代谢综合征小鼠肝脏过氧化物增殖体受体γ共同作用因子-1的表达

目的探讨代谢综合征小鼠肝脏过氧化物增殖体受体γ共同作用因子-1(PGC-1)表达.方法进正常食C57BL/6J小鼠10只、进高脂高糖食8 wk小鼠5只及16 wk小鼠10只.测定血脂、血清胰岛素(INS)及空腹血糖、肝功、肝脏重质量、腹部瘦肉及瘦肉含量,肝脏脂质含量及PGC-1蛋白表达采用Western blot免疫印迹,并做肝脏病理.结果进高脂高糖食16 wk的小鼠腹部脂肪量、血清甘油三酯(TC)和空腹血糖(FBG)均明显高于正常小鼠(腹部脂肪量3.63±0.62vs 2.99±0.31, P＜0.01;TC2.31±0.16 mmol/Lvs 2.04±0.15 mmol/L,P＜0.01;FBG6.90±1.84 mmol/L vs 5.11±1.86 mmol/L,P＜0.05).高脂高糖食的动物血清TP、ALB及A/G低于正常动物,其中进食16 wk的动物ALB及A/G有显著差异(ALB18.12±2.63 g/L vs 21.64±3.38 g/L,P＜0.05;A/G0.89±0.15 vs 1.06±0.18,P＜0.05).血清ALT,ALP及AST高于正常动物,其中进食16 wk的动物的ALP有显著差异(103.80±8.72 U/L vs 64.60±10.67 U/L,P＜0.05).高脂高糖食小鼠肝脏有明显脂肪变性,16 wk重于8 wk的小鼠.16 wk进高脂高糖食的小鼠肝脏的TC和TG含量显著高于正常动物,达到正常的2倍以上(TC0.0582±0.0251 mmol/g干重vs 0.0275±0.0114 mmol/g干重,P＜0.01;TG0.1566±0.0166 mmol/g干重vs 0.0631±0.0232 mmo1/g干重,P＜0.01).高脂高糖食小鼠肝脏PGC-1表达高于正常动物,16 wk强于8 wk的小鼠.结论高脂高糖食C57BL/6J小鼠可作为代谢综合征动物模型,其存在脂肪肝,肝脏的PGC-1蛋白表达量高于正常食小鼠,可能其参与脂肪肝的形成.     

猕猴桃果仁油对小鼠非酒精性脂肪性肝病的作用

目的:观察猕猴桃果仁油对小鼠非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD) 的保护作用,并初步探讨其作用机制. 方法:健康,♂小鼠50 只,随机分为:对照组、模型组和果仁油低、中、高剂量组[90 、180 、270 mg/(kg·d)]5 组. 除对照组用普通饲料喂养外,其余各组均给予高脂饲料喂养. 实验6 wk 后处死全部小鼠,比较各组之间血清和肝脏生化以及肝脏组织病理学特征. 结果:与对照组相比,模型组小鼠血清TG 、TC 、ALT 、AST 和肝组织MDA 显著升高(均P<0.01),肝组织SOD 和GSH-Px 显著降低(均P<0.01);果仁油中、高剂量组小鼠血清TC 、TG 、ALT 、AST 及肝组织MDA 显著低于模型组(TC:3.05±0.32 mmol/L,2.55±0.43 mmol/L vs 4.55±0.23 mmol/L;TG:1.62± 0.68 mmol/L,1.56±0.57 mmol/L vs 1.90±0.55 mmol/L;ALT:76.91±16.32 U/L,64.54±11.32 U/L vs 170.34±9.32 U/L;AST:128.26±20.15 U/L,112.74±21.37 U/L vs 158.86±18.45 U/L;MDA:5.16±0.97 U/mg,5.01±1.14 U/mg vs 5.88±1.07 U/mg,P <0.05 或0.01),肝组织SOD 和GSH-Px 的显著高于对照组(均P<0.05);模型组小鼠肝脏脂肪变性严重,并伴有炎细胞浸润及坏死,而果仁油中、高剂量组小鼠肝脏脂肪变性程度轻,无明显炎细胞浸润及坏死. 结论:猕猴桃果仁油对高脂饲料诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝病有明显的保护作用.     

高脂血症和高脂血症性脂肪肝大鼠肾上腺髓质素2的变化

目的:研究高脂血症、高脂血症性脂肪肝大鼠血浆及肝组织ADM2/IMD的变化,探讨ADM2/IMD在高脂血症、高脂血症性脂肪肝病理过程中的意义.方法:雄性SD大鼠16只,随机均分为对照组与高脂组.大鼠被高脂喂食造模4 wk后,观察大鼠肝脏病理学变化,测定血脂(TG,TC,HDL-C,LDL-C)及肝功能(ALT,AKP);放免法测定血浆及肝组织匀浆ADM2/IMD含量.结果:高脂组体质量、肝质量及肝指数(肝质量/体质量)均显著高于对照组(P<0.01)肝组织呈轻中度脂肪变.高脂组TG、TC、LDL-C、ALT及AKP均显著高于对照组(0.29±0.05 mmol/L vs 0.18±0.09 mmol/L.2.49±0.35 mmol/L vs 1.25±0.16 mmol/L.1.69±0.18 mmol/L vs 0.49±0.06 mmol/L.25.46±5.14 kU/ L vs 13.15±2.83 kU/L,416.1±42.7 U/L vs 281.2±47.3 U/L;P<0.01).HDL-C则低于对照(0.65±0.11 mmol/L vs 0.75±0.10 mmol/L,P<0.01).血浆ADM2/IMD水平两组间差异无统计学意义(P>0.05);但高脂组肝组织匀浆ADM2/IMD水平较对照组高115%(26.21±11.2 pg/mg·pro vs 12.18±2.9 pg/mg·pro,P<0.01).结论:ADM2/IMD可能与大鼠饮食性高脂血症和高脂血症性脂肪肝病理进程有关.     

软脉灵对大鼠非酒精性脂肪肝的预防作用

目的:观察软脉灵对非酒精性脂肪性肝病大鼠模型的预防作用.方法:采用高脂膳食喂养方式建立大鼠非酒精性脂肪性肝病模型.♂SD大鼠90只,随机分为模型组、药物组与空白对照组,每组30只.模型组应用高脂饲料喂养,药物组在高脂饲料喂养同时应用软脉灵灌胃,空白对照组应用基础饲料喂养.每组均于8,12及16 wk时各处死10只,观察肝脏指数,血清与肝组织生化指标及肝组织病理改变.结果:16 wk时与模型组相比较,药物组肝脏指数显著降低(F=51.626,P=0.000);血清胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c),丙氨酸转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)水平明显降低(2.27±0.38 mmol/L VS 3.09±0.45 mmol/L;0.83±0.13 mmol/L vs 1.03±0.18 mmol/L;0.41±0.06 mmol/L vs 1.09±0.27 mmol/L;52.0±6.50 U/L vs 79.0±4.72 U/L;182.9±26.43 U/L vs 326.5±28.21 U/L;均P<0.01),但血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)水平提高(0.76±0.17 mmol/L vs 0.55±0.11 mmol/L,P<0.01);肝组织丙二醛(MDA)水平降低明显(167.2±14.00 mmol/g vs 263.6±26.84 mmol/g,P<0.01),超氧化物歧化酶(SOD)活力增加显著(9.95±0.33 U/g vs 4.36±0.46 U/g,P<0.01),肝组织脂肪变性程度(χ~2 =19.828-20.470,均P=0.000)和炎症活动度(F =10.170,P=0.000)明显减轻.结论:软脉灵具有预防大鼠非酒精性脂肪性肝病的作用.     

大鼠非酒精性脂肪肝造模方法的改进

目的:快速建立一种非酒精性脂肪肝大鼠模型.方法:24只♂SD大鼠随机平均分为正常组、常规组和改良组,分别喂普通基础饲料、常规用高脂饲料及常规高脂饲料 蔗糖 丙基硫氧嘧啶 胆酸钠.5 wk内动态观察三组大鼠的一般情况、体质量变化,均5 wk处死,观察大鼠肝脏病理形态变化,苏丹Ⅳ染色和电镜检测了解大鼠肝细胞胞质内脂滴存在情况,并比较三组大鼠血清甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力及肝组织甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)含量的变化.结果:第4周开始正常组和改良组两组大鼠与常规组体质量之间有显著性差异(249.63±34.25,241.88±20.75 vs 275.38±6.59,P<0.05),改良组与正常组之间体质量无显著性差异(P>0.05).第5周在光镜下见改良组大鼠肝细胞内弥漫大量的脂肪空泡,电镜和苏丹Ⅳ染色证实肝细胞内有大量脂滴.肝脂肪变性程度为 ～ (H=13.36,P=0.0003),正常组和常规组大鼠肝细胞内未见明显脂肪变性.改良组大鼠血清TG,TC,ALT水平和MDA含量均高于正常组和常规组(TG:1.28±0.61 mmol/L vs 0.72±0.12,0.76±0.04 mmol/L;TC:12.78±1.47 mmol/L vs 1.71±0.03,2.31±0.49 mmol/ L;ALT:1518.64±186.04 nkat/L vs 1181.57±37.84,1262.92±159.20 nkat/L;MDA:13.40±4.24μmol/L vs 5.89±1.05,7.23±1.15μmol/L;均P<0.05),常规组与正常组比无显著差异(P>0.05);而改良组血清SOD活力显著低于正常组和常规组(5.21±0.81 nkat/mL vs 11.91±2.69,11.19±0.78 nkat/mL,P<0.05).肝组织TG,TC含量常规组和模型组均比正常组有增高(TG:2.14±0.26,5.83±1.42 mmol/L vs 1.20±0.16 mmol/L,P<0.05;TC:3.19±0.23,9.63±1.12 mmol/L vs 2.13±0.16 mmol/L,P<0.05),常规组与改良组也有显著差异(P<0.05).结论:通过与利用常规高脂饲料建模的方法比较,该改良方法5 wk成功地构建了非酒精性脂肪肝大鼠模型,缩短了建模时间,降低了实验成本且模型基本符合人类发病的自然状态,是一种理想的建模方式.     

贞清方对2型糖尿病并发非酒精性脂肪肝大鼠LXRα表达的影响

目的:探讨贞清方对2型糖尿病非酒精性脂肪肝的治疗作用及可能机制.方法:高脂高糖饮食结合小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立2型糖尿病并发非酒精性脂肪肝大鼠模型.将成模大鼠随机分为模型组、贞清方治疗组和女贞子治疗组( n= 8),并设立正常对照组( n = 10),灌胃治疗8 wk.比较喂养4、8和16 wk时各组大鼠空腹血糖(FBG)、血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、胰岛素(FINs)和胰岛素敏感指数(ISI)的变化.并于喂养16 wk时观察各组大鼠肝脏指数、TG含量和血清丙氨酸转氨酶(ALT)的水平以及病理变化.用PCR法观察大鼠肝X受体(LXRα)及其下游固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c) mRNA的表达,免疫组织化学法观察肝脏LXRα蛋白的表达.结果:灌胃干预8 wk后,与正常组相比,模型组大鼠FBG、血清TG、肝脏指数及肝脏TG含量明显升高(均P<0.01),胰岛素敏感性明显降低( P<0.01),肝脏脂肪变明显加重,肝脏LXRα mRNA、SREBP-1c mRNA和LXRα蛋白的表达明显增多(均P<0.01).与模型组相比,贞清方治疗组大鼠FBG水平、血清TG水平、肝脏指数及肝脏TG含量明显降低(10.94±3.33 mmol/L vs 16.67±4.33 mmol/L; 0.79±0.27 mmol/L vs 1.33±0.33 mmol/L; 5.72±0.81vs 7.61±1.24; 0.041±0.0110 mmol/g vs 0.059±0.0160 mmol/g,均P<0.01),肝脏脂肪变明显改善,肝脏LXRα mRNA、SREBP-1c mRNA和LXRα蛋白的表达明显减少(0.75±0.11 vs1.23±0.17,0.68±0.16 vs 1.07±0.14,0.220±0.071 vs 0.334±0.037,均P<0.01).结论:贞清方对2型糖尿病性非酒精性脂肪肝具有一定的治疗作用,且其治疗作用可能与贞清方能下调非酒精性脂肪肝组织LXRα的表达有关.     

瘦素及硬脂酰CoA去饱和酶-1在高脂饮食大鼠非酒精性脂肪肝发病中的作用

目的:研究瘦素及SCD-1在高脂饮食引起非酒精性脂肪肝形成及其药物治疗中的作用．方法:42只SD大鼠分成正常组、高脂组和干预组(自高脂饮食喂养8 wk起用罗格列酮进行干预16 wk)．酶联免疫法测定血清瘦素,RT-PCR实时荧光分析大鼠肝 SCD-1 mRNA与β-actin mRNA的比值．结果:肝组织HE染色显示高脂组大鼠肝脏内有弥漫性肝细胞脂肪变性,8 wk达到脂肪肝诊断标准．8,24 wk高脂组大鼠血清瘦素水平升高,与正常组相比有显著性差异(8 wk:5．29±1．83 μg／L vs 3．06±1．35 μg/L, P<0．05;24 wk:7．89±3．01 μg/L vs 3．09±1．52 μg/L, P<0．05);肝SCD-1 mRNA与β-actin mRNA的比值明显下降(8 wk:0．37±0．25 vs 0．82±0．34,P<0．05)．干预组与高脂组相比,血清瘦素水平下降(5．95±3．31 μg/L vs 7．89±3．01 g／L,P>0．05);肝SCD-1 mRNA表达明显增强(SCD-1/β-actin:1．02±0．11 vs 0．52±0．22,P<0．01)．结论:长期高脂饮食可导致血清瘦素水平升高,其通过下调肝SCD-1表达促进非酒精性脂肪肝的形成．罗格列酮可降低血清瘦素水平,上调肝SCD-1的表达,减轻因高脂饮食引起的非酒精性肝脂肪变．     

丹芍化纤胶囊对肝纤维化大鼠PDGFR-β和p-ERK1/2的影响

目的:通过观察丹芍化纤胶囊对肝纤维化大鼠PDGFR-β和p-ERK1/2的影响,探索其抗肝纤维化的可能机制.方法:♂SD大鼠55只,体质量180-220g,随机分为正常组、模型组、预防组.除正常组外,其余均采用四氯化碳、高脂饮食及乙醇复合因素复制肝纤维化模型,造模同时预防组每日一次予以0.8 g/kg丹芍化纤自来水悬液灌胃,模型组、正常组予以等体积自来水灌胃,持续8 wk.造模结束后肝组织HE染色病理检查,免疫组化检测肝组织PDGFR-β、蛋白印迹检测肝组织p-ERK1/2在各组表达,生化法检测各组血清透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PⅢP)、白蛋白(ALB)、总蛋白(TP),计算白球比(A/G).结果:造模8 wk后经病理学证实模型大鼠形成典型的肝纤维化,模型成功.与正常组相比,模型组肝组织PDGFR-β、p-ERK1/2及血清HA、LN、PⅢP均有显著升高,ALB、A/G显著降低(PDGFR-β:184.6±8.5 vs 89.6±5.8,P<0.05;p-ERK1/2:360.0±14.5 vx 15.4±2.1,P<0.05;HA:517.5±91.5μg/L vs 254.4±33.1μg/L,P<0.05;LN:58.4±11.3μg/L vs 37.3±9.8μg/L,P<0.05:PⅢP:36.9±5.6μg/L vs 4.7±1.5μg/L,P<0.05;ALB:27.4±4.9 g/L vs 42.1±1.6 g/L,P<0.05;A/G:0.89±0.08 vs 1.38±0.09,P<0.05);与模型组相比,预防组肝组织PDGFR-β、p-ERK1/2及血清HA、LN、PⅢP均有显著降低,ALB、A/G显著升高(PDGFR-β:91.1±6.3 vs 184.6±8.5,P<0.05;p-ERK1/2:253.8±18.2 vs 360.0±14.5,P<0.05;HA:322.9±41.4μg/L vs 517.5±91.5μg/L,P<0.05;LN:46.0±9.4μg/L vs 58.4±11.3μg/L,P<0.05;PⅢP:14.5±2.4μg/L vs 36.9±5.6μg/L,P<0.05;ALB:37.2±2.8g/L vs 27.4±4.9g/L,P<0.05;A/G:1.18±0.13 vs 0.89±0.08,P<0.05).结论:PDGFR-β及p-ERK1/2在肝纤维化形成中起重要作用,丹芍化纤胶囊具有良好的预防肝纤维化形成的作用,其降低PDGFR-β及p-ERK1/2在肝组织的表达可能是其作用机制之一.     

应用磁共振氢谱技术评价中药肝脂消胶囊治疗非酒精性脂肪肝的疗效

目的:应用磁共振氢谱(~1H-MRS)技术定量评价复方中药肝脂消胶囊治疗非酒精性脂肪肝(NAFLD)的疗效.方法:依中华医学会NAFLD诊断标准入选NAFLD患者22例,并与20例健康人对照.两组均进行常规体检,包括体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR)、血压(BP)、血清谷丙转氨酶(ALT)、空腹血糖(FBG)、胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、尿酸(UA)和肝脏~1H-MRS扫描,计算肝内脂质含量(IHCL).NAFLD组患者服用肝脂消胶囊8 wk,检测治疗前后血清生化指标和IHCL的变化.结果:NAFLD组BMI,WHR,DBP,ALT,FBG,TG,UA,IHCL分别较正常组(BMI:28.4±2.4 vs 21.7±2.2.WHR:0.91±0.04 vs 0.83±0.04,DBP:80±10 mmHg vs 72±8 mmHg,ALT:71.5±24.8 U/L vs 20.4±10.1 U/L.FBG:5.67±0.61 mmol/L vs 4.72±0.43 mmol/L.TG:2.48±1.46 mmol/L vs 1.05±0.40 mmol/L.UA:420.7±57.5μmol/L vs 372.1±50.6μmol/L,IHCL:27.49%±12.27%vs 1.34%±0.79%,P<0.05或P<0.01)明显升高,但IHCL和上述指标之间没有明显相关性.经治疗后ALT(54.6±19.9 U/L,P<0.01),TG(2.14±1.38 mmol/L,P<0.05),IHCL(19.7%±12.7%,P<0.01)均明显下降.结论:肝脏~1H-MRS扫描可对肝脏内脂质含量进行准确定量,肝脂消胶囊可有效治疗NAFLD.     

牡蛎肝宝对大鼠酒精性肝病的抗脂质过氧化作用

目的:观察牡蛎肝宝对大鼠酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)的防治作用及其抗脂质过氧化效应.方法:采用给予乙醇灌胃制造酒精肝模型的方法,75只♂Wistar大鼠随机均分为空白组、模型组以及牡蛎肝宝低剂量、中剂量、高剂量5组.模型组仅给予500 mL/L的乙醇灌胃8wk,治疗组给予同等量乙醇灌胃,同时还给分别给予低剂量、中剂量和高剂量牡蛎肝宝8wk.空白对照组每天仅给予等量蒸馏水灌胃8 wk.治疗结束后,抽取大鼠腹主动脉血液,检测血清ALT、AST、TG、TC、GLU及丙二醛加合物抗体IgG,同时取大鼠肝脏做冰冻切片,用苏丹Ⅲ染色,观察各组脂肪变程度.结果:空白组及牡蛎肝宝中、高剂量组血清ALT、AST、TG、TC、GLU均明显低于模型组(均P<0.01),牡蛎肝宝中、高剂量组血清丙二醛加合物抗体IgG浓度低于模型组(P<0.01),牡蛎肝宝低剂量组血清ALT、AST和GLU低于模型组(63.67 U/L±6.89 U/L vs 81.53 U/L±22.85 U/L,131.2 U/L±11.63 U/L vs 156.47U/L±32.23 U/L,6.38 mmol/L±0.66 mmol/Lvs 6.86 mmol/L±0.67 mmol/L,P<0.01或0.05):模型组肝脏病理改变的程度高于空白对照组(P<0.01):牡蛎肝宝中、高剂量组肝脏病理改变的程度均低于模型组(P<0.05).结论:牡蛎肝宝可以降低ALD的肝脏脂质蓄积,抗脂质过氧化,有保肝降酶作用.     

T辅助细胞亚群在大鼠非酒精性脂肪性肝病模型中的变化

目的:探讨T辅助细胞亚群Th1/Th2和Treg在非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)发病机制中的意义.方法:SD大鼠正常喂养1 wk后,随机分为正常组(n=20)和高脂饮食组(n=20).正常组大鼠以普通饲料喂养,高脂饮食组以高脂饲料喂养.实验第8、16周分批处死大鼠.观察肝组织的病理改变.荧光定量PCR方法检测肝脏TNF-α、IFN-γ、IL-4和Foxp3的基因表达.结果:高脂饮食8 wk大鼠肝细胞脂肪变明显,无明显炎症改变,IFN-γ、IL-4在肝脏的基因表达与正常组比较无明显变化,TNF-α稍升高,但无统计学意义,Foxp3 mRNA的表达比正常组明显降低(ct值:26.12±0.69 VS 24.22±0.62,P<0.05).高脂饮食16 wk大鼠脂肪肝明显,炎症明显,IFN-γ和TNF-α基因表达均显著升高(ct值:24.52±0.87 vs 29.94±1.44,24.31±1.13vs28.88±1.95,均P<0.05),IL-4与正常组相比较无明显变化,Foxp3基因表达较正常组和高脂饮食8 wk时均显著降低(ct值:32.57±1.54 vs 24.29±1.08,26.12±0.69,P<0.05).结论:高脂饮食大鼠肝脏Foxp3和Treg表达减少可能是高脂饮食NAFLD发生发展的重要因素.IFN-γ和TNF-α的联合作用加重了肝脏的炎症损伤.     

非酒精性脂肪肝大鼠肝脏硬脂酰CoA去饱和酶-1表达与ATP浓度之间的关系

目的:研究非酒精性脂肪肝大鼠肝脏SCD-1表达及ATP含量之间的关系.方法:SD大鼠30只分成正常组、高脂组,在实验的第8,16和24周分批处死,观察肝脏组织学改变,荧光素酶-荧光素法测定肝脏ATP含量,RT-PCR实时荧光分析大鼠肝SCD-1mRNA与β-actinmRNA的比值.结果:肝组织HE染色显示高脂组大鼠肝脏内有弥漫性肝细胞脂肪变性,8wk达到脂肪肝诊断标准.8wk表现为单纯性脂肪肝,16-24wk进展为脂肪性肝炎.电镜下发现实验组与对照组相比,肝细胞线粒体肿胀、增大,部分内膜嵴粒脱落,16wk发现线粒体内有类圆形结晶样物质沉积.实验组肝SCD-1mRNA表达下降,8,16和24wk的测定值分别为0.39±0.18vs0.83±0.28(P<0.05)、0.44±0.17vs0.81±0.30(P<0.05)和0.47±0.23vs0.88±0.22(P<0.01);每克肝匀浆ATP含量(10-8μmol/L)减低(2.40±0.54vs2.96±0.43,P>0.05,2.26±0.55vs3.00±0.42,P<0.05和1.74±0.45vs2.79±0.40,P<0.01).肝SCD-1mRNA表达与ATP含量呈正相关(r=0.46,P<0.05).结论:长期高脂饮食引起肝SCD-1的表达下调,促使脂肪在肝内蓄积形成非酒精性脂肪肝.同时使肝细胞内饱和游离脂肪酸增加,线粒体结构和功能受损,使ATP的合成和储存下降,加重氧化应激对肝细胞的打击和肝脏的炎症反应.     

罗格列酮对高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗及脂联素的影响

目的:探讨罗格列酮对高脂饮食所致的非酒精性脂肪肝大鼠模型胰岛素抵抗及脂联素的影响.方法:30只大鼠随机分为3组,即模型组(高脂饮食 蒸馏水ig),空白对照组(正常饲料 蒸馏水ig)和罗格列酮组[高脂饮食 罗格列酮3 mg/(kg·d)ig].观察各组血脂、肝功、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的变化和各组肝组织HE染色与脂肪特异性的苏丹Ⅲ染色的变化.采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和免疫印迹(western blot)检测各组肝组织的脂联素水平.结果:模型组与空白对照组相比,甘油三酯(TG)(1.51±0.37 mmol/L vs 0.98±0.51 mmol/L,P<0.01),总胆固醇(TC)(2.74±0.65 mmol/L vs 1.71±0.37 mmol/L,P<0.05),ALT(450.20±244.12 U/L vs 264.56±48.44 U/L,P<0.011,AST(460.30±310.13 U/L vs 196.11±52.23 U/L,P<0.01)和HOMA-IR(3.46±1.16 vs 1.07±0.26,P<0.01)均显著升高.罗格列酮治疗可使TG(1.27±0.50 mmol/L),ALT(360.26±244.37 U/L,AST(300.20±233.13 U/L)以及HOMR- IR(1.44±0.37)得到明显改善(均P<0.05).从组织病理学亦可得到证实.肝组织实时荧光定量PCR及免疫印迹显示罗格列酮组的Adiponectin mRNA(552.40±268.13 vs 215.95±135.87,P<0.05)和蛋白表达均较模型组升高.结论:高脂饮食可诱导大鼠NAFLD和IR发生,并使肝功,血脂异常升高.罗格列酮可以改善高脂饮食大鼠的脂肪肝及IR情况,可能与Adiponectin缓解IR和NAFLD改善有关.     

泰脂安对高胆固醇血症兔血脂和主动脉内膜中巨噬细胞的影响

目的 观察泰脂安对高胆固醇血症兔血脂和主动脉内膜中巨噬细胞的影响,以探讨泰脂安在调脂和抗动脉粥样硬化中的作用.方法 给16只新西兰健康雄兔高胆固醇饮食,8周后随机给予泰脂安1.0 g·kg-1·d-1,8只为泰脂安组;淀粉干预25.0 mg·kg-1,8只为对照组;另8只兔每天分别进食普通饲料120 g(正常饮食组).6周后测定血清血清总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDI-C),采用免疫组织化学法测定主动脉内膜中巨噬细胞阳性数.结果 与正常饮食组比较,对照组和泰脂安组TC[分别为(1.8±0.7)mmol/L与(27.8±1.0)mmol/L和(26.5±2.5)mmol/L]、LDL-C[(0.6±0.2)mmol/L与(14.5±3.3)mmol/L和(13.7±4.1)mmol/L]升高,均为P<0.05.经泰脂安干预后,主动脉粥样硬化斑块中巨噬细胞表达下降[(71.8±15.5)%与(53.8±12.7)%,P<0.05];TC[(19.0±4.3)mmol/L]和LDL-C[(11.6±2.2)mmol/L]水平下降(P<0.05).结论 泰脂安能有效地调节血脂和降低动脉粥样硬化程度.     

非酒精性脂肪肝大鼠L-FABP和PPAR-α mRNA的动态表达

目的:检测非酒精性脂肪肝大鼠肝脏中L-FABP、PPAR-α mRNA的动态变化,探讨非酒精性脂肪肝的发病机制. 方法:♂大鼠84只,体质量180 g±10 g,随机分为饮食基础饲料的正常对照组和饮食高脂饲料的实验组;各组又随机分为0、2、4、8、12、16、18 wk 7个时相组,其中高脂饲料组在12 wk以后饮食正常饲料,使其脂肪肝处于自然恢复状态.分别于不同时相从心脏取血,测定血清中ALT、TG、CHOL、HDL-C和LDL-C的含量:收集肝脏标本,分别进行病理学检测和L-FABP和PPAR-α mRNA的动态变化检测. 结果:对照组大鼠肝脏L-FABP和PPAR-α mRNA在不同时相间的表达无显著性变化.高脂饮食脂肪肝大鼠第2周时病理切片没有观察到脂肪变性.L-FABPmRNA在第4周升高(0.59±0.06 vs 0.52±0.03,P<0.05),第8、12周显著升高(0.91±0.07,0.92±0.08 vs 0.52±0.03,均P<0.01),正常饮食6 wk后显著下降(0.59±0.04 vs 0.92±0.08,P<0.01),但是与对照组比较仍升高(P<0.05).PPAR-α mRNA在第4周下降(1.05±0.09 vs 1.13±0.07,P<0.05),第8、12周显著下降(0.89±0.04,0.85±0.07 vs 1.13±0.07,均P<0.01),正常饮食6 wk后显著升高(1.04±0.07 vs 0.85±0.07,P<0.01),但是与对照组比较仍下降(P<0.05).脂肪变性面积在第12周时最大,但未见明显的炎症反应,正常饮食6 wk后脂肪变性明显好转. 结论:高脂饮食脂肪肝大鼠模型L-FABP mRNA表达阈值的出现和PPAR-α mRNA表达下调可能在脂肪变性形成过程中起到重要作用,且单纯脂肪变性在一定程度上是可以通过饮食调节自然恢复的.     

代谢综合征小鼠肝脏改变及肝脏清道夫受体B1的表达

目的　探讨代谢综合征小鼠肝脏改变及肝脏清道夫受体B1 (SR B1 )表达。方法　正常饮食C57BL/ 6J小鼠 1 0只 (对照组 ) ;进高脂高糖食 8w 5只 (实验组 )和 1 6w 1 0只 (实验组 )。测定血脂、血清胰岛素 (INS)及空腹血糖、肝功、肝脏重量、腹部瘦肉及瘦肉含量 ,肝脏脂质含量及SR B1蛋白表达。并做肝脏病理检查。结果　①实验B组小鼠腹部脂肪量显著高于对照组 (P <0 0 1 )。②实验B组的小鼠血清甘油三酯 (TG)、空腹血糖 (FBG)明显高于对照组 (P <0 0 5) ,胰岛素高于对照组 ,但无显著性 (P >0 0 5)。③实验组小鼠血清TP、ALB及A/G低于对照组 ,其中实验B组小鼠ALB及A/G有显著差异 (P <0 0 5)。血清ALT、ALP及AST高于对照组 ,其中实验B组小鼠ALP有显著差异 (P <0 0 5)。④实验组小鼠肝脏有明显脂肪变性 ,B组重于A组。实验组小鼠肝脏的TC和TG含量显著高于对照组 ,实验B组小鼠达到正常的 2倍以上。⑤实验组小鼠肝脏SB B1表达高于对照组 ,B组强于A组。结论　高脂高糖食C57BL/ 6J小鼠可作为代谢综合征动物模型 ,其存在脂肪肝 ,肝脏的SR B1蛋白表达量高于正常饮食小鼠 ,可能其参与脂肪肝的形成。     

高脂喂养及罗格列酮干预对老年大鼠骨骼肌线粒体功能的影响

目的 观察高脂饮食和罗格列酮干预对老年大鼠骨骼肌过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)和线粒体融合蛋白2(Mfn2)表达的影响. 方法 21～23月龄Wistar大鼠分为老年对照组、高脂组和高脂+罗格列酮干预组(干预组),并设4～5月龄Wistar大鼠作为青年对照组.应用正常葡萄糖高胰岛素钳夹技术评价胰岛素敏感性,高脂喂养第8周时,检测骨骼肌PGC-1α和Mfn2的mRNA及蛋白表达.结果高脂喂养8周后,青年对照组、老年对照组和高脂组空腹血游离脂肪酸[(0.68±0.18)mmol/L、(0.82±0.23)mmol/L和(1.53±0.40)mmol/L],三酰甘油[(0.53±0.13)mmol/L、(0.63±0.17)mmol/L和(1.08±0.30)mmol/L],骨骼肌三酰甘油[(1.09±0.17)mmol/L、(1.34±0.20)mmol/L和(2.07±0.30)mmol/L]均升高,葡萄糖输注率((30.4±4.2)mg·kg~(-1)·min~(-1)、(20.9±2.2)mg·kg~(-1)·min~(-1)和(12.0±1.9)mg·kg~(-1)·min~(-1)]下降;经过罗格列酮干预后游离脂肪酸[(0.93±0.29)mmol/L]、三酰甘油[(0.62±0.12)mmol/L]及骨骼肌三酰甘油[(1.68±0.28)mmol/L)]均明显下降,葡萄糖输注率[(16.7±1.7)mg·kg~(-1)·min~(-1)]升高.与青年对照组比较,老年对照组骨骼肌PGC-1α和Mfn2的表达下降,经高脂喂养后PGc-1α和Mfn2的表达进一步下降,干预组上述基因的表达均显著高于高脂组(P<0.05),但仍比老年对照组降低(P<0.05). 结论 高脂饮食可诱导老年大鼠产生IR,推测可能与骨骼肌PGC-1α和Mfn2的表达下降有关;罗格列酮可通过改变骨骼肌PGC-1α和Mfn2的表达增加胰岛素敏感性.     

小鼠日本血吸虫性肝纤维化组织TGF-β1及Smads的表达

目的:探讨小鼠日本血吸虫病纤维化肝组织中转化生长因子(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad2/3、Smad4和Smad7的表达和肝纤维化的发病机制.方法:清洁级6-8 wk龄ICR小鼠80只,雌雄各半,随机分为模型组和正常对照组,用血吸虫尾蚴腹部贴附法制成动物模型,正常组未予处理.感染后wk 4、6、8和12末分批处死2组小鼠且称肝脾质量,取部分肝做病理学观察,HE染色和猩红染色,制作组织芯片,免疫组化检测TGF-β1、Smad2/3、Smad4和Smad7在各细的表达状况.结果:与正常组相比,模型组小鼠肝脾质量和肝指数均高(肝,12 wk:2.99±0.28 g vs 1.83±0.13 g;脾,12 wk:0.87±0.15 g vs 0.14±0.02g;肝指数,12 wk:0.09±0.01 vs 0.04±0.00;均P＜0.01),TGF-β1和Smad2/3表达也均高于正常对照组(TGF-β1.12 wk:0.105±0.008 vs 0.024±0.002;Smad2/3.12 wk:0.094±0.009 vs 0.003±0.001,均P＜0.01),以上指数分别与肝纤维化程度呈正相关(r=0.635,0.482,0.646,0.347,0.662;均P<0.01);Smad4表达高于对照组且随着纤维化的发展表达量在逐渐下降(4wk:0.075±0.011 vs 0.023±0.006.6 wk:0.043±0.008 vs 0.010±0.002.8 wk:0.038±0.009 vs 0.003±0.002.12 wk:0.028±0.004 vs 0.013±0.006;均P＜0.01).Smad7仅8 wk表达增强.结论:TGF-β1和Smad2/3表达增强在肝纤维化的发生中起重要作用,Smad4可能主要在纤维化的早中期发挥效应.     

沙棘与疏肝理气及清热利湿方配伍对脂肪肝大鼠的防治作用

目的:探讨沙棘分别与逍遥散及二妙散配伍对实验性脂肪肝大鼠的防治作用.方法:大鼠随机分为5组:正常组(N)、模型组(M)、西药(东宝肝泰)组(D)、沙棘配逍遥丸组(SA)、沙棘配二妙散组(SB),每组10只.正常组基础饲料喂养,其余各组高脂饲料喂养8wk后行药物干预,并继续高脂每日加250mL/L乙醇12mL/kg,ig,1mo后观察进食量、体质量、肝脾指数、用药前后血清总胆固醇(CHO,mmol/L)、三酰甘油(TG,mmol/L)、低密度脂蛋白(LDL, mmol/L)、极低密度脂蛋白(VLDL,mmol/L),高密度脂蛋白(HDL,mmol/L)及肝脏病理改变.结果:高脂喂养2mo和药物干预后.与N组相比,M组大鼠体质量增长加快,CHO,TG,LDL和VLD明显升高,HDL明显下降;与M组相比,SA和SB组大鼠进食量减少、TG和VLDL下降(TG:3.9±0.2,4.0±O.1vs5.4±0.3;VLDL:2.4±0.1,2.7±0.1vs 3.1±0.2,P＜0.05),D组TG下降(3.3±0.5vs5.4±0.3,P＜0.05).肝脏病理方面,M细肝细胞呈广泛的气球样变,SA和SB组均能明显减少病变的肝细胞数和减轻病变程度.结论:沙棘与逍遥散及二妙散配伍对肝脏损伤有保护作用,以沙棘与逍遥散配伍防治作用更好.     

复方中药对大鼠高脂饮食所致脂肪性肝炎肝组织氧化和抗氧化系统的影响

目的:探讨氧应激和脂质过氧化在高脂饮食所致脂肪性肝炎形成中的作用,复方中药防治非乙醇性脂肪性肝炎的作用机制.方法:雄性SD大鼠60只随机分组为6组,每组10只.正常组普通饲料喂养;模型Ⅰ组、Ⅱ组喂高脂饲料;中药治疗Ⅰ、Ⅱ组分别在喂饲高脂饲料9wk、13wk予复方中药灌胃;饮食治疗组在喂饲高脂饲料13wk后改为普通饲料喂养.12wk末处死正常组、模型Ⅰ组、中药治疗Ⅰ组大鼠;剩余3组大鼠继续喂养至16wk末处死,测定血清转氨酶(ALT、AST),全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX),肝匀浆丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性,总抗氧化能力(T-AOC),一氧化氮(NO),诱导型一氧化氮合酶(iNOS),谷胱甘肽(GSH)水平,观察肝组织学改变.结果:模型组大鼠12wk出现单纯性脂肪肝,16wk发展为脂肪性肝炎.与正常组比,模型组大鼠肝组织脂质过氧化产物MDA含量明显增多(6.45±1.07,8.38±1.32μmol/gvs5.08±0.91μmol/g,P<0.01),而抗氧化物SOD(171±14,148±26kNU/gtvs198±25kNU/gt,P<0.05和P<0.01),GSH(40.8±5.1,35.0±9.0mg/gvs48.5±7.6mg/g,P<0.05和P<0.01),GSH-PX(11.2±1.5,10.3±1.8μmol/Lvs16.4±3.7μmol/L,P<0.01)含量明显降低,且肝脏的脂肪变性严重程度随着高脂饮食喂养的时间延长而加剧.中药治疗组各项指标较模型组有明显改善(P<0.05或P<0.01),脂肪变性程度明显减轻.而饮食治疗组大鼠肝脏病理学仍呈轻-中度脂肪变性,各项指标与模型组比无显著差异.结论:氧应激和脂质过氧化在NASH形成中发挥重要作用,复方中药通过抗脂质过氧化等作用来治疗大鼠NASH.