喉癌组织中PRDM1基因的表达及其临床意义

喉癌是头颈部肿瘤中较为常见的恶性肿瘤,研究初步证实喉癌的发生与遗传突变有关,并且常表现为一系列基因的突变,如癌基因活化以及抑癌基因的失活.     

喉癌组织中EMS1和DcR3蛋白的表达及其相关性研究

目的:探讨EMS1和DcR3在喉癌组织中的表达及其相关性.方法:采用流式细胞术检测41例喉癌组织和41例相应癌旁组织中EMS1和DcR3的表达,并以15例非喉癌患者喉部正常黏膜组织作对照.结果:①喉癌组织中EMS1和DcR3蛋白的表达量及阳性表达率均明显高于癌旁组织及正常喉黏膜组织(P＜0.05),癌旁组织及正常喉黏膜组织的表达差异无统计学意义(P＞0.05).②EMS1和DcR3蛋白的表达与喉癌组织中的淋巴结转移、临床分期和病理分级有相关性(P＜0.05);与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无相关性(P＞0.05).③喉癌组织中EMS1蛋白表达水平与DcR3蛋白表达水平呈正相关(P＜0.05).结论:EMS1和DcR3关系密切,二者在喉癌发生、发展过程中发挥重要作用.     

喉癌组织中凋亡相关基因Survivin蛋白表达的临床意义

目的:探讨Survivin蛋白在喉癌组织中的表达与患者术后生存期的关系。方法:采用免疫组织化学 (SP法)染色技术对40例喉癌组织(喉癌组)和5例正常喉黏膜组织(对照组)石蜡标本进行Survivin蛋白表达的 检测,并采用图像分析对表达结果进行定量分析。结果:Survivin在喉癌组中的阳性表达显著高于对照组(P< 0.01);在有淋巴结转移的喉癌组织中Survivin蛋白的表达高于无淋巴结转移的喉癌组织(P<0.05);不同性别、 年龄的患者喉癌组织中Survivin蛋白的表达差异均无统计学意义(均P>0.05);Survivin蛋白的表达与喉癌的 TNM分期有关(P<0.05),与患者生存期呈负相关关系(r=-0.646,P<0.01)。结论:喉癌组织Survivin蛋 白的表达与TNM分期、淋巴结转移和预后有密切关系,它的高表达提示肿瘤患者预后不良;Survivin基因在喉癌 组织中表达上调,提示该基因在喉癌的发生、发展中起重要作用     

Stat3及其靶基因Cyclin D1在喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的:研究喉鳞状细胞癌组织中信号转导和转录激活因子3(Stat3)及其靶基因细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达情况并探讨其临床意义。方法:应用Western blot和RT-PCR方法,研究喉鳞状细胞癌组织中Stat3、Cyclin D1蛋白和mRNA的表达情况以及与喉鳞状细胞癌临床病理因素的关系。结果:喉鳞状细胞癌组织中Stat3、Cyclin D1蛋白和mRNA的表达水平明显高于正常喉黏膜组织(P<0.01)。Stat3、Cyclin D1蛋白表达水平与喉鳞状细胞癌临床分期、分化程度及淋巴结转移有关(P<0.01);在喉鳞状细胞癌组织中Stat3蛋白、mRMA与CyclinD蛋白、mRNA的表达均呈正相关(r=0.564、0.552,均P<0.01)。结论:Stat3信号转导通路在喉鳞状细胞癌的发生、发展过程中起重要作用,检测喉鳞状细胞癌组织中Stat3及其靶基因Cyclin D1的表达可以反映肿瘤的恶性程度。     

喉癌组织中Caspase-3的表达及其临床意义

目的 通过对比Caspase-3在喉癌、喉癌前病变及声带息肉中表达的差异;探讨Caspase-3在喉癌中表达及其临床意义.方法 选取2011年2月～2016年12月在我院就诊的喉癌患者49例、声带息肉13例、喉癌前病变10例(含喉乳头状瘤6例,非典型增生4例)病理切片标本作为研究对象,采用免疫组化EnVision法检测...     

Cycin D1在鼻腔鼻窦肿瘤中的表达

目的：探讨cycin D1在鼻腔鼻窦肿瘤中的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化SABC法检测20例鼻腔鼻窦恶性肿瘤和10例相应部位良性病变的石蜡标本中cycin D1的表达。结果：鼻腔鼻窦肿瘤中cycin D1表达均为阳性,良性病变中为阴性或弱阳性。鼻腔鼻窦恶性肿瘤中cycin D1积分与患者年龄、性别、病变部位及病理类型无关（P＞0.05）。Cycin D1积分与TNM分期、病理分级相关（P＜0.05 ),且积分随肿瘤临床分期、分级逐渐升高。初诊病例与复发病例之间cyclin D1积分差异有统计学意义（P＜0.05 ）。结论：Cycin D1在鼻腔鼻窦肿瘤的发生、发展及复发转移等临床病理过程中起重要作用。     

喉癌组织中PD-L1的表达及意义

目的:探讨程序性死亡配体-1(PD-L1)在喉癌及癌旁组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学和Western-blotting技术分别检测31例喉癌组织和24例癌旁组织中PD-L1的蛋白表达水平及差异。结果:PD-L1在喉低、低中分化鳞状细胞癌中的表达明显高于高分化癌组织,前者PD-L1主要表达于血管,瘤细胞少见,后者血管常呈弱表达而局部瘤细胞呈阳性表达;PD-L1的表达与淋巴转移相关。癌旁组织中PD-L1表达明显低于癌组织,然其表达水平与其对应癌组织呈正相关。结论:PD-L1可能在喉癌特别是低及低中分化喉癌的发生、发展和(或)转移中起到一定作用,有望成为喉癌尤其是低、低中分化喉癌治疗的一个新靶点。     

微管相关蛋白1轻链3在喉癌中的表达及其意义

目的:探讨微管相关蛋白1轻链3(LC3)在喉癌中的表达及其意义.方法:采用免疫组织化学染色方法检测LC3蛋白在50例喉癌组织、45例癌旁组织、10例喉乳头状瘤及16例声带息肉中的表达情况.采用RT-PCR法检测LC3 mRNA和蛋白在41例喉癌组织、41例癌旁组织及11例声带息肉组织中的表达,并结合临床病理因素进行分析.结果:免疫组织化学结果显示LC3蛋白在喉癌组织、癌旁组织、喉乳头状瘤、声带息肉中的阳性率分别为60.0%、93.3%、90.0%、93.8%.LC3在喉癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁及声带息肉组织(χ2=18.135,P＜0.01).RT-PCR检测结果显示LC3 mRNA在喉癌组织中相对表达量为0.57±0.08,与癌旁组织(0.99±0.11)及声带息肉组织(1.07±0.05)中的相对表达量比较差异亦有统计学意义(F=255.872,P＜0.01).LC3在喉癌中的蛋白表达与肿瘤部位、病理学分级有关(P＜0.05),与患者的年龄、T分期、临床分期及淋巴结转移无关(P＞0.05).结论:LC3在喉癌中的表达下调,自噬活性的改变可能与喉癌发生、发展有关.     

反义Stat3基因诱导喉癌细胞凋亡的线粒体机制探讨

目的:探讨Stat3反义寡脱氧核苷酸转染人喉癌Hep-2细胞株后,细胞内线粒体的改变,为阐明喉癌细胞凋亡的机制奠定一定的理论基础,为临床上喉癌的治疗开辟一条新思路。方法:将设计好的Stat3反义寡核苷酸序列(ASODN),应用脂质体转染法以不同浓度转染人喉癌Hep-2细胞,并设空白组(MOCK)及正义对照组(SODN)作为比较,检测各转染组Hep-2细胞中线粒体膜电势、电压依赖性阴离子通道(VDAC)以及Cyt-c,以判断线粒体的变化。结果:随着ASODN浓度的增加,线粒体膜电势降低,VDAC逐渐增加,Cyt-c释放逐渐增多。结论:在Stat3影响人喉癌Hep-2细胞凋亡的机制中,线粒体途径发挥了作用。初步阐明Stat3影响喉癌细胞增殖的调控机制,为临床治疗提供了新的研究靶点。     

COX-2基因及产物在人类喉癌组织中的表达

目的:研究COX-2在喉鳞状细胞癌中的表达,探讨其与喉癌的生长、浸润及转移的关系.方法:应用半定量RT-PCR方法对标本中COX-2 mRNA的表达进行检测,应用免疫组织化学方法对标本中COX-2蛋白的表达进行检测,并对COX-2的表达情况与疾病生物学特点的关系进行研究.结果:COX-2 mRNA及蛋白在喉鳞状细胞癌组织中高表达,与在声带息肉组织中的表达差异有统计学意义(P<0.01),且随肿瘤的进展COX-2的表达强度增加.结论:COX-2是较为有效的生物学指标,指示喉鳞状细胞癌的发生和发展.同时应用RT-PCR方法及免疫组织化学方法检测喉癌标本,既保证了灵敏度又兼顾了特异度.     

Stat3反义核苷酸通过调节凋亡相关因子诱导喉癌细胞凋亡

目的:探讨反义Stat3基因诱导喉癌细胞凋亡的机制。方法:将设计好的已证实能诱导人喉癌细胞凋亡的Stat3反义寡核苷酸序列,应用脂质体瞬时转染法转染人喉癌Hep-2细胞,应用Western blot、PCR检测Hep-2细胞中Bcl-2,Bax及C-Myc基因及蛋白的表达情况。结果:Western blot和RT-PCR结果显示转染Stat3反义寡核苷酸细胞组,Bax的表达随反义寡核苷酸浓度增加,表达增强,而Bcl-2及C-Myc的表达则减弱。结论:反义Stat3寡核苷酸通过上调Bax,下调Bcl-2及C-Myc基因表达来参与其诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡的过程。     

Stat3反义寡脱氧核苷酸在体外诱导喉癌细胞凋亡

目的:探讨Stat3反义寡核苷酸对人喉癌Hep-2细胞株细胞凋亡的影响。方法:设计Stat3反义寡核苷酸序列,应用脂质体瞬时转染法转染人喉癌Hep-2细胞,应用Western blot和RT-PCR检测Stat3及p-Stat3的表达;MTT实验检测Stat3反义寡核苷酸对转染细胞的抑制情况,应用DNA ladder、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)及流式细胞术检测细胞凋亡水平和形态变化。结果:Western blot和RT-PCR结果显示Stat3反义寡核苷酸分别在蛋白及mRNA水平显著抑制Stat3基因表达,并在蛋白水平抑制p-Stat3表达;转染Stat3反义寡核苷酸的喉癌细胞增殖明显受到抑制,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);DNA ladder、AO/EB及流式细胞术证实Stat3反义寡核苷酸在体外可抑制Stat3基因表达并诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡,且呈现浓度依赖性。结论:Stat3对喉癌细胞的过度生长、增殖起一定作用,Stat3反义寡核苷酸能够诱导喉癌细胞凋亡,抑制其增殖。     

Cyclin D1在EGCG抗鼻咽癌中表达的变化及意义

目的：探讨Cyclin D1基因在表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）抗鼻咽癌中表达的变化及意义,揭示EGCG的抗鼻咽癌作用机制。方法：体外培养低分化鼻咽癌细胞株CNE-2并以不同浓度EGCG处理,倒置显微镜下观察不同浓度EGCG作用48h后CNE-2细胞的形态变化,采用MTT比色法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期,半定量逆转录PCR检测细胞中Cyclin D1mRNA的表达变化。结果：EGCG处理后,CNE-2细胞的数量及密度逐渐降低,分裂象减少,贴壁差,部分细胞变圆且体积变小,漂浮及凋亡细胞不断增多;细胞增殖明显受到抑制,CNE-2细胞被阻滞在G0/G1期,呈时间和剂量依赖性（P〈0.05）;Cyclin D1mRNA表达明显下调,且EGCG作用浓度与时间依赖性（P〈0.05）。结论：EGCG抑制CNE-2细胞的增殖,可能与其呈浓度与时间依赖性下调Cyclin D1mRNA的表达相关。     

成人喉乳头状瘤Pin1和CyclinD1的表达及意义

目的：探讨成人喉乳头状瘤中Pin1和Cyclin D1的表达情况、二者之间的相关性及在喉乳头状瘤恶变中的作用。方法：用免疫组织化学方法检测10例喉正常上皮组织、39例喉乳头状瘤、27例喉乳头状瘤伴中重度不典型增生及16例喉乳头状瘤伴癌变共计92例石蜡切片中Pin1和Cyclin D1的表达情况。结果：从正常喉上皮组织到喉乳头状瘤恶变组织的变化过程中,Pin1和Cyclin D1的表达逐渐增高（P〈0.05）;Cyclin D1在喉乳头状瘤组与伴不典型增生组之间表达差异无统计学意义（P〉0.0125）,其余各组间差异均有统计学意义（均P〈0.0125）;Pin1和Cyclin D1的表达具有显著正相关性（P〈0.05）。结论：Pin1和Cyclin D1在喉乳头状瘤恶变过程中发挥重要作用;Pin1过表达上调Cyclin D1过表达,可能是喉乳头状瘤恶变机制之一。