肝复乐胶囊对慢性乙型肝炎患者肝功能及肝纤维化指标的影响

目的探讨肝复乐胶囊对慢性乙型肝炎患者肝功能和肝纤维化指标的影响。方法将慢性乙型肝炎患者98例随机分为观察组和对照组,每组各49例,治疗前后检测肝功能,用放射免疫法检测血清纤维化指标Ⅲ型前胶原（PCIII）、IV型胶原（CIV）、透明质酸（HA）、层黏蛋白（LN）。结果观察组治疗后肝功能明显好转,血清PCI．II、CIV、HA、LN水平较治疗前及对照组治疗后均明显降低（P〈0．05）。结论肝复乐胶囊治疗慢性乙型肝炎肝纤维化有很好的效果。     

血吸虫肝纤维化小鼠肝组织中去甲肾上腺素及受体的表达

目的研究血吸虫肝纤维化小鼠肝组织中交感神经递质去甲肾上腺素（norepinephrine,NE）及其受体（adrenal receptor,AR）的表达。方法应用腹部敷贴尾蚴法使小鼠感染血吸虫。30只昆明种小鼠随机分成正常对照组（N组）和肝纤维化模型组（M组）。采用光镜及电镜观察肝组织病理学改变,高效液相色谱-电化学（HPLC-ECD）法检测肝组织中NE的含量,同时应用Western blot方法检测肝脏组织中AR的表达水平。结果血吸虫肝纤维化小鼠的肝组织中NE的含量明显低于正常小鼠,而AR的含量明显高于正常组,其差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论小鼠血吸虫肝纤维化时肝组织中去甲肾上腺素表达减少,这可能是肝纤维化时交感神经促进肝纤维化发展的作用机制之一。     

CCl4肝纤维化大鼠功能性瘦素受体表达的动态变化

目的明确瘦素受体(OB-R)在正常和CCl4肝纤维化大鼠肝组织的表达,观察功能性瘦素受体(OB-Rb)表达在肝纤维化进程中的动态变化,以探讨瘦素在肝纤维化形成中的作用机制。方法建立大鼠CCl4肝纤维化模型,采用免疫组织化学方法观察瘦素受体在大鼠肝组织的表达及变化;采用RT-PCR方法观察大鼠肝组织OB-Rb mRNA表达的动态变化。结果正常肝组织可见OB-R在汇管区和血管周围间质细胞的胞质和胞膜有少量表达;OB-R在模型大鼠汇管区、小叶内窦周及纤维间隔的表达明显增加。正常肝组织表达OB-Rb mRNA,不同时间点其表达量差异无统计学意义;模型组造模4 d后,OB-Rb mRNA表达水平即开始增加,随着肝纤维化的形成,OB-Rb mRNA表达逐渐增强,其表达水平与肝纤维化分期呈正相关性(rs=0.804,P=0.000)。结论在大鼠CCl4肝纤维化形成过程中,功能性瘦素受体的表达在肝损伤早期即明显增加,并随纤维化程度加重而逐步升高,从而促进肝脏纤维化的发生。     

胆碱能受体和肾上腺素能受体磷酸化的调节作用机制研究

目的：研究受体激活剂或抑制剂影响G蛋白偶联受体激酶2（GRK2）介导的胆碱能m2受体和β2肾上腺素能受体膜蛋白（β2-AR）磷酸化的调节机制。探讨兴奋剂使m2受体和β2-AR受体活化,引发受体磷酸化级联反应,进而影响蛋白激酶催化受体磷酸化的起始机制。方法：制备亲和层析柱;利用亲和层析方法从大鼠脑中纯化毒草碱乙酰胆碱m2受体;分别将纯化的毒蕈碱乙酰胆碱m2受体或β-肾上腺素受体,G蛋白偶联受体激酶-2,[γ-P^32]ATP与受体激活剂或抑制剂共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白,放射性自显影检测m2受体磷酸化结果。结果：m2受体激活剂氨甲酰胆碱明显增强m2受体的磷酸化,而m2受体抑制剂阿托品或肝素（GRK2抑制剂）完全阻断了m2受体的磷酸化。m2受体的磷酸化是依赖激活剂如氨甲酰胆碱作用发生的,呈明显的剂量依赖关系;β2-AR的激活剂特布他林增强肾上腺素能受体的磷酸化,而肝素可完全阻断β2-AR的磷酸化;并且证实氨甲酰胆碱对mAChR2,特布他林对β2-AR磷酸化的增强作用是选择性的作用结果;HEL299细胞磷酸化实验结果也显示氨甲酰胆碱可以增强HEL299细胞m2受体的磷酸化,阿托品可以抑制HEL299细胞m2受体的磷酸化。结论：实验证实氨甲酰胆碱、特布他林和阿托品等一些m2受体和β2-AR的激活剂及抑制剂对M2受体和β2-AR磷酸化的调节作用。提示激活剂增强m2受体和β2-AR的磷酸化可能是这些受体活化一个重要部分,由此开始加速受体敏感性下调,受体耐受性增强。     

免疫性肝纤维化大鼠肝组织G蛋白偶联受体激酶2的表达

目的 探讨G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)在猪血清诱导的免疫性肝纤维化模型中表达的变化及其意义.方法 Wistar大鼠腹腔注射猪血清建立免疫性肝纤维化模型,在造模的第0、3、6、9、12、16周不同时间点采用Masson染色对肝脏组织作病理检查;免疫组化染色法、蛋白免疫印迹法检测肝脏中GRK2表达水平的变化.结果 大鼠腹腔注射猪血清在16周时可以成功建立免疫性肝纤维化模型.与正常大鼠相比,免疫性肝纤维化大鼠肝脏中GRK2的表达量随造模时间的延长而明显降低.结论 免疫性肝纤维化大鼠肝脏中GRK2表达水平下调,提示GRK2可能在免疫性肝纤维化过程中发挥重要作用.     

老鼠簕对四氯化碳致肝纤维化大鼠Toll样受体4表达的影响

目的研究老鼠簕对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠肝组织Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法 Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、秋水仙碱组、老鼠簕乙醇提取物低剂量组和老鼠簕乙醇提取物高剂量组。除空白对照组外,其余4组用CCl4制备大鼠肝纤维化模型。秋水仙碱组、老鼠簕乙醇提取物低剂量组和老鼠簕乙醇提取物高剂量组分别于4周后给予相应的药物,空白对照组和模型对照组给予等容量的生理盐水,每日1次。8周后处死大鼠。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织中TLR4 mRNA的表达。结果 RT-PCR结果显示,与空白对照组相比,模型对照组TLR4 mRNA表达增强(P<0.01);老鼠簕乙醇提取物干预组(1.0、2.0 g.kg-1)较模型对照组TLR4 mRNA表达减弱(P<0.05)。结论老鼠簕能够抑制肝纤维化大鼠肝组织TLR4的表达。     

转化生长因子—β1及其受体的表达与大鼠肝纤维化关系 …

探讨肝纤维化形成过程转化生长因子－β及其受体的表达对胶原合成的影响。方法：采用免疫组化和斑点杂交技术,观察实验性大鼠肝纤维化过程肝内ＴＧＦ－β１,ＴＧＦ－βＲⅡ和Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ及其蛋白表达的动态变化。结果随着肝纤维化程度的加重,肝内ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－βＲⅡ和Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ及其蛋白表达均明显增加,组间比较均有显著差异（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）。ＴＧＦ－β１与Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲ     

奥曲肽对实验性肝纤维化大鼠瘦素及功能性瘦素受体表达的影响

目的探讨奥曲肽(OCT)对实验性肝纤维化大鼠瘦素及功能性瘦素受体(OB-Rb)表达的影响。方法雄性SD大鼠54只,随机分为3组:正常组、模型组、OCT组。采用四氯化碳(CCl4)复合因素建立肝纤维化模型,实验开始后分别于第2、4、6周随机采集标本,测定血清肝功能、瘦素及转化生长因子β1(TGF-β1)水平,观察肝脏病理形态学改变,检测肝纤维化大鼠肝组织瘦素及OB-Rb的表达情况。结果与正常组比较,模型组和OCT组大鼠血清肝功能下降,瘦素及TGF-β1水平增高,肝组织瘦素及OB-Rb表达增强,且随着时间的增加表现明显;OCT组与模型组同时相比较,OCT组肝功能下降程度、瘦素及TGF-β1水平增高程度较小,病理改变较轻,肝组织瘦素及OB-Rb的表达水平较低。结论 OCT可在一定程度上改善肝功能,延缓肝纤维化的进展,其机制可能是OCT通过抑制瘦素及OB-Rb的表达而影响TGF-β1水平,进而延缓肝纤维化的进展。     

黄芪对肝纤维化大鼠NF-κB的调节作用

目的通过观察NF-κB表达情况,探讨黄芪抗肝纤维化机制。方法45只SD大鼠随机分为正常对照组、CCl_4诱导肝纤维化模型组和黄芪干预组。HE染色评价各组肝纤维化程度,免疫组化方法检测NF -κB在肝组织中表达,利用单因素方差分析法研究其表达水平与肝纤维化关系。结果HE染色结果显示,肝纤维化模型组的肝纤维化分级明显高于正常对照组(P<0.01),黄芪组肝纤维化分级与肝纤维化模型组比较明显降低(P<0.01);肝纤维化模型组大鼠肝组织NF-κB表达显著高于正常对照组(P<0.01),而黄芪组NF-κB表达较模型组显著降低(P<0.01)。结论黄芪可以显著抑制CCl_4诱导的肝纤维化,对NF-κB信号转导通路相关分子的调控可能是其机制之一。     

实验性肝脏纤维化瘦素表达的变化

目的:研究实验性大鼠肝脏纤维化进程中瘦素表达的变化.方法:雄性Wistar大鼠23只,随机分成2组.正常对照组不做处理;四氯化碳造模组,40%四氯化碳蓖麻油溶液皮下注射(3ml/kg,每周2次,首剂加倍).分别于第4,8周取材.检测血清肝功能、肝纤维化指标和肝脏中瘦素表达的变化,光镜下观察组织学的改变.结果:模型组血清肝功能、肝纤维化、血清瘦素和肝脏中瘦素表达都加重,与对照组比较有统计学差异.模型组中血清瘦素和肝脏中瘦素的表达在8周末与4周末之间有统计学差异.结论:实验性大鼠肝纤维化时明显有瘦素的表达,并且随肝纤维化程度的加重而增加.     

复方氨基酸冲剂(肝氨要素)对实验性肝纤维化的保护作用

以四氯化碳诱发大鼠慢性肝损伤致肝纤维化为动物模型,观察了复方氨基酸冲剂(肝氨要素)对肝纤维化的保护作用。结果显示,复方氨基酸冲剂能防止肝纤维化动物的体重和食量下降及血清转氨酶活性升高,阻止血清总蛋白和白蛋白含量降低,提高血清BCAA/AAA比值,纠正氨基酸谱紊乱,减轻肝组织变性、坏死和纤维增生程度。结果提示,复方氨基酸冲剂对肝纤维化有明显保护作用。     

肝纤维化大鼠模型研究进展

肝纤维化是肝脏对各种原因所致肝损伤的创伤愈合反应,表现为肝内结缔组织增生与沉积,是慢性肝病重要的病理特征,也是进一步向肝硬化发展的重要环节.制备出标准而理想的动物模型是疾病研究的基础,选择与各种原因所致人类慢性肝病相似的肝纤维化动物模型不仅是研究肝纤维化发病机制的重要基础,也是临床评价肝纤维化诊断和治疗方法的有效手段.大鼠是肝纤维化造模的常用实验动物,本文讨论了几种肝纤维化大鼠模型的建立方法、致病机制、肝脏病理变化,每种模型的优缺点及主要用途等.     

脂联素受体2在糖尿病大鼠肝脏中的表达

目的探讨脂联素受体2在1型和2型糖尿病大鼠肝脏中的表达差异以及与糖尿病发病的可能机制的关系。方法 30只SD大鼠分为3组：对照组（con）,腹腔注射等体积量枸橼酸缓冲液;1型糖尿病组（1-DM）：一次性腹腔内注射高剂量链脲佐菌素60 mg/kg;2型糖尿病组（2-DM）：大鼠高脂饲料喂养1个月,禁食12 h后腹腔注射低剂量链脲佐菌素35 mg/kg,继续高脂饮食喂养。采用ELISA试剂盒检测血清胰岛素和脂联素水平,免疫组化法分析肝脏脂联素受体2（Adipo R2）的表达,HE染色观察各组肝脏病理改变。结果糖尿病组大鼠血糖均高于对照组,与con组（8239±2259）ng/ml比较,1-DM组血清脂联素降低[（5266±1985）ng/ml,P〈0.05],肝Adipo R2表达无明显改变[（13.39±3.09）%,（11.92±5.62）%,P﹥0.05];与con组（8239±2259）ng/ml和1-DM组（5266±1985）ng/ml比较,2-DM组血清脂联素（3533±1048）ng/ml降低（P〈0.05）,肝Adipo R2表达升高（69.76±10.8）%,P〈0.01,且有脂肪变性等损伤。结论肝Adipo R2在1-DM大鼠肝脏的表达与正常组无异,在2-DM大鼠肝脏高表达,与2-DM肝脏的损伤和脂代谢异常相关。     

逍遥散对肝纤维化模型大鼠肝功能、肝纤维化指标的影响

目的:观察逍遥散对肝纤维化模型大鼠的肝功能、肝纤维化指标的影响。方法:选取清洁级成年Wistar大鼠80只,采用随机数字表法分为空白组(等量生理盐水)、模型组(等量生理盐水)、阳性对照组(秋水仙碱)、逍遥散低剂量组(1 g·mL~(-1)的逍遥散溶液,按照8 g·kg~(-1)灌胃)、逍遥散高剂量组(1 g·mL~(-1)的逍遥散溶液,按照16 g·kg~(-1)灌胃),均连续给药8周。结果:干预8周后,逍遥散高剂量组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平均低于阳性对照组和逍遥散低剂量组(P<0.05),白蛋白(albumin,ALB)高于阳性对照组和逍遥散低剂量组(P<0.05)。逍遥散高剂量组的血清透明质酸(hyaluronic acid,HA)、层黏蛋白(laminin,LN)、Ⅲ型前胶原(precollagen typeⅢ,PCⅢ)、Ⅳ型胶原(collagen typeⅣ,Ⅳ-C)水平低于阳性对照组和逍遥散低剂量组(P<0.05)。逍遥散高剂量组的转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)蛋白表达水平低于阳性对照组和逍遥散低剂量组(P<0.05)。结论:逍遥散能显著改善肝纤维化模型大鼠肝功能(降低ALT、AST水平)和血清肝纤维化指标(降低HA、LN、PCⅢ及Ⅳ-C水平),降低肝组织中TGF-β1及PDGF蛋白表达水平。     

银杏叶提取物对肝纤维化大鼠肝脏Smad2/3表达的影响

目的观察银杏叶提取物(GbE)对肝组织Smad2/3表达的影响,探讨GbE抗肝纤维化的作用机制。方法采用CCl4诱导大鼠肝纤维化,同时分别以200、100、50mg/(kg.d)的GbE进行干预,并设复方鳖甲软肝片为对照组,6周后取肝组织,原位杂交及免疫组化技术分别检测肝组织Smad2/3mRNA及蛋白的表达。结果模型组大鼠肝组织Smad2/3mRNA及蛋白的表达正常组明显增高,应用不同剂量的GbE及复方鳖甲软肝片干预后肝组织Smad2/3mRNA及蛋白较模型组显著下降。结论 GbE降低Smad2/3mRNA及蛋白表达可能是其抗肝纤维化作用的重要机制之一。     

HMG-CoA还原酶抑制剂对肾病综合征大鼠肝脏低密度脂蛋白受体表达的影响

目的观察在大鼠肾病综合征模型中使用3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A（HMG-CoA）还原酶抑制剂洛伐他汀（Lovastatin）治疗对肝脏低密度脂蛋白（LDL）受体表达的影响，探讨他汀类药治疗肾病综合征高脂血症的机制。方法大鼠2次尾静脉注射阿霉素建立肾病综合征大鼠模型；采用灌胃法给予大鼠洛伐他汀治疗2周。采用Western blot和RT-PCR技术分别检测LDL受体蛋白和其mRNA在肝脏的表达，同时检测大鼠相关血生化指标。结果肾病综合征大鼠洛伐他汀治疗2周后，血清总胆固醇、LDL胆固醇和三酰甘油以及尿蛋白均显著降低（均P〈0．05），血清白蛋白显著升高（P〈0．05），血肌酐在各组间差异无显著性意义（P〉0．05）；肝脏LDL受体蛋白较肾病综合征组显著增加（P〈0．01）；肝脏LDL受体mRNA水平在各组间差异无显著性意义。结论肾病综合征大鼠经洛伐他汀治疗后，其肝脏LDL受体缺乏得到明显改善，伴随的高脂血症也得到明显改善。     

SnoN蛋白在肝纤维化大鼠肝组织中的表达及其意义

目的观察SnoN蛋白在大鼠肝纤维化进展过程中的动态表达变化及其意义。方法 SD大鼠分两组:正常对照组6只,模型组24只,二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射制备大鼠肝纤维化模型。造模后分别在第2周、4周、6周、8周取大鼠血及肝脏标本,HE和Masson染色并光镜下观察各组大鼠肝组织病理变化;RT-PCR检测SnoN、Smurf 2、TGF-β1及Ⅰ型胶原纤维(COL-1)在造模过程中的动态变化。结果模型组第4周、6周肝纤维化明显;模型组血清ALT、AST升高,第4周时达高峰;Alb逐步下降,6周时最低,各时间点与对照组比较均有统计学差异(P<0.005)。造模后,SnoN表达进行性降低,第8周达到最低,Smurf 2表达量逐渐增加,在第6周达最高峰,且明显高于对照组,各模型组与对照组相比均具有显著差别(P<0.05或0.01);TGF-β1表达水平逐步增高,于第4周时达高峰,各模型组与对照组相比均具有统计学差异(P<0.01)。结论 SnoN蛋白表达的降低可能是肝纤维化中的一个重要环节,值得进一步深入研究。     

肝纤愈对免疫性肝纤维化大鼠肝功能及组织病理学改变的影响

目的:建立大鼠免疫损伤性肝纤维化的实验模型,研究中药复方肝纤愈(GXY)对肝纤维化模型动物肝功能指标及肝组织病理学的影响。方法:在以人血白蛋白(HSA)诱导的免疫损伤性肝纤维化大鼠模型基础上,GXY小剂量(6.1g/kg)、大剂量(12.2g/kg)灌胃给药,连续8周,以鳖甲软肝片和秋水仙碱为阳性对照药。测定大鼠血清中ALT、AST、TP、Alb含量;光镜、电镜观察肝组织病理学改变。结果:GXY(大)组可明显降低HSA诱导免疫性肝纤维化大鼠模型血清中ALT、AST的含量,升高Alb的含量,同时可改善实验大鼠生存质量,且可显著改善肝组织病理学。结论:GXY具有明显的抗肝纤维化作用。