姜黄素对人胰腺癌细胞增殖抑制作用及对Wnt信号通路的影响

目的:探究姜黄素对人胰腺癌SW1990细胞增殖抑制作用及对Wnt信号通路的影响。方法:低/中/高剂量观察组人胰腺癌SW1990细胞分别以终浓度为20、50、100μmol/L姜黄素处理,100μL/孔,对照组细胞则以等体积生理盐水处理,分别干预24、48、72 h。以噻唑蓝(MTT)法及Annexin-V/FITC双染法分别检测人胰腺癌细胞SW1990增殖及凋亡情况,反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法及细胞爬片免疫细胞化学技术检测人胰腺癌细胞SW1990β-链蛋白(β-Catenin)mRNA及β-Catenin蛋白表达情况。结果:干预72 h后低/中/高剂量观察组人胰腺癌SW1990细胞增殖抑制率(%)分别为(4.59±1.32)、(40.01±3.87)、(60.98±5.97);对照组及低/中/高剂量观察组人胰腺癌SW1990细胞凋亡率(%)(8.14±1.25)、(13.04±1.03)、(27.15±1.62)、(59.21±1.46);β-Catenin蛋白免疫细胞化学(ICC)评分(分)分别为(5.78±0.56)、(4.42±0.61)、(2.57±0.58)、(1.38±0.63)。观察组凋亡率显著高于对照组,β-Catenin mRNA相对表达量及β-Catenin蛋白ICC评分显著低于对照组(P0.05),且增殖抑制率、凋亡率随姜黄素作用浓度增加逐渐升高(P0.05),增殖抑制率亦随干预时间延长逐渐升高(P0.05);β-Catenin mRNA相对表达量及β-Catenin蛋白ICC评分随姜黄素作用浓度增加逐渐降低(P0.05)。结论:姜黄素可有效下调人胰腺癌细胞SW1990β-Catenin基因表达,抑制Wnt信号通路活化,具有显著的增殖抑制作用,且具有明显的时间-剂量依赖性。     

冬凌草甲素对人肝癌SMMC-7721细胞增殖侵袭的抑制作用及细胞Wnt2/β-catenin表达的影响

目的:探讨冬凌草甲素对人肝癌SMMC-7721细胞增殖侵袭的抑制作用及细胞Wnt2/β-catenin表达的影响。方法:培养人肝癌SMMC-7721细胞,实验分为阴性对照组,冬凌草甲素低剂量组(10μmol/L),冬凌草甲素中剂量组(20μmol/L),冬凌草甲素高剂量组(40μmol/L)。MTT检测肝癌细胞存活率;流式细胞仪检测肝癌细胞凋亡;RT-PCR检测肝癌细胞Wnt2、β-catenin mRNA的表达;Western Blot检测肝癌细胞内Wnt2、β-catenin蛋白的表达。结果:冬凌草甲素进行剂量干预后,肝癌细胞存活率显著降低(P0.05)。冬凌草甲素以20μmol/L的浓度进行干预后,人肝癌SMMC-7721细胞凋亡高于阴性对照组(P0.05),冬凌草甲素浓度40μmol/L时,人肝癌SMMC-7721细胞凋亡显著高于阴性对照组(P0.01)。冬凌草甲素干预肝癌细胞后,显著降低肝癌细胞内Wnt2、β-catenin mRNA的表达(P0.05)。同时,冬凌草甲素干预后,肝癌细胞内Wnt2、β-catenin蛋白的表达也得到显著降低(P0.05)。结论:冬凌草甲素对人肝癌SMMC-7721细胞增殖侵袭具有明显的抑制作用,其机制可能与抑制Wnt2/β-catenin经典通路上的Wnt2、β-catenin的表达有关。     

姜黄素诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡

目的：研究姜黄素（Cur）诱导人胃癌BGC－823细胞凋亡的作用。方法：细胞增殖抑制采用MTT法,细胞凋亡采用流式细胞仪检测。结果;Cur27－168μmol/L呈剂量依赖性抑制人胃癌BGC－823细胞增殖（r＝0．994,P＜0．01）。Cur 27μmol／L浓度开始出现BGC－823细胞Apo峰,68－136μmol/L出现明显的Apo峰,细胞凋亡峰在24－72h内随作用时间延长逐渐增高。结论：姜黄素可诱导BGC－823细胞凋亡,该作用有时间和剂量依赖性。     

桑根白皮素调控人结肠癌HCT116细胞周期阻滞及其抑制细胞增殖的体外研究

目的观察中药提取物桑根白皮素对结肠癌HCT116细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡的影响,探讨其相关机制。方法体外以不同浓度桑根白皮素作用于HCT116细胞72 h,CCK-8法检测细胞增殖,计算细胞生长抑制率和IC50,取25.4μmol/L和50.8μmol/L桑根白皮素作用于HCT116细胞24、48、72 h,CCK-8法检测细胞增殖,镜下观测细胞形态并摄图;25.4μmol/L桑根白皮素作用于细胞24 h后,流式细胞仪检测细胞周期分布,荧光显微镜下TUNEL法原位检测细胞凋亡;Western blot检测药物干预后β-catenin通路蛋白和细胞周期蛋白的表达变化。结果桑根白皮素对HCT116细胞增殖的抑制作用呈浓度/时间依赖性,72 h IC50为25.4μmol/L;桑根白皮素阻滞HCT116细胞周期于G0/G1期和G2/M期,对细胞凋亡无明显诱导作用;桑根白皮素显著降低β-catenin通路相关蛋白β-catenin、c-Myc及细胞周期调控蛋白cyclin D1、cyclin B1的表达。结论桑根白皮素可阻滞HCT116细胞周期,抑制细胞增殖,其机制可能是通过下调β-catenin通路活性,并抑制细胞周期蛋白cyclin D1、cyclin B1表达实现的。     

姜黄素联合氟尿嘧啶对结肠癌细胞增殖凋亡迁移作用

目的:探索姜黄素调控上皮细胞间质转化(EMT)增敏5-FU的抗肿瘤作用。方法:采用姜黄素、5-FU不同给药浓度诱导结肠癌细胞株HCT8的凋亡,MTT法及克隆形成实验检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移能力;Compusyn软件分析姜黄素的增敏效力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;WesternBlot检测E-Cadherin、N-Cadherin、vimentin、cleaved-Caspase3、snail、β-catenin蛋白的表达量。结果:姜黄素能抑制HCT8细胞的增殖;6μmol/L姜黄素显著促进8μmol/L 5-FU对HCT8细胞的生长抑制和凋亡作用,联合药物指数(CI)值=0.7576;联合用药后降低HCT8细胞迁移能力,上调cleaved-Caspase3、E-Cadherin蛋白表达,同时抑制N-Cadherin、snail、β-catenin、vimentin蛋白表达。结论:姜黄素增加5-FU对HCT8细胞的敏感性,其机制可能与抑制EMT、诱导细胞凋亡有关。     

姜黄素对海人酸活化的小胶质细胞增殖及PKC-δ表达的影响

目的:观察姜黄素对海人酸活化的BV-2小胶质细胞增殖的影响,探讨其可能的分子机制。方法:将BV-2细胞分为正常对照组、海人酸组和姜黄素组,倒置显微镜观察姜黄素对海人酸活化的BV-2细胞形态的影响,MTT法检测姜黄素对海人酸活化的BV-2细胞增殖的影响,免疫组化法检测姜黄素对海人酸活化的BV-2细胞PKC-δ蛋白表达的影响。结果:倒置显微镜观察结果显示,海人酸组与正常对照组相比BV-2细胞数量增加、胞体变大、突起变短变粗;姜黄素组与海人酸组相比BV-2细胞数量减少、胞体变小、突起变长变细。MTT检测结果显示,5μmol/L姜黄素作用BV-2细胞2~96小时,BV-2细胞抑制率随着姜黄素作用时间的增加逐渐增高;5μmol/L姜黄素作用BV-2细胞2~8小时,实验组BV-2细胞抑制率与海人酸组相比无显著差异(P0.05),5μmol/L姜黄素作用BV-2细胞16~96小时,姜黄素组BV-2细胞抑制率与海人酸组相比具有显著差异(P0.05)。免疫组化检测结果显示,海人酸组BV-2细胞PKC-δ表达明显高于对照组(P0.05);与海人酸组相比,姜黄素组BV-2细胞PKC-δ表达明显减弱(P0.05)。结论:姜黄素可抑制海人酸活化的BV-2细胞增殖,其机制可能与下调BV-2细胞PKC-δ蛋白表达有关。     

姜黄素对人口腔黏膜上皮细胞系增殖及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:探究姜黄素对人口腔黏膜上皮细胞系增殖及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法:取生长至对数期的人口腔上皮癌Ca9-22细胞,分为对照组及5 μmol/L姜黄素处理组、10 μmol/L姜黄素处理组、20 μmol/L姜黄素处理组、40 μmol/L姜黄素处理组,分别于处理24、48、72 h后采用MTT法检测细胞存活率,采用流式细胞仪检测不同浓度姜黄素对Ca9-22细胞凋亡的影响,Caspase-3、Caspase-9活性检测试剂盒检测Caspase-3、Caspase-9活性,免疫印迹法检测β-catenin、C-myc、Wnt1、Bcl-2及Bax表达。结果:与对照组比较,不同浓度姜黄素均对人口腔上皮癌Ca9-22细胞的增殖有一定抑制作用,且与浓度、时间有关。5 μmol/L姜黄素处理组、10 μmol/L姜黄素处理组、20 μmol/L姜黄素处理组、40 μmol/L姜黄素组处理48 h后,细胞凋亡率、Caspase-3、Caspase-9活性及Bax mRNA表达均高于对照组,Bcl-2 mRNA及β-catenin、C-myc、Wnt1表达低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:姜黄素可抑制人口腔上皮癌Ca9-22细胞增殖并诱导Ca9-22细胞凋亡,其机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路的表达有关。     

不同浓度的Chir99021对软骨细胞增殖和Ⅱ型胶原表达的影响

目的:探讨不同浓度的Wnt/β-catenin信号通路激活剂Chir99021对体外培养的大鼠软骨细胞增殖和Ⅱ型胶原表达的影响。方法:新生24hSD大鼠8只(雌雄不限),取出关节软骨进行软骨细胞培养,细胞培养48h后进行软骨细胞免疫荧光鉴定。以不同药物浓度将软骨细胞分为四组,分别加入浓度为0.00μmol/L(对照组),0.75μmol/L,1.50μmol/L,3.00μmol/L的Wnt/β-catenin信号通路激活剂Chir99021进行干预。24h后分别观察不同浓度组细胞形态的变化,蛋白印迹分析法(Western blot)检测Ⅱ型胶原、β-catenin和PCNA蛋白的表达情况。结果:在0.00μmol/L(对照组),0.75μmol/L,1.50μmol/L,3.00μmol/L的Wnt/β-catenin信号通路激活剂Chir99021干预下,各组细胞数量明显逐渐增加,与对照组相比较,各加药组β-catenin和PCNA蛋白的表达逐渐上调(P0.05),而Ⅱ型胶原蛋白的表达逐渐下降(P0.05)。结论:不同浓度的Chir99021激活Wnt/β-catenin信号通路后明显促进了软骨细胞的增殖,却抑制了软骨细胞分泌的Ⅱ型胶原。     

姜黄素抗食管癌Eca-109细胞增殖及诱导凋亡机制的研究

目的 探讨姜黄素抗食管癌Eca-109细胞增殖及诱导凋亡机制.方法 CCK-8法检测姜黄素对Eca-109细胞的抑制作用;琼脂糖凝胶技术检测有无Ladder状条带形成、电镜技术观察细胞超微结构及全自动荧光酶标仪观察姜黄素对Eca-109细胞的杀伤作用.结果 随浓度增加时间延长各组生长抑制率有明显增高,且呈剂量浓度依赖性,组间差异有显著性(P＜0.01).Caspase-3活性检测发现:姜黄素20 μmol·L-1、40μmol·L-1作用24 h后OD值与对照组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).电镜观察显示姜黄素可破坏细胞的超微结构.结论 姜黄素可破坏细胞超微结构,抑制食管癌Eca-109细胞增殖并诱导其凋亡.     

姜黄素对人肾透明细胞癌细胞株786-O作用的实验研究

目的探讨姜黄素对人肾透明细胞癌细胞786-O体外增殖及其诱导细胞凋亡的影响。方法 MTT法观察对癌细胞生长的影响,DAPI凋亡染色检测姜黄素对细胞凋亡的诱导作用,Western Blot检测抑凋亡蛋白Bcl-2的表达。结果MTT结果表明姜黄素对细胞786-O具有较好抑制作用,25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L浓度的姜黄素处理48h对细胞增殖抑制率分别为(45.90±1.78)%、(79.76±1.49)%、(91.11±1.38)%,并呈现一定剂量依赖关系;凋亡染色显示细胞在作用48h后,有典型的凋亡形态出现,且随着浓度的增大作用更为明显;Western Blot显示姜黄素可下调Bcl-2蛋白表达,50μmol/L和100μmol/L浓度作用较为明显。结论姜黄素可抑制人肾透明细胞癌细胞786-O的生长,并能诱导其凋亡,其作用机制可能与下调Bcl-2蛋白表达有关。     

姜黄素对肺癌细胞TFPI-2基因去甲基化作用研究

目的：探讨姜黄素对肺癌细胞组织因子途径抑制物-2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)基因去甲基化的作用。方法：将人A549细胞分为姜黄素低剂量组(20μmol·L^-1)、姜黄素中剂量组(40μmol·L^-1)、姜黄素高剂量组(80μmol·L^-1)及空白对照组,分别采用完全培养液及含相应浓度姜黄素的培养液培养后,MTT法检测A549细胞的增殖情况;RT-PCR检测TFPI-2 mRNA及DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1) mRNA、DNMT3a mRNA、DNMT3b mRNA的表达情况;甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)法检测TFPI-2基因甲基化状态。结果：与空白对照组比较,处理细胞12 h、24 h及48 h后,各剂量姜黄素组细胞增殖降低,且40μmol·L^-1姜黄素处理细胞48 h时OD值最低,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞抑制率结果显示,各...     

汉黄芩素对胃癌细胞SGC7901凋亡、侵袭迁移及Wnt/β-catenin信号通路的影响研究

目的:探讨汉黄芩素对胃癌细胞SGC7901凋亡、侵袭迁移及Wnt/β-连接素(β-catenin)信号通路的影响。方法:常规培养3种常见胃癌细胞株(SGC7901、BGC-823及MKN-45)至对数生长期,采用终浓度0、20、50、100、200μmol/L汉黄芩素处理24、48、72、96 h后采用四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞增殖情况,分别采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术、划痕实验及Transwell细胞侵袭实验检测各浓度汉黄芩素作用24、48 h后SGC7901细胞的凋亡率及迁移、侵袭能力,Western blotting检测各浓度汉黄芩素作用48 h后SGC7901细胞Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin及下游靶分子C-myc、细胞周期素D1(Cyclin D1)的蛋白水平。结果:汉黄芩素在20~200μmol/L范围内可呈浓度和时间依赖性抑制SGC7901、BGC-823及MKN-45细胞增殖。与汉黄芩素0μmol/L组比较,各浓度汉黄芩素作用24、48 h后SGC7901细胞凋亡率均升高,迁移距离和穿膜细胞数均降低(P0.05);除汉黄芩素20μmol/L组的β-catenin水平外,其余浓度SGC7901细胞β-catenin、C-myc及Cyclin D1蛋白水平均低于0μmol/L(P0.05),其作用呈量-效关系。结论:汉黄芩素对胃癌细胞的增殖有抑制作用,同时可诱导凋亡和抑制细胞侵袭和迁移,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin通路激活有关。     

姜黄素对肺腺癌A549细胞增殖与凋亡的影响

目的：研究姜黄素对肺腺癌A549细胞增殖与凋亡的影响。方法：采用MTT法检测姜黄素对A549细胞存活率的影响。运用吖啶橙染色方法,观察细胞形态变化。利用TUNEL染色,检测DNA断裂情况。采用Western blot技术,检测P53蛋白表达变化。结果：姜黄素显著抑制A549细胞增殖。吖啶橙和TUNEL染色显示姜黄素可以诱导A549细胞凋亡。Western blot结果显示姜黄素提高了A549细胞中P53蛋白的表达。结论：姜黄素通过激活P53蛋白,抑制A549细胞增殖和诱导A549细胞凋亡。     

熊去氧胆酸促进肝癌HepG2细胞凋亡研究

目的 探讨熊去氧胆酸(UDCA)对肝癌HepG2细胞凋亡的影响及作用机制。方法 取对数生长期的肝癌HepG2细胞分为0μmol/L组、5μmol/L组、10μmol/L组,各组分别加入0、5、10μmol/L UDCA药液干预24 h。24 h后采用MTT法检测HepG2细胞增殖抑制率,倒置光学显微镜观察HepG2细胞的数量、形态变化,流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡率和线粒体下降的膜电位,RT-PCR法检测Bcl-2 mRNA相对表达量,Western blot检测Bcl-2蛋白相对表达水平。结果 与0μmol/L组比较,5μmol/L组和10μmol/L组HepG2细胞增殖抑制率均升高(P均<0.05),且UDCA药物浓度越高抑制率越强;与0μmol/L组比较,5μmol/L组和10μmol/L组HepG2细胞数量减少,细胞脱落变圆,悬浮细胞相对增加;与0μmol/L组比较,5μmol/L组和10μmol/L组HepG2细胞凋亡率均增加(P均<0.05),线粒体下降的膜电位均增加(P均<0.05);与0μmol/L组比较,5μmol/L组和10μmol/L组Hep...     

姜黄素与博来霉素联用对A549细胞增殖抑制及细胞周期和凋亡的影响

目的:研究姜黄素和博来霉素联合应用对人肺泡Ⅱ型样细胞A549细胞增殖和细胞周期及细胞凋亡的影响,探讨姜黄素抗博来霉素诱导的肺纤维化机制。方法:采用MTT法观察姜黄素和博来霉素对A549细胞的增殖抑制作用,并用流式检测细胞周期分布,凋亡试剂盒检测细胞凋亡。结果:姜黄素及博来霉素能抑制A549细胞的增殖,并呈浓度及时间依赖性。姜黄素(Cur)浓度为60μmol/L与博来霉素(BLM)2、4、6、8μg/mL联合24h的抑制率显著高于单用博来霉素组;姜黄素可引起体外培养的A549细胞G0/G1期阻滞;而且对G0/G1期阻滞随作用时间延长而增强。单用博来霉素刺激细胞,培养24h和48h,对细胞周期各个时期的影响没有统计学意义;姜黄素联合博来霉素诱导A549细胞凋亡,细胞核变的不规则皱缩,可见凋亡小体。结论:姜黄素联合博来霉素在体外对A549细胞的增殖有明显的抑制作用,对细胞周期G0/G1期有显著阻滞作用,并可改变细胞凋亡;姜黄素和博来霉素联合应用可能通过改变肺泡上皮细胞细胞周期分布,并通过影响肺泡细胞凋亡从而起到抑制博来霉素治疗过程中肺纤维化的发生发展。     

姜黄素对人食管癌耐药细胞逆转作用的实验研究

目的研究姜黄素对食管癌耐药细胞的作用及作为食管癌多药耐药逆转剂的可能性。方法采用20、40、80μmol/L姜黄素作用体外培养Eca-109/Taxol细胞及Eca-109细胞,倒置显微镜观察姜黄素对Eca-109/Taxol细胞作用的形态变化,CCK-8法检测姜黄素对两种细胞的增殖抑制率并计算姜黄素的逆转效应。流式细胞术检测姜黄素对Eca-109/Taxol细胞的凋亡率及测定罗丹明123在癌细胞内的蓄积。采用全自动酶标仪检测Caspase-3活性、免疫细胞化学法检测P-gp在癌细胞中的表达。结果 Eca-109/Taxol细胞经不同浓度姜黄素作用后,细胞生长变慢、细胞变圆,部分细胞悬浮于培养液中。随着姜黄素浓度的增高,对Eca-109/Taxol细胞生长抑制作用逐渐增强。姜黄素对Eca-109/Taxol细胞具有明显的耐药逆转作用,10μmol/L姜黄素逆转2.50倍,40μmol/L姜黄素逆转6.83倍,且在一定浓度范围内呈剂量依赖性。姜黄素与低浓度Taxol联合应用,可使Eca-109/Taxol细胞中Caspase-3活力提高。流式细胞仪检测显示,随姜黄素浓度的增加,癌细胞的凋亡率逐步增高,20μmol/L姜黄素作用24 h后凋亡率为(13.6±1.3)%,80μmol/L姜黄素凋亡率为(43.5±1.6)%,组间比较,差异有统计学意义(P0.01),同时可使Eca-109/Taxol细胞内Rho123的蓄积增高(P0.01);20μmol/L姜黄素对Eca-109/Taxol细胞作用24 h可明显抑制P-gp在Eca-109/Taxol细胞中的表达。结论姜黄素对Eca-109/Taxol细胞生长具有抑制作用,可以较强地逆转癌细胞对Taxol耐药性,可能是食管癌临床化疗中较好的耐药逆转药物。     

姜黄素对人类子宫内膜异位症异位内膜组织中基质细胞衍生因子-1及间质细胞增殖和侵袭的影响

目的观察姜黄素对人类子宫内膜异位症异位内膜组织中基质细胞衍生因子-1(SDF-1)表达及间质细胞增殖和侵袭的影响。方法建立子宫内膜异位症异位内膜组织的间质细胞原代培养模型,随机分为对照组(0μmol/L)、姜黄素低剂量组(10μmol/L)、姜黄素中剂量组(30μmol/L)、姜黄素高剂量组(50μmol/L),分别连续给药24 h后PCR法检测异位内膜组织中SDF-1的mRNA表达情况,分别连续给药12 h、24 h、48 h后MTT法检测异位内膜组织细胞抑制率,分别连续给药48 h后Transwell小室观测异位内膜组织细胞侵袭能力。结果姜黄素各剂量组异位内膜间质细胞中SDF-1 mRNA表达量均显著下降(P均0.05),且随药物浓度的增加下降更明显。各浓度姜黄素对细胞作用24 h、48 h、72 h后细胞抑制率比较差异均有统计学意义(P均0.05),同时点姜黄素高、中、低剂量组细胞抑制率比较差异均有统计学意义(P均0.05),姜黄素对异位内膜间质细胞的生长增殖抑制呈明显的剂量和时间效应关系。作用48 h后,侵袭抑制率组间整体比较差异有统计学意义(P0.05),随着姜黄素浓度的升高,间质细胞的侵袭数量减少,浓度越高,侵袭率越低。结论姜黄素可以明显降低异位内膜组织中SDF-1表达,且随着姜黄素浓度的增加SDF-1表达呈阶梯型减少,SDF-1/CXCR4轴可能参与了子宫内膜异位症的发展过程;姜黄素对异位内膜细胞的增殖、侵袭有明显抑制作用,抑制作用呈阶梯型增强。姜黄素可能通过降低细胞SDF-1mRNA的表达,抑制上游核转录因子κB(NF-κB)活性而下调MMP的表达,进而抑制人子宫内膜异位症细胞的侵袭和转移。     

藁本内酯抗人肺癌A549细胞增殖作用研究

目的探讨藁本内酯抗人肺癌A549细胞增殖的作用机制。方法 CCK-8法检测藁本内酯对A549细胞活力的影响,TUNEL法检测细胞凋亡率,Hoechst 33258荧光染色法观察A549细胞的形态变化,ELISA检测血管内皮生长因子(VEGF)含量,Western blot检测核因子-κB(NF-κB)、Bcl-2、Bax及磷酸化JNK蛋白表达。结果 15、30、60、120、180μmol/L藁本内酯作用12、24、48 h能抑制A549细胞活力(P0.05,P0.01,P0.001),并呈剂量及时间依赖(P0.05,P0.01);30、60、120μmol/L藁本内酯作用12、24、48 h,细胞凋亡率呈时间和剂量依赖(P0.05,P0.01);经藁本内酯处理48 h后,A549细胞核可见明显凋亡形态,包括核皱缩、碎裂、亮蓝色荧光,染色质分割产生凋亡小体;30、60、120μmol/L藁本内酯细胞核内NF-κB蛋白p65亚基表达升高、细胞内JNK蛋白磷酸化水平升高、抑凋亡蛋白Bcl-2表达降低及促凋亡蛋白Bax表达升高(P0.05,P0.01,P0.001)。结论藁本内酯通过抑制VEGF的表达而抑制肿瘤新生血管的形成,通过调控NF-κB蛋白表达及JNK蛋白磷酸化水平,降低Bcl-2/Bax比值,诱导肿瘤细胞凋亡。     

姜黄素对人骨肉瘤细胞的生长抑制及对MAPK基因的调控作用研究

目的:研究姜黄素人成骨肉瘤细胞MG-63的生长抑制作用,并检测对骨肉瘤细胞中MAPK基因表达的调控作用,初步明确姜黄素对骨肉瘤细胞的作用机制。方法:以人骨肉瘤细胞株MG-63为研究对象,采用不同剂量姜黄素处理。MTT法检测5,10,15,20,25,30,35,40,50μmol/L姜黄素作用24,48,72 h对细胞的毒性作用;Transwell小室侵袭实验法检测5,10,15μmol/L姜黄素对细胞的侵袭能力,黏附实验法检测对细胞的黏附能力;Western blot法检测5,10,15μmol/L姜黄素作用后MAPK蛋白表达水平的影响,RT-PCR法检测对细胞中MAPK基因m RNA转录水平的影响。结果:姜黄素浓度>15μmol/L,作用时间>24 h时,对细胞的生长抑制呈时间和剂量依懒性(P<0.001),当姜黄素浓度≤15μmol/L,作用时间为24 h时,对细胞无明显毒性作用,细胞存活率>85%;细胞侵袭能力和黏附能力随着姜黄素浓度的增加而逐渐降低,以15μmol/L姜黄素浓度处理效果最明显(P<0.05);姜黄素可明显抑制MAPK基因m RNA转录水平,其抑制作用与剂量呈高度依懒性(P<0.05)。结论:姜黄素可通过抑制MAPK信号通路的活化及此信号通路靶基因MAPK的表达降低人骨肉瘤细胞株MG-63的侵袭性。     

白藜芦醇致敏TRAIL诱导人肝癌细胞凋亡及其相关机制的研究

目的研究白藜芦醇对TRAIL诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡的影响及其机制。方法培养人肝癌细胞株SMMC-7721,分为对照组、TRAIL干预组、Res+TRAIL干预组,进行DNA末端原位标记(TUNEL)染色法作凋亡分析;Western Blot检测白藜芦醇对SMMC-7721细胞Survivn表达的影响。结果对照组SMMC-7721细胞的凋亡指数为(1.78±0.49)%,TRAIL干预组凋亡指数为(9.86±0.53)%,Res+TRAIL干预组中25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L浓度Ros凋亡指数分别为(11.30±0.80)%,(20.89±0.69)%和(27.78±1.88)%。除Res+TRAIL干预组(25μmol/L)与TRAIL干预组比较无显著性差异(P0.05),其余各组之间比较差异均有统计学意义(P均0.05)。Western Blot测定结果显示:25μmol/L Ros处理组Survivin/β-actin的值与对照组相比无统计学差异(P0.05);50μmol/L和100μmol/L Res处理组Survivin/β-actin的值较对照组显著降低(P0.01);100μmol/L Res处理组Survivin/β-actin的值较50μmol/L显著降低(P0.01)。结论 TRAIL对SMMC-7721细胞有凋亡诱导作用;Res对TRAIL诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡有致敏作用,并且这种作用呈剂量依赖关系;其分子机制可能与下调凋亡抑制因子Survivin的表达有关。