消渴通痹颗粒对DM大鼠神经缺血髓化修复中VEGF表达的影响

目的探讨消渴通痹颗粒对DM大鼠神经缺血髓化修复中VEGF表达的影响。方法在STZ诱发的DM大鼠模型基础上,结扎股动静脉,制成单侧肢体缺血模型,用不同剂量的消渴通痹颗粒灌胃,并与西洛他唑对照,8 W后观察各组大鼠坐骨神经VEGF的变化。结果不同剂量的消渴通痹颗粒均能上调DPN大鼠坐骨神经VEGF的表达,与西洛他唑相比有统计学意义(P<0.05)。结论消渴通痹颗粒可减轻或改善糖尿病周围神经损伤,其机制可能与调节VEGF的表达有关。     

糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经VEGF和HIF-1α调控机制研究

目的:观察中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经VEGF及HIF-1α表达的影响。方法:SD雄性大鼠60只,随机选取10只为正常组,其余大鼠采用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发2型糖尿病大鼠动物模型。造模成功后随机分为模型组,甲钴胺组,糖痹康低、中、高剂量组,每组10只。各组采取相应干预。16周后取大鼠一侧坐骨神经,采用Western blot法检测大鼠大鼠坐骨神经VEGF和HIF-1α的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经组织HIF-1α及VEGF蛋白表达显著升高(P0.01);与模型组比较,糖痹康中剂量组HIF-1α蛋白表达显著降低(P0.01),而与模型组比较,糖痹康低和高剂量组以及弥可保组虽有减低但无统计学意义;与模型组比较,弥可保组与糖痹康低、中、高剂量组均可显著降低大鼠坐骨神经中VEGF的蛋白表达。(P0.01)。结论:糖痹康上调糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神VEGF及HIF-1α蛋白表达,可能是其DPN神经保护作用靶点之一。     

消渴通痹颗粒对糖尿病大鼠周围神经功能的影响及作用机制

目的:观察消渴通痹颗粒对糖尿病大鼠周围神经早期病变神经功能的影响, 并探讨其作用机制.方法:采用STZ诱发糖尿病(DM)大鼠模型.分别用不同剂量的消渴通痹颗粒灌胃,并与弥可保相对照,2个月后对照观察各组大鼠红细胞山梨醇(RBCS)、神经热痛阈值、运动传导速度(MNCV)及感觉传导速度(SNCV)的变化.结果:消渴通痹颗粒降低糖尿病大鼠红细胞山梨醇的含量、增加坐骨神经的热痛阈值、加快神经传导速度的综合疗效优于弥可保. 结论:消渴通痹颗粒可显著改善糖尿病大鼠周围神经功能,其作用机制可能与抑制多元醇代谢亢进途径等有关.     

电项针疗法对大鼠脑缺血再灌注模型HIF-1α及HIF-1α mRNA表达的影响

目的：探讨项针疗法对大鼠脑缺血再灌注模型HIF（缺氧诱导因子）-1α及HIF-1α mRNA表达的影响。方法：随机将72只大鼠分为3组：假手术组（A）、造模组（B）、电项针组（C）,每组各24只,各组再分为12h、24h、3d、5d等4个时间点,每个时间点6只。采用线栓法制备脑缺血再灌注动物模型,观察项针疗法对脑缺血再灌注大鼠HIF-1α及HIF-1α mRNA表达的影响。结果：再灌注第3d,B组梗死灶周围神经细胞数目减少、肿胀更加明显,胞浆淡染,胞核溶解,结构不清,细胞间质呈空泡样改变,残留血管充血,梗死灶周围胶质细胞明显增多;C组梗死灶周围神经细胞肿胀减轻,核仁清楚,结构不清,可见少量固缩神经元,较模型组损伤程度减轻。再灌注12h,缺血中心区及缺血周边区络膜、血管内皮细胞、神经元可见HIF-1α阳性表达。C组大鼠神经元细胞HIF-1α表达明显增加,第3d达高峰,第5d逐渐下降,与B组比较,有显著性差异（P〈0．01）。结论：项针疗法能够改善缺血半影区神经细胞功能状态．促进神经胶质细胞的增生;表明项针疗法能够通过促进HIF-1α及HIF-1α mRNA的表达,提高脑神经细胞对缺氧的耐受,从而发挥脑保护作用。     

消渴通痹颗粒对高血糖下缺血性周围神经病变大鼠新生血管及神经结构的影响

目的探讨消渴通痹颗粒对高血糖状态下缺血性周围神经病变大鼠新生血管及神经结构影响的观察。方法建立糖尿病大鼠坐骨神经缺血损伤模型,用不同剂量的消渴通痹颗粒灌胃,并与西洛他唑对照,2个月后取缺血一侧坐骨神经,用免疫组化法检测坐骨神经中CD34、VEGF表达,电镜观察坐骨神经髓鞘超微结构变化。结果模型组大鼠坐骨神经CD34、VEGF表达呈现代偿性增加,神经髓鞘弯曲折叠,少部分髓鞘分层、脱髓鞘,形态不规则,Schwann cell肿胀,电子密度降低,轴浆内线粒体肿胀,神经微丝减少,毛细血管轻度肿胀;中药高剂量组大鼠坐骨神经CD34、VEGF表达明显增强,与模型组比较(P<0.05,P<0.01),与低剂量组比较(P<0.01),坐骨神经呈现髓鞘板层轻度弯曲,神经维丝略有减少,可见到新生的Schwann cell及毛细血管;中药低剂量组CD34、VEGF虽较模型组表达增加(P<0.05),但神经结构改善不如高剂量组明显;西洛他唑组CD34、VEGF表达亦较模型组增多(P<0.05,P<0.01),神经结构改变同中药高剂量组。结论消渴通痹颗粒组能促进雪旺氏细胞增殖、促进新生血管形成,减轻轴突损伤,从而减轻或延缓糖尿病(DM大鼠)周围神经损伤,其高剂量组效果与西洛他唑相当。     

消渴通痹汤治疗80例糖尿病周围神经病变的临床观察

消渴脉痹（即糖尿病周围神经病变,ＤＰＮ）是消渴病的三大慢性并发征之一,据统计,消渴脉痹在消渴病早期即可发生,随着病程的延长,其发病率可达６０％～９０％。笔者结合导师多年临床经验,以益气养阴,化瘀通络为法,应用消渴通痹汤对１９９９年１月～２０００年６月在我院门诊就诊及住院的８０例消渴脉痹患者进行系统临床观察,取得了较好的疗效,现报道如下。１对象与方法１．１病例选择标准纳入本研究的患者共８０例,均为ＮＩＤＤＭ患者。男４２例,女３８例,平均年龄５５．４５±７．８年,病程ｌ个月至５年;６人从事重体力劳动…     

消渴通痹颗粒对高糖诱导的HUVEC屏障功能的影响及保护作用

目的:观察益气活血中药消渴通痹颗粒对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)屏障功能及紧密连接蛋白(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)表达的影响,探讨消渴通痹颗粒保护糖尿病周围神经病变内皮细胞屏障功能的作用及机理。方法:将不同浓度的消渴通痹颗粒含药血清和5.5 mmol/L葡萄糖作用于HUVEC 24 h,MTT法检测细胞的存活率,确定消渴通痹颗粒含药血清的给药浓度。根据葡萄糖的浓度和消渴通痹颗粒含药血清的浓度将实验分为正常对照组,高糖模型组和消渴通痹颗粒22.5 g/kg含药血清组。各组细胞传代8代～15代时,应用HRP检测HUVEC单层通透性;流式细胞术检测HUVEC凋亡;免疫荧光法、流式细胞术检测紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的表达。结果:与正常对照组相比,5%、10%消渴通痹颗粒22.5 g/kg含药血清组的存活率明显升高(P<0.05),15%、20%消渴通痹颗粒22.5 g/kg含药血清组的存活率明显下降(P<0.05或P<0.01),故而确定消渴通痹颗粒含药血清的浓度为5%、10%、15%。与正常对照组相比,高糖模型组单层通透性增加,凋亡率显著上升,ZO-1、Occludin蛋白的表达减少、荧光信号减弱、边缘粗糙、细胞与细胞之间的连接有断裂(P<0.05或P<0.01)。与高糖模型组相比,5%、10%消渴通痹颗粒22.5 g/kg含药血清组单层通透性降低,凋亡率下降,ZO-1、Occludin的蛋白表达上调、荧光信号加强、边缘趋于光滑、细胞与细胞之间连接紧密(P<0.05或P<0.01);15%消渴通痹颗粒22.5 g/kg含药血清组单层通透性降低,凋亡率下降,Occludin蛋白表达下调、荧光信号减弱(P<0.05或P<0.01),ZO-1蛋白表达变化不明显(P>0.05)。结论:益气活血中药消渴通痹颗粒改善了高糖诱导的HUVEC细胞屏障功能,其机制可能与增加紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的表达有关。     

生肌玉红膏对大鼠糖尿病足溃疡组织bFGF、HIF-1α及VEGF表达的影响

目的 :探讨生肌玉红膏对大鼠糖尿病足溃疡组织碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)及内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法:选用SD大鼠50只制备糖尿病足模型,造模成功后将大鼠随机分为对照组和实验组各25只。大鼠足部溃疡处对照组覆盖凡士林纱布,实验组覆盖生肌玉红膏油纱布,隔日更换1次;分别于造模后3、7、14天取大鼠足创面局部组织标本,运用免疫组化法分别观察bFGF、HIF-1α及VEGF表达水平。结果:干预后实验组大鼠足创面局部组织中bFGF、HIF-1α及VEGF表达均高于对照组(P0.05),其中第3天,HIF-1α表达两组比较差异有统计学意义(P0.01),第7天,VEGF表达实验组高于对照组(P0.01)。实验组bFGF、HIF-1α表达呈逐渐下降趋势,VEGF表达呈先升高后下降趋势。结论:生肌玉红膏能够促进创面局部组织中bFGF、HIF-1α及VEGF的表达,促进血管生成,改善糖尿病足溃疡缺血缺氧状态,缩短创面愈合时间,较凡士林有明显优势。     

消渴通痹颗粒防治糖尿病周围神经早期病变的实验研究

目的:观察消渴通痹颗粒对糖尿病大鼠周围神经早期病变的防治作用及其作用机制。方法:采用STZ诱发糖尿病大鼠模型,灌服消渴通痹颗粒,并与弥可保对比,2月后观察大鼠血糖(FBG)、体重(W)、红细胞山梨醇(RBCS)、Na+-K+-ATP酶、神经传导速度的变化。结果:消渴通痹颗粒能降低糖尿病大鼠红细胞中山梨醇含量、升高Na+-K+-ATP酶活性、增加坐骨神经传导速度,综合疗效优于弥可保。结论:消渴通痹颗粒有防治糖尿病大鼠周围神经早期病变的作用,其可能机制与抑制多元醇代谢亢进途径等有关。     

消渴痹通胶囊联合怡开片治疗糖尿病周围神经病变60例

目的观察消渴痹通胶囊联合怡开对血瘀阻络型糖尿病周围神经病变的临床疗效。方法将120例患者随机分为消渴痹通胶囊联合怡开片(治疗组)60例与单纯怡开片组(对照组)60例。以神经传导速度作为判定依据,观察神经传导速度、振动觉及温度觉检查结果。结果治疗后,两组神经传导速度、振动觉及温度觉检查较治疗前及对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论消渴痹通胶囊联合怡开治疗糖尿病周围神经病变有积极作用,对神经传导速度、振动觉及温度觉有治疗优势。     

丹蛭降糖胶囊对糖尿病大鼠肝组织HIF-1α的干预及肝脏病理的影响

目的探讨丹蛭降糖胶囊(DJC)对糖尿病大鼠肝组织缺氧诱导因子(HIF-1α)的干预及肝脏病理的影响。方法取50只大鼠,除正常组8只外,其余组给予高脂饲料喂养4周,按35 mg/kg给大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)1次,建立糖尿病模型。造模成功后将大鼠随机分为模型组8只、丹蛭高剂量组8只、丹蛭低剂量组8只、吡格列酮组8只。丹蛭高、低剂量组分别给予1.08、0.54 g/(kg·d)灌胃。连续8周,并继续喂高脂饲料。测定血糖、糖化血红蛋白(Hb A1c)、血脂,留取肝脏,做肝脏病理并测定大鼠肝组织HIF-1α蛋白表达,RT-PCR检测HIF-1αmRNA表达量水平。结果模型组HIF-1α的表达较正常组明显升高,丹蛭高、低剂量组与模型组比较HIF-1α的表达量显著降低。病理报告显示,模型组大鼠肝脏受损严重,丹蛭高剂量组病变程度明显减轻,优于低剂量组及吡格列酮组。模型组大鼠血糖、Hb A1c、TG、TC、LDL-C与正常组比较指标明显升高,予丹蛭降糖胶囊后,上述指标显著下降,HDL-C变化不明显。结论丹蛭降糖胶囊能够明显下调HIF-1α的高表达,改善糖尿病大鼠肝脏病变程度,有良好的降糖调脂作用。     

热痹颗粒对AA大鼠Bc1-2蛋白表达及IL-1β、TNF-α的影响

目的:研究热痹颗粒治疗类风湿性关节炎的作用机理.方法:以佐剂性关节炎大鼠(AA)作为实验模型,热痹颗粒为阳性对照药物,随机分为6组(正常组、模型组、对照组、热痹颗粒小剂量组、中剂量组和大剂量组)进行实验研究,观察热痹颗粒时AA大鼠Bc1-2蛋白表达及IL-1β、TNF-α的影响,对其作用机理进行探讨.结果:热痹颗粒能够下调Bc1-2蛋白的表达,降低血清中IL-1β、TNF-α的水平.软骨的破坏,使关节损伤减轻.结论:该药具有较好的抗炎和免疫调节作用,能改善细胞因子紊乱,减轻关节炎性细胞浸润及滑膜炎性增生.     

针刺对缺氧缺血性脑病模型幼鼠HIF-1α、VEGF表达的影响

目的 观察针刺疗法对缺氧缺血性脑病模型幼鼠HIF-1α、VEGF表达的影响,探讨针刺治疗缺氧缺血性脑病的作用机制.方法 将7d龄60只SD雄性SPF级幼鼠随机分为假手术组、模型组、针刺治疗组.采用结扎左侧颈总动脉随后进行3.5h缺氧以建立缺氧缺血性脑病模型,针刺治疗组给予针刺百会、四神聪,1次/d,连续治疗28 d,其...     

扶正消瘤颗粒对原发性肝癌血清中VEGF、HIF-1α表达的影响及临床意义＊

目的 探讨扶正消瘤颗粒对原发性肝癌血清中血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）和缺氧诱导因子-1α（Hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）表达的影响及临床意义。方法 选择符合纳入标准的原发性肝癌患者66例，按1∶1随机分试验组和对照组。观察治疗过程中两组VEGF、HIF-1α水平的变化及对患者临床疗效指标的影响。结果 （1）在性别、年龄、合并乙型肝炎、Child-Pugh分级、AFP值、临床分期方面，试验组和对照组差异无统计学意义（P > 0.05）。（2）肝癌患者在治疗各时间节点的VEGF和HIF-1α表达水平呈线性正相关（r = 0.829，P < 0.001）。（3）VEGF浓度在经导管动脉化疗栓塞术（Transcatheter arterial chemoembolization，TACE）后3月降至术前水平（P > 0.05），HIF-1α在TACE后3月仍高于术前（P < 0.05）。（4）扶正消瘤颗粒可降低HIF-1α水平，下调VEGF的表达。（5）扶正消瘤颗粒可减少TACE序贯RFA治疗后的不良反应，提高患者的生活质量（P < 0.05）。（6）血清中VEGF水平与生活质量无明显相关性（P > 0.05，r = 0.251），HIF-1α水平与生活质量存在正相关性（P < 0.05，r = 0.450）。结论 扶正消瘤颗粒可明显改善TACE序贯RFA治疗后患者生活质量，降低HIF-1α水平，下调VEGF的表达，抑制肿瘤血管生成。     

通痹化纤方对肺纤维化大鼠肺功能及uPA、PAI-1、TNF-α表达的影响

目的观察通痹化纤方对肺纤维化大鼠肺功能及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、尿激型纤溶酶原激活剂(uPA)和纤溶酶原激活剂抑制剂-1(PAI-1)表达的影响,探讨该方治疗肺纤维化大鼠的作用机制。方法将70只大鼠随机分为空白组、模型组、激素组、中药组,气管内注射博来霉素造成肺纤维化大鼠模型,造模后28天予以相应药物灌胃给药,连续给药21天。检测各组大鼠肺组织病理形态学、肺功能、血清及支气管肺泡灌洗液uPA和PAI-1水平、血清TNF-α水平的变化。结果模型组呈中重度肺纤维化改变,中药和激素组肺泡炎和肺纤维化程度均较模型组明显减轻;与模型组比较,中药和激素组TNF-α水平明显降低(P<0.05);与空白组比较,其余各组大鼠血清uPA水平明显降低(P<0.05);与空白组比较,模型组大鼠MVV水平明显降低(P<0.05);与空白组比较,模型组大鼠Cydn水平明显降低(P<0.05),与模型组比较,中药和激素组Cydn水平明显升高(P<0.05);与空白组比较,模型组大鼠RL水平明显升高(P<0.05),与模型组比较,中药组RL水平明显降低(P<0.05);与空白组比较,模型组大鼠RE水平明显升高(P<0.05)。结论通痹化纤方可能通过降低肺纤维化大鼠血清中TNF-α水平,改善肺纤维化大鼠Cydn及RL,从而延缓肺纤维化的进程。     

清络通痹颗粒对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞的影响

目的探讨清络通痹颗粒对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞的影响.方法建立佐剂性关节炎(AIA)大鼠模型,同时设正常对照组.自第7天开始给药,持续21 d.取滑膜,检测滑膜细胞增殖能力和滑膜细胞分泌IL-1的量.结果清络通痹颗粒7.2、14.4 g/kg可明显抑制AIA大鼠的滑膜细胞增殖反应(P＜0.01).结论一定剂量的清络通痹颗粒可抑制AIA大鼠滑膜细胞的过度增生,这与其调节与滑膜增生相关的细胞因子有关.     

降糖消渴颗粒含药血清对INS-1细胞FoxO1表达的影响

目的:通过研究降糖消渴颗粒含药血清对INS-1细胞FoxO1因子表达的影响,探讨降糖消渴颗粒含药血清保护胰岛β细胞的分子机制。方法:通过慢病毒转染的方法制备FoxO1高表达INS-1稳定细胞株,以2.5μg/mL四环素干预12h诱导FoxO1高表达以成模。以10%的降糖消渴颗粒含药血清干预细胞模型24h,正常鼠血清作对照。高倍镜下观察细胞形态,MTT法计算细胞存活率,全自动生化仪检测细胞培养液中葡萄糖含量以计算葡萄糖消耗量,Elisa法检测细胞胰岛素分泌量,Western blot检测细胞中FoxO1总蛋白表达水平及其磷酸化水平,以qRT-PCR检测FoxO1mRNA表达情况。结果:高倍镜下观察细胞形态、细胞存活率均无统计学意义。降糖消渴颗粒含药血清组葡萄糖消耗量与细胞胰岛素分泌量均显著升高(P0.01)。Western-blot结果显示FoxO1总蛋白表达无统计学意义(P0.05),而p-FoxO1蛋白表达增加(P0.05)。qRT-PCR结果显示FoxO1mRNA表达量稍有降低,但差异没有统计学意义(P0.05)。结论:降糖消渴颗粒含药血清不能降低INS-1细胞FoxO1蛋白表达水平,但能促进FoxO1磷酸化,进而达到改善胰岛β细胞功能的作用。     

蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠HIF-1α与Bcl-2蛋白表达的影响

目的:在不同时间点观察大鼠脑出血后Bcl-2和HIF-1α蛋白的表达情况及经蛭龙活血通瘀胶囊干预对其的影响,为蛭龙活血通瘀胶囊治疗脑出血提供参考。方法:将100只SD大鼠随机分为蛭龙活血通瘀胶囊高剂量组、蛭龙活血通瘀胶囊中剂量组、蛭龙活血通瘀胶囊低剂量组、模型组和假手术组各20只。采用自体血注入法制备脑出血大鼠模型,根据脑出血术后不同时间点,每组再继续分为术后6 h、1 d、3 d、7d 4个亚组,每亚组5只。术前1周开始灌胃,每天1次。蛭龙活血通瘀胶囊高剂量组、蛭龙活血通瘀胶囊中剂量组、蛭龙活血通瘀胶囊低剂量组予以等体积相应浓度的蛭龙活血通瘀胶囊灌胃,给药剂量分别为1.6 g·(kg·d)-1、0.8 g·(kg·d)-1、0.4 g·(kg·d)-1;模型组和假手术组均给予等体积的生理盐水灌胃。免疫组化法测定HIF-1α与Bcl-2蛋白的表达。结果:在相应时间点,蛭龙活血通瘀胶囊中剂量组、蛭龙活血通瘀胶囊高剂量组与蛭龙活血通瘀胶囊低剂量组比较,其HIF-1α与Bcl-2蛋白的表达均升高,差异有统计学意义(P0.05);在相应时间点与模型组比较,蛭龙活血高剂量组、蛭龙活血中剂量组、蛭龙活血低剂量组Bcl-2与HIF-1α蛋白的表达升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:蛭龙活血通瘀胶囊能明显促进HIF-1α与Bcl-2表达,HIF-1α与Bcl-2蛋白之间存在正相关性。在脑出血大鼠中,蛭龙活血通瘀胶囊可能有一定的脑保护作用,且存在量效关系。     

清络通痹颗粒对胶原关节炎大鼠滑膜炎的影响

目的：探讨清络通痹颗粒对胶原性关节炎大鼠滑膜细胞的影响及机理。方法：建立胶原性关节炎大鼠（CIA）模型，同时设正常对照组。给药自第7天始，持续21天。取滑膜，检测滑膜细胞增殖能力和滑膜细胞分泌TNF-α的量。结论：一定剂量的清络通痹颗粒可抑制CIA大鼠滑膜细胞的过度增生，这与其调节与滑膜增生相关的细胞因子有关。     

眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠HIF-1α表达的影响

目的 通过观察眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠血清HIF-1α表达的影响,探讨眼针治疗脑缺血再灌注损伤的机制.方法 采用改良线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型,应用眼针治疗.于再灌注后72 h进行神经功能缺损程度评分,运用ELASA法,检测血清HIF-1α蛋白含量.结果 与模型组比较,眼针组大鼠神经功能缺损评分明显下降;血清中HIF-1α蛋白含量上调.结论 眼针能通过上调脑缺血再灌注损伤的HIF-1α蛋白含量,发挥神经保护作用.