骨髓内皮细胞衬里人工血管间置移植的实验研究

通过骨髓内皮细胞衬里人工血管间置移植的动物实验,为人工血管内皮化的临床应用作准备.方法分离犬骨髓单核细胞,ePTFE人工血管以二种规格(4 mm×4 cm和8 mm×5 cm)完成内皮化.分别作犬颈总动脉和下腔静脉间置移植(各10条),术后作多谱勒超声检查,处死后作移植血管大体肉眼、病理、免疫组化、扫描电镜等检查.结果颈总动脉移植组2周和2月实验侧通畅率分别为100%(5/5)和60%(3/5),同期对照侧通畅率分别为40%(2/5)和0%(0/5);下腔静脉移植组实验组和对照组2月移植血管通畅率为83.3%(5/6)和50%(2/4).扫描电镜显示颈总动脉移植血管腔面内皮细胞覆盖率实验组和对照组2周时存在差异(84%±11% 与 43%±15%,P<0.05),下腔静脉移植实验组和对照组内皮细胞覆盖率也有差异(95%±6%与77%±13%, P<0.05);颈总动脉和下腔静脉移植物2月时,血管内膜厚度实验组小于对照组(116±28 μm与162±30 μm, P<0.05; 91±24 μm与143±35 μm, P<0.05).结论骨髓内皮细胞衬里的ePTFE人工血管在体内能较快完成内皮化过程,能抑制内膜增生;循环内皮细胞作为内皮细胞的潜在来源,具有一定临床应用价值.     

尿酸盐对血管内皮细胞表达血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)mRNA的影响

目的观察不同浓度或不同时间范围内尿酸盐对人血管内皮细胞（endothelial cell of vessels,ECV）血管细胞粘附分子（VCAM-1）mRNA表达的影响。方法体外培养人血管内皮细胞,分别用710μmol／L、1070μmol／L、1430μmol／L（低、中、高）等不同浓度的尿酸盐刺激,用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）技术测定血管内皮细胞VCAM-1的mRNA表达;尿酸盐终浓度为1070μmol／L,分别孵育细胞8h、16h、24h、48h后用RT-PCR技术测定血管内皮细胞VCAM-1的mRNA表达。结果（1）低、中、高浓度尿酸盐刺激组细胞VCAM-1的mRNA表达均较空白对照组显著提高（P〈0．01）,以中浓度尿酸盐刺激组表达为最高。（2）内皮细胞在中浓度尿酸盐刺激下,8h、16h、24h、48h VCAM-1的mRNA表达均较空白对照组显著升高（P〈0．01）,但其表达于16h达到峰值。结论尿酸盐能直接作用于人的血管内皮细胞,诱导炎症分子的超表达,这也可能是其促进动脉粥样硬化斑块形成的重要机制之一。     

血管平滑肌细胞和内皮细胞联合种植生物可降解材料的组织工程血管研究

目的探讨应用组织工程学方法构建人工血管片。方法应用聚(乙交酯/丙交酯)二元共聚物(PLGA)无纺网织片作为细胞支架,体外逐层顺序种植血管平滑肌细胞、内皮细胞制作组织血管片。免疫组织化学方法鉴定平滑肌细胞、内皮细胞;扫描电镜观察组织血管片生长情况;放射免疫方法检测内皮细胞分泌内皮素、前列腺素E的功能。结果免疫组织化学染色鉴定平滑肌细胞肌动蛋白染色阳性,内皮细胞凝血Ⅷ因子相关抗原染色阳性。组织血管片在扫描电镜下显示出细胞融合,连接成片。放射免疫方法可以检测出平滑肌细胞和内皮细胞联合培养的组织片分泌内皮素(229pg/ml±34pg/ml),分泌前列环素的代谢产物6-酮-前列腺素F1α(402pg/ml±108pg/ml)。结论应用PLGA无纺网织片作为细胞支架,体外逐层种植血管平滑肌细胞、内皮细胞制作的组织血管片,基本具备正常血管组织基本形态结构和功能。     

不同浓度雌激素对卵巢癌细胞VEGF-C和TGF-β_1表达的影响

目的观察在不同浓度的雌激素作用下,卵巢癌细胞转化生长因子-β1（TGF-β1）、血管内皮细胞生长因子C（VEGF-C）表达的变化。方法在体外不同浓度（10-11、10-10、10-9、10-8mol/L 17β-E2）的17-β雌二醇（E2）作用下,用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及ELISA方法,检测卵巢癌SKOV3细胞株VEGF-CmRNA的表达及TGF-β1分泌量水平的变化。结果 SKOV3细胞在E2的作用下,TGF-β1的分泌量呈剂量浓度反应,随着10-11~10-8mol/L17-βE2浓度的增加,TGF-β1的分泌量明显增加;随着雌激素浓度的增加,SKOV3细胞VEGF-C mRNA的PCR产物表达也呈递增趋势。10-11、10-10、10-9和10-8mol/L 17β-E2组与对照组比较,VEGF-C,TGF-β1的表达有显著性差异（P〈0.05）。结论雌激素可上调SKOV3细胞的VEGF-C mRNA表达、TGF-β1分泌水平,两者均呈浓度递增趋势。     

三七总皂苷对拟缺血损伤脑微血管内皮细胞转化生长因子-β、血管内皮生长因子表达的影响

目的观察三七总皂苷对拟缺血损伤脑微血管内皮细胞的凋亡和转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的影响,以期揭示三七总皂苷发挥脑保护作用的分子机制。方法原代培养大鼠脑微血管内皮细胞,采用氧糖剥夺法制备拟缺血损伤模型,分为正常组、模型组、三七总皂苷组,流式细胞术检测细胞凋亡情况、酶联免疫吸附法检测细胞TGF-β1,VEGF-B水平、Western blotting法检测细胞TGF-β蛋白的表达水平。结果模型组细胞凋亡率与正常组相比显著性升高（P<0.01）;与模型组相比,三七总皂苷组细胞凋亡率明显下降（P<0.01）;与正常组相比,模型组细胞上清液中TGF-β1含量明显增多（P<0.05）;与正常组相比,模型组细胞上清液中VEGF-B含量显著性增多（P<0.01）;与模型组相比,三七总皂苷组中细胞上清液中VEGF-B含量明显增多（P>0.05）;正常组内皮细胞TGF-β表达量较少,造模后,TGF-β表达显著增加（P<0.05）,三七总皂苷能够下调TGF-β蛋白的表达。结论三七总皂苷可能通过抑制内皮细胞的凋亡,保持内皮细胞的完整性,上调VEGF表达,促进缺氧条件下血管的新生,这可能是三七总皂苷脑保护的机制之一。     

白细胞介素1β刺激脑微血管内皮细胞释放前列腺素E2的经时变化

目的探讨白细胞介素1β(IL-1β)刺激体外培养的大鼠脑微血管内皮细胞释放前列腺素E2(PGE2)的经时变化. 方法30 ng/ml浓度的IL-1β刺激体外培养的大鼠脑微血管内皮细胞,分别于刺激后0.5、1、2、4、8、12和24 h收集细胞外液,用酶联免疫法(ELISA)测定各时间点细胞外液PGE2含量,并对各相应时间点的内皮细胞进行细胞计数. 结果①空白组内皮细胞计数值随时间延长而持续性增加,12 h趋于稳定;IL-1β刺激组细胞计数值随时间延长也相应增加,12 h基本趋于稳定,虽各时间点细胞数绝对值略少于空白组,但两者无统计学差异(P>0.05). ②由于细胞的不断生长,空白组PGE2含量也在不断地增加,12 h 为(10.80±1.46) pg/ml,达最大值,24 h为(9.72±2.78) pg/ml,有所下降.加入IL-1β刺激后8 h,细胞外液PGE2含量已开始明显增加,12 h 为(16.93±2.98)pg/ml,达最大值,与空白组比较,有显著性差异(P<0.01);24 h为(16.82±1.54)pg/ml,虽有所降低,但与空白组比较,仍具显著性差异(P<0.01). 结论大鼠脑微血管内皮细胞经IL-1β刺激后,细胞释放的PGE2在12 h达峰值,以后缓慢下降.     

雌二醇对人脐静脉内皮细胞一氧化氮生成的作用

目的：观察17β－雌二醇（17β－E2）对原代培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）一氧化氮（NO）生成的影响,探讨雌激素影响体内NO水平的机制。方法：采用胰蛋白酶平铺消化法培养原代HUVEC,不同浓度17β－E2作用HUVEC不同时间,采用重氮法测定NO含量。结果：10^-6mol/L,10^-8mol/L 17β-E2作用1h,NO即明显增高（P＜0．001）,10^-6mol/L,17β－E2作用30min,NO即明显增高（P＜0．05）,10^-10mol/L,10^-8mol/L 17β－E2作用30min,NO与对照组无统计学差异。结论：一定剂量17β－E2可促进HUVEC生成NO,可能为降低血管阻力,抑制动脉粥样硬化（AS）形成的重要机制之一。     

实验性高胆固醇血症兔离体主动脉功能变化的研究

目的探讨高胆固醇血症对血管功能的影响。方法20只新西兰雄性兔随机分为2组正常饮食组(normal cholesterol,NC)10只及高胆固醇饮食组(hypercholesterol,HC)10只。4周后取出每只兔的降主动脉,5mm宽动脉环放置于含有25mlKreb液的组织－器官水浴系统中。分别测量游离血管对乙酰胆碱（10-10～10-5mol/L)的舒张反应及对去甲肾上腺素（10-10～10-5mol/L）的收缩反应。结果2组兔血胆固醇有显著差异,其中NC组（30.1±11.2）mg/dl,HC组（987.3±110.0)mg/dl(P<0.01);HC组血管对乙酰胆碱舒张反应与NC组比较明显减弱,HC组最大为（58.50±6.17）％,NC组最大为(103.2±6.9)％(P<0.01）;HC组血管对去甲肾上腺素反应增强,最大收缩力HC组为(4.15±0.56)g,NC组为(2.9±0.3)g(P<0.05）。2组动脉病理学检查无动脉硬化的改变。结论高胆固醇血症降低血管内皮依赖性舒张反应,增加血管对去甲肾上腺素的收缩反应。高胆固醇血症时血管内皮功能改变早于动脉粥样硬化的结构改变。     

14，15-DHET对牛主动脉内皮细胞中内皮型 一氧化氮合酶表达影响的研究

目的：探讨14,15-二羟基二十碳三烯酸（14,15-DHET）对牛主动脉内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶表达以及血管形成的影响。方法：将牛主动脉内皮细胞（bovine aortic endothelial cells,BAECs）按照不同14,15-DHET处理浓度分组为0（对照组）、0.1、0.5、1、5 μmol/L组,刺激时间均为24 h;按照时间梯度分组为0（对照组）、4、8、12、24 h,刺激浓度均为5 μmol/L,检测其内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）的蛋白表达水平,同时将人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）按照不同14,15-DHET浓度分组为0（对照组）和5 μmol/L（处理组）,刺激24 h后观察14,15-DHET对血管形成的影响。结果：在浓度梯度组中用0.1、0.5、1、5 μmol/L的14,15-DHET处理BAECs后细胞内eNOS蛋白表达水平（1.456±0.008、2.202±0.045、3.931±0.170、4.588±0.179）与对照组相比均明显升高（P＜0.05）;在时间梯度组中用5 μmol/L的14,15-DHET处理BAECs 4、8、12、24 h后细胞内eNOS蛋白表达水平（1.521±0.021、1.922±0.061、3.642±0.173、4.813±0.134）与对照组相比均明显升高（P＜0.05）;使用5 μmol/L的14,15-DHET刺激HUVECs后,处理组小管总长度和小管分枝总长度（13 715.000±448.092,12 538.000±574.182）与对照组（10 426.000±950.537,8 672.000±1 025.486）相比均明显升高（P=0.043,P=0.035）。结论：本研究结果表明14,15-DHET可以增加牛主动脉内皮细胞的eNOS蛋白表达,并且有促进血管形成的作用。     

miR-503-5p对IL-1β诱导的血管内皮细胞增殖、迁移、凋亡和黏附的影响

目的探讨miR-503-5p对白细胞介素1β（IL-1β）诱导的血管内皮细胞增殖、迁移、凋亡和黏附的影响和分子机制。方法将人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）分为NC组、IL-1β组、IL-1β+anti-miR-con组及IL-1β+anti-miR-503-5p组。分别采用噻唑蓝（MTT）法、黏附实验、流式细胞术、Transwell实验检测HUVECs增殖、黏附、凋亡和迁移能力。Western blotting检测细胞间黏附分子1（ICAM-1）、血管细胞黏附分子1（VCAM-1）表达水平。结果与NC组比较,IL-1β组HUVECs细胞活力、迁移细胞数显著降低,细胞黏附数、凋亡率、ICAM-1和VCAM-1蛋白表达显著升高（P < 0.01）。与IL-1β+anti-miR-con组比较,IL-1β+anti-miR-503-5p组HUVECs细胞活力、迁移细胞数显著升高,细胞黏附数、凋亡率、ICAM-1和VCAM-1蛋白表达显著降低（P < 0.01）。结论抑制miR-503-5p表达可促进血管内皮细胞增殖和迁移,抑制细胞黏附和凋亡,其机制可能与抑制ICAM-1和VCAM-1表达有关。     

高迁移率族蛋白1诱导内皮细胞释放细胞因子的作用及其与脂多糖对白细胞介素6释放的协同效应

目的观察高迁移率族蛋白1(HMGB1)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)释放细胞因子的影响及其对脂多糖(LPS)诱导细胞因子白细胞介素6(IL-6)表达的作用。方法用LiquiChip液相蛋白芯片系统检测重组HMGB1蛋白(15ng/ml)诱导HUVEC11种细胞因子/趋化因子的水平变化;检测不同浓度HMGB1(0~75ng/ml)刺激后不同时间点(0、1、3、6、12和24h)HUVEC分泌IL-6的水平以及HMGB1(15ng/ml)与LPS(10ng/ml)共同刺激对HUVEC分泌IL-6的影响。结果HMGB1刺激后HUVEC分泌粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、干扰素γ(IFN-γ)、IL-6、IL-8和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的水平明显升高(均P<0.01),分别是对照(未加刺激)的5.7、4.2、27.8、12.8和5.4倍;HMGB1蛋白以时间和剂量依赖方式诱导IL-6的分泌,在刺激后3~6h,IL-6水平开始增加,在6h时IL-6由对照的32pg/ml±21pg/ml增加到75pg/ml±22pg/ml(P<0.01),12h(453pg/ml±78pg/ml)~24h(901pg/ml±184pg/ml)持续升高(P<0.01);随着HMGB1浓度的增加,IL-6的水平也明显增加,当HMGB1浓度为3、15、75ng/ml时,IL-6分别是155pg/ml±33pg/ml、901pg/ml±184pg/ml、1508pg/ml±378pg/ml,与基础值32pg/ml±21pg/ml相比,差异有统计学意义(P<0.01)。分别用LPS(10ng/ml)和HMGB1(15ng/ml)单独刺激HUVEC时,IL-6的含量从基础的32pg/ml±22pg/ml分别增加至289pg/ml±42pg/ml和901pg/ml±184pg/ml(均P<0.01);如果用二者共同刺激HUVEC,IL-6的生成量大大增加(2361pg/ml±299pg/ml),二者存在协同作用(F=69.405,P<0.01)。结论HMGB1蛋白可诱导HUVEC释放多种炎性细胞因子;HMGB1诱导IL-6的上调具有时效性和量效性关系,并可协同LPS刺激HUVEC释放IL-6,在脓毒症的发生和发展中起重要作用。     

醛固酮对系膜细胞合成纤溶酶原激活剂抑制物-1的影响

目的 探讨醛固酮及阻断其受体后对系膜细胞生成纤溶酶原激活剂抑制物1（PAI-1）的影响。方法 醛固酮单独刺激大鼠系膜细胞24h以及采用螺内酯阻断后,用RT-PCR观察系膜细胞PA1-1mRNA的变化;用Western印迹方法检测细胞上清液中的PA1-1;采用ELISA方法测定细胞上清液中转化生长因子p1（TGF-β1）的含量;采用激光共聚焦检测系膜细胞内的活性氧（ROS）水平。观察不同浓度及不同作用时间的醛固酮刺激系膜细胞对PA1-1mRNA的影响。结果 醛固酮使系膜细胞PA1-1mRNA及蛋白表达明显升高,同时升高了TGF-β1的表达和细胞内的ROS水平。醛固酮使PA1-1mRNA表达呈剂量依赖性增加。100nmol／L醛固酮刺激系膜细胞4h后PA1-1mRNA表达才明显增加。加用螺内酯后使升高的PA1-1、TGF-β1表达以及细胞内ROS恢复到正常水平。结论醛固酮能独立促进大鼠系膜细胞分泌PA1-1的增加,同时醛固酮使TGF-β1表达以及细胞内ROS水平升高,而这些都是通过盐皮质激素受体介导的。     

Relation between changes of TXB2 and PGF1 alpha and the severity of the disease and pathological lesions in cases of severe icteric hepatitis.

Clinically, 32 cases of intrahepatic cholestasis and 30 cases of severe chronic hepatitis with a bilirubin level higher than 171 mumol/L were studied. The results showed that bilirubin was 420 mumol/L in the first group, and 480 mumol/L in the second group (P greater than 0.05); TXB2 was 306 pg/ml and 271 pg/ml (P greater than 0.05) while PGF1 alpha was 253 pg/ml and 494 pg/ml (P less than 0.05) respectively, both were higher than their normal values (P less than 0.01). The cases were divided into acute, moderate and severe types according to their pathological lesions. Experimentally, intra- and extrahepatic cholestasis and necrotic liver tissues were induced by ANIT, ligation of common bile duct, and carbon tetrachloride respectively. Bilirubin was 629 mumol/L, 124.8 mumol/L, and lower than 17.1 mumol/L (P less than 0.01); plasma TXB2 was 634 pg/ml, 1036 pg/ml, and 239 pg/ml (P less than 0.01); PGF1 alpha was 186 pg/ml, 218 pg/ml, and 868 pg/ml (P less than 0.01) in the three groups respectively. No statistic difference was found in their TXB2 and PGF1 alpha. Our studies suggested that plasma TXB2 and PGF1 alpha in the liver was not related to the severity of liver lesions. TXB2 and PGF1 alpha are positively correlated with the increase of bilirubin while TXB2 is negatively correlated with PGF1 alpha, which might serve as an index for cholestasis, and be a cause for deepening jaundice.

     

肾上腺髓质素及尾加压素Ⅱ在先天性心脏病肺动脉高压中作用的研究

目的探讨先天性心脏病(CHD)合并肺动脉高压(PH)患者手术前后血浆肾上腺髓质素(ADM)及尾加压素Ⅱ(UⅡ)变化的临床意义。方法将52例患者按肺动脉收缩压分为3组:无PH组(<30 mm Hg)17例,轻度PH组(30~49 mm Hg)18例,中重度PH组(≥50 mm Hg)17例。测定3组术前、术后即刻及术后7 d ADM及UⅡ含量,并比较手术前后的变化;分析两者及其与肺动脉压(PAP)间的相互关系。结果(1)3组患者肺动脉压(PAP)与血浆ADM浓度呈正相关(术前r=0.8012,P<0.01;术后即刻r=0.6325,P<0.01;术后7 dr=0.7126,P<0.01)。(2)3组患者UⅡ浓度则与PAP无相关性(均P>0.05)。(3)无PH组术前ADM浓度为33 pg/m l±5 pg/m l、术后即刻为29 pg/m l±4 pg/m l、术后7 d为20 pg/m l±3 pg/m l;轻度PH组术前ADM浓度为44 pg/m l±8 pg/m l、术后即刻40 pg/m l±6 pg/m l、术后7 d为34 pg/m l±4 pg/m l;中重度PH组术前ADM浓度为60 pg/m l±10 pg/m l、术后即刻58 pg/m l±8 pg/m l、术后7 d为38 pg/m l±4 pg/m l。各组术后ADM浓度呈下降趋势,但只有术后7 d与术前比较差异有统计学意义(无PH组q=5.41,P<0.01;轻度PH组q=4.76,P<0.01;中重度PH组q=6.32,P<0.01)。(4)无PH组术前UⅡ浓度为2.2 pmol/L±0.5pmol/L、术后即刻为2.2 pmol/L±0.44 pmol/L、术后7 d为2.2 pmol/L±0.6 pmol/L;轻度PH组术前UⅡ浓度为2.7 pmol/L±0.6 pmol/L、术后即刻2.6 pmol/L±0.6 pmol/L、术后7 d为2.6 pmol/L±0.5pmol/L;中重度PH组术前UⅡ浓度为2.9 pmol/L±0.6 pmol/L、术后即刻2.6 pmol/L±0.7 pmol/L、术后7 d为2.8 pmol/L±0.4 pmol/L。3组患者手术前后UⅡ浓度差异无统计学意义(均P>0.05)。结论(1)ADM在PH形成和血管重建中发挥重要的作用。(2)UⅡ与PAP无相关性,但是不能排除UⅡ在PH形成和血管重建中有重要的作用。(3)血浆ADM水平可作为判断PH严重程度的指标之一。     

豚鼠钩体病PDH模型血浆栓素和前列腺环素的测定

Guinea pigs were intravenously injected with icterhemorrhagiae serogroup Lai serovar strain 017 leptospirosis to model the pulmonary diffuse hemorrhage (PDH) in leptospirosis. Thirty-eight hours after the injection, the jugular arteries were catheterized to collect blood sample. The plasma was prepared for radioimmunoassay of TXB2 and 6-keto-PGF1a, the stable metabolites of TXA2 and PGI2 respectively. The plasma level of TXB2 in the experimental group, 107.15 +/- 41.65 pg/ml (n = 7), almost doubled that of the control, 54.05 +/- 12.93 pg/ml (n = 7), with significant difference (P less than 0.01); meanwhile, no significant difference was observed of 6-keto-PGF1a, 67.97 +/- 16.89 pg/ml (n = 6) vs. 98.06 +/- 40.63 pg/ml (n = 9) with P greater than 0.1. The fact that TXA2 causes vasoconstriction and increases vessel permeability suggests that TXA2 elevation should play a role in the mechanism of PDH in leptospirosis.     

Effect of surgical castration on risk factors for arteriosclerosis of patients with prostate cancer

Objective To analyze the effect of castration on risk factors for arteriosclerosis of patients with prostate cancerMethods Thirty patients with primary regional prostate adenocarcinoma limited to the prostate theca were selected in this study.Serum levels of testosterone (T), free testosterone (FT), dehydroepiandrosterone (DHEA), sex hormone-binding globulin (SHBG), prostatic specific antigen (PSA), triglyceride (TG), total cholesterol (TC), high density lipoprotein-cholesterol (HDL-C), low density lipoprotein-cholesterol (LDL-C), apoprotein α(1) (APOα(1)) and apoprotein β (APOβ), insulin, plasma fibrinopeptide A (FPA), plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) and fibrinogen were determined just prior to, 1 week and 1, 4 and 8 months after castration.Results T, FT and PSA decreased significantly 1 week after castration (21.12±15.11 ng/ml vs 383.9±62.6 ng/ml, P&lt;0.001; 4.08±3.29 pmol/L vs 34.11±11.59 pmol/L, P&lt;0.001; 14.34±7.77 ng/ml vs 23.51±6.57 ng/ml, P=0.001, respectively) and continued to decrease until reaching their lowest levels 8 months after castration.DHEA and SHBG did not undergo any changes.TG, fasting insulin and glucose, 2-hour insulin and glucose levels were significantly elevated 1 month after castration (1.84±0.61 mmol/L vs 1.30±0.40 mmol/L, P&lt;0.05; 18.16±5.57 mU/L vs 9.47±3.81 mU/L, P&lt;0.05; 4.77±0.66 mmol/L vs 3.92±0.34 mmol/L, P&lt;0.05; 65.52±14.78 mU/L vs 36.94±17.12 mU/L, P&lt;0.01; 6.98±0.79 mmol/L vs 6.01±0.23 mmol/L, P=0.001, respectively).TC, LDL-C, FPA and PAI-1 levels were elevated 4 months after castration (6.56±0.99 mmol/L vs 5.29±0.75 mmol/L, P&lt;0.01; 4.09±0.86 mmol/L vs 3.04±0.15 mmol/L, P&lt;0.01; 3.39±1.67 nmol/L vs 1.48±0.50 nmol/L, P&lt;0.01; 27.02±5.98 ng/ml vs 21.78±3.16 ng/ml, P&lt;0.05, respectively), continuing to increase after that point.Insulin sensitive index (ISI) decreased significantly 1 month after surgery (-4.42±0.36 vs -3.50±0.39, P&lt;0.001), and continued to decrease from that point forward.HDL-C, APOα(1), APOβ and fibrinogen remained at pre-operative levels.There was a negative linear correlation between FT and TG, TC, LDL-C, PAI-1, FPA, fasting insulin and glucose, 2-hour insulin and glucose (r=-0.311, -0.384, -0.385, -0.339, -0.353, -0.381, -0.303, -0.460 and -0.395, respectively; P&lt;0.05).A similar phenomenon occurred with T (r=-0.308, -0.309, -0.356, -0.320, -0.430, -0.453, -0.435, -0.483 and -0.512, respectively; P&lt;0.05).T and FT were positively associated with ISI (r=0.555 and 0.501; P&lt;0.001).Conclusions At 8 months follow-up of the study subjects, we found that lower androgen levels have adverse effects on lipid metabolism, coagulative function and insulin sensitivity, related to arteriosclerosis in men.     

乙型肝炎患者外周血Ⅱ型树突状细胞表型和功能鉴定及其意义的研究

目的　探讨Ⅱ型树突状细胞 (typeII dendriticcells,DC2 )数量和功能的变化及其与乙型肝炎 (乙肝 )患者病程、淋巴细胞亚群和HBVDNA病毒载量的关系。方法　采用流式细胞分析技术对 10 3例乙肝患者 (包括HBV携带者 11例 ,慢性乙肝轻度 35例 ,中度 33例 ,重度 13例 ,急性乙肝11例 )和 2 5例健康人 (对照组 )的外周血DC2进行检测 ,同时检测患者血常规 ,计算出DC2绝对数 ;用体外灭活的 1型单纯疱疹病毒 (HSV 1)刺激外周血单个核细胞 (PBMC)并与PBMC进行 2 4h共培养 ,检测上清中DC2的α干扰素产生能力 ;统计分析DC2数量、功能变化及其临床意义。结果　对照组外周血DC2占PBMC比例为 0 32 %± 0 13% ,绝对数为 (7 2± 2 4 ) 10 6个 /L。与对照组比较 ,HBV携带者DC2的比例 (0 32 %± 0 12 % )和绝对数 (6 9± 3 4 ) 10 6个 /L无明显下降 ;急性乙肝患者的DC2比例和绝对数下降 ,但无统计学意义 ;而慢性肝炎患者DC2的比例和绝对数随病程加重而降低 ,中、重度肝炎的DC2下降较轻度更为显著。DC2产生α干扰素的功能在急、慢性乙肝患者及HBV携带者均降低 ,各组患者之间差异不显著 ;DC2的数量与HBVDNA病毒载量未发现相关性 ,但与自然杀伤 (NK)细胞及CD8+ T数量高低存在正相关。结论　慢性乙肝患者外周血DC2数量和     

慢性乙型肝炎合并肝癌患者树突状细胞负载乙型肝炎病毒抗原后表型和功能的研究

目的研究慢性乙肝合并肝细胞癌(HCC)患者外周血髓样树突状细胞(mDC)负载乙型肝炎病毒(HBV)抗原后表型和功能的变化。方法用成分血分离机采集21例肝细胞癌患者和4名健康人的外周血单核细胞(PBMC),用无血清AIMV培养基加入粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)和白细胞介素(IL)4等因子诱导mDC分化、发育和成熟,同时加入HBcAg或HBsAg致敏mDC,通过流式细胞仪分析mDC表面分子的表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测mDC培养上清中IL12、IL10的含量,通过自体混合淋巴细胞反应(AMLR)比较抗原致敏后mDC刺激淋巴细胞增殖的能力。结果在肝细胞癌患者中,(1)经HBcAg致敏的mDC表面分子CD80、CD86、CD40、HLADR的表达率(55%±26%、80%±13%、70%±13%、73%±24%)明显高于无抗原致敏组mDC(29%±25%、35%±18%、44%±26%、45%±23%,P<005);经HBsAg致敏的mDC仅HLADR的表达率(63%±15%)高于无抗原致敏组(45%±23%,P<005),其他表面分子差异无统计学意义。(2)在AMLR中经HBV抗原致敏的mDC刺激淋巴细胞增殖的能力明显高于无抗原致敏组(P<005),而且HBcAg的致敏效果优于HBsAg的致敏效果(P<005)。(3)经HBcAg致敏的mDC分泌IL10和IL12的量(236pg/ml±95pg/ml,733pg/ml±212pg/ml)明显高于经HBsAg致敏的mDC(35pg/ml±9pg/ml,135pg/ml±63p     

Her-2/neu小分子干扰RNA对肺腺癌细胞周期和凋亡机制的影响

目的研究人类表皮生长因子受体2(Her2/neu)小分子干扰RNA(siRNA)对Her2/neu过表达的肺腺癌细胞的细胞周期和凋亡机制的影响。方法用化学合成的靶向Her2/neusiRNA转染肺腺癌calu3细胞,转染前后通过逆转录聚合酶链反应(RTPCR)测定细胞中Her2/neu、细胞周期蛋白(Cyclin)D1mRNA水平;流式细胞术检测Her2/neu蛋白水平和细胞周期的变化;AnnexinⅤ异硫氢酸荧光素(FITC)试剂盒检测肺癌细胞的凋亡情况;荧光分光光度法测定Caspase3活性;酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测培养液上清中血管内皮生长因子(VEGF)水平。结果Her2/neusiRNA能在mRNA和蛋白水平下调肺癌细胞株calu3中Her2/neu基因的表达。calu3细胞转染Her2/neusiRNA48h后处于G0/G1期的细胞增多,同时S期的细胞比例减少,与未转染对照组、空载体组和非特异性siRNA组比较差异有统计学意义(F=6.1,P<0.01)。转染Her2/neusiRNA后CyclinD1mRNA水平下降,同时培养上清液中的VEGF含量为176pg/ml±6pg/ml(F=24.7,P<0.01),Caspase3活性为135%±4%(F=8.9,P<0.01),细胞凋亡率为25.1%±1.2%(F=10.3,P<0.01)。结论化学合成的靶向Her2/neusiRNA能够下调Her2/neu基因表达,继而降低CyclinD1和VEGF水平,激活Caspase3途径,从而阻滞细胞周期于G0/G1期和诱导凋亡。     

替普瑞酮对类固醇致胃黏膜损伤的保护作用

目的研究替普瑞酮对类固醇激素所致胃黏膜损伤的保护作用及其机制。方法50只雄性SD大鼠随机分为空白组、实验对照组、低剂量替普瑞酮组、中剂量替普瑞酮组和高剂量替普瑞酮组,每组10只。采用泼尼松龙皮下注射制备大鼠胃黏膜损伤模型,低、中、高剂量组替普瑞酮的剂量分别为50、100、200mg/kg,给药7d,每天1次。观察胃黏膜的病理变化,计算溃疡指数、胃黏膜组织学损伤指数,放射免疫法检测血浆内皮素1和胃黏膜前列腺素E2(PGE2)水平,Griess法检测血清NO含量。结果类固醇激素能引起胃黏膜显著出血性损伤,实验对照组大鼠溃疡指数中位数为44.5,组织学损伤指数中位数为5.5,明显高于空白组(均为0,均P<0.01);实验组大鼠血浆内皮素1水平为399pg/ml±74pg/ml,高于空白组(279pg/ml±56pg/ml,P<0.01);血浆NO水平(27μmol/L±5μmol/L)低于空白组(36μmol/L±5μmol/L,P<0.01);胃黏膜PGE2水平(154pg/mg±83pg/mg)低于空白组(337pg/mg±112pg/mg,P<0.01)。低、中、高剂量替普瑞酮组的溃疡指数中位数分别为32.5,23.0,23.0,均明显低于实验组(均P<0.01);组织学损伤指数中位数分别为3.0,3.0,1.5,均明显低于实验组(均P<0.01),内皮素1水平分别为299pg/ml±99pg/ml,284pg/ml±85pg/ml,189pg/ml±32pg/ml,均明显低于实验对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.01);NO水平分别为56μmol/L±16μmol/L,62μmol/L±12μmol/L,83μmol/L±9μmol/L,均明显高于实验对照组(均P<0.01),高剂量替普瑞酮组胃黏膜PGE2水平为241pg/mg±65pg/mg,明显高于实验组154pg/mg±83pg/mg(P<0.05)。溃疡指数、组织学损伤指数和内皮素1水平随替普瑞酮剂量的增大而降低,血清NO、胃黏膜PGE2水平随替普瑞酮剂量的增大而升高。结论替普瑞酮对类固醇致胃黏膜损伤具有一定的保护作用,其机制可能与降低内皮素1水平和增加NO和PGE2生成有关。