左归丸防治去卵巢骨质疏松模型大鼠骨流失的实验研究

目的基于中医"肾主骨,生髓"理论,探讨滋阴补肾代表方左归丸对去卵巢骨质疏松模型大鼠的防治作用。方法40只雌性未生育SD大鼠,随机分为正常组(Control)、假手术组(Sham)、去卵巢模型组(OVX)、阳性对照补佳乐组(BJL)、左归丸组(ZGW),每组8只。造模7 d后给药12周,取材检测。双能X线检测大鼠股骨近端、远端1/3骨密度,ELISA法检测大鼠血清β-CTX含量,比色法检验大鼠血清ALP,Ca,Pi含量,HE染色观察大鼠骨组织结构变化。RTPCR和Western blotting法检测大鼠股骨RUNX2,Col-Ⅰ,BGP基因和蛋白表达。结果与正常组相比,模型组大鼠骨密度,血清钙含量,RUNX2、Col-Ⅰ、BGP基因和蛋白表达明显下降,(P0.05);血清β-CTX、ALP、Pi含量上升(P0.05);骨小梁间距增大,数量减少,结构紊乱。与模型组相比,左归丸组和补佳乐组能明显提高骨密度,血清钙含量,RUNX2,Col-Ⅰ,BGP基因和蛋白表达,(P0.05);降低血清β-CTX,ALP,Pi含量,(P0.05);同时防止骨小梁退化和成骨细胞数量减少。结论左归丸能有效预防卵巢切除后骨质疏松症模型大鼠的骨流失,促进骨形成。     

左归丸对去势大鼠骨组织胶原蛋白表达的影响

目的探讨左归丸对去卵巢所致骨质疏松大鼠骨组织胶原蛋白表达的影响。方法实验分为假手术组、模型组、左归丸组,左归丸组灌胃左归丸,其余组给予等量生理盐水。给药12周后,采用酶联免疫吸附法测定血清中骨钙素(BGP)和尿中脱氧吡啶啉(D-Pyd)的含量,采用免疫印迹法测定股骨组织中Ⅰ型胶原(COL1)蛋白表达情况。结果与假手术组比较,模型组血清中BGP的含量降低(P0.05),股骨组织中COL1蛋白表达减弱,尿中D-Pyd的含量升高(P0.05);与模型组比较,左归丸组血清中BGP的含量升高(P0.05),股骨组织中COL1蛋白的表达增强,尿中D-Pyd的含量降低(P0.05)。结论左归丸可能部分通过影响COL1蛋白表达、影响BGP和D-Pyd含量,促进骨形成,抑制骨吸收,发挥抗骨质疏松症作用。     

补肾填精方对去卵巢骨质疏松模型大鼠胶原代谢的影响

目的通过对比观察补肾填精方左归丸和左归丸去补阳药对去卵巢骨质疏松模型大鼠胶原代谢的影响,探讨左归丸阳中求阴法防治骨质疏松症的作用机制。方法取雌性SD大鼠32只,采用双侧卵巢摘除术建立骨质疏松模型,随机分为假手术组(Sham)、模型对照组(OVX)、左归丸组(ZGP)、左归丸去补阳药组(ZGPQ),每组8只。灌胃给药12周后收集各组大鼠血清和股骨组织,采用ELISA法检测血清中PICP和ICTP水平,采用Masson染色法检测股骨组织胶原纤维形态,采用免疫组织化学染色法检测股骨组织ColⅠ蛋白表达水平。结果与Sham比较,OVX血清PICP和ICTP水平显著升高(P0.01)、股骨组织ColⅠ蛋白表达显著降低;与OVX比较,补肾填精方下调血清PICP和ICTP水平(P0.05,P0.01)、上调股骨组织ColⅠ蛋白表达。结论补肾填精方左归丸对去卵巢引起的骨质疏松症具有一定的防治作用,其作用机制可能与其干预胶原代谢有关,全方效果较为明显。     

补肾填精方对去卵巢大鼠炎症因子与破骨细胞活性的影响

目的:对比观察补肾填精方左归丸与左归丸去补阳药对去卵巢骨质疏松模型大鼠炎症因子和破骨细胞活性的影响,探讨左归丸阳中求阴配伍的作用机制。方法:雌性SD大鼠32只,双侧卵巢摘除术建立骨质疏松模型,分为假手术组、模型对照组、左归丸组、左归丸去补阳药组4组,每组8只。灌胃给药90 d,收集各组大鼠血清和股骨组织,采用HE染色法观察股骨组织形态学,采用TRAP染色法检测股骨组织破骨细胞数,采用ELISA法检测血清中TNF-α、IL17和RANKL水平。结果:与模型对照组比较,补肾填精方改善去卵巢大鼠股骨组织形态学,减少破骨细胞数量;显著降低去卵巢大鼠血清TNF-α、IL-17、RANKL水平(P0.05)。结论:补肾填精方能够抗去卵巢骨质疏松症大鼠骨丢失,其作用机制可能与其通过提高雌激素水平以调节炎症因子抑制破骨细胞活性有关,全方效果较为明显。     

鹿茸复方对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢和骨钙磷含量的影响

目的:观察鹿茸复方对去卵巢大鼠骨质疏松的影响。方法:摘除雌性Wistar大鼠卵巢构建去势大鼠骨质疏松模型,将造模成功的24只大鼠随机分为3组:雌激素组(E2组),模型组(OVX组)和鹿茸复方组(F组);另取8只手术但不去势的大鼠为假手术组(Sham组);共4组(n=8)。分别给予相应的药物灌胃,连续给药12周,处死。然后称量各组大鼠的体质量、子宫质量和股骨质量;ELISA试剂盒检测各组血清中碱性磷酸酶(ALP)、骨形成蛋白(BGP)、甲状旁腺激素(PTH)和降钙素(CT)的含量;原子吸收法测定血清钙(Ca)和血清磷(P)的含量;取左侧股骨灰化,称质量,计算灰分;EDTA法检测骨钙含量,钒钼酸铵法检测骨磷的含量;对右侧股骨进行HE染色,观察骨组织形态和结构,计算切片内骨小梁面积比值。结果:与Sham组比较,OVX组大鼠的子宫质量、脏器比值、血清CT和Ca含量、骨钙和骨磷含量、骨小梁面积比均明显降低;血清ALP、BGP、PTH、P含量和大鼠体质量增值率均显著升高。与OVX组比较,E2组大鼠血清BGP、PTH、P含量均明显降低,子宫质量和脏器比值、骨钙和骨磷含量、骨小梁面积比值均显著升高;F组大鼠的血清ALP、BGP、PTH、P含量和大鼠体质量增值率均明显降低,血清CT、子宫质量和脏器比值、股骨质量均有显著升高。与E2组比较,F组大鼠的股骨质量和血清CT均明显升高;血清ALP、BGP、PTH、P含量、子宫质量、脏器比值、大鼠体质量增值率、骨小梁面积比值显著降低。结论:以鹿茸为君药的复方可以有效通过调节大鼠体内激素分泌改善去卵巢大鼠的骨代谢异常,抑制去卵巢大鼠骨钙和骨磷矿物质含量的流失,逆转骨组织病理状态,对骨质疏松症起到一定的防治作用。     

壮骨伸筋胶囊对去势大鼠骨密度及骨代谢的影响

目的:研究壮骨伸筋胶囊(Zhuanggu Shenjin capsules,ZSJ)对去卵巢骨质疏松大鼠骨密度及骨代谢的影响,并探讨其相关的作用机制。方法:将72只SD大鼠按随机分为假手术组(12只)和造模组(60只),模型组采用摘除大鼠双侧卵巢,将去卵巢大鼠随机分为模型组、阳性药结合雌激素组、壮骨伸筋胶囊高、中、低剂量组(5.42,2.71,1.36 g·kg~(-1)),每组12只。连续ig 13周,每周连续ig 6 d,实验结束,取血和骨组织,测定骨密度及血清中血钙(Ca),碱性磷酸酶(ALP),抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP),雌二醇(E2),骨钙素(BGP),降钙素(CT)的变化;甲苯胺蓝染色观察骨组织病理学。结果:与假手术组比较,模型组大鼠骨密度,血清E2含量明显降低,大鼠血清ALP,TRAP,BGP含量明显升高(P0.05,P0.01),子宫系数明显降低(P0.01),骨组织病理学观察显示模型组骨小梁稀疏,骨小梁间有断裂并且分离,间隙增大,排列紊乱,骨板层结构疏松,骨质疏松特征明显;与模型组比较,壮骨伸筋胶囊高、中剂量组能够显著增加模型大鼠的骨密度(P0.01),增加模型鼠血清E2含量(P0.05),降低模型大鼠血清ALP,TRAP,BGP含量(P0.05),但是对血钙和CT作用却不明显,骨组织病理学观察显示骨组织结构趋于完整。结论:壮骨伸筋胶囊能提高去卵巢骨质疏松大鼠骨密度,提高雌激素水平,改善骨代谢水平,从而起到防治骨质疏松的作用。     

左归丸、右归丸及其拆方对去卵巢骨质疏松症模型大鼠肾脏碱性磷酸酶、骨钙素表达的影响

目的探讨左归丸、右归丸治疗绝经后骨质疏松症的可能作用机制。方法将90只SD雌性大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、补佳乐组、左归丸组、右归丸组、共同药组、滋阴组、补阳组各10只。除假手术组、空白组外,其余各组均进行双侧卵巢切除制备绝经后骨质疏松症大鼠模型。造模1周后,补佳乐组、左归丸组、右归丸组、共同药组、滋阴组、补阳组每只大鼠每天灌胃相应药物,剂量分别为0.36 mg/(kg·d)、18.9 g/(kg·d)、20.52 g/(kg·d)、15.12 g/(kg·d)、12.96 g/(kg·d)、8.1 g/(kg·d),空白组、假手术组、模型组灌胃等量蒸馏水,各组均灌胃12周。检测各组大鼠肾组织中碱性磷酶(ALP)、骨钙素(BGP)mRNA和蛋白表达,取大鼠全股骨进行骨密度检测。结果与空白组及假手术组比较,模型组大鼠肾组织ALP、BGP mRNA及蛋白表达和全股骨密度均有所下降(P0.01);与模型组比较,除共同药组外其余各用药组大鼠肾组织ALP、BGP mRNA及蛋白和全股骨密度表达均有不同程度提高(P0.05或P0.01),其中以补佳乐组、左归丸组效果最好。结论左归丸、右归丸及其拆方可能通过提高去卵巢骨质疏松症模型大鼠肾组织ALP、BGP的表达从而有效治疗绝经后骨质疏松症,并且以左归丸疗效更佳。     

左归丸对绝经后骨质疏松症大鼠骨组织中GPR48、CREB表达影响的实验研究

目的:通过研究去卵巢骨质疏松症大鼠股骨中GPR48和CREB的蛋白表达,探讨摘除卵巢致肾虚骨质疏松症的病理机制,并研究左归丸的作用机制。方法:摘除雌性大鼠双侧卵巢的方法复制骨质疏松症模型,采用左归丸对实验大鼠治疗12周,以盖天力片作为阳性对照组,正常组、假手术组作为标准对照组,模型组作为空白对照,用ELISA法检测骨质疏松症大鼠股骨GPR48和CREB的蛋白表达。结果:ELISA方法检测表明:正常大鼠股骨中存在GPR48和CREB的蛋白表达。模型组大鼠股骨中GPR48和CREB的蛋白表达水平有明显的下降。左归丸组、盖天力组用药12周后,与模型组相比较,左归丸组可显著上调股骨中GPR48和CREB的蛋白表达水平。结论:1正常大鼠股骨中存在GPR48和CREB的蛋白表达;2股骨中GPR48和CREB的蛋白表达下降可能是导致骨质疏松症发生的机理之一;3左归丸能够上调GPR48和CREB的蛋白表达,表明左归丸对骨质疏松症有一定的防治作用。     

红曲对去卵巢大鼠骨质疏松模型血清ALP,TRAP及骨组织TNF-α,RANK表达的影响

目的:明确红曲对去卵巢大鼠骨质疏松模型血清ALP,TRAP及骨组织TNF-α,RANK表达的影响。方法:取12周龄Wistar雌性大鼠40只,随机分为结合雌激素组、红曲组、模型组、假手术组,每组10只。前三组行完整双侧卵巢摘除术,假手术组仅打开腹腔,不切除卵巢。灌胃12周后,处死各组动物,采用多光谱成像系统检测骨密度,用ELISA法测定各组大鼠血清中ALP及TRAP,用Image Pro Plus对免疫组化染色图像结果进行定量分析。结果:红曲组TNF-α免疫组化表达水平低于模型组(P0.05),红曲组RANK免疫组化表达水平低于模型组(P0.05)。结论:红曲可以提高血清ALP表达水平,降低血清TRAP表达水平,能够通过降低TNF-α水平及RANK水平来提高去卵巢大鼠骨密度,其机理与雌激素类似,可能与成骨细胞及破骨细胞活跃程度有关。     

菟丝子黄酮对大鼠激素型骨质疏松症防护作用及机制研究

目的观察菟丝子黄酮对大鼠激素型骨质疏松症的影响,并初步探讨其作用机制。方法将40只SD雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组、西药组,每组10只。除假手术组外,其余组均采用双侧切除大鼠卵巢法制备骨质疏松模型。手术4周后,西药组大鼠每天灌胃给予己烯雌酚30μg/kg,中药组大鼠每天灌胃给予菟丝子黄酮0.1 g/kg,假手术组和模型组灌胃给予等量生理盐水,均连续灌胃12周。12周后,测量各组大鼠骨物理生长指标及骨密度,比色法检测各组大鼠血清钙(Ca)、磷(P)及碱性磷酸酶(ALP)水平,Western Blot法检测各组大鼠股骨骨保护素(OPG)及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠骨质量指数、骨密度均明显降低(P均0.05),血清Ca水平明显升高(P0.05),股骨中Bax蛋白表达水平明显上调而Bcl-2、OPG蛋白表达水平明显下调(P均0.05);与模型组比较,中药组大鼠骨质量指数、骨密度及血清Ca、ALP水平均明显升高(P均0.05),股骨中Bax蛋白表达水平明显下调而Bcl-2、OPG蛋白表达水平明显上调(P均0.05)。结论菟丝子黄酮对大鼠激素型骨质疏松症具有很好的骨保护作用,该作用可能与其抑制成骨细胞凋亡有关。     

左归丸与右归丸对去卵巢大鼠股骨骨髓RUNX2、COLI基因与蛋白表达的影响

目的:观察左归丸、右归丸对去卵巢骨质疏松症模型大鼠股骨骨髓组织Runx2、COLI基因与蛋白表达的影响,探讨左归丸、右归丸防治绝经后骨质疏松症的作用机制。方法:采用去卵巢方法建立绝经后骨质疏松大鼠模型,将60只SD雌性大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、补佳乐组、左归丸组、右归丸组,每组各10只。造模3天后灌胃给药12周,分别采用Q-PCR、Western blot法检测大鼠股骨骨髓组织中Runx2、COLI基因与蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠股骨骨髓组织Runx2、COLI基因与蛋白的表达均呈下降趋势(P<0.01);与模型组比较,其余各用药组大鼠股骨骨髓组织Runx2、COLI基因与蛋白的表达均有不同程度的提高(P<0.01或P<0.05)。结论:左、右归丸可提高去卵巢大鼠股骨骨髓Runx2、COLI基因与蛋白的表达,达到促进骨形成的作用,其中左归丸的效果最佳。     

左归丸对去卵巢致绝经后骨质疏松症大鼠骨组织中BMP2、Smad1表达的影响

目的:通过研究去卵巢骨质疏松症大鼠股骨中BMP2和Smad1的蛋白表达,探讨摘除卵巢致肾虚骨质疏松症的病理机制,并研究左归丸的作用机制。方法:摘除雌性大鼠双侧卵巢的方法复制骨质疏松症模型,采用左归丸对实验大鼠治疗12周,以福善美片作为阳性对照组,正常组、假手术组作为标准对照组,模型组作为空白对照。用ELISA法检测骨质疏松症大鼠股骨BMP2和Smad1的蛋白表达。结果:正常大鼠股骨中存在BMP2和Smad1的蛋白表达。模型组大鼠股骨中BMP2和Smad1的蛋白表达水平有明显的下降。左归丸组、福善美组用药12周后,与模型组相比较,左归丸组和福善美组可显著上调股骨中BMP2和Smad1的蛋白表达水平。结论:1股骨中BMP2和Smad1的蛋白表达下降可能是导致骨质疏松症发生的机理之一;2左归丸能够上调BMP2和Smad1的蛋白表达,表明左归丸对骨质疏松症有一定的防治作用。     

左归丸拆方通过调节β2-AR介导的OPG/RANKL信号通路提高去卵巢大鼠骨密度

目的:探讨左归丸及其拆方治疗绝经后骨质疏松症(PMOP)的作用机制。方法:去卵巢法建立骨质疏松症模型,将40只SD大鼠平均随机分为假手术组,模型组(0. 1 mL·kg~(-1)·d~(-1)),17β-雌二醇组(50μg·kg~(-1)·d~(-1))和左归丸补阳药低、高剂量(0. 55,1. 1 g·kg~(-1)·d~(-1))组。灌胃给药12周后,显微CT(μ-CT)检测右侧远端股骨骨密度(BMD)及显微结构;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠股骨形态学变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中Ⅰ型胶原交联羧基端肽(β-CTX)和骨特异性碱性磷酸酶(BALP)浓度;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠下丘脑β2-肾上腺素能受体(β2AR),胫骨平台骨保护素(OPG)和核转录因子-κB受体激活因子配体(RANKL)蛋白及mRNA表达水平。结果:与假手术组相比,模型组大鼠BMD显著下降(P0. 01),骨组织形态破坏;血清BALP含量降低,β-CTX含量升高(P0. 01);下丘脑β2AR,胫骨RANKL mRNA及蛋白表达量升高(P0. 05,P0. 01),胫骨OPG mRNA及蛋白表达量降低(P0. 05,P0. 01)。治疗后,与模型组比较,各用药组大鼠BMD升高(P0. 01),骨组织形态改善;血清BALP含量升高,β-CTX含量降低(P0. 01);下丘脑β2AR,胫骨RANKL mRNA及蛋白表达降低(P0. 05,P0. 01),胫骨平台OPG mRNA和蛋白表达升高(P0. 05,P0. 01)。结论:左归丸拆方中补阳药能通过调节β2AR介导的OPG/RANKL信号通路提高去卵巢大鼠骨密度,"阳中求阴"配伍特点是左归丸治疗PMOP的关键之一。     

左归丸对去卵巢大鼠下丘脑瘦素及瘦素受体的影响北大核心CSCD

目的:通过观察左归丸对去卵巢大鼠下丘脑瘦素及瘦素受体水平的影响,探讨左归丸调节绝经后血脂代谢异常的作用机制。方法:选取雌性SD大鼠32只,随机分为假手术组、模型对照组、左归丸组、阳性药补佳乐组,每组8只。除假手术组,其余各组大鼠以双侧卵巢摘除术建立模型,灌胃给药12周后称体重,收集各组大鼠血清和下丘脑组织,检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、ELISA法检测血清中雌二醇(E2)、瘦素(Leptin)含量; Western blot法测定下丘脑瘦素受体(OB-Rb)以及下丘脑瘦素信号通路相关蛋白JAK2、P-JAK2、STAT3、P-STAT、CPT1蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型对照组大鼠体重显著增加,血清TC、TG以及瘦素水平升高,血清E2含量明显下降,下丘脑OB-Rb、P-JAK2、P-STAT3蛋白表达下降;与模型对照组比较,左归丸9. 68g/kg可降低大鼠体重,升高血清E2含量,下调TC、TG以及血清瘦素水平,上调血清HDL-C以及下丘脑OB-Rb、P-JAK2、P-STAT3、CPT1蛋白表达。结论:左归丸能有效改善由于雌激素减少引发的血脂代谢异常,其作用机制可能与干预瘦素信号通路有关。     

左归丸对去卵巢大鼠下丘脑瘦素及瘦素受体的影响

目的:通过观察左归丸对去卵巢大鼠下丘脑瘦素及瘦素受体水平的影响,探讨左归丸调节绝经后血脂代谢异常的作用机制。方法:选取雌性SD大鼠32只,随机分为假手术组、模型对照组、左归丸组、阳性药补佳乐组,每组8只。除假手术组,其余各组大鼠以双侧卵巢摘除术建立模型,灌胃给药12周后称体重,收集各组大鼠血清和下丘脑组织,检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、ELISA法检测血清中雌二醇(E2)、瘦素(Leptin)含量; Western blot法测定下丘脑瘦素受体(OB-Rb)以及下丘脑瘦素信号通路相关蛋白JAK2、P-JAK2、STAT3、P-STAT、CPT1蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型对照组大鼠体重显著增加,血清TC、TG以及瘦素水平升高,血清E2含量明显下降,下丘脑OB-Rb、P-JAK2、P-STAT3蛋白表达下降;与模型对照组比较,左归丸9. 68g/kg可降低大鼠体重,升高血清E2含量,下调TC、TG以及血清瘦素水平,上调血清HDL-C以及下丘脑OB-Rb、P-JAK2、P-STAT3、CPT1蛋白表达。结论:左归丸能有效改善由于雌激素减少引发的血脂代谢异常,其作用机制可能与干预瘦素信号通路有关。     

卷柏提取物对去卵巢大鼠骨代谢的影响

目的研究卷柏提取部位(A、B、C、D)对去卵巢大鼠血清雌二醇水平及骨代谢生化指标的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用6月龄雌性Wistar大鼠70只,按体质量随机分为假手术组、模型组、阳性对照组和4个卷柏不同提取部位用药组,每组10只。除假手术组外,其余各组切除双侧卵巢建立模型。手术1周后开始给药,连续给药26周后处死大鼠。用放射免疫法检测雌二醇(E2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血清骨钙素(BGP)、降钙素(CT)水平,用常规生化法检测血清碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性。结果大鼠去除卵巢以后,E2、CT水平明显降低,ALP、TRAP、BGP、TNF-α水平明显升高。给药26周后,用药组ALP、TRAP、BGP、TNF-α水平比模型组明显降低(P0.01);E2、CT水平明显升高(P0.01)。结论卷柏提取物对去卵巢大鼠骨代谢有一定的调节作用,能够提高血清雌激素水平,提示卷柏提取物对骨质疏松症有一定预防和治疗作用。     

右归胶囊防治去卵巢大鼠骨质疏松的作用

目的:观察右归胶囊防治去卵巢大鼠骨质疏松的作用,并探讨其相关的作用机制。方法:SPF级SD大鼠105只,其中15只大鼠作为假手术组,其余大鼠采用去卵巢大鼠复制骨质疏松模型,取造模后雌性大鼠随机分为模型组,右归胶囊低、中、高剂量组(0.71,1.43,2.85 g·kg~(-1)),雌激素组(己烯雌酚,0.02 mg·kg~(-1))和仙灵骨葆胶囊组(0.25 g·kg~(-1)),每组15只,于术后第7天开始ig给药,连续给药6个月。于末次给药后24 h大鼠眼眶采血,测定血清钙(Ca),磷(P),碱性磷酸酶(ALP),酸性磷酸酶(ACP)。完整取出大鼠左右股骨,用双能X射线吸收法骨密度仪测大鼠左股骨骨密度(BMD)和骨矿质(BMC)。用WDW型电子万能实验机测大鼠右股骨力学性能指标挠度、最大力和抗弯强度。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血清Ca,P,ALP及ACP水平明显升高,大鼠BMD及BMC含量明显降低,大鼠右股骨挠度、最大力和抗弯强度明显降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,右归胶囊低、中、高剂量组均能明显降低去势大鼠血清Ca,P,ALP及ACP水平,明显提高去势大鼠BMD及BMC含量,明显升高右股骨挠度、最大力和抗弯强度(P0.05,P0.01)。结论:右归胶囊能改善去势大鼠生物力学指标,并能够延缓大鼠骨量丢失,提示其具有预防骨质疏松症作用。     

左归丸对去卵巢大鼠皮肤组织透明质酸的影响

目的观察左归丸对去卵巢大鼠皮肤老化的影响,探讨其作用机制是否与其干预透明质酸(HA)质量浓度有关。方法实验分为假手术组、模型组、左归丸组,给药12周后,采用直接称重法检测大鼠皮肤组织细胞外基质中水含量,采用ELISA法检测皮肤组织中透明质酸质量浓度,采用Western blot法测定皮肤组织中透明质酸结合蛋白1(HABP1)和Ⅰ型胶原(COL1)蛋白表达水平。结果与假手术组相比,模型组细胞外基质含水量降低(P <0.05),透明质酸质量浓度、HABP1和COL1蛋白表达下降;与模型组相比,左归丸组皮肤组织细胞外基质中的水含量增多(P <0.05),皮肤组织中透明质酸质量浓度、HABP1蛋白和COL1蛋白表达上调。结论左归丸对去卵巢大鼠诱导的皮肤老化有保护作用,其作用机制可能与其对皮肤中透明质酸质量浓度的干预有关。     

健骨片对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢、骨微结构及骨强度的影响

目的:研究健骨片对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢、骨质微结构及骨强度的作用。方法:将50只雌性SD大鼠随机分为假手术组(n=10),模型组(n=10),戊酸雌二醇片组(n=10),健骨片低剂量组(n=9),健骨片高剂量组(n=9)。除假手术组外,其余各组行卵巢切除建立大鼠骨质疏松模型,术后各组分别灌服相应药物或蒸馏水,给药剂量分别为戊酸雌二醇片组(0.1 mg·kg~(-1)·d~(-1)),健骨片低剂量组(0.35 g·kg~(-1)·d~(-1)),健骨片高剂量组(1.05 g·kg~(-1)·d~(-1)),连续12周。每周测定大鼠体重,给药结束后酶联免疫吸附测定(ELISA)测定大鼠血清骨钙素(OC)。测定血清碱性磷酸酶(ALP),抗酒石酸酸性磷酸酶(Str ACP),钙(Ca),磷(P)。Micro-CT扫描重建股骨微结构,检测骨矿含量(BMC),组织骨矿含量(TMC),骨密度(BMD),组织矿物质密度(TMD),骨体积分数(BV/TV),骨小梁数量(Tb N),骨小梁分离度(Tb Sp),骨小梁厚度(Tb Th)。三点弯曲法测定股骨刚度及最大载荷。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血清OC,ALP显著升高,血清Ca,P明显降低(P0.05,P0.01);股骨远心端及中点骨小梁稀疏,缺失严重,BMC,TMC,BMD,TMD,BV/TV明显降低(P0.05,P0.01);股骨最大载荷显著降低(P0.05)。与模型组比较,健骨片低、高剂量组均明显降低血清OC及ALP,升高血清Ca,高剂量组明显升高血清P(P0.05,P0.01);骨参数分析显示,低、高剂量明显升高股骨BMC,TMC,BMD,BV/TV(P0.05,P0.01),高剂量组明显降低Tb Sp(P0.05);低、高剂量组均明显增加股骨刚度及最大载荷(P0.05,P0.01)。结论:健骨片可影响去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢,从而改善骨微结构,增加骨强度。     

左归丸对去势骨质疏松模型大鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:观察左归丸对去势骨质疏松大鼠模型骨代谢和Wnt/β-链蛋白(β-catenin)信号通路的影响,探讨左归丸防治骨质疏松症的分子生物学机制。方法:采用双侧卵巢切除法制备绝经后骨质疏松症大鼠模型,60只雌性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,雌二醇组(戊酸雌二醇片0.05 mg·kg^-1·d^-1),左归丸低、中、高剂量组(5.5,11,22 g·kg^-1·d^-1)。从造模成功后(第13周)开始,每日灌胃(ig)1次,共持续12周。给药结束后,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠股骨组织结构变化;双能X射线仪检测各组大鼠股骨骨密度(BMD)和骨矿质(BMC);MTS Acumen3型生物力学测试系统检测各组大鼠骨生物力学性能;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中骨碱性磷酸酶(BALP),骨钙素(BGP),抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP),Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PINP)等骨代谢标志物含量及雌二醇(E2)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠胫骨组织中Wnt2,β-catenin,低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)水平及糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)磷酸化水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠BMD,BMC,最大载荷和刚度显著降低(P<0.01),血清E2和PINP含量显著降低(P<0.01),BALP,BGP,TRAP含量显著升高(P<0.01),骨组织中Wnt2,p-GSK-3βSer9,LRP5和β-catenin蛋白表达水平显著降低(P<0.01),股骨骨小梁稀疏变细,数量减少;与模型组比较,雌二醇组和左归丸各组BMD,BMC,最大载荷和刚度明显升高(P<0.05,P<0.01),血清E2和PINP含量明显升高(P<0.05,P<0.01),BALP,BGP,TRAP含量显著降低(P<0.01),骨组织中Wnt2,p-GSK-3βSer9,LRP5,β-catenin蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),股骨骨小梁较模型组变粗,数量增加,结构基本清晰。结论:左归丸对去势大鼠骨质疏松症具有一定的防治作用,其机制可能与提高雌激素水平,激活Wnt/β-catenin信号通路,上调Wnt2和LRP5蛋白表达,抑制GSK-3β的活性,减少β-catenin的降解,协调骨形成与骨吸收的动态耦联平衡,纠正骨代谢紊乱,从而改善骨组织形态相关。