小白菊内酯对颈动脉狭窄大鼠MAPK/NF-κB信号通路的影响

目的 探索小白菊内酯（PTN）对颈动脉狭窄大鼠丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）/核因子κB(NF-κB)信号通路的影响。方法 120只大鼠随机分为假手术组、模型组、PTN低、中、高剂量组以及阳性对照组,每组20只。采用球囊拉伤的方法建立大鼠颈动脉狭窄模型。造模成功后,PTN低、中、高剂量组分别经腹腔注射125、250、500μg/kg PTN,阳性对照组给予30 mg/kg肠溶阿司匹林灌胃,模型组和假手术组给予等体积生理盐水,每天干预1次,连续干预14 d。干预结束后,测定大鼠颈动脉的面积狭窄率;酶联免疫吸附（ELISA）法测定大鼠血浆中血管内皮生长因子（VEGFA）、血管紧张素Ⅱ（Ang-Ⅱ）以及血清中炎症因子C-反应蛋白（CRP）、转化生长因子-β(TGF-β);苏木精-伊红（HE）染色观察颈动脉组织病理变化;蛋白免疫印迹（Western blot）法检测大鼠颈动脉组织中MAPK、NF-κB蛋白表达。结果 与假手术组相比,模型组发生明显颈动脉组织病变,面积狭窄率、血浆VEGFA、Ang-Ⅱ水平、血清CRP、TGF-β水平以及颈动脉组织中MAPK、NF-κB蛋白表达均显著增加,差异均有...     

小白菊内酯对PD小鼠黑质区NF-κB和FLIP表达的影响

目的 探讨在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)制备的帕金森病(pD)小鼠模型中核因子NF-κB与FADD样白细胞介素1-转化酶样抑制蛋白(FUP)之间的关系,研究核因子信号通路在PD发病中的作用机制.方法 将C57BL/6N小鼠随机分为模型组、干预组和对照组.观察小鼠行为学变化,采用免疫组织化学和免疫蛋白印迹法观察小鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)、NF-κB、FLIP和caspase-3的表达变化,以及给予小白菊内酯后对上述变化的影响.结果 与对照组相比,模型组小鼠出现典型PD症状,TH阳性神经元明显丢失,蛋白水平下降,核因子信号通路被激活,其阳性表达明显增多,FLIP和caspase-3表达也明显增加;经小白菊内酯干预处理后,上述变化均减轻.结论 核因子信号通路可能参与激活FLIP对PD模型小鼠黑质区凋亡有重要调控作用,小白菊内酯对PD模型小鼠有一定的神经保护作用.     

rhGH对大鼠肝脏缺血再灌注损伤中NF-κB P65蛋白表达的影响

目的探讨重组人生长激素(rhGH)对肝脏缺血再灌注损伤中的NF-κB P65蛋白表达的影响.方法Pringle’s法建立100只肝脏缺血再灌注损伤模型,实验组于建立模型前7 d每天给予重组人生长激素(rhGH)针剂皮下注射(0.2 IU/100 g体重),对照组等量的生理盐水注射,应用蛋白质印迹实验(Westernblotting)和免疫组化法检测NF-κB P65蛋白表达水平.结果rhGH组肝细胞NF-κB P65蛋白表达水平及活性均明显低于对照组(P<0.05).结论rhGH能下调大鼠肝脏缺血再灌注损伤中NF-κB P65蛋白的表达,从而减轻肝脏缺血再灌注损伤.     

NF-κB特异性抑制剂PDTC对鼠黑素瘤B16细胞增殖及VEGF表达的影响

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对鼠黑素瘤B16细胞增殖及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:不同浓度的PDTC作用于B16细胞不同时间后,MTT法测定其对B16细胞增殖的抑制率,ELISA检测PDTC作用下B16细胞VEGF的表达情况。结果:经PDTC处理的实验组,肿瘤细胞增殖活性明显受到抑制(P0.01);与对照组相比,PDTC作用后B16细胞VEGF表达降低(P0.01)。结论:PDTC具有显著抑制鼠黑素瘤B16细胞生长及VEGF表达的作用,是一种有潜力的抑制黑素瘤增殖的药物。     

心脉康方对兔动脉粥样硬化及NF-κBp65表达的影响

【目的】观察心脉康方对兔动脉粥样硬化及核转录因子κB(NF-κB)p65表达的影响。【方法】将37只新西兰白兔随机分成4组:假手术组(10只)、模型组(8只)、心脉康组(9只)、辛伐他汀组(10只)。模型组、心脉康组、辛伐他汀组兔给予高脂饲料喂养2周后行腹主动脉内膜球囊损伤术复制动脉粥样硬化模型,假手术组普通饲料喂养,只分离结扎股动脉,不拉伤腹主动脉内皮。术后,辛伐他汀组给予辛伐他汀2.60 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,心脉康组给予心脉康片0.21 g·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,假手术组、模型组给予等量生理盐水灌胃。持续12周。给药结束后,采用苏木素-伊红(HE)染色法光镜下观察兔主动脉组织病理变化,扫描电镜观察兔主动脉血管内壁病理变化,采用蛋白免疫分析(Western Blot)法检测兔主动脉组织中NF-κB p65的表达水平。【结果】HE染色与扫描电镜结果显示:模型组血管内粥样硬化斑块明显向内膜凸起,可见损伤的内皮细胞,在硬化斑块上可见粘附的巨噬细胞;心脉康组、辛伐他汀组上述损害明显减轻。Western Blot结果显示:模型组主动脉组织NF-κB p65表达水平较假手术组明显升高(P0.01);心脉康组主动脉组织NF-κB p65表达水平较模型组明显降低(P0.01);而辛伐他汀组主动脉组织NF-κB p65表达水平与模型组比较,差异无统计学意义(P 0.05)。【结论】心脉康方可改善兔动脉粥样硬化,保护血管内皮功能,其机制可能与下调主动脉组织NF-κB p65表达有关。     

人喉鳞状细胞癌组织中核转录因子-κB P65与PTEN蛋白的表达

目的:检测人喉鳞状细胞癌(LSCC)组织中核转录因子-κB P65(NF-κB P65)与PTEN蛋白的表达.方法:采用免疫组织化学SP法检测50例LSCC(男46 例,女4例;临床分期:Ⅰ期 6 例,Ⅱ期17 例,Ⅲ期22 例,Ⅳ期5 例;病理学分级:Ⅰ级 10 例,Ⅱ级24 例,Ⅲ级16例;有淋巴结转移27例,无淋巴结转移23例)和20例声带息肉组织中NF-κB P65和PTEN蛋白的表达情况.结果:LSCC和声带息肉组织中NF-κB P65阳性表达率分别为66.0%和5.0%,差异有统计学意义(P<0.05);PTEN阳性表达率分别为42.0%和75.0%,差异亦有统计学意义(P<0.05).LSCC组织中NF-κB P65的表达与淋巴结转移有关(P<0.05),PTEN的表达与临床分期、病理学分级、淋巴结转移均相关(P均<0.05).LSCC组织中NF-κB P65和PTEN的表达呈负相关(rs=-0.330,P=0.019).结论:NF-κB P65的高表达和PTEN的低表达可能与LSCC的发生、发展有关.     

生长抑素对胃癌SGC-7901细胞VEGF、NF_κB表达的影响

目的研究生长抑素对胃癌SGC-7901细胞血管内皮生长因子（VEGF）、核转录因子-κB（NFκB）表达的影响。方法不同浓度生长抑素处理SGC-7901。MTT法测量吸光度值,计算细胞生长抑制率;免疫细胞化学（SP）法检测VEGF、NFκB蛋白表达的变化;RT-PCR半定量检测VEGF、NFκB mRNA表达水平。结果实验组与对照组比较,细胞生长抑制率有明显差异（P〈0.05）,同一实验组不同时间点（24、48、72h）间比较,细胞生长抑制率也有明显差异（P〈0.05）,表明生长抑素对SGC-7901细胞生长抑制作用有剂量时间依赖性;不同浓度生长抑素处理48h后,SGC-7901细胞VEGF、NFκB蛋白表达下降,实验组与对照组比较有明显差异（P〈0.05）;mRNA的表达呈浓度依赖性降低,实验组与对照组比较有明显差异（P〈0.05）。结论生长抑素能下调胃癌SGC-7901细胞VEGF、NFκB表达,抑制胃癌细胞增殖。     

食管鳞癌组织中核转录因子κB P50、P65蛋白的表达

目的探讨核转录因子κB(NF-κB)P50、P65蛋白表达与食管鳞癌发生发展的关系.方法用免疫组化SP法检测49例食管鳞癌及癌旁黏膜组织(32例正常食管上皮,33例单纯增生上皮,19例轻度不典型增生上皮,14例重度不典型增生上皮,12例原位癌)中NF-κB P50、P65蛋白的表达.结果P50蛋白在癌旁正常上皮、单纯增生上皮、轻度不典型增生上皮、重度不典型增生上皮、原位癌和浸润癌组织中的阳性表达率分别为0%(0/32)、36.36%(12/33)、57.89%(11/19)、64.29%(9/14)、50.00%(6/12)和71.43%,正常上皮组织与单纯增生上皮、轻度不典型增生上皮、重度不典型增生上皮、原位癌和浸润癌组织比较差异均有统计学意义(P均＜0.01).P65蛋白在癌旁正常上皮、单纯增生上皮、轻度不典型增生上皮、重度不典型增生上皮、原位癌和浸润癌组织中的阳性表达率分别为6.25%(2/32)、18.18%(6/33)、36.84%(7/19)、42.86%(6/14)、58.33%(7/12)和57.14%(28/49),正常上皮组织与轻度不典型增生上皮、重度不典型增生上皮、原位癌和浸润癌组织比较差异均有统计学意义(P均＜0.01).P50、P65蛋白表达与食管鳞癌的组织学分级、浸润深度和淋巴结转移无关(P＞0.05).食管鳞癌组织中P50、P65蛋白阳性率差异无统计学意义,也无相关关系(P＞0.05).结论NF-κB P50、P65蛋白表达与食管鳞癌的发生发展有关.     

VEGF、COX-2和NF-κB在非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的研究血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、环氧化酶2（cyclooxygenase-2,COX-2）和核转录因子-κB（Nuc1earfactor-κB,NF-κB）在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）组织中的表达及其与临床病理的关系。方法应用免疫组化SP法检测60例非小细胞肺癌（NSCLC）和16例正常肺组织中VEGF、COX-2和NF-κB的表达情况。结果 60例NSCLC中,VEGF、COX-2和NF-κB的阳性表达率分别为71.67%、65.00%和76.67%,明显高于癌旁组织（均P〈0.01）。三者表达与年龄和性别分组均无关;VEGF阳性表达与各种临床病理特征无关（P〉0.05）,在有淋巴结转移患者中明显升高（P〈0.05）;COX-2阳性表达在腺癌和有淋巴结转移患者中明显升高（P〈0.05）;NF-κB阳性表达在有淋巴结转移患者中明显升高（P〈0.05）,并与临床分期密切相关。三者之间表达分别呈正相关关系。结论在非小细胞肺癌组织中,VEGF、COX-2和NF-κB的表达均增高并且呈正相关,三者协同促进NSCLC的发生发展,可以作为判断NSCLC恶性程度的生物学指标。     

小白菊内酯通过阻断Akt,NF-κ B信号通路诱导SK-N-SH细胞凋亡

目的探讨小白菊内酯(parthenolide,PTL)对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 MTT法检测不同浓度小白菊内酯对SK-N-SH细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察不同浓度(10、15μmol/L)的PTL作用48 h后SK-N-SH细胞的形态学变化;流式细胞术检测PTL处理后SK-N-SH细胞凋亡率;Western Blot检测PTL作用48 h后SK-N-SH细胞p-Akt和NF-κB p65蛋白表达的改变。结果①PTL抑制神经母细胞瘤SK-N-SH细胞生长,并呈浓度依赖关系;②PTL作用SK-N-SH细胞48 h后,细胞数量减少,细胞固缩变圆,细胞内结构消失,细胞溶解;③PTL处理SK-N-SH细胞后,细胞凋亡率增加,差异有统计学意义(P<0.01);④PTL作用SK-N-SH细胞后,与对照组比较,p-Akt和NF-κB p65蛋白表达均降低(P<0.05)。结论 PTL能抑制SK-N-SH细胞的增殖,诱导其凋亡,PTL的抗瘤机制可能与抑制Akt,NF-κB传导通路有关。     

视网膜母细胞瘤的VEGF和NF-κB P65表达及意义

①目的　探讨血管生成因子VEGF和细胞核因子NF κBP6 5蛋白在视网膜母细胞瘤中的表达及其与视网膜母细胞瘤生物学行为的关系。②方法　应用免疫组织化学SABC法检测VEGF和NF κBP6 5蛋白在 36例视网膜母细胞瘤中的表达情况。③结果　NF κBP6 5在正常视网膜中呈阴性表达 ,VEGF在正常视网膜中呈弱阳性表达 ,而在视网膜母细胞瘤中两者均呈阳性表达。两者在肿瘤组织细胞中的表达与在正常组织细胞中的表达差异有显著性 (F =1 5 2、1 2 3,q =4 0 .1 1、2 7.2 0 ,P <0 .0 5 )。且VEGF在视网膜母细胞瘤视神经浸润组与未浸润组的表达之间也有统计学差异 (q =1 0 .5 3,P <0 .0 5 )。 ④结论　VEGF和NF κBP6 5均参与视网膜母细胞瘤的形成 ,且VEGF可能与视网膜母细胞瘤的浸润有关     

胃癌中HSP70、NF-κB p65的表达及临床意义

目的探讨热激蛋白70(HSP70)、核因子κB(NF-κB)p65在胃癌中的表达及其意义。方法收集2011年8月至2012年5月益都中心医院经病理诊断确诊为胃癌并行胃癌根治术的胃癌组织标本60例,采用免疫组织化学法检测60例胃癌患者癌组织及癌旁组织中HSP70、NF-κB p65的表达,并分析两者与胃癌病理特征的关系。结果胃癌组织中HSP70的阳性表达率显著高于癌旁胃组织(78.3%vs 13.3%)(P<0.05);NF-κB p65阳性表达率显著高于癌旁胃组织(63.3%vs 30.0%)(P<0.05);HSP70、NF-κB p65与胃癌组织分化程度、肿瘤的浸润深度以及淋巴结转移有关(P<0.05);HSP70、NF-κB p65在胃癌中的表达呈正相关(P<0.05)。结论 HSP70、NF-κB p65可能通过调节细胞凋亡及细胞增殖参与胃癌的发生、发展,监测HSP70、NF-κB p65在一定程度上有助于胃癌的治疗及预后判断。     

吡柔比星对HL-60细胞NF-κB p65活性及细胞凋亡的影响

目的研究吡柔比星(perarubicin,THP)对髓系白血病细胞系HL-60细胞凋亡与核因子-κB p65(nucle-ar factor kappa B p65,NF-κB p65)活性的影响。方法指数生长期HL-60细胞置于96孔培养板内RPMI 1640培养液培养2 h后,分为两部分,第1部分又分为A、B 2组。A组加PBS液继续培养12 h,B组分别加1、10、100μmol/L(终浓度)的THP继续培养12 h;用DNA梯状凝胶电泳法(DNA ladder electrophoresis)和流式细胞检测技术(flow cy-tometry,FCM)分别检测HL-60细胞的凋亡率。第2部分也分为A、B 2组,A组加PBS液继续培养3 h,B组分别加1、101、00μmol/L(终浓度)的THP继续培养3 h;用FCM检测NF-κB p65活化率。结果1、10、100μmol/L的THP诱导HL-60细胞的凋亡率分别为(31.78±4.31)%(、47.25±5.27)%(、56.49±1.59)%,组间及与对照组(6.46±1.45)%比较差异有统计学意义(P<0.05);诱导的HL-60细胞NF-κB p65活化率分别为(16.21±1.20)%、(23.98±3.21)%(、32.44±2.89)%,组间及与对照组(8.44±2.20)%比较差异有统计学意义(P<0.05)。DNA梯状凝胶电泳Ladder出现从多到少的顺序为:100μmol/L THP1、0μmol/L THP、1μmol/L THP、对照组。结论THP在促进HL-60细胞凋亡的同时有诱导其NF-κB p65活化的作用,均存在剂量依赖。     

急性肺损伤小鼠NF-κB的表达

目的：研究核转录因子-κB(nuclearflactor-κB，NF-κB)在急性肺损伤的动态改变，以期找到NF-κB在肺损伤中的作用。方法：25只雄性小鼠随机分为5组，正常对照及不同时间点致伤组，致伤组腹腔注射脂多糖形成急性肺损伤模型，采用免疫印迹和免疫组化法检测正常鼠及致伤鼠肺组织中NF-κB的表达。结果：脂多糖注射后1hNF-κB即开始增高，3h达高峰，随后开始下降。结论：NF-κB可能是急性肺损伤发病中的一个关键性因子。     

苦丁茶熊果酸对鼻咽癌细胞凋亡的诱导及对NF-κB P65及CDK2表达的影响

目的：探讨苦丁茶熊果酸对鼻咽癌细胞凋亡的诱导及对NF-κB P65及CDK2表达的影响.方法：从苦丁茶老叶中提取熊果酸并纯化与鉴定,用10,20,40,80,100 μmol/L 5个梯度浓度的熊果酸持续作用于鼻咽癌细胞48 h,流式细胞术分析其细胞周期和凋亡率;免疫印迹法检测NF-κB P65及CDK2表达.结果：成功从苦丁茶老树叶中提取熊果酸,苦丁茶熊果酸能阻滞鼻咽癌细胞于G0～G1期;浓度达40 μmol/L时抑制效果较为明显.NF-κB P65及CDK2蛋白表达有同向变化趋势,在0～100μmol/L熊果酸浓度范围内,上述两蛋白随着浓度增高表达趋以减弱,当熊果酸浓度增至40 μmol/L后,两者表达逐渐消失.结论：苦丁茶熊果酸能诱导鼻咽癌细胞发生凋亡,对NF-κB P65及CDK2表达产生干预作用,有望成为化学治疗的候选新药.     

NF-κB、VEGF在胃不典型增生、胃癌中的表达及其意义

目的探讨细胞核因子-κB(NF-κB)、血管内皮生长因子(VEGF)在胃不典型增生及胃癌中的表达、相互关系及在胃癌发生中的作用。方法采用免疫组化PowerVision两步法对84例胃癌和54例胃不典型增生组织中NF-κB、VEGF的表达进行检测,并对其与临床病理因素之间的关系进行分析。结果NF-κB、VEGF在84例胃癌组织中阳性表达率分别为59.52%、61.90%,在33例胃轻度不典型增生组织中阳性表达率分别为24.24%、33.33%,NF-κB、VEGF在胃癌与轻度不典型增生组之间存在统计学差异(P<0.05)。NF-κB表达与肿瘤的大小相关,VEGF表达与肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤浸润深度相关(P<0.05)。NF-κB与VEGF之间存在相关关系(P<0.05)。结论在胃癌中NF-κB可以通过上调VEGF的表达影响肿瘤血管的形成,进而促进肿瘤的生长、浸润、转移。     

心理应激对大鼠牙周炎组织NF-κB表达的影响

目的 探讨心理应激状态下大鼠牙周炎组织中NF-κB表达的变化。方法 40只SD雄性大鼠随机分为对照组(A组)、实验性牙周炎组(B组)、心理应激组(C组)、实验性牙周炎+心理应激组(D组)以及实验性牙周炎+心理应激+氟西汀组(E组),每组8只动物。采用 CUMS 法建立心理应激模型,采用丝线结扎法建立实验性牙周炎模型。实验4周结束后,旷场实验观察大鼠行为学变化,ELASA 法测定大鼠血清中应激激素水平变化,并通过Western blot法检测动物牙龈组织中IκBα、p-IκBα、p65和p-NF-κB p65 的蛋白表达水平。结果 与对照组比较,心理应激可以引起动物皮质醇和肾上腺皮质激素的含量升高(P<0.05)以及旷场中央区停留时间和移动距离的改变(P<0.05)。同时,牙周炎组动物牙龈组织中p-IκBα和p-NF-κB p65的蛋白表达增多(P<0.05)、IκBα的蛋白表达减少(P<0.05),牙周炎合并心理应激后,p-IκBα和p-NF-κB p65的蛋白高表达更加明显(P<0.05)、IκBα蛋白含量则持续减少(P<0.05)。当给予心理应激拮抗后,动物的行为学和血清学变化恢复正常(P>0.05);且与实验性牙周炎+心理应激组动物比较,药物组的p-IκBα和p-NF-κB p65蛋白表达量有所下降(P<0.05),IκBα的表达逐渐升高(P<0.05)。结论 核转录因子-κB(NF-κB)过表达可能参与心理应激加重牙周炎这一过程。     

胎膜早破孕妇血中NF-κB P65、IL-8、MMP-9的表达及意义

目的探讨胎膜早破孕妇外周血中核因子-κB P65(NF-κB P65)、白细胞介素-8(IL-8)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的变化。方法采用免疫细胞化学(ICC)方法检测50例足月胎膜早破孕妇(研究组)外周血白细胞中NF-κB P65表达水平,酶联免疫吸附(ELISA)方法检测上述孕妇外周血清中IL-8及MMP-9浓度,胎盘胎膜病理检查有无组织学绒毛膜羊膜炎,并与同期正常50例孕妇(对照组)进行对比。结果 (1)研究组绒毛膜羊膜炎发生率明显高于对照组(64.0%vs 10.0%,P<0.05)。(2)研究组内亚临床绒毛膜羊膜炎孕妇NF-κB P65、IL-8及MMP-9均显著高于非绒毛膜羊膜炎孕妇(P<0.05);无亚临床绒毛膜羊膜炎者外周血白细胞中NF-κB P65、IL-8、MMP-9表达水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)NF-κB P65、IL-8、MMP-9对预测绒毛膜羊膜炎有较好的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Youden指数和诊断符合率,三者联合检测可提高特异性及阳性预测值。结论 (1)孕妇血白细胞中NF-κB P65表达水平与胎膜早破绒毛膜羊膜炎有关。(2)孕妇外周血NF-κB P65表达水平可作为预测胎膜早破孕妇是否患有绒毛膜羊膜炎的辅助指标。(3)联合检测孕妇外周血NF-κB P65、IL-8及MMP-9可以提高诊断的阳性预测值。