 75% of the tumors were p21^WAF1/CIP1 positive (≥5% of cells positive) and cyclin D₁ positive (≥10% of cells positive), respectively. The p21^WAF1/CIP1 expression was related to cyclin D₁ immunolabelling (P < 0.001) but not to the other variables studied. The expression of cyclin D₁ was inversely associated with T category (P=0.001), WHO grade (P=0.006), MIB-1 score (P=0.014), p53 expression (P=0.001), and bcl-2 (P=0.011) immunoreactivity. In univariate analysis, T category (P=0.0001), WHO grade (P < 0.0001), MIB-1 score (P < 0.0001), bcl-2 (P=0.0092), p53 (P=0.0016) and p21^WAF1/CIP1 (P=0.009) expressions were significant prognostic factors with regard to tumor progression, whereas cyclin D₁ was without any prognostic significance (P=0.1). Out of 123 p21 positive tumors 21 progressed, whereas only 2 out of 58 p21 negative tumors progressed. In multivariate analysis, the MIB-1 score was the only independent predictor of cancer-specific survival (P=0.03), whereas tumor grade (P=0.002) and cyclin D₁ expression (P=0.04) were independent predictors of tumor recurrence. Only the WHO grade (P=0.04) retained its prognostic value indicating the risk of progression. We suggest that in superficial bladder cancer p21^WAF1/CIP1 and cyclin D₁ immunohistochemistry provide no additional prognostic information compared with already established prognostic factors for predicting the risk of progressive disease. Received: 13 September 1999 / 22 March 2000     

Growth inhibitory effect of p21 and p53 containing adenoviruses on transitional cell carcinoma cell lines in vitro and in vivo

Altered p53 expression has been demonstrated in the majority of advanced transitional cell carcinoma (TCC) of the bladder tumors. The objective of this investigation was to examine the effect of the introduction of a p53 or p21^(WAF1/CIP1) adenovirus on the proliferation and apoptosis of various human TCC cell lines in vitro and in vivo. Proliferation was measured by ³H-thymidine incorporation. Apoptosis was measured by DNA fragmentation and bax expression. We also examined the effect of ex vivo introduction of the p21^(WAF1/CIP1) or the p53 gene on growth of the T24 TCC cells and UMUC-3 TCC cells introduced subcutaneously into athymic nude mice. We found that although the effect of the p21-adenovirus on the proliferation of various TCC lines varied with each individual cell line, there was a substantial growth inhibition observed (greater than 80% growth inhibition) in seven of the eight TCC cell lines at the highest viral dosage. In contrast, after 24 h, the highest dosage of the p53-adenovirus produced only a heterogeneous decrease in proliferation compared to the highest dose of the p21^(WAF1/CIP1)-adenovirus (40–90%). In ex vivo experiments, no tumors were found in nude mice injected subcutaneously with either TCC cell line exposed in vitro to the AdSCMV-p21^(WAF1/CIP1) or AdSCMV-p53 viruses before three weeks. There was a threefold decrease in tumor square area at week 5 in the Ad5CMV-p21^(WAF1/CIP1) or Ad5CMV-p53 TCC cells injected mice (p<0.001, p<0.009) compared to either mock or Ad5CMVLacZ TCC bladder tumor cells. These data suggest that significant portion of the effect of altered p53 on TCC phenotype may be mediated through the p21^(WAF1/CIP1) pathway. Thus, the restoration of p21^(WAF1/CIP1) function in this tumor system may be a beneficial therapeutic strategy.     

抑癌基因P16与癌基因P21在膀胱肿瘤中的表达及意义

目的：探讨癌基因Ｐ２１和抑癌基因Ｐ１６的表达与膀胱癌生物学行为之间的关系。方法：采用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法对４０例膀胱移行细胞癌癌基因Ｐ２１和抑癌基因Ｐ１６进行检测。结果：Ｐ２１和Ｐ１６阳性表达率为６７．５％和５２．５％;Ｐ２１阳性表达率与膀胱移行细胞癌的病理分级和临床分期呈正相关,而Ｐ１６阳性表达率与膀胱移行细胞癌的病理分级和临床分期呈负相关。结论：Ｐ２１、Ｐ１６基因蛋白的表达与膀胱肿瘤组织病理分     

P53和MDM2基因表达及与膀胱癌生物学行为的关系

目的：研究P53基因和MDM2基因表达及与膀胱癌生物学行为的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测49例膀胱移行细胞癌中P53基因和MDM2基因的表达。结果：P53基因的阳性表达率为51．0％（25／49）,其表达率随膀胱癌的分期、分级升高而升高。MDM2基因的阳性表达率为32．7％（14／49）,其表达率随膀胱癌的分期、分级降低而升高。单有P53基因阳性表达的膀胱癌几乎均为浸润性和中、低分化癌;而当P53基因并MDM2基因表达时,膀胱癌的侵袭性和恶性度明显降低。2年复发组和未复发组的P53基因和MDM2基因的阳性表达率差异均无显著性意义。结论：联合检测P53和MDM2基因表达可更准确地解释和描述膀胱癌的生物学行为。这两种基因表达与膀胱癌预关系值得进一步研究。     

P~(16)、P~(53)、P~(21)/WAF1蛋白的表达与原发性肝癌诊断与预后关系的研究

目的:探讨肝癌和癌旁组织中P~(16)、P~(53)、P~(21)/WAF1蛋白的表达与原发性肝癌的诊断和预后的关系。方法:应用免疫组化技术检测48例手术切除肝癌及癌旁组织中肿瘤相关基因的表达。结果:P~(16)、P~(53)、P~(21)/WAF1蛋白在肿瘤组织中的阳性表达分别为39.6％、56.2％、43.7％,与癌旁组织中的表达差异有显著性(P<0.05),瘤体直径大于5cm、包膜不完整的肿瘤、生存期小于2年和伴有瘤栓的肿瘤组中,P~(21)、P(53)、P~(16)与癌旁组织的表达差异有显著性(P<0.05);在生存期大于2年和复发时间大于6个月的病例中,肿瘤组织表达P~(16)蛋白明显高于生存期小于2年和复发时间小于6个月的病例(P<0.05);在伴有瘤栓和侵润生长的肿瘤组织中P~(53)蛋白表达与不伴有瘤栓和膨胀生长的表达差异有显著性;P~(21)在低分化和早期复发的肿瘤组织中表达显著高于高分化和复发时间较晚的肿瘤组织(P<0.05)。结论:P~(53)基因突变与肝癌的分期、门静脉癌栓的形成、肿瘤的侵袭性有关,是肝癌发展的晚期事件,P~(21)与肝癌的分化和预后有关;P~(16)与肝癌的复发和预后有关。P~(16)、P~(53)、P~(21)可以作为对肝癌分化、侵袭、转移和预后进行预测的标志。     

膀胱癌多发或复发的克隆起源

目的 探讨人膀胱移行上皮癌多发性、复发性的细胞克隆起源。方法 采用ｐ５３基因突变的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析及ＤＮＡ测序检测６例患者１４个表浅、低分级原发加多发或复发的膀胱移行上皮癌标本及ｐ２１＾ＷＡＦ１／ＣＩＰ１蛋白的表达。结果 在１４个膀胱移行上皮癌标本均有ｐ５３基因的点突变,同一例患者所有标本的点突变分别在同一位点上;１４个膀胱移行上皮癌标本中仅有５个有ｐ２１＾ＷＡＦ１／ＣＩＰ１蛋白的表达。结论