橙皮苷对IgA肾病大鼠免疫调节的作用研究

目的:探讨橙皮苷对IgA肾病大鼠肾脏组织中免疫调节蛋白转化生长因子β1(TGF-β_1)和补体应答基因32(RGC-32)表达的作用。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组及治疗组,每组20只,采用经典造模法构建IgA肾病大鼠模型,造模成功后,治疗组给予橙皮苷[10mg/(kg·d)]灌胃治疗,模型组和正常组给予相应量的生理盐水灌胃参照,分别于治疗4周和8周后,处死大鼠各半,观察大鼠血清肌酐、尿素氮、24小时蛋白尿以及血清中白介素2(IL-2)白介素6(IL-6)水平。HE染色观察其病理学改变,同时WesternBlot和RT-PCR测定肾脏组织TGF-β1和RGC-32基因表达。结果:造模成功后,模型组和治疗组有明显的肉眼或镜下血尿;与正常组大鼠相比,血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)和24小时尿蛋白、IL-2以及IL-6均明显升高(P0.05),橙皮苷治疗4周后,除SCr外,其他指标均明显降低(P0.05),治疗8周后上述5个指标均明显降低(P0.05);病理学检查显示正常组结构清晰,而模型组有明显的增生反应,橙皮苷治疗后对其有一定的改善。WesternBlot和RT-PCR结果显示与空白组相比,模型组TGF-β_1和RGC-32表达均明显升高,治疗后均降低(P0.05)。结论:橙皮苷可通过降低IgA肾病大鼠血清中IL-2和IL-6含量,进而抑制肾脏组织中TGF-β_1和RGC-32的表达,最终改善大鼠症状。     

参芪地黄汤对阿霉素肾病大鼠足细胞Nephrin蛋白和mRNA表达的影响

目的:观察参芪地黄汤对阿霉素肾病大鼠Nephrin蛋白和mRNA表达的影响,探讨参芪地黄汤减少阿霉素肾病大鼠蛋白尿的作用机制。方法:随机分为正常组、模型组、参芪地黄汤组,造模后7、14、28、56 d检测尿蛋白,造模后28、56 d检测血清白蛋白(ALB)、血肌酐(Scr),HE染色光镜下观察肾组织,免疫组化法观察Nephrin蛋白表达,RT-PCR法检测Nephrin mRNA表达。结果:造模后7、14、28、56 d,模型组大鼠24 h尿蛋白定量均显著高于正常组(P<0.05)。造模后28、56 d,参芪地黄汤组大鼠24 h尿蛋白定量明显少于模型组(P<0.05)。造模后28、56 d,模型组大鼠肾组织Nephrin蛋白和mRNA的表达与正常组相比明显下降(P<0.05)。参芪地黄汤组Nephrin蛋白和mRNA的表达较同期模型组均有显著增加(P<0.05)。结论:参芪地黄汤可能通过保留阿霉素肾病大鼠Nephrin的表达,从而减少蛋白尿,保护肾功能,改善肾病理。     

益气活血化瘀汤对膜性肾病大鼠肾脏组织Nephrin mRNA 和Podocin mRNA表达的影响

目的观察益气活血化瘀汤对膜性肾病大鼠肾脏组织Nephrin mRNA、Podocin mRNA表达的影响。方法 SD大鼠随机分为正常对照组和造模组,其中造模组采用抗近端小管刷状缘抗原(抗Fx1A)血清一次性尾静脉注射诱导被动型海曼(Heymann)肾炎模型,造模成功后将造模组随机分为模型组、洛丁新组及益气活血化瘀汤低、中、高剂量组,每组6只。每组按相应剂量灌胃4周,每周收取大鼠24 h尿量,检测24 h尿蛋白定量(UTP)。4周末处死大鼠,心脏取血,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-c)、三酰甘油(TG)水平,取肾脏行Masson、PASM染色观测肾脏组织病理改变,免疫荧光法观察Ig G、C3改变,实时荧光PCR检测Nephrin mRNA、Podocin mRNA的表达。结果与正常对照组比较,其余5组UTP均升高(P0.05),Nephrin mRNA、Podocin mRNA表达量均减少(P0.01);与模型组比较,给药组UTP均减少(P0.05),Nephrin和Podocin mRNA表达量均增加(P0.01),TP、ALB有所升高但差异无统计学意义(P0.05),Scr、BUN、TC、HDL-c、TG差异无统计学意义(P0.05);与洛丁新组比较,益气活血化瘀汤低、中、高剂量组UTP有所减少,但差异无统计学意义(P0.05),各生化指标差异无统计学意义(P0.05),益气活血化瘀汤低、中、高剂量组肾脏组织Nephrin mRNA、Podocin mRNA表达均有所增加,但差异无统计学意义(P0.05);益气活血化瘀汤各组之间各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论益气活血化瘀汤可明显减少膜性肾病大鼠的尿蛋白程度,减少肾脏病理损伤,上调肾脏组织Nephrin mRNA、Podocin mRNA的表达,延缓膜性肾病的进展。     

金樱子对IgA肾病大鼠肾脏组织蛋白质表达和肾脏功能的影响

目的:了解金樱子对IgA肾病肾脏功能及肾脏组织蛋白质表达的影响.方法:通过口服牛血清白蛋白(BSA)酸化水及尾静脉注射葡萄球菌肠毒素(SEB),建立IgA肾病大鼠模型,连续用药4周后,采用表面激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术扫描分析肾脏组织蛋白质的表达变化,并用牛化自动仪测定血清白蛋白(Alb)、尿素氮(BUN)及肌酐(Cr)含量.结果:共扫描到70 蛋白峰,其中3个蛋白质在模型组中的表达有降低趋势,经过金樱子水醇萃取成分作用后表达增加;9个蛋白质在模型组中的表达有升高趋势,经过金樱子水醇萃取成分作用后荷质比为1033.16 Da、9370.88 Da的蛋白质表达降低;而分子量为7624.95 Da、15229.41 Da的蛋白质在治疗组中的表达高于模型组和正常组.Cr在三组中的含量分别为:正常组(24.34±2.11)μmol/l、模型组(33.61±3.01)μ mol/l、治疗组(26.17±2.26)μ mol/l.结论:金樱子能够调节IgA肾病大鼠肾脏组织蛋白质的表达,增加血清Cr的清除,改善肾脏功能.     

苁归益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏Nephrin蛋白和Podocin蛋白表达的影响

目的探讨苁归益肾胶囊(由肉苁蓉、当归、山茱萸、桂枝、泽泻和丹皮组成)对高糖高脂饲料喂养加链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病肾病肾脏足细胞裂孔隔膜蛋白相关分子(肾病蛋白Nephrin和肾小球足细胞裂隙膜蛋白Podocin)表达的影响,探讨其降低尿蛋白、保护肾脏的机制。方法随机抽取大鼠10只作为正常组,并将90只成模大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦组、苁归治疗组(苁归益肾胶囊高、中、低剂量组)。治疗10周后,收集大鼠尿液测定24 h尿蛋白定量,肾脏HE染色观察病理损伤,检测各组大鼠肾功能,生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测肾组织Nephrin和Podocin蛋白的表达。结果苁归益肾胶囊可改善糖尿病肾病大鼠肾组织病理损伤,降低糖尿病肾病大鼠24 h尿蛋白定量血肌酐和血尿素,并能增加肾组织中Nephrin和Podocin蛋白的表达。各治疗组肾组织病理改变较模型组均有不同程度的改善。结论苁归益肾胶囊对糖尿病肾病模型大鼠具有一定的治疗作用,其机制可能与上调Podocin和Nephrin表达有关。     

金樱子对实验性IgA肾病大鼠MCP-1mRNA表达的影响

目的研究金樱子水醇提取液对实验性IgA肾病大鼠肾组织MCP-1mRNA表达的影响,了解其作用机制。方法建立IgA肾病大鼠模型,将36只动物随机分成正常组、模型组和治疗组,用RT-PCR方法检测各实验组肾脏组织MCP- 1mRNA表达。结果MCP-1mRNA在3个实验组中的相对表达量分别为:(0.3083±0.1594),(0.8732±0.5017),(0.4182±0.1933),与模型组相比,金樱子治疗组能有效抑制MCP-1mRNA在肾组织的表达(P<0.05)。结论金樱子能下调MCP-1mRNA在肾脏的表达,减少局部炎症反应,减轻肾脏损害,保护肾脏。     

黄芪对IgA肾病小鼠肾脏功能和肾组织蛋白质表达的作用

目的：研究右旋糖苷所致IgA肾病小鼠的肾组织蛋白表达变化和黄芪提取物（AEAR）对IgA肾病小鼠的作用。方法：给正常小鼠注射右旋糖苷建立IgA肾病小鼠模型。部分模型小鼠给予AEAR10g-kg^-1·d^-1。作为AEAR治疗组。为探究AEAR的作用,运用双向电泳（2-DE）技术分别获得正常对照组、IgA肾病模型组、AEAR组小鼠的肾组织蛋白凝胶,银染后,图像用PDQUEST双维分析软件分析比较,得到相应图谱。结果：连续12周给予AEAR的IgA肾病小鼠血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）和尿蛋白含量明显降低,且它们的肾组织蛋白图谱相应恢复接近正常鼠的图谱形态。与正常组比较,模型组有334个蛋白表达有显著性差异,其中142个蛋白表达增强2倍,61个蛋白表达增强5倍,121个蛋白表达减弱2倍;10个蛋白在模型组特异表达,在正常组不表达。以上334个差异蛋白中的50％个蛋白在给予AEAR治疗后,表达水平趋近于正常对照组水平;上述10个特异表达的蛋白经过AEAR干预后,有5个蛋白恢复至正常的不表达状态,4个蛋白表达明显减弱接近正常水平,只有1个蛋白表达上调甚至高于模型组对应蛋白的表达水平,分析可能与IgA肾病发病或AEAR药物作用密切相关。结论：AEAR不仅具有保护IgA肾病小鼠肾脏功能的作用,而且能调节小鼠肾脏组织蛋白表达,有助于发现AEAR作用于IgA肾病的靶蛋白。     

健脾益肾活血方对膜性肾病大鼠肾组织Nephrin和Podocin表达的影响

目的 观察健脾益肾活血方对膜性肾病大鼠24 h尿蛋白定量及肾脏组织Nephrin、Podocin蛋白表达的影响.方法 将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、贝那普利组、健脾益肾活血组,每组10只.除正常组外,其余组均采用抗FxlA血清一次性尾静脉注射诱导被动型Hey-mann肾炎模型.造模后第1天开始,贝那普利组给予...     

川芎嗪对IgA肾病大鼠的肾脏保护作用及TGF-β表达的影响

目的:研究川芎嗪对IgA肾病(IgAN)大鼠肾脏的保护作用及对TGF-β表达的影响。方法:建立IgA肾病大鼠模型,随机分成模型组、地塞米松组、川芎嗪组,另设正常对照组;光镜观察肾组织形态,RT-PCR检测肾组织的TGF-βmRNA、表达,ELISA法测血清TGF-β水平。结果:光镜下川芎嗪治疗组IgAN大鼠的肾组织病理损害减轻。RT-PCR结果显示地塞米松与川芎嗪下调TGF-βmRNA,与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01);ELISA结果提法明地塞米松与川芎嗪显著降低血清TGF-β水平,与模型组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:川芎嗪能明显改善IgAN大鼠肾组织的病理损害。川芎嗪能够下调肾组织TGF-βmRNA、TGF-β蛋白水平,这可能是川芎嗪治疗IgA肾病的作用机制之一。     

肾炎宁方对IgA肾病模型大鼠肾脏组织核转录因子-κB表达的影响

目的:探讨肾炎宁方治疗IgA 肾病的作用机理.方法:采用口服牛血清白蛋白和葡萄球菌肠毒素B 感染的复合方法,复制大鼠IgA 肾病模型,并给予肾炎宁方治疗,检测大鼠肾组织核转录因子-κB(NF-κB)含量及其mRNA 表达.结果:肾炎宁方可明显抑制IgA 肾病模型大鼠肾组织中NF-κB的分泌及其mRNA 表达.结论:肾炎宁方抑制IgA 肾病模型大鼠肾组织NF-κB的分泌作用可能是其治疗IgA 肾病的作用机理之一.     

肾炎宁对IgA肾病大鼠肾组织炎症反应相关因子的影响

目的探讨肾炎宁对IgA肾病大鼠肾组织炎症反应相关因子的影响。方法将48只SD大鼠随机分为4组,即对照组、模型组、西药组（贝那普利＋氯沙坦）及中药组（肾炎宁）,各12只。模型组、西药组、中药组采用脂多糖（LPS）、牛血清白蛋白（BSA）、四氯化碳（CCl4）联合造模法进行模型制备。造模成功后,西药组、中药组均给药6周。取肾组织行IgA免疫荧光检测,并用免疫组织化学法测定其中核转录因子KB（NF—kB）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的表达水平。结果中药组、西药纽IgA免疫荧光强度、NF—kB、MCP-1、ICAM-1表达水平较模型纽均降低（P〈0．01）。结论肾炎宁可能通过对炎症反应相关因子的影响,从而达到延缓肾脏病理进程,发挥对IgA肾病的治疗作用。     

来氟米特联合糖皮质激素治疗进展性IgA肾病的研究

目的观察来氟米特联合中小剂量激素治疗进展性IgA肾病的疗效和安全性。方法将确诊为IgA肾病的60例患者随机分为2组:观察组给予来氟米特联合泼尼松治疗,对照组仅予泼尼松治疗。观察2组治疗前和治疗后1,3,6个月的相关临床指标变化情况,同时记录不良反应。结果治疗1,3,6个月后,2组24 h尿蛋白定量、血肌酐均有下降(P均<0.01),血清白蛋白均有升高(P均<0.01),肾小球滤过率也有所上升(P均<0.01)。观察组在临床指标方面改善的幅度要优于对照组(P均<0.01)。观察组完全缓解率、总有效率明显高于对照组(P均<0.05)。观察组不良反应较轻,患者耐受性良好。结论来氟米特联合中小剂量激素治疗进展性IgA肾病,近期降尿蛋白疗效显著,且安全,患者有较好的耐受性。     

海昆肾喜对阿霉素肾病大鼠肾组织PDGF-BB蛋白及其mRNA表达的影响

目的：研究海昆肾喜(fucoidan)对阿霉素肾病大鼠肾组织血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)蛋白及mRNA表达的影响。方法：采用阿霉素肾病模型,将54只大鼠随机分为6组：正常组、假手术组、模型组、苯那普利组、海昆肾喜低及高剂量组(0.77,3.08 mg·kg^-1)。实验第10周观察各组大鼠24 h尿蛋白定量,肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平及肾组织形态学变化；应用免疫组化及原位杂交方法分别观察PDGF-BB蛋白及mRNA在肾组织中的表达。结果：海昆肾喜低及高剂量组24 h尿蛋白定量和Scr,BUN水平较模型组均明显降低。PDGF-BB蛋白及mRNA的表达见于肾小管上皮细胞胞浆及肾小球系膜细胞,其表达较模型组显著减少。结论：海昆肾喜能抑制阿霉素肾病大鼠肾组织PDGF-BB蛋白及mRNA的表达,这可能是该药物防治肾小球硬化的作用机制之一。     

柚皮素对糖尿病肾病大鼠肾脏损伤的保护作用及机制探讨

目的研究柚皮素对糖尿病肾病大鼠肾脏损伤的保护作用及其相关机制。方法将20只SPF级SD大鼠按照随机原则分为空白组、模型组、柚皮素低剂量组、柚皮素高剂量组,每组5只。除空白组外,其余组给予高脂饲料和1%链脲佐菌素60 mg/kg腹腔注射制备糖尿病肾病模型。确认糖尿病肾病造模成功后,柚皮素低剂量组和柚皮素高剂量组每天分别给予柚皮素50 mg/kg、100 mg/kg灌胃,空白组、模型组每天灌胃等量生理盐水,均1次/d,持续4周。灌胃结束后留取血清标本用于检测血糖、尿素氮、肌酐水平;取肾组织,应用流式细胞术检测各组大鼠肾细胞凋亡情况,应用免疫组织化学法检测肾组织中Bax和Caspase-3蛋白表达情况,实时定量PCR法检测肾组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α) mRNA表达情况,采用分光光度计检测肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,Western blot检测肾组织中p-P38蛋白表达情况。结果灌胃结束后,柚皮素低剂量组和柚皮素高剂量组血糖、尿素氮、肌酐水平,细胞凋亡率,肾脏组织中IL-1β、TNF-αmRNA表达量,Bax、Caspase-3、p-P38蛋白表达量均明显低于模型组(P均0.05),且柚皮素高剂量组均明显低于柚皮素低剂量组(P均0.05)。柚皮素低剂量组和柚皮素高剂量组肾脏组织中SOD表达量明显高于模型组(P均0.05), MDA表达量明显低于模型组(P均0.05),且柚皮素高剂量组SOD表达量明显高于柚皮素低剂量组而MDA表达量明显低于柚皮素低剂量组(P均0.05)。结论柚皮素可通过p38MAPK信号传导通路抑制炎症细胞因子表达,减轻氧化应激反应,影响Bax和Caspase-3蛋白表达,从而延缓糖尿病肾病大鼠肾脏损伤,具有明显肾保护作用。     

黄葵胶囊治疗IgA肾病湿热证蛋白尿的临床观察

目的:观察黄葵胶囊(黄蜀葵花)治疗IgA肾病湿热证的临床疗效。方法:将64例IgA肾病湿热证患者随机分为治疗组和对照组,治疗组32例给予黄葵胶囊4粒,3次/日治疗,对照组采用常规西药福辛普利(蒙诺)10mg,1次/日治疗,疗程12周,观察两组治疗前后中医湿热证证候积分、24h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮的变化及肝功能、电解质、不良事件等安全性指标。结果:两组病人临床资料无统计学差异。治疗12周后对照组和治疗组的24h尿蛋白分别较治疗前降低(0.49±0.78)g/24h和(0.4±0.76)g/24h(P<0.05),两组差异无显著性(P>0.05);对照组和治疗组中医湿热证证候积分分别下降(0.88±1.43)和(1.94±1.63)(P<0.05),两组差异有显著性(P<0.05)。治疗组西医总有效率为53.1%,对照组为65.6%(P>0.05);治疗组中医总有效率84.4%,对照组为50.0%,两组比较差异有显著性(P<0.01)。与治疗前相比,两组的血肌酐、尿素氮均无明显变化(P>0.05)。治疗12周中两组不良事件发生率差异无显著性,且均未发生严重不良事件。结论:黄葵胶囊可以减少IgA肾病湿热证患者...     

芪芎健肾颗粒治疗IgA肾病大鼠的实验研究

[目的]观察芪芎健肾颗粒对IgA肾病(IgAN)大鼠的治疗作用。[方法]建立IgAN大鼠模型,观察芪芎健肾颗粒对大鼠尿红细胞(URBC)计数、24 h尿蛋白定量(24 h Upr)、血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)和肾脏病理形态学的影响。[结果]芪芎健肾颗粒高剂量组(芪高组)与模型组比较,可有效降低URBC计数、24 h Upr、SCr、BUN(P<0.05),抑制肾小球系膜细胞增生和系膜基质增多,减少肾小球系膜区IgA的沉积。其中,芪高组在降低24 h Upr、SCr及改善肾脏病理损害方面疗效优于肾炎康复片组(对照组)(P<0.05),但在降低URBC计数、BUN方面与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]芪芎健肾颗粒能有效降低IgAN血尿、蛋白尿,改善肾功能,并有延缓肾小球病理进展的作用,是防治IgAN的有效方剂。