TET蛋白家族和5-羟甲基胞嘧啶在肿瘤发病中的研究进展

DNA的胞嘧啶5-甲基化是一个重要的表观遗传学修饰,这种修饰在哺乳动物的发育、老化以及疾病中发挥重要作用。研究发现,TET蛋白家族可催化5-甲基胞嘧啶(5mc)羟基化的酶活性,从而生成5-羟甲基胞嘧啶(5hmc)。TET蛋白的这种催化作用可将DNA同一位点上的C、5mc、5hmc保持动态平衡。TET家族蛋白和5hmc与众多疾病的发生、发展有关,尤其是与肿瘤疾病的关系使人们对肿瘤的发生有了一个新的理解。     

5-羟甲基糠醛的药理作用研究进展

5-羟甲基糠醛(5-HMF)是一种低分子量的呋喃衍生物,广泛存在于含糖量高的植物、热加工食品、中草药及中药制剂中。5-HMF有多种药理活性,包括抗炎、抗氧化应激、抗缺氧、免疫调节等作用,有助于治疗和改善慢性炎症性疾病、心血管疾病、急性肝损伤、镰状细胞病、阿尔茨海默症等疾病。本文对近年来5-HMF的药理作用及机制相关研究作一综述,以期为临床用药提供参考及对相关科研工作的开展提供理论基础。     

快速测定5-羟甲基糠醛限量

5-羟甲基糠醛限量是葡萄糖注射液等的检查项目之一,其含量高低,直接影响制剂质量,因此,中国药典规定其在一定浓度、波长λ284时的吸收度不超过0.32或0.24(1)。按照文献(1)方法检查,当检品数量较多时,较费工费时。本文利用微量移液器,直接将检品稀释到石英比色皿中,可连续操作,既快速简便、省工省时,且测定结果与文献法无显著差异,准确可信,提高了工作效率。1　仪器及检品　　1000μl微量移液器(中外合资上海求精生化试剂仪器有限公司),石英比色皿(宜兴光学仪器厂),FA2004上皿电子天平(上海天平仪器厂),753BI微机型紫外可见分光光度计(上海…     

基于5hmC-Seal测序技术检测糖尿病肾病患者血浆游离DNA中5-羟甲基胞嘧啶的变化

目的 通过生物信息学方法筛选血浆游离DNA来源的糖尿病肾病中的关键差异通路和羟甲基化修饰基因,为寻找诊断糖尿病肾病的生物标志物及阐明其潜在的分子机制奠定基础。方法 利用5hmC-Seal测序方法对糖尿病和糖尿病肾病患者血浆游离DNA的5-羟甲基胞嘧啶进行富集,并通过测序得到全基因组5-羟甲基胞嘧啶,对两组患者进行差异分析得到差异羟甲基化基因,再利用差异基因的羟甲基化水平进行基因集变异分析,最后再对富集到的差异通路里的差异基因通过MCODE插件筛选关键基因,并进行单基因和多基因诊断疾病的准确性分析。结果 基因集变异分析得到在糖尿病和糖尿病肾病两组患者中的差异通路：神经活性配体受体相互作用通路、肾脏上皮通路、趋化因子信号通路和已有文献报道与糖尿病肾病发病机制相关的Wnt信号通路,Wnt信号通路中富集到18个差异羟甲基化基因,通过MCODE筛选到关键模块基因有11个,分别为CTNNB1、GSK3B、CREBBP、CUL1、NFATC1、CCND3、WNT11、PRKACB、DKK1、SMAD3、CCND1,最后进行ROC分析有9个基因的诊断效能较好(AUC值≥0.8):CTNNB1、GSK3...     

5-羟甲基糠醛的研究概况

5-羟甲基糠醛(5-HMF)是具有呋喃环结构的醛类化合物,该化合物在制剂中存在过多时临床上可能会出现类过敏反应,因此全面了解5-HMF的现有研究成果对于降低药品中5-HMF含量的研究提供一定的研究背景。近年来关于5-HMF生物活性等方面的研究备受关注,5-HMF可能是一种隐藏在中药背后新的活性成分,深入研究既可提高药品安全性,也可为研究中药活性成分提供新的思路。     

不同“变色”程度枸杞子中5-羟甲基糠醛含量测定

目的：研究枸杞子“变色”程度与5-羟甲基糠醛（5-HMF）含量的关系。方法：采用HPLC测定,SepaxHP-C18色谱柱（4．6mm×250mm,5μm）,流动相甲醇-水（5：95）,流速为1．0mL/min,检测波长为284nm;柱温为30℃。结果：枸杞子“变色”程度越严重,5-HMF含量越高。结论：首次建立了HPLC测定枸杞子中5-HMF含量的方法,该法稳定、可靠,可用于枸杞子中5-羟甲基糠醛的含量测定,为阐明其“变色”物质基础提供参考。     

TET蛋白家族与5-羟甲基胞嘧啶在干细胞及再生医学表观遗传调控中的作用

表观遗传调控是对DNA及组蛋白的修饰,决定了何时、何地、以何种方式对遗传信息进行表达[1].DNA甲基化是目前研究最多的表观遗传调控方式之一[2],将一个甲基共价结合在DNA胞嘧啶的5-碳位置上形成5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine,5mC).     

葡萄糖注射液5-羟甲基糠醛含量的实验

葡萄糖注射液是一类临床上广泛应用的营养剂 ,制备过程中需热压灭菌 ,由于受热等因素的影响 ,葡萄糖易脱水分解 ,产生一系列的分解物 ,5 -羟甲基糠醛 (以下简称 5 - HMF)为主要分解物之一 [1 ] ,其为一有毒物质 ,L D5 0 为 10 mg/ kg。英、美、日等国对 5 - HMF的量 (以吸收度值表示 )均有控制 ,中国药典九五版二部规定 ,精取葡萄糖注射液适量 (约相当于葡萄糖 1.0 g)置 10 0 ml量瓶中 ,加水稀释至刻度 ,摇匀 ,照分光光度法于 2 84nm波长处测定 ,吸收度不得大于 0 .32。在配制过程中必须严格控制各影响因素 ,减少葡萄糖的分解破坏。为此…     

5-羟甲基糠醛生成量与高压灭菌的关系

本文对葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛含量的检测中发现,其生成量与灭菌时间有关;与灭菌温度有关;与灭菌方法有关;与药液本身5-羟甲基糠醛的含量有关。     

黄精煎剂中5-羟甲基糠醛的含量测定

【目的】通过对11批黄精煎剂中5-羟甲基糠醛含量的考察,为黄精的物质基础与质量控制研究奠定基础。【方法】采用煎煮法获得供试品溶液,高效液相色谱(HPLC)法测定其含量。色谱条件:HypersilODS2色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),甲醇—体积分数0.05%磷酸溶液(体积比为10:90)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为280nm。【结果】11批黄精煎剂中5-羟甲基糠醛含量的差别达30倍,在0.0200～2.0000μg(r=0.9997)范围内线性关系良好,平均回收率为100.3%(sR=1.9%,N=6)。【结论】该方法简便、结果准确,为黄精物质基础研究与质量控制提供了一定参考。     

葡萄糖输液5-羟甲基糠醛检查的取样问题

5-羟甲基糠醛(以下简称5-HMF)系葡萄糖溶液受热脱水的产物。中国药典自1985年版起规定检查葡萄糖注射液中的5-HMF。笔者数次发现,同一锅灭菌的葡萄糖输液,随机取样检查5-HMF,结果有时不符合药典规定,有时又符合药典规定。由此笔者注意到取样位置对检查结果能有影响。为此进行了如下实验研究。     

RP-HPLC法测定熟地黄中5-羟甲基糠醛的含量

目的建立测定熟地黄中5-羟甲基糠醛(5-HMF)含量的方法.方法采用反相高效液相色谱法,以ZODBAX-C18(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇与0.01mol/L磷酸溶液(70∶30),检测波长为284nm,流速0.8mL/min,柱温25℃,进样量20μL.结果5-HMF在0.44~2.18μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9999,5-HMF平均加样回收率为99.0%,RSD为0.8%(n=6).结论采用反相高效液相色谱法简便、快捷、可靠性高,准确性和重现性好,确定是一种值得推广应用的检测熟地黄中5-HMF的含量方法.     

光照对葡萄糖分解产生5-羟甲基糠醛的影响

葡萄糖注射液（GS）是临床常用的输液制剂，在制备过程中使用盐酸水解，如果水解不完全，产品中会出现淀粉、糊精等杂质；如果水解时间过长，又可使产品中含异性麦芽糖（亦称复合二糖，由2个分子葡萄糖脱水缩合而成）以及卜羟甲基糠醛（5－HMF）等杂质。影响葡萄糖分解产生5－HMF的因素很多，如灭菌温度、时间、液体PH值等，这方面文献已有报道，但光线照射对其影响的报道较少。本文对光照对GS分解产生5－HMF的影响进行初步分析。1临床实验1.1仪器与样品751－1型紫外分光光度计（上海分析仪器厂生产），容量瓶（100ml），移液管（5．0…     

白茅根炒炭前后5-羟甲基糠醛的变化研究

目的 考察白茅根炒炭前后5-羟甲基糠醛的变化。方法 采用RP-HPLC法,Lichrospher5-C₁₈色谱柱(150 mm×46 mm,5 μm);流动相：甲醇0.005%醋酸水溶液 ;梯度洗脱;柱温：30 ℃;体积流量：1 mL/min。结果 5-羟甲基糠醛在10.84～346 8 ng线性关系良好,r=0.999 9,平均回收率为99.39%,RSD为 1.72%(n=6)。经炒炭后,炮制品中5-羟甲基糠醛增大了32倍。结论 白茅根经炒炭后,5-羟甲基糠醛的量显著提高,为进一步研究茅根炭的质量控制和止血机制提供了依据。     

结肠癌组织中5-甲基胞嘧啶表达与患者临床病理特征的相关性研究

目的 探讨结肠癌组织中5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine,5-mC)表达与患者临床病理特征的相关性.方法 采用结肠癌组织芯片(HColA160Su02),包含2006年1月至2010年12月确诊的93例结肠癌患者的手术标本,进行免疫组化检测,根据5-mC表达强度分为高表达组46例和低表达组47例.采用二元...     

反相色谱法测定葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛的含量

目的建立用外标法测定葡萄糖注射液含量的简单高效液相色谱方法。方法采用PurospherStar C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）;流动相为：甲醇-水（10：40）检测波长：284nm;进样量：10μL,流量：0.6mL·min^-1;温度35℃。结果5-羟甲基糠醛在1.02～20.40μg·mL^-1浓度范围内线性关系良好（r=0.99997）;平均回收率为98.4%,回收率的RSD为0.5%。结论本测定方法简便快速,灵敏度高,准确度好,可用于葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛的含量测定。     

炮制对北五味子中5-羟甲基糠醛含量的影响

目的 研究炮制对北五味子5-羟甲基糠醛(5-HMF)含量的影响,考察5-HMF作为五味子炮制程度评价指标的可行性。方法 利用HPLC研究炮制时间、温度、辅料用量对五味子中5-HMF含量的影响。结果 随炮制时间的延长及炮制温度的升高,五味子中5-HMF含量明显增加。随炮制辅料用量的增加,5-HMF含量变化呈2种趋势。蜜制五味子随炮制辅料用量增加5-HMF含量逐渐升高,酒制和醋制五味子随炮制辅料用量的增加而含量逐渐降低,到40 g·(100 g)^-1五味子的用量时,辅料量的增加对5-HMF产生量的影响变小。结论 5-HMF对各炮制因素具一定敏感性,可考虑作为炮制程度的一个评价指标引入到五味子质量控制体系中。